淫羊藿苷对脂多糖诱导成骨细胞凋亡及GRP78/PERK/CHOP通路的影响

摘 要 目的：探讨淫羊藿苷（ICA）对脂多糖（LPS）诱导成骨细胞凋亡及葡萄糖调节蛋白78/蛋白激酶R样内质网激酶/C/EBP同源蛋白（GRP78/PERK/CHOP）通路的影响。 方法: 采用大鼠骨髓基质干细胞定向诱导分化为成骨细胞的方法,将成骨细胞随机分成5组：对照组（只含成骨细胞）、LPS组（成骨细胞中加入终浓度为500 ng·ml-1 LPS）、ICA低、中、高剂量组（分别在LPS组基础上加入终浓度为1,10,100 μmol·L-1 ICA）。采用CCK 8法检测细胞增殖情况,采用对硝基苯棕榈酸酯（PNPP）法检测成骨细胞碱性磷酸酶（AKP）活性的变化情况,采用ELISA法检测成骨细胞Ⅰ型胶原蛋白表达情况,采用AnnexinV/PI双染法流式细胞术检测细胞凋亡情况,采用Western blot检测凋亡及GRP78/PERK/CHOP通路相关蛋白表达情况。 结果: 骨髓基质干细胞经定向诱导后,符合成骨细胞形态学表现,AKP染色呈阳性反应,Ⅰ型胶原蛋白免疫组织化学染色结果显示：细胞质染色呈棕黄色;与对照组相比,LPS组细胞48 h时的吸光度（A）值、AKP活性、Ⅰ型胶原蛋白和B淋巴细胞瘤 2基因（Bcl 2）蛋白表达水平显著降低（P＜0.05）,细胞凋亡率、活化的天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶 3（cleaved caspase 3）、Bax、GRP78、磷酸化的PERK（p PERK）、磷酸化α亚基的真核起始因子2（p eIF2α）、CHOP蛋白表达水平显著升高（P＜0.05）;与LPS组相比,ICA各剂量组细胞48 h时的A值、AKP活性、Ⅰ型胶原蛋白和Bcl 2蛋白表达水平显著升高（P＜0.05）,细胞凋亡率、cleaved caspase 3、Bax、GRP78、p PERK、p eIF2α、CHOP蛋白表达水平显著降低（P＜0.05）,且呈剂量依赖性（P＜0.05）。     

依达拉奉抗大鼠脊髓损伤后脊髓细胞凋亡的机制初探

摘要： 目的 探讨依达拉奉 （EDA） 对大鼠脊髓损伤 （SCI） 后内质网应激 （ERS） 介导的细胞凋亡的影响。方法 36 只 SD 大鼠随机分为假手术(sham)组、 SCI 组、 EDA 组, 每组 12 只。采用 Allen’ s 法建立 SCI 模型, sham 组仅行椎板切除术。术后 Sham 组和 SCI 组给予与 EDA 组等体积等频次生理盐水处理; EDA 组在 SCI 模型建成以后予以 EDA(10 mg/kg), 每 12 h 腹腔注射给药 1 次。于术后 3 d 取脊髓, 应用 Western blot 检测 C/EBP 同源蛋白 （CHOP）、 Cleaved caspase-12 和 Cleaved caspase-3 的表达水平, 免疫荧光技术检测脊髓组织中 caspase-12、 CHOP 阳性细胞的比率, TUNEL 法检测脊髓细胞凋亡水平。结果 SCI 组较 sham 组 CHOP、 Cleaved caspase-12、 Cleaved caspase-3 的表达升高, Cleaved caspase-12、 CHOP 阳性细胞比率增加, 脊髓组织细胞凋亡比率增加 （均 P < 0.01）。EDA 组较 SCI 组 CHOP、 Cleaved caspase-12 和 Cleaved caspase-3 的表达降低, Cleaved caspase-12、 CHOP 阳性细胞比率减少, 脊髓组织细胞凋亡比率减少 （均 P < 0.01）。结论 EDA 对脊髓损伤有保护作用, 机制可能与其抑制 SCI 后脊髓细胞的 ERS 和脊髓细胞的凋亡有关。     

克班宁透皮贴剂对佐剂性关节炎大鼠的抗炎作用

目的：考察克班宁制备成透皮贴剂后对佐剂性关节炎大鼠的抗炎作用。方法：将60只雄性Wistar大鼠随机分为6组,分别为正常组、模型组、甲氨蝶呤（MTX）组、克班宁贴剂低、中、高剂量组,每组10只。除正常组外,其余大鼠右后足趾皮下注射0.1 mL弗氏完全佐剂（CFA）造模,给药组于腹部脱毛区域给予克班宁透皮贴剂,MTX组腹腔注射给予甲氨蝶呤,正常组、模型组给予空白透皮贴剂,隔天给药1次,连续给药20 d。观察各组大鼠体质量、关节肿胀度、关节炎指数和免疫器官指数的变化,检测血清中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-1β（IL-1β）和白细胞介素-6（IL-6）水平,苏木素伊红（HE）染色观察大鼠踝关节病理变化情况。结果：与正常组相比,模型组体质量增长较慢,关节炎指数明显升高,右后肢关节严重肿胀,血清TNF-α、IL-1β和IL-6水平显著升高（P<0.01）,踝关节可见严重滑膜炎症、软骨侵蚀及骨破坏。与模型组相比,各给药组大鼠体质量增加较快,关节肿胀度降低（P<0.01）、关节炎指数降低（P<0.01）,血清中TNF-α、IL-1β、IL-6水平降低（P<0.01）,踝关节炎细胞浸润减轻,软骨破坏减弱。结论：克班宁透皮贴剂能明显改善佐剂性关节炎大鼠关节炎症和病理损伤,降低血清中炎症因子水平,说明克班宁透皮贴剂对佐剂性关节炎具有一定的治疗作用。     

岩藻黄质调控TGF-β/Smad3信号通路减轻CCl4诱导的大鼠肝纤维化和氧化应激

目的： 探究岩藻黄质对肝纤维化模型大鼠氧化应激和纤维化的保护作用及可能机制。方法： 将雄性SD大鼠随机分为空白、模型、岩藻黄质和水飞蓟宾组。除空白组外,其余各组大鼠均皮下注射CCl₄溶液,2次/周,连续8周。造模同时,各组给予相应药物,空白和模型2组均给予等体积无菌水。8周后处死大鼠,检测血清谷草转氨酶（AST）、谷丙转氨酶（ALT）、总胆红素（T-BIL）、直接胆红素（D-BIL）、超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、谷胱甘肽-过氧化物酶（GSH-Px）、透明质酸（HA）、羟脯氨酸（HYP）、层粘连蛋白（LN）含量以及α-SMA、TGF-β/Smad3通路主要mRNA和蛋白表达;并检测肝组织病理变化和纤维化。结果： 与空白组比较,模型组大鼠血清AST、ALT、T-BIL、D-BIL、HA、HYP、LN、MDA,肝组织α-SMA mRNA和α-SMA、TGF-β、p-Smad3蛋白水平显著上调,而SOD和GSH-Px含量降低,肝脏可见细胞结构破坏,大量炎症细胞浸润,胶原沉积和纤维增生;与模型组相比,岩藻黄质和水飞蓟宾可显著逆转大鼠血清ALT、AST、T-BIL、D-BIL、HA、HYP、LN和MDA的升高及SOD和GSH-Px的降低,并缓解肝组织炎症和纤维化程度;此外,岩藻黄质可显著抑制肝组织α-SMA、TGF-β mRNA和α-SMA、TGF-β、p-Smad3蛋白表达水平。结论： 岩藻黄质通过抑制TGF-β/p-Smad3通路缓解大鼠肝纤维化水平,调节氧化应激状态。     

积雪草苷对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用以及MAPK通路的影响

目的：研究积雪草苷对大鼠心肌缺血再灌注损伤及MAPK信号通路的影响。方法：构建大鼠心肌缺血再灌注模型,将大鼠分为对照组、模型组和积雪草苷低（12.5 mg·kg^-1）、中（25 mg·kg^-1）、高（50 mg·kg^-1）治疗组。心脏超声检测心脏功能,HE染色检测心脏组织损伤程度。免疫组化检测心脏组织中ki67阳性细胞率,Western blot检测Bax、Bcl-2、磷酸化-细胞外调节激酶1/2（phosphorylation-extracellular signal-regulated kinase 1/2,p-ERK1/2）和p-p38丝裂原活化蛋白激酶（p-p38 mitogen-activated protein kinase,p-p38MAPK）的蛋白相对表达量。酶联免疫吸附法（enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA）检测外周血液中肌酸激酶同工酶（creatine kinase-MB,CK-MB）、肌红蛋白（myoglobin,Mb）、肌钙蛋白（cardiac troponin I,cTnI）、肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor alpha,TNF-α）、白介素-6（interleukin-6,IL-6）和IL-1β的蛋白相对表达量。结果：与模型组相比,在积雪草苷治疗后,大鼠心率、射血分数、左室收缩压显著上调;心肌酶Mb、cTnl、CK-MB的表达量显著下调,ki67阳性细胞率上调,促炎细胞因子IL-6、TNF-α和IL-1β的表达量下调,Bax/Bcl-2、p-ERK1/2/ERK1/2和p-p38MAPK/p38MAPK的比率显著下调。结论：积雪草苷对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用,并抑制MAPK信号通路。     

垂盆草苷对胆道梗阻大鼠肝脏组织形态及PERK/eIF2α信号通路的影响

摘要：目的:研究垂盆草苷对胆道梗阻大鼠肝脏组织形态及蛋白激酶R样内质网激酶（PERK）/真核翻译起始因子2α（eIF2α）信号通路的影响。方法:60只SD大鼠随机分为5组：正常对照组、模型组、阳性对照组(异甘草酸镁,15 ml·kg-1)、垂盆草苷低(15 ml·kg-1)、高(60 ml·kg-1)剂量组,每组12只。除正常对照组外,其余各组建立胆道梗阻模型。各给药组灌胃给药,正常对照组和模型组给与等量蒸馏水,1次/d,连续1周。采用HE染色法观察肝脏组织病理形态;PCR检测PERK、eIF2α基因表达水平;黄嘌呤氧化酶法检测超氧化物歧化酶（SOD）;TBA法检测丙二醛（MDA）;四唑盐比色法检测黄嘌呤氧化酶（XOD）;比色法检测谷胱甘肽（GSH）;TUNEL检测肝细胞凋亡;Western Blot检测肝组织中B细胞淋巴瘤/白血病-2（Bcl-2）、Bcl2关联X蛋白（Bax）、PERK、p-PERK、eIF2α、p-eIF2α蛋白表达水平。结果:正常对照组肝脏细胞结构完整;模型组肝细胞结构模糊,有局灶性坏死及炎性细胞浸润;阳性对照组和垂盆草苷低、高剂量组以上情况均有所改善,以垂盆草苷高剂量组效果更佳。与正常对照组相比,模型组PERK和eIF2α基因水平、XOD、MDA、肝细胞凋亡率、Bax、PERK、p-PERK、eIF2α、p-eIF2α蛋白水平显著升高（P＜0.05）,SOD、GSH、Bcl-2水平显著降低（P＜0.05）。与模型组相比,阳性对照组和垂盆草苷低、高剂量组PERK和eIF2α基因水平、XOD、MDA、肝细胞凋亡率、Bax、PERK、p-PERK、eIF2α、p-eIF2α蛋白水平显著降低（P＜0.05）,SOD、GSH、Bcl-2水平显著升高（P＜0.05）。垂盆草苷低、高剂量组与阳性对照组相比,各指标差异均有统计学意义（P＜0.05）。结论:垂盆草苷可改善肝组织病理形态及氧化应激水平,降低肝细胞凋亡,其作用机制可能与抑制PERK/eIF2α通路的激活有关。     

大麻二酚对应激性心肌损伤的预防及其机制

目的：探索应激性心肌损伤之后,大鼠心肌组织及心肌细胞的状态和可能的作用机制。方法：采用水浸束缚应激的方式,建立大鼠应激性心肌损伤模型,观测大麻二酚治疗之后应激大鼠心率和血压的变化,血清中CORT、BNP、c-TnI、TNF-α和Il-1β的含量变化,以及应激前后心肌组织中mRNA的差异表达,将差异表达最显著的前100位基因按照具有氧化作用和抗氧化作用进行分类,采用HE染色和免疫组化研究方法,观察大麻二酚对应激性心肌损伤的影响,并利用Western blot研究应激性心肌损伤后心肌细胞中蛋白质差异表达。结果：通过HE染色、免疫组化和生化酶学检测验证大鼠应激性心肌损伤模型,心肌损伤的大鼠心率和血压明显升高（P<0.05）,血清中CORT （P<0.05）、BNP （P<0.05）、c-TnI （P<0.05）、TNF-α（P<0.05）和Il-1β（P<0.01）也显著升高,使用大麻二酚预处理之后,大鼠的心率（P<0.05）和血压（P<0.01）明显下降,血清中CORT （P<0.001）、c-TnI （P<0.001）、TNF-α（P<0.01）和Il-1β（P<0.05）也显著降低,转录组显示差异表达最显著的前100位基因中,44个基因发挥氧化作用,34个基因具有抗氧化作用。体外研究发现,心肌细胞应激之后细胞中MDA含量明显升高（P<0.01）,SOD （P<0.01）和GSH （P<0.01）显著降低,经过剂量为2.5 μmol·L^-1的大麻二酚预处理之后,MDA含量明显降低（P<0.01）,SOD （P<0.05）和GSH （P<0.01）水平却明显升高,利用Hoechst 33342和Annexinv-FITC/PI进行双染凋亡细胞检测,发现应激之后心肌细胞凋亡数量显著增加,大麻二酚预处理可减少心肌细胞凋亡,应用Western blot检测发现,应激之后Gsk3β和Bax蛋白表达量显著升高,而Nrf2和Bcl2蛋白表达量则显著降低,经过大麻二酚预处理之后Gsk3β、Bax蛋白表达量显著降低,Nrf2和Bcl2蛋白表达量显著升高。结论：大麻二酚可预防大鼠应激性心肌损伤,并且其作用机制与减少Gsk3β、Bax的表达和升高Nrf2、Bcl2蛋白的表达水平有关。     

丙泊酚抑制GRP78/PERK/CHOP通路改善PE诱导H9C2细胞凋亡的研究

目的:研究丙泊酚对苯肾上腺素(phenylephrine, PE)诱导H9C2心肌细胞的影响及机制。方法:H9C2细胞均分为5组,PE诱导细胞凋亡模型,用0.5,1,1.5 mmol·L^-1丙泊酚预处理。采用流式细胞术检测凋亡率;RT-qPCR检测GRP78/PERK/CHOP通路的mRNA表达;蛋白质印迹检测GRP78/PERK/CHOP通路蛋白、caspase-12、caspsae-3、SERCA2a的表达;定磷法检测SERCA2a活性。结果:PE诱导心肌细胞凋亡率升高,GRP78/PERK/CHOP通路mRNA及蛋白表达升高,caspase-12、caspsae-3表达升高,SERCA2a蛋白表达及活性降低,差异有统计学意义(P均<0.05)。中、高浓度的丙泊酚可明显逆转PE诱导的上述指标变化,且差异有统计学意义(P均<0.05)。结论:丙泊酚通过恢复SERCA2a的活性及表达量、抑制GRP78/PERK/CHOP通路,降低PE诱导的心肌细胞凋亡。     

苦参碱治疗慢性萎缩性胃炎的实验研究

目的：探讨苦参碱对大鼠慢性萎缩性胃炎（CAG）的影响及其作用机制。方法：采用多因素复合法建立CAG模型,将大鼠分为正常组、模型组、阳性对照组（维酶素300 mg·kg^-1）、苦参碱高剂量组（200 mg·kg^-1）、苦参碱低剂量组（100 mg·kg^-1）,每组10只。灌胃给药,连续治疗8周后,于光镜下观察胃黏膜组织病理学并进行病理程度分级;放射免疫法测定血清胃泌素（GAS）和血浆生长抑素（SS）含量;酶联免疫吸附法测定胃黏膜匀浆液中白细胞介素I β（IL-1β）、IL-6、肿瘤坏死因子α（TNF-α）浓度,实时定量聚合酶链反应法测定胃黏膜Toll样受体4（TLR4）、髓样分化因子88（MyD88）、核因子κB（NF-κB）基因表达。结果：各给药组大鼠胃黏膜病变有显著减轻,炎性细胞浸润程度和固有腺体萎缩程度的组间差异均有统计学意义（P<0.01）;与模型组相比,苦参碱高、低剂量组大鼠血清GAS含量显著升高（P<0.01）,血浆SS含量则出现显著降低（P<0.01）;苦参碱高、低剂量组大鼠胃黏膜IL-1β、IL-6和TNF-α水平均有显著降低,与模型组相比组间差异均有统计学意义（P<0.01）;与模型组相比,苦参碱高剂量组大鼠胃黏膜TLR4、MyD88和NF-κB mRNA相对表达量均有显著降低（P<0.05或P<0.01）,苦参碱低剂量组TLR4和NF-κB mRNA相对表达量均有显著降低（P<0.05或P<0.01）。结论：苦参碱可通过抑制TLR4/MyD88/NF-κB信号转导通路的持续活化及相关炎症细胞因子的高表达,减轻CAG炎症反应,阻止炎症细胞对胃黏膜造成的损伤,发挥对胃黏膜的保护作用。     

7-羟乙基白杨素对低压低氧大鼠认知功能的保护作用及机制研究

目的：研究7-羟乙基白杨素（7-HEC）对低压低氧致大鼠认知功能损伤的保护作用及其机制。方法：将48只雄性大鼠随机分为正常对照组、缺氧模型组、白杨素组和7-HEC组，连续灌胃给药5 d，其中舱外2 d，然后将大鼠置于模拟海拔8 000 m环境停留3 d，期间每天给药一次。八臂迷宫检测大鼠空间学习记忆能力，HE染色观察脑组织海马区病理改变，检测海马组织中H₂O₂、MDA和抗氧化酶的活性变化，ELISA法检测炎性因子IL-6、IL-1β、TNF-α的水平，蛋白印迹法检测Bcl-2、Bax和caspase-3蛋白的表达情况。结果：低压低氧导致大鼠海马组织损伤明显，参考记忆错误（RME）、工作记忆错误（WME）、总错误次数（TE）和总时间（TT）显著升高，海马组织中H₂O₂、MDA含量和炎性因子水平显著增加，抗氧化酶活性显著减低，Bax和caspase-3蛋白表达增加，Bcl-2蛋白表达降低。经7-HEC预处理后能够显著降低WME、RME、TE和TT，降低大鼠海马组织中H₂O₂、MDA含量和炎性因子水平，提高抗氧化酶活性，降低Bax和caspase-3蛋白表达，显著提高Bcl-2蛋白的表达。结论：7-HEC能够减轻低压低氧诱导的认知功能损伤，作用机制可能与清除自由基，提高抗氧化酶活性，降低机体氧化应激，抑制炎性反应和细胞凋亡有关。     

大承气汤调控Nrf2/TGF-β1/ERK通路来减轻脂多糖诱导的急性肺损伤

目的：研究大承气汤（Dachengqi Decoction,DCQD）减轻脂多糖诱导的急性肺损伤模型的作用及机制。方法：选择无特定病原体（specific pathogen free,SPF）级8周龄SD雄性大鼠,采用脂多糖腹腔注射诱导急性肺损伤模型。将48只大鼠随机分为空白组（blank group）、模型组（model group）、大承气汤低浓度组（L-DCQD group,2.5 g·kg^-1）、中浓度组（M-DCQD group,5 g·kg^-1）、高浓度组（H-DCQD group,10 g·kg^-1）和大承气汤高浓度合Nrf2抑制剂组（H-DCQD＋ML385 group）,每组8只。采用脂多糖10 ml·kg^-1腹腔注射造模,每天灌胃给药1次,连用5 d,并于造模后2 h给予不同浓度的大承气汤灌胃,6 h后收集标本。ELISA检测肺泡灌洗液中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白介素-1β（IL-1β）、髓过氧化物酶（MPO）、丙二醛（MDA）、转化生长因子-β（TGF-β1）表达量,HE染色观察各组大鼠肺脏的病理变化,Western blot检测肺组织核因子E2相关因子2（Nrf2）、p-Nrf2、血红素氧合酶1（HO-1）、细胞外调节蛋白激酶（ERK）、p-ERK的表达,免疫荧光检测Nrf2核转位情况。结果：与blank组相比,model组出现严重的炎症反应,肺泡损伤,肺水肿形成,大量炎症细胞浸润;相关促炎因子TNF-α、IL-1β及氧化指标MPO、MDA明显升高（P<0.05）;大鼠肺组织p-Nrf2及HO-1、p-ERK蛋白表达均上调（P<0.05）。与model组相比,DCQD组炎症反应减轻,肺组织损伤改善,TNF-α、IL-1β及氧化指标MPO、MDA下降,p-Nrf2及HO-1蛋白表达均上调（P<0.05）,p-ERK蛋白表达下调（P<0.05）,且DCQD高浓度组变化趋势更明显（P<0.05）。结论：大承气汤可减轻脂多糖引起的急性肺损伤,其机制与激活Nrf2/TGF-β1/ERK信号通路及抑制炎症反应、氧化应激、上皮间质转化有关。     

黄芪多糖对脓毒症急性肾损伤大鼠AMPK/SIRT1信号通路介导的肾上皮细胞能量代谢的影响

目的：研究黄芪多糖（APS）对脓毒症急性肾损伤（AKI）大鼠肾上皮细胞能量代谢的影响。方法： 60只大鼠随机抽取10只设为正常组,其余随机分为AKI组,APS低、高剂量组各10只,地塞米松组11只。建模后6,12,18 h时APS低、高剂量组APS 100,200 mg·kg^-1灌胃,地塞米松组地塞米松10 mg·kg^-1灌胃,正常组及AKI组等量生理盐水灌胃。建模后24 h测磷法检测肾上皮细胞钠-钾-三磷酸腺苷酶（Na^＋-K^＋-ATP）活性;Western blot法检测肾组织沉默信息调节因子2相关酶类1（SIRT1）。结果：与AKI组比较,APS低、高剂量组,地塞米松组Na^＋-K^＋-ATP酶活性增强（t=3.894,P=0.005;t=6.564,P<0.01;t=6.565,P<0.01）;与APS低剂量组比较,APS高剂量组、地塞米松组Na^＋-K^＋-ATP酶活性增强（t=2.544,P=0.034;t=2.635,P=0.030）;与AKI组比较,APS低、高剂量组,地塞米松组SIRT1蛋白表达量升高（t=9.923,P<0.01;t=12.042,P<0.01;t=10.960,P<0.01）;与APS低剂量组比较,APS高剂量组、地塞米松组SIRT1蛋白表达量升高（t=4.985,P=0.001;t=5.000,P=0.001）。结论： APS可改善脓毒症AKI大鼠肾上皮细胞能量代谢,可能与激活AMPK/SIRT1信号通路有关。     

逆萎康含药血清调控AKT/GSK-3β/β-catenin通路抑制MC细胞的上皮间质转化

目的：逆萎康（NWK）含药血清对MC细胞（MNNG诱导人胃黏膜上皮细胞系（GES-1）恶性转化）上皮间质转化（EMT）的影响及可能机制。方法：用不同浓度含药血清作用于MC细胞,采用蛋白免疫印迹法（Western blotting）检测E-cadherin、N-cadherin、vimentin、p-AKT Ser⁴⁷³、β-catenin、α-SMA、GSK-3β、p-GSK-3β Ser⁹、AKT蛋白的表达影响;采用实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测C-myc基因的表达影响。结果：与空白组比较,蛋白质印迹实验表明,逆萎康含药血清、AKT抑制剂GSK690693（10 μmol·L^-1）使得β-catenin、p-AKT Ser⁴⁷³、E-cadherin和p-GSK-3β Ser⁹在蛋白水平的表达下调（P<0.05）,而α-SMA、N-cadherin和vimentin在蛋白水平上的表达上调（P<0.05）,但GSK-3β和AKT这两种蛋白的表达差异不显著;qRT-PCR结果证实逆萎康含药血清可以抑制C-myc mRNA（P<0.05）的表达,并且加入抑制剂后抑制作用增强,差异具有显著性。结论：逆萎康通过抑制AKT/GSK-3β/β-catenin信号通路的活化,抑制MC细胞的EMT过程。     

消炎退热颗粒清热解毒作用研究

目的：观察中成药消炎退热颗粒（DPZG）对家兔发热模型、小鼠急性耳廓肿胀模型、小鼠内毒素血症模型的作用,探讨其清热解毒的作用和机理。方法：采用脂多糖（lipopolysaccharides,LPS）耳缘静脉注射建立家兔发热模型,评价其解热作用;采用二甲苯致小鼠急性耳廓肿胀模型评价其抗炎作用;建立小鼠内毒素血症模型,观察DPZG对于D-氨基半乳糖（ACTD）敏化小鼠LPS致死攻击的影响,评价其抗内毒素的作用;以Elisa法检测DPZG对内毒素血症模型小鼠血清中TNF-α、IL-1β等炎症因子水平的影响,Western blot法检测小鼠肝、脾、肾组织中膜突蛋白（moesin）以及磷酸化P38 MAPK表达。结果：与模型组比较,DPZG对家兔体温升高有显著抑制作用,与阿司匹林趋同;可显著降低二甲苯致小鼠急性耳廓肿胀程度;可显著升高内毒素血症模型小鼠存活率;显著降低小鼠血清中TNF-α、IL-1β水平和小鼠肝脾肾组织内p-P38MAPK和膜突蛋白（moesin）的表达,效果明显优于中成药对照药蒲地蓝消炎口服液（PBKH）。结论：消炎退热颗粒有显著清热解毒作用,主要作用方式是解热、抗炎、抗内毒素,且效果明显优于PBKH。其作用机制可能与抑制IL-1β、TNF-α、Moesin以及p-P38 MAPK的表达有关。     

罗汉果苷V通过Wnt/β-catenin信号通路对糖尿病状态成骨细胞增殖与分化的影响

目的:探索罗汉果苷V(mogroside V,MV)对糖尿病状态下成骨细胞增殖分化的影响及其可能的作用机制。方法:构建糖尿病大鼠模型,分离培养正常大鼠和糖尿病大鼠下颌骨成骨细胞。CCK8法检测不同质量浓度MV对糖尿病大鼠成骨细胞的毒性和增殖活性,并筛选出适宜的MV浓度用于后续实验;取正常大鼠和糖尿病大鼠下颌骨成骨细胞,分别设立正常对照组、高糖组及MV+高糖组,茜素红染色及定量分析检测成骨分化情况,实时荧光定量PCR检测成骨相关因子ALP、OCN及Wnt/β-catenin信号通路相关因子Runx2,β-catenin,Axin2,Lef1及Osterix的mRNA表达。结果:0~0.4 g·L^-1质量浓度范围内MV对糖尿病状态成骨细胞均未表现出毒性,且浓度为6.25×10^-3g·L^-1时促进细胞增殖活性最强;与高糖组相比,MV+高糖组(含质量浓度为6.25×10^-3g·L^-1 MV)成骨分化能力增强,ALP、OCN、Runx2、β-catenin、Lef1、Osterix的表达显著升高,Axin2的表达显著降低。 结论:罗汉果苷V可促进糖尿病状态成骨细胞增殖与分化,其机制可能与调控Wnt/β-catenin信号通路有关。     

白藜芦醇通过SIRT1激活ADAM10促进APPα代谢

目的：探讨白藜芦醇可否通过SIRT1激活解整合素金属蛋白酶10（ADAM10）促进APPα代谢抑制Aβ分泌。方法：选取过表达人瑞典突变淀粉样前体蛋白APP695sw的细胞模型,分别设立DMSO空白对照组、SIRT1激活剂白藜芦醇组和SIRT1抑制剂EX527组。给药后,ELISA法分别检测细胞培养上清中sAPPα和Aβ的含量,免疫印记Western Blot法检测细胞SIRT1和ADAM10的蛋白水平。结果：与对照组比较,白藜芦醇组细胞培养上清sAPPα的含量增高,Aβ含量下降,sAPPα/Aβ比值增大,细胞SIRT1和ADAM10蛋白水平增高;而抑制剂EX527组与对照相比,细胞培养上清sAPPα的含量降低,Aβ含量升高,sAPPα/Aβ比值减小,细胞SIRT1和ADAM10蛋白水平降低;抑制剂下调SIRT1后各项指标与激动剂组呈现相反的趋势（P<0.05）。结论：白藜芦醇可通过SIRT1激活ADAM10,促进APP进行α非淀粉样代谢途径,增强sAPPα分泌并抑制Aβ产生。     

姜黄素对亚急性肝内胆汁淤积大鼠肠内菌群变化的影响及其机制研究

目的： 研究姜黄素对亚急性肝内胆汁淤积（intrahepatic cholestasis,IHC）大鼠肠内菌群变化的影响,并分析相关机制。方法： 38只IHC大鼠随机分为模型组（9只）、姜黄素低剂量组（9只）、姜黄素高剂量组（10只）、阳性药物组（10只）,9只健康大鼠设置为对照组。姜黄素低、高剂量组姜黄素200、400 mg·kg^-1灌胃;阳性药物组熊去氧胆酸60 mg·kg^-1灌胃;对照组与疾病组等量生理盐水灌胃。均为每天一次;干预14 d。检测肝功能指标、胆红素代谢指标、炎症指标;qRT-PCR反应定量检测肠内菌群;Western blot检测肝组织核转录因子-κB（NF-κB）p65、p-NF-κB p65、核因子抑制蛋白（IκBα）、p-IκBα蛋白相对表达量。结果： 与疾病组比较,姜黄素低、高剂量组、阳性药物组碱性磷酸酶（ALP）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、γ-谷氨酰转肽酶（GGT）、总胆红素（TBIL）、直接胆红素（DBIL）、总胆汁酸（TBA）、白介素-1β（IL-1β）、白介素-6（IL-6）、转化生长因子-β₁（TGF-β₁）均降低,白介素-10（IL-10）均升高,乳酸杆菌、双歧杆菌均增加,大肠杆菌均减少（P<0.05）;与姜黄素低剂量组比较,姜黄素高剂量组、阳性药物组ALP、ALT、AST、GGT、TBIL、DBIL、TBA、IL-1β、IL-6、TGF-β₁均降低,IL-10均升高,乳酸杆菌、双歧杆菌均增加,大肠杆菌均减少（P<0.05）。与疾病组比较,姜黄素低、高剂量组、阳性药物组p-NF-κB p65/NF-κB p65,p-IκBα/IκBα均降低（P<0.05）;与姜黄素低剂量组比较,姜黄素高剂量组、阳性药物组p-NF-κB p65/NF-κB p65,p-IκBα/IκBα均降低（P<0.05）。结论： 姜黄素可改善亚急性IHC模型大鼠肝功能、胆红素代谢、肠道菌群,减轻炎症反应及肝脏组织病理变化,且具有剂量依赖性,推测其作用机制与抑制NF-κB信号通路有关。     

单纯形网格法优化黄芪甲苷纳米乳处方及其皮肤滞留量考察

目的: 优化黄芪甲苷纳米乳处方并考察其皮肤滞留量。方法: 绘制伪三元相图,确定各相比例。以载药量、平均粒径及多分散指数为评价指标,采用单纯形网格法优化纳米乳处方。采用Franz扩散池法考察皮肤滞留量。结果: 优化的处方为丙二醇单月桂酸甘油酯含量5%,混合乳化剂(聚氧乙烯氢化蓖麻油∶1,2-丙二醇,Km=2∶1)含量40%,水含量55%,制备的纳米乳平均粒径为(20.73±0.25) nm,多分散指数为0.183±0.01,载药量为(1.60±0.05) mg·mL^-1,响应方程预测的各指标值与实测值偏差均小于5%。与黄芪甲苷混悬液比较,纳米乳显著提高黄芪甲苷的皮肤滞留量(P<0.01)。结论: 建立的方法预测性好,可用于黄芪甲苷纳米乳处方优化,纳米乳可显著提高黄芪甲苷的皮肤滞留量。     

神经生长因子联合盐酸多奈哌齐治疗帕金森病临床疗效及作用机制分析

目的：分析神经生长因子联合盐酸多奈齐治疗帕金森病临床疗效及对血清炎性因子及脑神经递质的影响。方法：收集104例帕金森病患者作为观察对象,随机分为对照组和观察组,每组各52例。对照组给予盐酸多奈哌齐胶囊,观察组给予神经生长因子联合盐酸多奈哌齐胶囊治疗。治疗3个月后,比较2组血清炎性因子、脑神经递质、临床疗效、不良反应。结果：观察组有效率88.46%明显高于对照组73.08%（χ²=3.962,P<0.05）;血清白细胞介素-6（IL-6）、C反应蛋白（CRP）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）含量明显低于对照组（t=6.722,10.246,4.090,P<0.05,P<0.01）;脑神经递质多巴胺（DA）、去甲肾上腺素（NE）、5羟色胺（5-HT）明显高于对照组（t=10.162,7.887,3.884,P<0.05,P<0.05,P<0.01）;2组不良反应比较无统计学差异（11.54% vs 7.69%）（χ²=0.443,P>0.05）。结论：神经生长因子联合盐酸多奈齐有助于提高帕金森病患者临床疗效,可能与抑制炎症状态、调节脑神经递质等因素有关。     

SCN2A基因多态性与丙戊酸钠治疗壮族癫痫患者疗效的相关性

目的：研究SCN2A基因多态性与丙戊酸钠治疗壮族癫痫患者疗效的相关性。方法：收集224例广西百色地区丙戊酸钠（VPA）规范治疗的壮族癫痫患者（有效组85例,无效组139例）为研究对象,采用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性（polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism,PCR-RFLP）技术和直接测序法检测患者外周血SCN2A位点rs17183814和rs1864885基因多态性,利用LC-MS色谱法测定VPA血药浓度,利用SHEsis软件对rs17183814和rs1864885进行连锁不平衡分析。结果：无效组与有效组相比,rs17183814位点等位基因分布（χ²=9.707,P=0.002）和基因型分布（χ²=11.202,P=0.004）的差异均有统计学意义,而rs1864885位点等位基因分布（χ²=0.792,P=0.374）和基因型分布（χ²=0.763,P=0.683）的差异均无统计学意义。与GG+GA基因型相比,rs17183814的AA基因型显著降低VPA疗效,OR值（95%可信之间）为2.925（1.373~6.233）。有效组中rs17183814的GG、GA和AA基因型患者VPA血药浓度差异（F=5.016,P=0.368）和rs1864885的AA、AG和GG基因型患者VPA血药浓度差异（F=3.215,P=0.102）均无统计学意义。rs17183814和rs1864885没有连锁不平衡性。结论：SCN2A基因位点rs17183814单核苷酸多态性可能与壮族癫痫丙戊酸钠抵抗性形成有关。