运用超高效液相色谱-生物化学检测在线联用分析方法筛选中药中的丁酰胆碱酯酶抑制剂

目的：建立超高效液相色谱（UPLC）-生物化学检测（BCD）在线联用技术快速筛选中药中的丁酰胆碱酯酯酶（BChE）抑制剂的方法。方法：运用UPLC-DAD-BCD方法快速筛选吴茱萸、钩藤、苦参、山豆根提取物中的BChE抑制剂。以莲心碱为阳性对照,考察UPLC-DAD-BCD方法用于BChE抑制剂筛选的可行性。运用超高效液相-线性离子阱/静电场轨道阱高分辨质谱（UHPLC-LTQ/Orbitrap MS）方法鉴定4种中药的70%甲醇提取物中的主要活性成分。结果：UPLC-DAD-BCD方法快速筛选出12个BChE抑制剂,其中吴茱萸4个、钩藤3个、苦参5个、山豆根2个,山豆根中的2个活性成分与苦参共有,通过UHPLC-LTQ/Orbitrap MS鉴定出其中的8个BChE抑制剂,分别为去氢吴茱萸碱、吴茱萸碱、吴茱萸次碱、1-甲基-2-[（6Z,9Z）-6,9-十五二烯基]-4（1H）-喹诺酮、去氢毛钩藤碱、毛钩藤碱、苦参碱和氧化苦参碱。结论：建立的UPLC-DAD-BCD在线分析方法灵敏度高、重现性好,能快速筛选中药中的BChE抑制剂,为中药中新的生物活性成分的快速筛选提供了一种高效、便捷的分析策略。     

基于UHPLC-Q-Exactive Orbitrap-MS技术分析四花青皮的成分

目的：采用超高效液相色谱串联四极杆轨道阱高分辨率质谱技术（UHPLC-Q-Exactive Orbitrap-MS）对四花青皮的成分进行定性分析。方法：分析采用ZORBAX Rclipse Plus C₁₈色谱柱（2.1 mm×50 mm,1.8 μm）,以0.1%甲酸水-乙腈为流动相进行梯度洗脱,流速为0.4 mL·min^-1,柱温40℃。结果：在正离子模式下,从四花青皮中共鉴定了32个成分,包括18个黄酮类化合物,7个有机酸类化合物,2个生物碱类成分和5个其他成分,其中14个成分为四花青皮中首次报道。结论：本方法适用于四花青皮中成分的快速鉴定,可为四花青皮的质量控制和进一步应用开发提供参考依据。     

基于序贯代谢模型研究地榆鞣质在大鼠体内的代谢作用

目的：以序贯代谢模型为基础,研究地榆鞣质成分在大鼠体内代谢动态情况。方法：采用超高液相色谱-线性离子阱-串联静电轨道阱高分辨质谱（UHPLC-LTQ-Orbitrap HRMS）技术,以此同时检测多成分变化情况。体内代谢采用在体封闭肠环法研究地榆鞣质口服后多成分经肝肠代谢变化过程。结果：口服地榆鞣质通过肝肠的代谢,经过水解、甲基化及葡萄糖醛酸化后共鉴定出12种代谢产物。结论：采用序贯代谢模型的方法,研究地榆鞣质口服经不同代谢部位的情况进行了定性描述,可为该药物的质量控制、机制阐述及再次开发提供参考依据。     

基于UPLC-Q-TOF-MS对蒙药苏格木勒-3水提物化学成分的研究

目的：对蒙药苏格木勒-3水提物进行化学成分研究,构建较为全面的化学成分谱,为苏格木勒-3水提物有效物质基础研究奠定基础。方法：采用超高液相色谱串联四级杆飞行时间质谱（UPLC-Q-TOF-MS）技术,使用ESI离子源,通过mzCloud与mzVoult软件以及质谱裂解规律,并结合对照品及相关文献资料比对进行定性分析。结果：经过分析,从蒙药苏格木勒-3水提物中共鉴定出42个成分,主要包括氨基酸、酚酸类、黄酮类、内酯类、生物碱类及其他类等6类成分,并对各成分的药材来源进行归属。结论：本研究全面、快速、准确地分析了蒙药苏格木勒-3水提物的化学成分,为其药效物质基础和质量控制等研究奠定了基础。     

基于UPLC-Q-Orbitrap-HRMS技术分析半夏白术天麻汤的化学成分及入血成分

目的:采用超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱(UPLC-Q-Orbitrap-HRMS)技术分析半夏白术天麻汤(Banxia Baizhu Tianma Decoction,BBTD)化学成分及入血成分,阐明其可能的药效物质基础。方法:色谱柱为Waters ACQUITY UPLC HSS T3 C₁₈(2.1mm×100mm,1.8μm),流动相为0.1%甲酸乙腈(A)-0.1%甲酸水溶液(B)梯度洗脱,流速0.2mL·min^-1。采用电喷雾离子源ESI,正、负离子模式扫描。根据准分子离子与二级碎片离子,结合对照品及文献数据鉴定BBTD化学成分、入血成分。结果:BBTD表征出133个成分,含药大鼠血浆样品分析出48个化合物,包括39个原型成分和9个代谢产物。结论:通过UPLC-Q-Orbitrap-HRMS技术对BBTD化学成分及入血成分进行表征,为其药效物质基础研究和质量控制奠定基础。     

基于UPLC-Q-TOF-MS技术的五酯胶囊及其入血原型木脂素类成分快速鉴定分析

目的：利用超高效液相色谱-飞行时间质谱联用（UPLC-Q-TOF-MS）技术通过特征碎片和中性丢失快速鉴别五酯胶囊及其入血的原型木脂素类成分。方法：ACQUITY UPLC BEH C₁₈色谱柱（100 mm×2.1 mm,1.7 μm）,以0.1%甲酸水-甲醇梯度洗脱,流速0.2 mL·min^-1;进样量2 μL。电喷雾离子源（ESI）,正离子模式下采集。结果：结合文献及对照品的色谱、质谱裂解行为,共推测鉴定五酯胶囊中木脂素类化合物14个,其中入血成分8个。结论：本研究建立了UPLC-Q-TOF-MS法对五酯胶囊及其入血原型木脂素类成分进行分析,为阐明其药效物质基础和作用机制提供参考。     

超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱测定五味子和醋五味子中8种木脂素成分含量

目的：建立一种快速稳定的液质联用方法分析醋制对五味子中8种主要木脂素类成分含量的影响,为完善五味子及醋五味子饮片的质量标准提供实验依据。方法：采用超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱,以乙腈-0.1%甲酸水梯度洗脱,流速 0.4 mL·min^-1,质谱采用加热电喷雾离子源（H-ESI）,利用其高分辨的特点采用一级正离子Full mass扫描方式,对不同批次五味子、醋五味子及自制醋五味子中8种主要木脂素类成分进行含量测定。结果：在优化的色谱质谱条件下,每个样品的分析时间仅为4 min。通过Xcalibur数据处理软件加权处理,五味子醇甲、五味子醇乙、五味子酯甲和五味子丙素在0.062 5~2.00 μg·mL^-1,五味子酯乙、五味子酚、五味子甲素和五味子乙素在0.015 6~0.500 μg·mL^-1线性关系良好（r≥0.991 3）;精密度、重复性及稳定性良好（RSD≤3%）;加样回收率在98.74%~102.34%,RSD均小于3%;所测成分含量在五味子和醋五味子之间无显著差异;自制醋五味子与市面上醋五味子之间木脂素类成分含量也无明显差异;自制醋五味子中木脂素成分含量炮制前后同一成分含量均有一定变化,但变化均不一致,有升有降,但多批次平均含量之间无统计学差异。结论：建立的定量方法分析时间短、灵敏度高且准确性好,方法学考察结果符合测定要求,可用于五味子及醋五味子中8种木脂素类成分的快速测定,并为其质量评价提供新的科学依据和参考。     

清肝利胆口服液化学成分的鉴定及网络药理学法探讨其作用机制

目的：对清肝利胆口服液中的化学成分进行鉴定,探索其保肝利胆的作用机制。方法：采用超高效液相色谱-四级杆-飞行时间质谱（UPLC-Q-TOF-MS/MS）法鉴定清肝利胆口服液中所含的化学成分;利用TCMSP、TTD等数据库获得所得成分和疾病分别相对应的靶点信息;通过生物信息学技术富集涉及的相关通路及生物过程,并运用Cytoscape软件进行构图。结果：鉴定出清肝利胆口服液成分22种,成分作用靶点548个,疾病靶点454个,主要作用通路5条。结论：清肝利胆口服液中化学成分可以通过UPLC-Q-TOF-MS/MS法进行简便、快速定性分析,而其发挥保肝利胆的作用可能与抗炎、免疫调节、细胞色素P450代谢和血糖调节相关。     

高效液相色谱法同时检测洋参抗衰合剂中丹参5种水溶性成分

目的：建立高效液相色谱法同时测定洋参抗衰合剂中5种水溶性丹参成分含量的方法。方法：采用高效液相色谱法，Agilent ZORBAX Extend C₁₈（250 mm×4.6 mm，5 μm）色谱柱；以乙腈-0.1%磷酸溶液为流动相，梯度洗脱：0~15 min，5.0% A；15~25 min，5.0%→30.0% A；25~35 min，30.0%→36.0% A；检测波长287 nm；柱温30℃；体积流量1.0 μg·mL^-1，测定洋参抗衰合剂中5种水溶性丹参成分含量。结果：洋参抗衰合剂方中君药丹参所含丹参素钠、原儿茶醛、阿魏酸、迷迭香酸、丹酚酸B共5种水溶性有效成分在考察浓度范围内各成分药物浓度与峰面积之间呈良好线性关系，平均加样回收率在95%~105%之间，RSD均在2.0%以内。结论：该方法快速、准确，重复性好，可用于洋参抗衰合剂中丹参水溶性成分的全面质量控制，有利于合剂水提效果的整体监控。     

超高效液相色谱-质谱联用法测定人血浆中沙丁胺醇浓度

目的：建立测定人血浆中沙丁胺醇浓度的超高效液相色谱-质谱联用方法。方法：内标选用沙丁胺醇-d9,以甲醇沉淀血浆中蛋白,取上清液吹干复溶;采用Welch Ultimate XS-C₁₈色谱柱（3.0 mm×100 mm,3 μm）,预柱选用Welch Ultimate XB-C₁₈柱（2.1 mm×5 mm,5 μm）,以含0.1%甲酸5 mmol·L^-1乙酸铵的5%乙腈和纯乙腈为流动相,梯度洗脱;应用电喷雾离子化,正离子模式下进行多反应监测沙丁胺醇（m/z 240.2→m/z 147.9）和内标沙丁胺醇-d9（m/z 249.1→m/z 149.1）的浓度。结果：沙丁胺醇的线性范围为5~2 000 pg·mL^-1,定量下限为5 pg·mL^-1,日内、日间准确度为101.93%~109.03%,精密度RSD为1.45%~8.50%。结论：本方法简便、准确、灵敏、稳健且经济,适用于硫酸沙丁胺醇吸入气雾剂的临床药动学研究和生物等效性评价。     

Tenuifoliose Q, a new oligosaccharide ester from the root of Polygala tenuifolia Willd

From the cortexes of Polygala tenuifolia Willd., a new oligosaccharide ester, tenuifoliose Q (1), was isolated together with three known compounds. The structure of 1 was elucidated by spectroscopic and physiochemical analysis as an oligosaccharide esterified with acetic, benzoic and p-hydroxycinnamoyl acid.     

Triterpenoid saponins from Anemone begoniifolia

A new triterpenoid saponin, begoniifolide D (1), along with eight known ones (2-9) has been isolated from the methanol extracts of Anemone begoniifolia Lévl. et Vant. Their structures have been elucidated by spectroscopic and chemical methods.     

A new bisabolane sesquiterpenoid from Euphorbia chrysocoma

The new sesquiterpenoid (6R)-2-chloro-6-[(1S)-1,5-dimethylhex-4-en-1-yl]-3-methylcyclohex-2-en-1-one (1), together with ten known compounds, (6R)-6-[(1S)-1,5-dimethylhex-4-en-1-yl]-3-methylcyclohex-2-en-1-one (2), bauerenol acetate (3), lupenone (4), alpha-amyrenone (5), beta-sitosterol (6), stigmasterol (7), beta-amyrin (8), ursolic acid (9), betulinic acid (10), scopolin (11), have been isolated from the roots of Euphorbia chrysocoma Lévl. et Vant. Their structures have been elucidated by spectroscopic data.     

基于指纹图谱结合化学计量学方法及含量测定评价金莲花质量

目的:建立金莲花高效液相色谱(HPLC)指纹图谱,测定其中2个黄酮类成分的含量,并结合化学计量学方法评价其质量.方法:采用HPLC法,以荭草苷为参照,绘制15批样品的HPLC指纹图谱,采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012版)》进行相似度评价,并通过SPSS 23.0软件进行聚类分析、主成分分析和偏最小二乘判别...     

卵叶银莲花全草中的新三萜皂苷

目的　对卵叶银莲花（Anemone begoniifolia Lévl.et Vant）全草的的三萜皂苷成分进行分离和结构鉴定。方法　通过正相和反相硅胶柱色谱分离甲醇提取物中的三萜皂苷;利用各种波谱技术并结合化学降解方法鉴定其化学结构。结果　分离鉴定了1个二元混合物和2个单体,二元混合物中的2个成分分别鉴定为3-O-β-D-吡喃葡糖(1→2)-α-L-吡喃阿拉伯糖基-齐墩果酸-28-O-α-L-吡喃鼠李糖(1→4)-β-D-吡喃葡糖(1→6)-β-D-吡喃葡糖苷(1)和3-O-β-D-吡喃葡糖(1→3)-α-L-吡喃阿拉伯糖基-齐墩果酸-28-O-α-L-吡喃鼠李糖(1→4)-β-D-吡喃葡糖(1→6)-β-D-吡喃葡糖苷(2),2个单体分别鉴定为23-O-丙二酸单甲酯单酰基-常春藤配基-28-O-α-L-吡喃鼠李糖(1→4)-β-D-吡喃葡糖(1→6)-β-D-吡喃葡糖苷(3)和3-O-丙二酸单甲酯单酰基-常春藤配基-28-O-α-L-吡喃鼠李糖(1→4)-β-D-吡喃葡糖(1→6)-β-D-吡喃葡糖苷(4)。结论　化合物2,3和4为新三萜皂苷,分别命名为卵叶银莲花苷A,B和C。     

山茱萸炮制前后血清中移行成分差异分析

目的：分析山茱萸炮制前后血清中移行成分的差异,从血清药物化学的角度揭示山茱萸炮制机理。方法：将山茱萸与制山茱萸水提液动物口服给药后制备含药血清,建立并分析比较空白组、山茱萸组和制山茱萸组大鼠血清HPLC特征图谱,确定山茱萸炮制前后血清移行成分差异,并进行主成分分析（PCA）和偏最小二乘判别分析（PLS-DA）分析。结果：与空白组相比,山茱萸组新增6个色谱峰,制山茱萸组新增5个色谱峰,两给药组共有色谱峰为11号、12号、13号色谱峰,其中11号和12号色谱峰峰面积存在显著性差异;S-1、S-2和S-3号色谱峰为山茱萸组特有,Z-1和Z-2号色谱峰为制山茱萸组特有。PCA和PLS-DA分析结果显示,山茱萸和制山茱萸组均出现明显的聚类,且两组间分离明显。结论：山茱萸炮制前后血清移行成分存在量与质的显著差异。     

A new bisabolane sesquiterpenoid from Euphorbia chrysocoma

The new sesquiterpenoid (6R)-2-chloro-6-[(1S)-1,5-dimethylhex-4-en-1-yl]-3-methylcyclohex-2-en-1-one (1), together with ten known compounds, (6R)-6-[(1S)-1,5-dimethylhex-4-en-1-yl]-3-methylcyclohex-2-en-1-one (2), bauerenol acetate (3), lupenone (4), α-amyrenone (5), β-sitosterol (6), stigmasterol (7), β-amyrin (8), ursolic acid (9), betulinic acid (10), scopolin (11), have been isolated from the roots of Euphorbia chrysocoma Lévl. et Vant. Their structures have been elucidated by spectroscopic data.     

Coagulant and esterase activities of thrombin and Bothrops atrox venom

Thrombin and Bothrops atrox coagulant are similar enzyme proteins. Contrary to the general contention, TAME hydrolyzing enzyme was found by the authors to differ from the coagulant component of both the thrombin preparation and the B. atrox venom. With the thrombin preparation and B. atrox venom, the hydrolysis of synthetic amino acid esters and transformation of fibrinogen to fibrin appeared to be catalyzed by two different enzyme proteins.     

基于指纹图谱和成分定量的丹参化瘀颗粒质量评价研究

目的:建立丹参化瘀颗粒的HPLC指纹图谱及多成分定量分析方法,为其质量评价提供依据。方法:采用Agilent 5TC-C₁₈(2)色谱柱(250 mm×4.6 mm, 5.0μm),以0.05%磷酸水溶液(A)-乙腈(B)作为流动相进行梯度洗脱,体积流量1.0 mL·min^-1,柱温30℃,进样量20μL,检测波长403 nm、230 nm及302 nm,测定12批次丹参化瘀颗粒指纹图谱,标定共有峰并进行归属分析及相似度评价,对采用对照品比对确认的成分进行含量测定。结果:12批丹参化瘀颗粒指纹图谱标定共有峰29个,其中8个来源于丹参、1个来源于天麻、2个来源于当归川芎药对、1个来源于红花、1个来源于芍药。通过对照品比对确认其中7个成分,分别为天麻素、羟基红花黄色素A、芍药苷、阿魏酸、丹酚酸B、隐丹参酮、丹参酮ⅡA。各批样品相似度均在0.99以上。结论:所建立的方法灵敏度高,专属性强,HPLC指纹图谱结合多成分定量测定能全面反映丹参化瘀颗粒内在质量,可用于其质量控制。