HPLC-CAD法测定川芎茶调散中绿原酸、阿魏酸、阿魏酸松柏酯、洋川芎内酯A、Z-藁本内酯、欧前胡素和异欧前胡素

目的建立高效液相色谱-电喷雾检测器(HPLC-CAD)法同时测定川芎茶调散中绿原酸、阿魏酸、阿魏酸松柏酯、洋川芎内酯A、Z-藁本内酯、欧前胡素、异欧前胡素。方法采用资生堂Capcell Pak MGⅡC18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:80%甲醇-10 mmol/L甲酸铵,梯度洗脱;体积流量:1.0 m L/min;柱温:40℃;CAD雾化器温度:35℃,采集频率:10 Hz,过滤常数:5.0;进样体积:20μL;稀释剂:70%甲醇。结果绿原酸、阿魏酸、阿魏酸松柏酯、洋川芎内酯A、Z-藁本内酯、欧前胡素、异欧前胡素的质量浓度分别在0.51～10.20μg/m L(r=0.999 4),0.53～10.60μg/m L(r=0.999 3),2.52～50.40μg/m L(r=0.999 5),5.05～101.00μg/m L(r=0.999 4),5.01～100.20μg/m L(r=0.999 8),1.02～20.40μg/m L(r=0.9995)、0.62～12.40μg/m L(r=0.9993)线性关系良好;平均回收率分别为99.46%、98.65%、98.48%、98.74%、98.60%、98.69%、98.58%,RSD值分别为1.62%、0.87%、1.03%、1.20%、1.25%、0.69%、0.66%。结论方法准确、重复性好,为川芎茶调散的质量研究提供了更加全面的方法。     

天舒胶囊中9种活性成分的HPLC-CAD法含量测定及稳定性研究

目的：采用高效液相色谱仪-电喷雾检测器（HPLC-CAD），建立同时测定天舒胶囊中天麻素、巴利森苷B、巴利森苷C、巴利森苷A、阿魏酸、阿魏酸松柏酯、洋川芎内酯A、6，7-二羟基藁本内酯及Z-藁本内酯含量的检测方法，并对天舒胶囊稳定性进行考察。方法：采用GL Sciences Inertsil ODS-3色谱柱，以90%乙腈（A），20 mmol·L^-1甲酸铵（甲酸pH 3.5）-乙腈（90：10）（B）为流动相，梯度洗脱，流速1.0 mL·min^-1，柱温40℃；CAD雾化器温度35℃，采集频率10 Hz，气压59.6 psi。同时测定天舒胶囊在加速及长期试验下各成分含量的变化，为该品种稳定性及贮藏条件提供依据。结果：各成分分离度均良好，阴性无干扰；9种成分的线性关系良好（r≥0.999 1）；平均加样回收率（n=6）为96.44%~98.91%，RSD≤2.0%。稳定性考察结果表明，阿魏酸松柏酯、洋川芎内酯A及Z-藁本内酯在加速条件下含量显著下降，提示该品种不宜在高温下长时间放置；长期条件下稳定性良好。结论：经方法学验证，该方法具有良好的灵敏度及准确度，可为天舒胶囊的全面质量控制提供科学依据，该品可于室温贮藏。     

HPLC-DAD同时测定益心通胶囊中6种活性成分的含量

目的 建立HPLC同时测定益心通胶囊中葛根素、龙胆苦苷、阿魏酸、毛蕊花糖苷、丹酚酸B和丹皮酚6种活性成分含量的方法。方法 采用XSELECT^TM HSS C₁₈色谱柱,流动相为乙腈（A）-0.2%磷酸水溶液（B）,梯度洗脱;柱温：30℃;流速：1.0 mL·min^-1;检测波长：阿魏酸、毛蕊花糖苷和丹酚酸B为220 nm,葛根素为250 nm,龙胆苦苷和丹皮酚为275 nm。结果 葛根素、龙胆苦苷、阿魏酸、毛蕊花糖苷、丹酚酸B和丹皮酚的线性范围分别为7.56~113.4 μg·mL^-1（r=0.999 8）,4.36~65.4μg·mL^-1（r=0.999 7）,1.18~17.7 μg·mL^-1（r=0.999 3）,1.90~28.5 μg·mL^-1（r=0.999 4）,4.48~67.2 μg·mL^-1（r=0.999 3）和11.7~175.5 μg·mL^-1（r=0.999 7）,平均加样回收率分别为98.7%,97.8%,97.6%,98.6%,99.0%,98.7%,RSD分别为1.0%,1.3%,1.4%,1.1%,1.2%,1.3%。结论 本法专属性强,结果准确,重现性好,可用于益心通胶囊的质量控制。     

穿黄制剂定性指纹图谱及多组分含量测定方法研究

目的： 采用高效液相色谱（HPLC）法,建立穿黄制剂指纹图谱定性分析和10个主要成分定量分析的测定方法,为穿黄制剂质量控制方法的建立提供科学依据。方法： 色谱柱为Agilent Technologies EC-C₁₈柱（250 mm×4.6 mm,4.0 μm）,乙腈-0.2%磷酸水溶液为流动相,梯度洗脱,流速为1.0 mL·min^-1,柱温为25℃,采用323 nm和215 nm双波长切换模式进行检测。结果： 研究建立了该制剂的HPLC指纹图谱共有模式,确定了11个共有峰,17批次穿黄制剂的指纹图谱的相似度均大于0.9;同时测定了其中新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、异绿原酸B、异绿原酸A、异绿原酸C、穿心莲内酯、新穿心莲内酯、去氧穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯10种主要成分的含量,方法学考查结果显示,以上各成分的线性范围分别是0.009 2~0.101 0 mg·mL^-1（r=0.999 8）,0.012 9~0.142 0 mg·mL^-1（r=0.999 9）,0.010 1~0.111 1 mg·mL^-1（r=0.999 9）,0.013 0~0.143 0 mg·mL^-1（r=0.999 9）,0.008 9~0.097 9 mg·mL^-1（r=0.999 9）,0.004 7~0.051 4 mg·mL^-1（r=0.999 9）,0.032 6~0.359 0 mg·mL^-1（r=0.999 9）,0.051 7~0.569 0 mg·mL^-1（r=0.999 9）,0.011 7~0.129 0 mg·mL^-1（r=0.999 9）,0.056 6~0.623 0 mg·mL^-1（r=0.999 9）,平均回收率在98.10%~102.93%范围内,RSD<2.3%（n=6）。结论： 建立的穿黄制剂指纹图谱和含量测定方法准确可靠、快速高效,可用于穿黄制剂的定性、定量分析。     

HPLC同时测定丹酚酸B和阿魏酸的含量

目的 建立HPLC同时测定丹酚酸B和阿魏酸的方法。 方法 色谱柱ODS-C₁₈(4.6 mm×250 mm,5 μm)柱,流动相：甲醇-乙腈-甲酸-水,检测波长为286 nm,流速0.8 mL·min^-1。 结果 丹酚酸B浓度在5.40~43.25 μg·mL^-1,阿魏酸浓度在3.37~27.00 μg·mL^-1内线性关系良好。丹酚酸B和阿魏酸的线性方程分别为：Y=0.971 1X-2.215 4,r=0.999 8,Y=0.415 9X-0.450 7,r=0.999 9;平均回收率分别为98.4%,98.7%;RSD分别为3.39%,1.49%。 结论 本法在检测丹酚酸B和阿魏酸时有较好的专属性,灵敏度高,重复性好,且样品处理简单、容易操作,可以作为丹参和当归复方制剂的质量检测方法。     

HPLC双波长法同时测定炎热清片中6种有效成分的含量

目的 建立HPLC双波长法同时测定炎热清片中龙胆苦苷、栀子苷、芒果苷、黄芩苷、黄芩素和汉黄芩素6种成分的含量。方法 采用Agilent TC-C₁₈色谱柱（4.6 mm×250 mm,5 μm）,流动相为甲醇∶0.2%磷酸水溶液（梯度洗脱）,柱温为35℃,流速为1.0 mL·min^-1,检测波长0~20 min为254 nm,同时检测龙胆苦苷、栀子苷、芒果苷,20~50 min为280 nm,同时检测黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素。结果 龙胆苦苷、栀子苷、芒果苷、黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素分别在18.92~189.2 ng（r=0.999 9）,107.44~1 074.4 ng（r=0.999 9）,9.82~98.2 ng（r=0.999 9）,767.68~7 676.8 ng（r=1.000 0）,100.94~1 009.4 ng（r=0.999 9）,49.84~498.4 ng（r=0.999 9）线性良好,平均回收率（n=9）分别为98.31%,98.35%,98.40%,98.03%,98.46%,98.24%,RSD分别为0.4%,0.3%,0.3%,0.4%,0.4%,0.3%。结论 该方法灵敏、简便、准确,可用于炎热清片的质量控制。     

UPLC同时测定生脉饮口服液中五味子醇甲、五味子醇乙、五味子甲素的含量

目的 建立UPLC测定生脉饮口服液中有效成分（五味子醇甲、五味子醇乙、五味子甲素）含量的方法。方法 采用XBridge^® BEH C₁₈色谱柱（2.1 mm×100 mm,2.5 μm）,以乙腈（A）-水（B）为流动相进行梯度洗脱,流速0.5 mL·min^-1,进样量5 μL;柱温为40℃;检测波长为203 nm。结果 五味子醇甲、五味子醇乙、五味子甲素检测质量浓度线性范围分别为1.950~124.8μg·mL^-1（r=0.999 9）、1.375~88.00μg·mL^-1（r=0.999 9）、1.594~102.0μg·mL^-1（r=0.999 9）;定量限≤0.137 5μg·mL^-1,检测限≤0.068 8μg·mL^-1;仪器精密度、稳定性、重复性试验的RSD≤1.18%;加样回收率分别为98.65%（RSD=0.82%）,98.47%（RSD=1.21%）,99.24%（RSD=0.99%）。结论 该方法操作简便,仪器精密度、稳定性、重复性好,可用于生脉饮口服液中五味子醇甲、五味子醇乙、五味子甲素含量测定。     

银黄胶囊HPLC特征图谱和6个成分含量测定

目的 采用HPLC建立银黄胶囊的特征图谱,并同时测定6个成分的含量。方法 采用Agilent ZORBAX SB-C₁₈（250 mm×4.6 mm,5 μm）,柱温30℃,以乙腈-0.4%乙酸溶液为流动相,梯度洗脱,流速为1.0 mL·min^-1,检测波长为327 nm,进样量10 μL,对20批银黄胶囊进行特征图谱研究,采用“中药色谱指纹图谱相似度评价系统（2012.130723版本）”对结果进行分析,并对色谱峰进行指认。结果 建立了银黄胶囊的HPLC特征图谱,指认了其中的6个特征峰,并对20批银黄胶囊中6个成分进行含量测定。新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、3-5-O-二咖啡酰基奎宁酸、黄芩苷和黄芩素质量浓度分别在0.638 7~6.387 μg·mL^-1（r=0.999 3）、2.893~28.93 μg·mL^-1（r=0.999 8）、0.664 1~6.641 μg·mL^-1（r=0.999 7）、0.743 1~7.431 μg·mL^-1（r=0.999 6）、16.19~161.9 μg·mL^-1（r=0.999 7）和2.143~21.43 μg·mL^-1（r=0.999 7）内线性关系良好,平均加样回收率（n=6）分别为100.19%（RSD=1.76%）、101.14%（RSD=1.29%）、98.86%（RSD=1.20%）、98.05%（RSD=0.99%）、99.38%（RSD=1.92%）、99.70%（RSD=1.92%）,20批银黄胶囊中上述6个成分含量分别为0.637 9~4.100,3.069~15.28,0.960 4~4.906,0.625 9~4.440,82.69~118.2,2.118~14.76 mg·g^-1。结论 所建立的HPLC特征图谱专属性强,结合6个主要成分含量测定能够为银黄胶囊的质量控制提供科学依据。     

HPLC波长切换法测定莪术中8个主要有效成分的含量

目的 建立HPLC同时测定莪术药材中8个主要有效成分（蓬莪术和温莪术的双去甲氧基姜黄素、去甲氧基姜黄素、姜黄素、莪术烯醇、莪术二酮、呋喃二烯酮、牻牛儿酮和呋喃二烯）的方法。方法 取样品粉末,以70%甲醇超声提取。采用Kromasil 100-5-C₁₈（4.6 mm×250 mm,5 μm）色谱柱,以乙腈（A）-0.4%磷酸溶液（B）为流动相,梯度洗脱,流速1.0 mL·min^-1;检测波长分别为426 nm和216 nm。再通过化学计量学分析蓬莪术和温莪术共有模式与成分差异。结果 双去甲氧基姜黄素、去甲氧基姜黄素、姜黄素、莪术二酮、莪术烯醇、呋喃二烯酮、牻牛儿酮和呋喃二烯的线性范围分别为3.90~155.9 μg·mL^-1（r=0.999 6）,3.52~140.9μg·mL^-1（r=0.999 4）,4.34~173.8 μg·mL^-1（r=0.999 5）,36.88~1 475.2 μg·mL^-1（r=0.999 4）,142.45~5 698 μg·mL^-1（r=0.999 9）,36.47~1 458.9 μg·mL^-1（r=0.999 9）,48.04~1 921.8 μg·mL^-1（r=0.999 3）,37.52~1 500.6 μg·mL^-1（r=0.999 9）;平均加样回收率（n=3）为99.4%~100.3%。20批药材测定结果显示蓬莪术中姜黄素类成分高于温莪术。化学计量学分析结果表明莪术二酮和呋喃二烯酮是蓬莪术和温莪术的重要差异成分。结论 所建立的方法符合方法学验证要求,可用于莪术药材的姜黄素类和倍半萜类成分的同时测定。     

复方苦参肠炎康片HPLC指纹图谱及多成分含量测定

目的 采用HPLC建立复方苦参肠炎康片指纹图谱定性和8个成分定量分析的测定方法,为复方苦参肠炎康片的质量控制提供更为可靠的方法和依据。方法 采用HPLC同时测定复方苦参肠炎康片中京尼平苷酸、苦参碱、绿原酸、氧化苦参碱、芍药苷、黄芩苷、盐酸小檗碱、甘草酸铵的含量,采用Agilent TC-C₁₈柱（250 mm×4.6 mm,5 μm）,流动相为乙腈（A）-0.05%磷酸溶液（B）,梯度洗脱;检测波长为220 nm,柱温为30℃,流速为1.0 mL·min^-1,进样量为10 μL。选取黄芩苷为参照峰,并使用中药色谱指纹图谱相似度评价系统对指纹图谱进行相似性评价,确定共有峰。结果 京尼平苷酸、绿原酸、苦参碱、氧化苦参碱、芍药苷、黄芩苷、盐酸小檗碱、甘草酸铵质量浓度的线性范围分别为1.080~9.723（r=0.999 8）,5.213~46.92（r=0.999 6）,18.95~170.5（r=0.999 4）,31.79~286.1（r=0.999 7）,49.53~445.8（r=0.999 4）,113.5~1022（r=0.999 5）,70.77~636.9（r=0.999 6）,10.69~96.21（r=0.999 5）μg·mL^-1;定量限分别为0.867 0,1.051,1.123,1.021,0.903 1,0.896 1,1.063,1.216 μg·mL^-1;平均加样回收率分别为98.6%,99.0%,98.4%,98.7%,98.8%,99.1%,98.9%,98.8%（RSD均<2.0%,n=6）;仪器精密度、重复性、稳定性（48 h）试验的RSD均<2.0%（n=6）。14批次复方苦参肠炎康片的指纹图谱与其指纹图谱共有模式相比较相似度均>0.9,标定了共有峰22个,并对其中8个共有峰进行了指认和归属。结论 所建立的HPLC指纹图谱分离效果良好,特征性强,方法稳定简单,多指标成分含量测定同时结合指纹图谱分析能更为全面地对复方苦参肠炎康片的质量进行控制。     

中空纤维离心超滤结合高效液相色谱法测定5-氟尿嘧啶的血药浓度

目的：建立简单、快速的中空纤维离心超滤-高效液相色谱法（HFCF-UF-HPLC）测定人血浆中5-氟尿嘧啶血药浓度的方法。方法：将加入少量释放剂的血浆样本经中空纤维离心超滤预处理后,直接取20 μL超滤液进行HPLC分析,采用Venusil MP C₁₈色谱柱（250 mm×4.6 mm,5 μm）,流动相：甲醇-0.01 mol·L^-1磷酸二氢钾缓冲液（2∶98,V∶V）,流速：1.0 mL·min^-1,检测波长：265 nm。结果：5-氟尿嘧啶在0.05~50.1 μg·mL^-1的范围内线性关系良好（R²=0.999 9）,绝对回收率为99.5%~104.2%,RSD<1.8%,检测限为0.03 μg·mL^-1,定量限0.05 μg·mL^-1,室温放置24 h,循环冻融3次和冰冻3个月的稳定性良好。结论：所建立的方法避免了由于疾病所引起的血浆白蛋白水平的变化对其血药浓度测量结果的影响,为临床中5-氟尿嘧啶的血药浓度监测提供了简单、快速、灵敏的样品前处理方法。     

高效液相色谱-电雾式检测器法同时测定小儿解感片中7种黄酮类成分的含量

目的：建立同时测定小儿解感片中芦丁、槲皮苷、橙皮苷、黄芩苷、汉黄芩苷、山奈酚及黄芩素7种黄酮类成分含量的方法。方法：采用高效液相色谱-电雾式检测器（HPLC-CAD）法,色谱柱为Waters XBridge C₁₈（250 mm×4.6 mm,5 μm）,甲醇（A）-20 mmol·L^-1乙酸铵（乙酸调pH至4.5）（B）为流动相,梯度洗脱,流速0.8 mL·min^-1,柱温35℃,进样量20 μL,CAD雾化器温度为35℃,过滤常数5.0。结果：芦丁、槲皮苷、橙皮苷、黄芩苷、汉黄芩苷、山奈酚及黄芩素检测质量浓度线性范围为0.28~5.60 μg·mL^-1（r=0.999 2）,0.23~4.60 μg·mL^-1（r=0.999 6）,0.17~3.40 μg·mL^-1（r=0.999 1）,1.88~37.60 μg·mL^-1（r=0.999 6）,0.51~10.20 μg·mL^-1（r=0.999 5）,0.15~3.00 μg·mL^-1（r=0.999 4）,0.16~3.20 μg·mL^-1（r=0.999 1）;检测限分别为0.06,0.06,0.06,0.07,0.07,0.05,0.05 μg·mL^-1,定量限分别为0.17,0.16,0.16,0.18,0.19,0.13,0.13 μg·mL^-1;平均加样回收率分别为99.44%,98.83%,98.44%,98.60%,98.05%,99.02%及98.53%,RSD分别为1.70%,1.47%,0.89%,1.20%,1.13%,1.80%及1.32%（n=6）。结论：本法准确性好,灵敏度高,简便易行,可用于小儿解感片中多指标成分的质量控制研究。     

基于指纹图谱及多组分定量分析对金荞麦止咳膏质量评价方法的研究

目的:建立金荞麦止咳膏指纹图谱定性分析和8个主要成分定量分析的测定方法,为金荞麦止咳膏质量控制方法的建立提供科学依据。方法:采用高效液相色谱法(HPLC)建立13批金荞麦止咳膏的指纹图谱,标定共有峰,并进行相似度评价,对采用对照品比对确认的8种组分进行定量分析。结果:金荞麦止咳膏标定共有峰21个,其中原儿茶酸、原儿茶醛、芦丁、柚皮苷、黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素8种成分采用对照品比对确认,各成分的线性范围分别0.011 75～1.174 8 mg·mL^-1(r=1.000 0),0.016 92～1.691 8 mg·mL^-1(r=1.000 0),0.015 88～1.588 0 mg·mL^-1(r=0.999 9),0.030 34～3.034 mg·mL^-1(r=0.999 9),0.017 24～1.724 2 mg·mL^-1(r=0.999 9),0.016 86～1.686 4 mg·mL^-1(r=0.999 9),0.026 58～2....     

HPLC测定异维A酸有关物质

目的 建立HPLC测定异维A酸有关物质的方法。方法 色谱柱为NUCLEOSIL 100-3 C₁₈（4.6 mm×150 mm,3 μm）,以甲醇-水-冰醋酸（770：225：5）为流动相,流速为1.0 mL·min^-1;柱温为25℃,检测波长为355 nm。结果 异维A酸峰与杂质H、I、维A酸、强制降解杂质峰分离良好;异维A酸、杂质H、I和维A酸的线性范围分别为0.000 545 5~21.82 μg·mL^-1（r=0.999 9）,0.002 856~7.14 μg·mL^-1（r=0.999 0）,0.002 789~6.97 μg·mL^-1（r=0.999 1）、0.017 07~22.76 μg·mL^-1（r=0.999 6）;检测限分别为0.27,0.60,0.65,5.50 ng·mL^-1,定量限分别为0.55,2.85,2.80,17.00 ng·mL^-1;杂质H、I和维A酸的平均回收率分别为101.57%,102.02%,101.03%,RSD分别为0.5%,0.8%,1.5%。结论 建立的HPLC方法准确、专属性强,可用于异维A酸有关物质的测定。     

HPLC测定硫酸氢氯吡格雷阿司匹林片有关物质

目的 建立HPLC测定硫酸氢氯吡格雷阿司匹林片有关物质。方法 采用Waters XBridge Shield RP₁₈色谱柱（250 mm×4.6 mm,5 μm）,以0.1%三乙胺溶液（用磷酸调节pH值至2.5±0.1）-甲醇为流动相进行梯度洗脱,流速为1.0 mL·min^-1,检测波长为220 nm。结果 各杂质与主峰之间的分离度良好,阿司匹林杂质C、D、E、F及氯吡格雷杂质A浓度分别在0.59~178.32,0.31~12.47,0.33~13.21,0.31~18.49和0.76~30.28μg·mL^-1内与峰面积呈良好的线性关系,r分别为0.999 9,1.000 0,0.999 8,0.999 7和0.999 9。阿司匹林杂质C、D、E、F及氯吡格雷杂质A加样回收率的平均值分别为97.47%,102.16%,102.20%,103.71%和104.16%,RSD分别为5.35%,1.93%,1.40%,4.63%和2.45%。结论 本方法简便、准确可靠,适用于硫酸氢氯吡格雷阿司匹林片中有关物质的控制。     

苦瓜素I抑制乳腺癌MCF-7/DOX细胞多柔比星耐药的研究

目的：研究苦瓜素I （momordicin I,MMI）对人乳腺癌耐多柔比星（doxorubicin,DOX） MCF-7/DOX细胞耐药的影响及其作用机制。方法：MTT比色法检测MMI对MCF-7/DOX细胞的毒性,考察MMI对MCF-7/DOX细胞多柔比星敏感性的影响;实时定量PCR和western blot方法检测DOX单独以及MMI与DOX联用后,MCF-7/DOX细胞中MDR1在mRNA和蛋白质水平的表达变化;进一步采用实时定量PCR方法检测DOX单独以及MMI与DOX联用后,MCF-7/DOX细胞中与甘油磷脂代谢相关的AGPAT2、CEPT1、CHKA、DGKA、PCYT1A、PLA2G15等基因表达的变化。结果：MMI （12.5,25,50 μg·mL^-1,）可明显抑制MCF-7/DOX细胞的增殖,MMI对MCF-7/DOX细胞的最大无毒浓度为6.25 μg·mL^-1。MMI 6.25 μg·mL^-1与DOX联用后,DOX对MCF-7/DOX细胞的半数抑制浓度（IC₅₀）下降,MMI使得MCF-7/DOX细胞对DOX的敏感性提高了13.88倍。与DOX 50 μg·mL^-1单独组相比,MMI 6.25 μg·mL^-1与DOX 50 μg·mL^-1联用后,MCF-7/DOX细胞中的MDR1 mRNA显著下调（P<0.05）,MDR1蛋白表达有下降趋势。进一步研究发现MMI 6.25 μg·mL^-1与DOX 50 μg·mL^-1联用可协同下调MCF-7/DOX细胞甘油磷脂代谢相关基因AGPAT2、CEPT1、CHKA、DGKA、PCYT1A、PLA2G15等表达。结论：MMI可增强乳腺癌MCF-7/DOX细胞多柔比星敏感性,抑制MDR1表达,逆转耐药,此作用可能与其抑制甘油磷脂代谢有关。