光动力疗法选择性治疗鲜红斑痣的机制探讨

本文用荧光方法对体外培养的人血管内皮细胞吸收HpD的特性,以及鸡活体静注HpD后血药浓度的动态变化进行了研究,以探讨PDT选择性治疗鲜红斑痣的作用机制。结果显示人血管内皮细胞可迅速吸收血中的HpD,30分钟达吸收高峰,其吸收量与HpD的浓度呈正相关。鸡静脉注射PsD—007和HpD后,分别于15和45分钟血清中药物浓度达高峰。表明血管内皮细胞可能是PDT作用的主要靶部位。     

光动力疗法治疗鲜红斑痣的基础研究—血啉甲醚与血卟啉衍生物吸收特性的比较

目的　观察新型光敏剂——血啉甲醚(HMME)在鸡冠皮肤组织和血管内皮细胞(EC)的吸收特点。 方法　莱亨鸡12只,分为HMME组和血卟啉衍生物(HpD)组,每组6只。分别静脉注射HMME或HpD10mg/kg,每隔10min取血2.5ml和鸡冠皮肤组织2.5g。培养新生儿脐带EC,培养液中加入HMME或HpD,孵育浓度分别为20、40、60、80和100 μg/ml,孵育时间为即刻、15、30、60、120、180和240min。采用荧光分析法测定光敏剂含量,并绘制EC吸收光敏剂的浓度—含量和时间—含量关系曲线。 结果　静脉注射HMME或HpD后,其血清浓度的峰值出现在注射后10min,以后随时间迅速下降,二者的曲线形态基本一致。HMME在鸡冠组织中的含量于注射后10min显著高于HpD（P＜0.01）,以后虽然下降速率较快,但在注射后80min仍显著高于HpD（P＜0.05）。培养EC可迅速吸收HMME和HpD,30min达峰值的89%以上;其吸收量与孵育浓度呈线性关系,对HMME的吸收量显著高于HpD（P＜0.01）。 结论　HMME较HpD更容易被皮肤微血管EC摄取,这将有利于鲜红斑痣的治疗。     

新型光敏剂4SB的光谱特性及与血清蛋白相互作用的研究

目的研究新型光敏剂17,4-位氨基磺酸竹红菌乙素衍生物（17-4-amino-1-butane-sulfonic acid-hypocrellin B,4SB）的光谱特性及其与人血清白蛋白（human serum albumin,HSA）的相互作用规律,为4SB临床和基础研究提供实验依据。方法使用分光光度计和荧光光谱仪测量4SB在PBS和HSA溶液中的吸收光谱和荧光光谱,并与临床使用的光敏剂血卟啉衍生物（hematoporphyrin derivative,HpD）作对比,研究HSA对4SB光谱的影响。将4SB溶于HSA溶液后持续震荡,不同的时间点测定4SB吸收光谱和荧光光谱,观察4SB与HSA作用的时间规律。观察HSA对4SB吸收和荧光光谱的影响：将浓度为0、1.25、2.5、5.0、10和20μM/ml的HSA加入5μM/ml的4SB中,测定吸收光谱和荧光光谱。HSA与4SB相互的荧光淬灭：将不同浓度的4SB加入HSA中,测定4SB的荧光光谱;将不同浓度的4SB加入HSA中,测定HSA的荧光光谱。结果 4SB在600 nm以上的波段较HpD的吸收有很大提高,在人血清溶液体系中此峰红移且增强了2.3倍。4SB与HSA的结合时间是30 min。HSA与4SB是1对1的特异性结合,且位点在色氨酸残基附近。结论 4SB在红光波段吸收好,与白蛋白结合后增强了对光的吸收,与白蛋白1∶1结合,是一种有开发前景的光敏剂。     

大鼠严重烧伤后心肌细胞膜损伤的实验研究

目的 探讨严重烧伤后心肌细胞膜损伤后的机制及意义。方法 大鼠在体致伤模型,采用生化法,荧光偏振法分别测定伤后２４小时心肌细胞膜磷脂含量,膜脂流动性,膜酶活性及膜脂质过氧化的方法。结果 伤后１小时,膜酶活力降低;伤后３小时,心肌细胞膜磷脂含量减少,膜脂质过氧化加强;伤后６小时,膜荧光偏振度升高,流动性降低。     

激光激活光敏剂ATX-S10和HpD特性的对比研究

目的对比在激光辐射下ATX-S10和HpD两种光敏剂在其不同浓度及不同光照的功率密度和照射时间的激活规律。方法以454 nm激光器作为激发光源,通过改变光敏剂ATX-S10和HpD浓度,以及激光照射功率密度和照射时间,利用光电倍增管测量单态氧在波长1 270 nm处的红外发光强度变化情况,对比两种光敏剂的激活特性。结果浓度分别为5、10、30、50和100μg/ml的ATX-S10和HpD溶液,氩离子激光器照射后,单态氧的红外发光强度均随光敏剂浓度的增加而增加,光敏剂浓度相同时,ATX-S10比HpD发光强度更强;激光的功率密度越强,相对发光强度越高,相同辐照强度下,ATX-S10比HpD发光强度更强;辐射时间越长,相对发光强度越强,直至达到饱和(60 s),辐射时间相同时ATX-S10比HpD发光强度更强。结论激光功率密度越大、照射时间越长、光敏剂浓度越高,光敏剂的激活率越高。相同条件下ATX-S10的单态氧产率比HpD高。     

潜艇长航对艇员血清超氧化物歧化酶和丙二醛的影响

潜艇长航对艇员血清超氧化物歧化酶和丙二醛的影响史秀风郭丰涛杨玉明有关艇员长航后自由基损伤情况的资料尚少。现特通过观察一次常规潜艇长航６０天前、后艇员的血清超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）和脂质过氧化物最终分解产物丙二醛（ＭＤＡ）的变化，探讨长航中艇员体内的自...     

不同剂量VitC对严重烧伤延迟复苏大鼠血清cTnI的影响

目的研究不同剂量维生素c（VitC）对烧伤后延迟复苏大鼠血清肌钙蛋白I（cTnI）的影响,以了解VitC对烧伤后延迟复苏心肌的保护作用。方法40只Wistar大鼠随机分成4组：假手术组、延迟复苏组、VitC低剂量组及VitC高剂量组。复制烧伤模型30h后,检测血清cTnI、丙二醛（MDA）含量及超氧化物歧化酶（SOD）活性变化。结果使用VitC可以降低烧伤后延迟复苏大鼠血清中cTnI和MDA的含量、升高SOD活性（P〈0．01）;VitC高剂量组降低烧伤后延迟复苏大鼠血清cTnI和MDA的含量,升高SOD活性作用较VitC低剂量组明显（P〈0．05）。结论烧伤后延迟复苏时使用VitC对心肌具有保护作用,大剂量VitC的保护作用优于低剂量VitC,其保护机制可能与抗氧自由基、抑制膜脂质过氧化有关。     

高温和噪声环境对飞行员红细胞膜脂质过氧化的损害

目的 搪塞高温和噪声等飞行环境对飞行员红细胞膜脂质过氧化的影响。方法 用分光光度计法测定２４名飞行员,飞行前、飞行后即刻以及飞行后８ｈ的红细胞膜谷胱甘肽过氧化物酶及丙二醛（ＭＤＡ）的含量,并与对照组进行比较。结果垢即刻红细胞膜中的谷胱甘肽过氧化物酶活力明显低于对照组,飞行后即刻和飞行后８ｈ的二醛含量明显高于普通地面人员。结论高温和噪声等飞行环境可导致飞行员红细胞膜脂质过氧化反应增强和抗氧化能力降低     

蝮蛇抗栓酶对烧伤早期组织细胞损伤的影响

本研究针对烧伤后血液呈高凝状态,加重组织损害的特点,利用家兔25％TBSAⅢ°烫伤模型,采用蝮蛇抗栓酶治疗,观察脂质过氧化产物丙二醛（MDA）及血清酶学变化,结果显示：蝮蛇抗栓酶能明显减轻烧伤早期脂质过氧化损害;对烧伤后继发性组织损伤有保护作用。     

卡托普利对冠心病患者血清内皮衍生舒张因子及脂质过氧化物水平的影响

目的探讨卡托普利对冠心病患者血清内皮衍生舒张因子及脂质过氧化物水平的影响。方法对80例CHD患者血清一氧化氮(NO)、脂质过氧化终产物丙二醛(MDA)水平进行测定并与对照组进行比较,同时观察了卡托普利对CHD患者血清MDA及NO水平的影响。结果(1)CHD患者血清NO水平显著低于对照组,而血清MDA水平显著高于对照组(P<0.01);(2)CHD患者血清MDA水平与NO水平呈显著负相关(r=-0.58,P<0.01);(3)卡托普利可抑制CHD患者脂质过氧化反应,降低血清MDA水平,升高血清NO水平。结论CHD患者脂质过氧化反应增强,内皮功能失调,而卡托普利可以升高NO水平,对CHD的防治具有重要的临床意义。     

氩离子激光＋HpD照射血管瘤动物模型的组织学变化

本文用氩离子激光照射鸡垂（ｗａｔｔｌｅ）．分为注射ＨｐＤ和对照组，在１、３、７、１４、２８天取材，观察了肉眼和组织学变化，并对ＨｐＤ组的血清荧光进行了监测。组织学结果表明：ＨｐＤ组病变反应完全，坏死层、渗出层均较对照组显著，对血管的破坏更完全。血清中的荧光随时间衰减，至２４小时基本排泄完。鸡垂组织匀浆上清液中的荧光在２４小时内衰减较快，后趋于平缓。正常组的血清荧光和鸡垂组织匀浆上清液荧光在同样测试条件下均无荧光峰值出现，表现为一低水平的直线。     

血卟啉衍生物静脉注射后在皮肤中分布的实验研究

目的探讨鲜红斑痣光动力学疗法中血卟啉衍生物（ＨｐＤ）的理想剂量和理想照光时间。方法５组实验用新西兰白兔（每组６只）分别按２、３、５、７、１０ｍｇ／ｋｇ静脉注射ＨｐＤ,采用快速冰冻切片技术,于荧光显微镜下观察不同时间ＨｐＤ在真皮血管内、真皮血管外间质和表皮的分布情况。结果ＨｐＤ在真皮浅层血管内出现时间,２、３ｍｇ／ｋｇ二组为１５ｍｉｎ,５、７、１０ｍｇ／ｋｇ三组为５ｍｉｎ;ＨｐＤ在真皮血管外间质出现时间,各组依次为６０、６０、３０、１５、５ｍｉｎ;ＨｐＤ在表皮出现时间,３、５、７、１０ｍｇ／ｋｇ各组依次为９０、６０、３０、５ｍｉｎ,２ｍｇ／ｋｇ组观察至１２０ｍｉｎ未出现。结论运用光动力学疗法治疗鲜红斑痣的剂量应掌握在３～５ｍｇ／ｋｇ之间,注射完毕后即可开始照光,３ｍｇ／ｋｇ时照光时间不宜超过９０ｍｉｎ,５ｍｇ／ｋｇ时不宜超过６０ｍｉｎ。     

血管平滑肌细胞对血啉甲醚吸收特性的研究

目的 探讨血管平滑肌细胞（ＳＭＣ）对光敏剂血啉甲醚（ＨＭＭＥ）的吸收特点及影响因素,为进一步建立动脉粥样硬化和血管成形术后再狭窄的光动力治疗方法提供实验依据。方法 培养兔主动脉ＳＭＣ并接种至９６孔培养板。首先,培养液中分别加入ＨＭＭＥ和血卟啉衍生物（ＨＰＤ）,浓度分别为２０、４０、６０、８０、１００μｇ／ｍｌ,采用荧光分析法测定细胞内光敏剂含量,绘缺点ＳＭＣ吸收光敏剂的浓度－含量和时间－含量关系曲     

Oxygen consumption during photodynamic therapy in vitro

The consumption of dissolved molecular oxygen was measured during photodynamic therapy in vitro. Aqueous solutions of hematoporphyrin derivative (HpD) containing different concentrations of serum or numbers of cells were prepared. Decrease in oxygen in the solution and cell suspensions was monitored during light-irradiation (at a wavelength of 610 to 640 nm). The rate of oxygen consumption increased with increasing concentrations of HpD, serum levels or numbers of cells. Upon repeated irradiation of the same solutions (after restitution of the initial pO2 of 100 mm Hg), the rate of oxygen consumption decreased indicating a disaggregation process of HpD. The rate of oxygen content of the solutions decreased independently of the actual oxygen partial pressure. Even at a low pO2 below 10 mm Hg, oxygen consumption was unimpeded until the solutions were free of oxygen. No O2-consumption was noted in aqueous solutions of HpD (up to 40 g/ml) without serum or cells during irradiation.     

五种竹红菌素衍生物对A549细胞的光动力效应研究

目的比较五种新型竹红菌素衍生物分别为竹红菌素乙素（hypocrellin,HB）的二位ω-氨基磺酸衍生物THB、3HB和4HB,及十七位ω-氨基磺酸衍生物3SB和4SB对体外培养的人肺腺癌上皮细胞（A549）的光动力（photodynamic therapy,PDT）效应,筛选光动力活性和安全性较好的竹红菌素衍生物。方法 （1）杀伤效应。将0.94 nmol/ml的5种新型竹红菌素衍生物和HB分别与A549细胞孵育4 h后,分别以波长630和532 nm激光照射,功率密度20 mW/cm2,照射时间1 000 s,能量密度20 J/cm2,照光后继续避光孵育24 h后采用MTT法测定细胞存活率。（2）安全系数。分别以波长532和630 nm激光照射,以血卟啉（hematoporph-yrin derivative,HpD）为对照光敏剂,研究17-4-amino-1-butane-sulfonic acid-hypocrellin B（4SB）对A549细胞的光动力效应及和暗毒性,并比较安全系数（暗毒性IC50/光毒性IC50）。结果 （1）杀伤效应。五种竹红菌素衍生物中,4SB在630和532 nm激光照射下对A549的光动力杀伤作用强于其它衍生物,接近HB。（2）安全系数。波长532 nm激光照射,4SB的光毒性分别为103.86和84.16 ng/ml是HpD 960.14 ng/ml的10.53和11.4倍,但前两者之间差异无显著意义（P〉0.05）;波长630 nm激光照射下,4SB光毒性的IC50为50.7 ng/ml,HpDIC50为1 069.88 ng/ml,暗毒性HpD、4SB分别为7.84、21.93μg/ml,安全系数4SB（432.5）〉HpD（7.3）。HpD在532和630 nm两波长下的光毒性IC50差异无显著意义（P〉0.05）,而4SB在532和630 nm两波长下的光毒性差异有显著意义（P〈0.05）。结论 5种衍生物可能成为有价值的光敏剂,值得进一步深入研究。     

血卟啉衍生物肿瘤内注射的分布及毒性实验

为了探讨光敏剂瘤内注射法在临床上的应用，本实验将高浓度血卟啉衍生物（ＨｐＤ）直接注入荷瘤小鼠的肿瘤内，利用组织涂片法，通过荧光显微镜观察。结果，注射后１～５天内，局部注射组肿瘤内发橘红色荧光的细胞的百分比明显高于腹腔注射组，以１～４天为著。局部注射组的肝、脾、肾组织中发荧光细胞的百分比低于腹腔注射组。根据本实验结果认为，肿瘤内注射可以提高瘤内ＨｐＤ的浓度，而减少正常组织中ＨｐＤ的含量，减轻毒副作用     

雌激素替代治疗对雌鼠血管内皮细胞、心脏中雌激素受体含量的影响

目的：探讨雌激素替代治疗,高脂饮食对雌鼠心脏和肺血管内皮细胞中雌激素受体含量的影响。方法;用放射配体结合法定量检测雌激素受体,分别测定去势,高脂饮食及雌激素替代治疗后雌鼠心脏及血管内皮细胞中雌激素受体含量,并对去势前后血清雌激素及血脂水平进行检测。结果：去势及高脂饮食后心脏及血管内皮细胞中雌激素受体含量均下降（P＜0．01）,但以去势为明显,雌激素替代治疗9周后雌激素受体含量明显改善;去势组雌鼠血清雌二醇水平较假手术组明显下降（P＜0．01）,胆固醇水平显著升高（P＜0．01）。结论：（1）雌激素水平明显影响雌鼠心脏和血管内皮细胞中雌激素受体的表达,高脂饮食可降低雌激素受体的含量。（2）雌激素替代治疗可改善心脏和血管内皮细胞中雌激素受体含量。