成纤维细胞生长因子受体在肾间质成纤维细胞的表达

在肾小管间质纤维化的发生发展过程中，损伤和再生的肾小管上皮细胞可以合成和分泌多种细胞因子和生长因子，成纤维细胞生长因子（ＦＧＦ）就是其中的一种。研究ＦＧＦ的靶细胞或细胞受体（ＦＧＦＲ），对于揭示ＦＧＦ在肾小管间质纤维化中的作用有重要意义。１　材料和方法１．１　材料　Ｗｉｓｔａｒ大鼠，雌性，体重２００～２５０ｇ（北京医科大学实验动物提供）。并选用了１９９６年至１９９７年北京医科大学病理系肾穿刺标本有增生硬化性改变的肾小球肾炎２０例，均伴有肾小管间质纤维化，５例轻度系膜增生性肾小球肾炎作为对照。１．…     

氟对小鼠成纤维细胞血管内皮生长因子表达的影响

目的 观察氟在单层细胞培养系统即二维(2D)培养体系和成纤维细胞(FB)胶原凝胶系统即三维(3D)培养体系中对小鼠FB血管内皮生长因子(VEGF)mRNA及蛋白表达的影响,探讨VEGF表达改变对FB成骨功能的作用.方法 在2D、3D培养体系中,FB按染氟剂量不同分为0(对照)、0.0001、0.0010、0.1000、1.0000、10.0000、20.0000mg/L组,染氟培养48h后,应用RT-PCR法、酶联免疫吸附法(ELISA)和免疫组化方法(IHC)检测VEGF mRNA和蛋白的表达.结果 3D培养体系中,0.1000 mg/L组VEGF mRNA表达(1.08±0.09)高于对照组(0.93 ±0.02,P<0.05).2D培养体系中,0.1000、1.0000、10.0000 mg/L组VEGF蛋白表达(0.19±0.02、0.26±0.01、0.32±0.01)高于对照组(0.14±0.01,P均<0.05);3D培养体系中,0.1000、1.0000 mg/L组VEGF蛋白表达(0.59±0.06、0.52±0.03)高于对照组(0.37±0.05,P均<0.01).2D培养体系中,0.0010mg/L组VEGF蛋白阳性表达细胞数(0.45±0.05)高于对照组(0.36±0.03,P<0.05);3D培养体系中,0.0010、0.1000、1.0000 mg/L组VEGF蛋白阳性表达细胞数(0.62 ±0.04、0.70±0.06、0.65 ±0.07)高于对照组(0.44±0.04,P<0.05或<0.01).结论 2D和3D培养体系中FB VEGF mRNA和蛋白,提示VEGF在氟化物刺激FB成骨功能增强方面具有重要作用.     

肾性高血压大鼠血管重塑中碱性成纤维细胞生长因子的表达

目的 观察碱性成纤维细胞生长因子（b-FGF）在肾性高血压大鼠血管重塑中的表达,以及Benazepril逆转血管重塑的作用.方法 将45只8周龄Wistar大鼠随机分为对照组、模型组和药物干预组.模型组制备“二肾一夹”肾性高血压模型,对照组行假手术,药物干预组给予Benazepril每天灌胃10 mg/kg,连续灌胃8周,检测大鼠尾动脉收缩压（SBP）每周1次,光镜下观察血管壁结构变化,计算颈总动脉中膜厚度与内径比值（MT/LD）及血管中膜细胞层数,应用免疫组织化学法检测颈总动脉管壁中b-FGF的表达水平.结果 ①与对照组相比,模型组大鼠尾动脉收缩压、颈总动脉MT/LD及血管中膜细胞层数显著增高（P＜0.01）,管壁b-FGF表达显著增强（P＜0.01）.②Benazepril治疗8周后,尾动脉收缩压、颈总动脉MT/LD及血管中膜细胞层数降低（P＜0.01）,管壁b-FGF表达明显减弱（P＜0.01）.结论 b-FGF参与了高血压血管重塑的病理过程,是促血管重塑的细胞因子;Benazepril抑制血管重塑的通路可能是bFGF介导的信号通路之间存在着交互调节的作用.     

过量氟对大鼠肾组织骨桥蛋白表达的影响

目的检测骨桥蛋白(OPN)mRNA和蛋白在氟处理大鼠肾组织中的表达差异和蛋白定位,并探讨OPN与氟中毒肾损害的关系。方法经饮水投氟喂养Wistar大鼠48只,用免疫组织化学法进行骨桥蛋白的组织学检测。提取各组大鼠肾组织mRNA,采用RT-PCR法检测骨桥蛋白mRNA的表达变化。结果免疫组织化学结果表明,骨桥蛋白主要定位于肾组织的肾小管上皮细胞质中,常食和偏食对照组大鼠肾组织OPN蛋白只是散在表达,而常食和偏食加氟组的OPN蛋白表达较相应对照组明显增强(与常食对照组比较,q=18．4,P< 0．05;与偏食对照组比较,q=12．0,P<0．01)。2个投氟组的OPN mRNA表达水平均较相对应的对照组增加,但差异无统计学意义。结论过量氟可促进大鼠。肾组织OPN表达,且随着投氟量的增加,OPN伴随着肾损伤加重而表达增强,提示OPN与氟中毒肾损伤程度密切相关,很可能作为一种氟中毒肾损害的预测标志。     

碱性成纤维细胞生长因子研究进展

碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)是一种多种细胞具有增殖和分化刺激调节作用的活性多肽,能刺激大量中胚层和神经外胚层来源细胞的生长。目前国外已用bFGF治疗老年性痴呆及帕金森氏病等神经系统疾病。珠海东大生物制药公司在国内首家应用基因重组技术制备纯化bFGF,并已完成Ⅱ期临床。现对bFGF的研究进展介绍如下。1 bFGF的特征 bFGF是含146氨基酸的阴离子多肽,分子量为16000～185000Da,等电点8～10。天然bFGF来源于脑、垂体、下丘脑、眼、软骨、黄体、肾上腺等组织,可由多种细胞产生。目前临床应用的bFGF     

胃力康颗粒对实验性胃溃疡大鼠胃组织碱性成纤维细胞生长因子表达的影响

[目的]观察胃力康颗粒对实验性胃溃疡大鼠胃组织碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)表达的影响,探讨胃力康颗粒的疗效机制.[方法]大鼠随机分成正常组、模型组、法莫替丁对照组和胃力康治疗组,以Okabe改良法复制实验性胃溃疡大鼠模型,采用RT-PCR检测各组大鼠胃组织bFGF mRNA表达水平.[结果]胃力康治疗组bFGF mRNA表达水平较模型组明显升高,差异有统计学意义(P＜0.05).[结论]胃力康颗粒能上调bFGF mRNA的表达,从而促进溃疡愈合.     

木瓜蛋白酶致大鼠肺气肿中碱性成纤维细胞生长因子mRNA的表达

碱性成纤维细胞生长因子 (ｂＦＧＦ)是一种具有促进细胞生长增殖作用的多肽类生长因子 ,在维持机体的生长发育及促进多种组织的损伤修复中起着十分重要的作用。我们通过对木瓜蛋白酶 (Ｐａｐａｉｎ)致大鼠肺气肿模型肺组织和肺泡巨噬细胞ｂＦＧＦｍＲＮＡ表达的研究 ,来探讨其在肺气肿形成过程中与肺组织Ⅰ、Ⅲ型胶原增长的关系。材料与方法　 (1)肺气肿动物模型的制备与分组 :健康Ｗｉｓｔａｒ大鼠 42只 ,体重 2 0 0～ 2 5 0ｇ ,雌雄不拘 (由同济医科大学实验动物中心提供 ) ,随机分为肺气肿模型 1,3 ,5 ,7,15 ,30天组和正常对照组 ,每组 6…     

胃腺癌组织中碱性成纤维细胞生长因子mRNA的表达

背景碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)是一种强有力的血管生成因子,与肿瘤发生关系密切。目前有关bFGF与胃癌关系的研究不多。目的研究胃腺癌组织中bFGFmRNA的表达,探讨bFGF在胃腺癌发生、发展中的作用。方法采用逆转录聚合酶链反应(RT鄄PCR)检测20例胃腺癌组织和相应癌旁组织(距肿瘤边缘5cm以上)中bFGFmRNA的表达,以恒定表达的GAPDH作为内参照。计算bFGFmRNA与GAPDHmRNA表达积分光密度值的比值(b/G),以反映组织中bFGFmRNA的相对表达量。结果胃腺癌组织的b/G比值显著高于癌旁组织(1.3173±0.1578对0.9427±0.1402,P<0.01);其中低分化腺癌的b/G比值显著高于高中分化腺癌(1.4232±0.1225对1.2013±0.1340,P<0.05),有淋巴结转移者的b/G比值显著高于无淋巴结转移者(1.4075±0.1375对1.1962±0.1286,P<0.05)。结论bFGF与胃腺癌的恶性程度和转移密切相关,对其发生、发展具有重要影响。     

碱性成纤维细胞生长因子在急性白血病中的表达

目的探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)在急性白血病(AL)中的表达及其临床意义。方法应用酶联免疫法(ELISA)检测AL初治及复发患者化疗前后血清bFGF的水平,并与正常对照组比较。结果47例AL初治患者血清bFGF水平为(60.57±25.62)pg/L,8例复发患者为(72.26±21.44)pg/L,均明显高于正常人对照组的(24.06±5.97)pg/L,差异有统计学意义(P<0.01);11例完全缓解(CR)患者血清bFGF水平(27.33±9.04)pg/L,较CR前明显下降(P<0.01),接近于正常人对照组的水平(P>0.05);急性淋巴细胞白血病(ALL)难治组血清bFGF的水平为(85.20±31.45)pg/L,明显高于非难治组的(60.03±22.97)pg/L,两者差异有统计学意义(P<0.05);但急性髓细胞白血病(AML)难治组血清bFGF水平(63.36±16.62)pg/L与非难治组的(55.02±22.84)pg/L差异无统计学意义(P>0.05)。结论血清bFGF的检测对了解AL的发生、发展及疗效观察和预后判断有一定临床价值。     

外源性碱性成纤维细胞生长因子对吸烟大鼠脑细胞凋亡及p53表达的影响

目的 研究外源性碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对吸烟大鼠脑细胞凋亡及p53表达的影响.方法 将40只大鼠随机分为4组:正常对照组、长期大量吸烟组、短期大量吸烟组、吸烟+bFGF组(吸烟最后15 d经腹腔内注射bFGF).采用线栓大脑中动脉法建立大鼠脑梗死模型.采用脱氧核苷酸末端转移酶介导的dUTP缺口末端标记技术(TUNEL法)及免疫组化法检测细胞凋亡和p53蛋白表达.结果 各吸烟组脑细胞凋亡及p53蛋白表达较对照组明显增加(P＜0.01),凋亡细胞数量和p53蛋白表强度随吸烟时间和剂量增加而增加(P＜0.01).bFGF治疗组大鼠脑细胞凋亡数及p53蛋白表达较单纯吸烟组明显减少(P＜0.01).结论 吸烟可使大鼠脑细胞凋亡及p53蛋白表达增加,p53介导吸烟诱导的细胞凋亡,细胞凋亡及p53蛋白表达强度与吸烟时间及数量相关,bFGF 通过抑制p53表达减少细胞凋亡.     

肾小管上皮细胞损伤与成纤维细胞生长因子的关系

目的：研究碱性成纤维细胞生长因子（ｂＦＧＦ）在肾小管上皮细胞损伤和再生过程中的表达及其对肾小管上皮细胞的促增殖作用。方法：给大鼠腹腔注射庆大霉素４００ｍｇ（ｋｇ·ｄ），注射４天，造成肾小管损伤，分别于１、３、５、７、９、１２、１５天检查肌酐、尿素氮、乳酸脱氢酶及碱性磷酸酶含量，然后对肾损伤进行形态观察，用原位杂交和双重免疫组化染色观察ｂＦＧＦ表达与增殖的伴随情况，增殖细胞用增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）显示。体外培养的人肾小管上皮细胞加入不同浓度的ｂＦＧＦ，测定３ＨＴｄＲ掺入率，观察ｂＦＧＦ与肾小管上皮细胞增生的关系。结果：生化检测尿ＬＤＨ、ＡＬＰ及血Ｃｒ、ＢＵＮ比对照显著增高。原位杂交及双重免疫组化染色显示：正常情况下，ｂＦＧＦ只在单核细胞、肾间质纤维细胞表达。肾小管损伤再生过程中，肾近曲小管上皮细胞表达增加，再生肾小管上皮细胞成熟后，不再表达ｂＦＧＦ。体外给培养的人肾小管上皮细胞加入ｂＦＧＦ后，３ＨＴｄＲ掺入率较对照组明显增高。结论：正常肾小管上皮细胞无ｂＦＧＦ产生，损伤及再生的肾小管上皮细胞有ｂＦＧＦ的基因表达和蛋白合成。ｂＦＧＦ可促进肾小管上皮细胞增殖，对肾间质纤维化可能有一定作用     

过量氟对肾细胞内游离钙及钙泵的影响

目的探讨过量氟对肾细胞内游离钙([Ca2 ]i)及钙泵(Ca2 -ATPase)的影响及[Ca2 ]i在肾损害发生机制中的作用。方法应用饮水投氟方式喂养Wistar大鼠20周和原代培养肾小管上皮细胞染氟,采用生物化学方法检测血清内离子钙和总钙水平及肾细胞Ca2 -ATPase活性变化;使用Ca2 指示剂Fura-2测定肾细胞[Ca2 ]i。结果肾细胞[Ca2 ]i水平在常食投氟组和偏食投氟组较相应对照组明显增多;暴露于低钙高氟环境中的大鼠血清总钙降低,离子钙降低达到显著程度,该组肾细胞的钙泵(Ca2 -ATPase)活性比富钙投氟组明显低;低氟(1.0-5.0mg/L)处理肾小管上皮细胞钙泵活力明显增高,但随着氟水平的提高(>7．5mg／L),Ca2 -ATPase活力明显下降。结论高氟直接抑制钙泵活性很可能造成肾细胞内[Ca2 ]i潴留,而[Ca2 ]i升高很可能是过量氟导致肾损害的一种重要机制。     

肾移植术后高脂血症患者碱性成纤维细胞生长因子和受体mRNA表达及辛伐他汀降脂治疗对其影响

目的研究肾脏移植术后高脂血症患者外周血单个核细胞中碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)及其受体FGFR2 mRNA表达水平及降脂治疗后的改变。方法肾移植术血脂正常组、血脂增高组及正常对照组各30例,血脂增高组应用辛伐他汀20mg／a进行降脂治疗,于服药后1．5、3个月复查血脂,同时应用逆转录-多聚合酶链反应方法检测外周血单个核细胞碱性成纤维细胞生长因子及其受体mRNA表达。结果伴高脂血症的肾移植受者辛伐他汀降脂治疗1,5个月血脂水及外周血单个核细胞中bFGF及其受体FGFR2 mRNA显著高于血脂正常组及对照组,辛伐他汀治疗1．5个月后血脂水平及bFGF、FGFR2 mRNA表达水平显著下降,治疗3个月时进一步下降。结论伴高脂血症的肾移植受者bFGF及其受体FGFR2 mRNA表达水平上调,可能是高脂血症引起动脉硬化、慢性移植肾病的机制之一。辛伐他汀降脂治疗可使碱性成纤维细胞生长因子及其受体的表达下调。     

Bcl-2在染氟大鼠肾小管上皮细胞氧化应激态中的表达

目的观察不同染氟(NaF,F-)条件下大鼠肾小管上皮细胞氧化应激能力变化及Bcl-2在氧化应激时的表达。方法采用体外原代细胞培养方法,相差显微镜观察大鼠肾小管上皮细胞形态结构变化;测定大鼠肾小管上皮细胞在染氟(F-)0.050、0.250、0.750、1.250mmol/L和不同氟暴露时间条件下,肾小管上皮细胞的增殖活性和丙二醛(MDA)水平、超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)活性;利用半定量RT-PCR方法分析大鼠肾小管上皮细胞在氟暴露0.050～0.625mmol/L48hBcl-2的表达。结果相差显微镜下,染氟0.750、1.250mmol/L组部分肾小管上皮细胞缩为圆形和有细胞脱落现象。在24h,0.005mmol/L组(0.48±0.10)、0.025mmol/L组(0.46±0.12)、0.250mmol/L组(0.36±0.04)肾小管上皮细胞的增殖活性较对照组(0.29±0.09)有不同程度升高,但在72h,1.250mmol/L组(0.16±0.02)细胞的增殖活性明显降低。肾小管上皮细胞MDA水平在染氟48h内,0.25mmol/L组(626.15±124.02)、0.75mmol/L组(498.74±119.88)、1.250mmol/L组(441.99±53.57)与对照组(232.62±21.00)比较,升高显著;SOD酶活性在48h内,随着染氟量的增加而有升高,在0.750mmol/L组(1298.66±248.53)、1.250mmol/L组(1664.70±277.68),酶活性明显高于对照组(741.67±265.56);CAT酶活性,在0.7     

Regulation of VEGF and bFGF mRNA expression and other proliferative compounds in skeletal muscle cells

The role of muscle contraction, prostanoids, nitric oxide and adenosine in the regulation of vascular endothelial growth factor (VEGF), basic fibroblast growth factor (bFGF) and endothelial cell proliferative compounds in skeletal muscle cell cultures was examined. VEGF and bFGF mRNA, protein release as well as the proliferative effect of extracellular medium was determined in non-stimulated and electro-stimulated rat and human skeletal muscle cells. In rat skeletal muscle cells these aspects were also determined after treatment with inhibitors and/or donors of nitric oxide (NO), prostanoids and adenosine. Electro-stimulation caused an elevation in the VEGF and bFGF mRNA levels of rat muscle cells by 33% and 43% (P < 0.05), respectively, and in human muscle cells VEGF mRNA was elevated by 24%. Medium from electro-stimulated human, but not rat muscle cells induced a 126% higher (P < 0.05) endothelial cell proliferation than medium from non-stimulated cells. Cyclooxygenase inhibition of rat muscle cells induced a 172% increase (P < 0.05) in VEGF mRNA and a 104% increase in the basal VEGF release. Treatment with the NO donor SNAP (0.5 M) decreased (P < 0.05) VEGF and bFGF mRNA by 42 and 38%, respectively. Medium from SNAP treated muscle cells induced a 45% lower (P < 0.05) proliferation of endothelial cells than control medium. Adenosine enhanced the basal VEGF release from muscle cells by 75% compared to control. The present data demonstrate that contractile activity, NO, adenosine and products of cyclooxygenase regulate the expression of VEGF and bFGF mRNA in skeletal muscle cells and that contractile activity and NO regulate endothelial cell proliferative compounds in muscle extracellular fluid.     

Distinct regulation of genes by bFGF and VEGF-A in endothelial cells

A finely tuned balance of angiogenic inhibitors and inducers controls the activity of angiogenesis characterized by proliferation, migration and differentiation of endothelial cells. Among many angiogenic factors, basic fibroblast growth factor (bFGF) was first identified to be angiogenic whereas vascular endothelial growth factor A (VEGF-A) is an endothelial cell specific mitogen. In addition to being a specific mitogen, VEGF-A is also known as a vascular permeability factor. The majority of growth factors transduce their mitogenic signals from cell surface to nucleus where gene expression occurs. Whether these ligands utilize a distinct or a common molecular pathway to exert their biological effects on human endothelial cells remains elusive. We thus studied the expression profile of 884 human genes under the influence of either bFGF or VEGF-A alone in the context of human endothelial cells. A total of ninety-four genes were differentially regulated by more than two folds. The expression patterns of 32 genes are similar between the treatment of either factor alone whereas those of the remaining 62 genes are only regulated by one but not the other factor. Their function in the control of angiogenesis will be discussed and apoptotic signaling in the regulation of angiogenesis is also implicated. This revised version was published online in June 2006 with corrections to the Cover Date.     

慢性砷中毒大鼠肾脏蛋白激酶C-α表达的研究

目的 探讨蛋白激酶C(PKC)-α在慢性砷中毒大鼠肾脏的表达及作用.方法 将60只清洁级SD大鼠按体质量随机分为高砷(10.0 mg/kg)、低砷(0.4mg/kg)组和对照(蒸馏水)组,采用自由饮水方式进行染毒,每10天称体质量1次,调节给药量.连续染毒4个月,测血砷、尿砷.取大鼠肾脏用免疫组织化学SABC法,观察肾脏PKC-α阳性细胞并计数,采用Biomias图像分析软件测定其平均灰度值.结果 高砷组和低砷组的SD大鼠肾脏近端小管PKC-α阳性细胞计数[(3.62±1.90)、(10.07±3.22)个/视野]、肾小球PKC-α阳性细胞计数[(3.62±1.90)、(10.07±3.22)个/视野]均低于对照组[(60.00±9.63)、(18.57±2.71)个/视野,P均＜0.05),高砷组和低砷组的大鼠尿砷[(7366.62±1086.50)、(1744.31±300.12)μg/L]、血砷[(31.59±9.24)、(16.58±2.08)μg/L]均高于对照组[(18.97±3.58)、(18.97±3.58)μg/L,P均＜0.05].高砷组和低砷组的SD大鼠肾脏近端小管、肾小球PKC-α阳性细胞平均灰度值(142.79±11.16、122.15±5.91)均高于对照组(114.33±6.70,P均＜0.05).结论 砷可使SD大鼠肾脏PKC-α阳性细胞表达减少,PKC-α在慢性砷中毒大鼠肾脏抑制细胞凋亡的调控作用被减弱.     

和血生络方对心肌梗死大鼠碱性成纤维生长因子的影响

目的通过观察和血生络方对碱性成纤维生长因子(bFGF)的影响及其促进心肌梗死大鼠心肌血管新生的作用机制。方法选雄性W istar大鼠,制作心肌梗死大鼠模型,随机分为消心痛组和血生络高、低剂量组及模型对照组,同时建立假手术组,每组8只。药物治疗组分别给予和血生络水溶液(9.9,19.8 g.kg-1.d-1)及消心痛水溶液(2.7 mg.kg-1.d-1)每日1次灌胃,其他组给予等量蒸馏水,连续用药3 w后处死大鼠,检测血清中bFGF的含量及心肌中bFGF mRNA表达。结果和血生络高剂量组、消心痛组血清bFGF含量与模型组相比有显著差异(P<0.05)。各用药组均能促进心肌中bFGF mRNA表达,与模型组有显著差异(P<0.05),而且高剂量组强于低剂量组(P<0.05),与阳性对照组无差异(P>0.05)。结论和血生络方促进血管新生的机制可能是通过促进bFGF生成以利于内皮细胞增殖和迁移实现的。     

Pre-treatment global quality of health predicts progression free survival in metastatic kidney cancer patients treated with sorafenib or sunitinib

Purpose  Our goal was to prospectively evaluate self-reported quality-of-life (QoL) during second-line therapy in 51 consecutive patients with cytokine-refractory kidney cancer treated with sorafenib or sunitinib. Methods  QoL was assessed by the EORTC QoL questionnaire QLQ-C30 at baseline and at weeks 4, 6, 10, 12 and 16. Results  Global QoL deteriorated significantly during the first 4 weeks of treatment (P < 0.0001). Patients experienced a reduction of their role, cognitive, and social function (all P < 0.0001). In addition, fatigue (P < 0.0001), nausea/vomiting (P = 0.003), and pain (P < 0.0001) as well as dyspnoea (P < 0.0001), insomnia (P = 0.026), appetite loss (P = 0.013), and diarrhoea (P < 0.0001) increased significantly. After 16 weeks, fatigue (P < 0.0001), pain (P = 0.015), appetite loss (P = 0.002) and diarrhoea (P = 0.038) were still influenced by the therapy, while all functional scales recovered. Global QoL at baseline was predictive of overall response (P = 0.006) and progression free survival (PFS) (P < 0.0001). A better physical function at baseline, a better ECOG performance status, and a low risk profile according to MSKCC risk groups correlated with a longer PFS (all P < 0.0001). No significant differences regarding QoL were found between sorafenib and sunitinib during the study period. Conclusions  Second-line therapy with sorafenib or sunitinib does not adversely affect patients global QoL after 16 weeks of treatment. Evaluation of baseline QoL can help to further stratify patients into risk groups predicting overall response and PFS. Edwin Herrmann and Joachim Gerss contributed equally to this work.