四氯化碳诱导的肝纤维化小鼠肝组织和HSC-T6细胞NOX4基因及其蛋白表达的变化

目的 探讨四氯化碳(CCl₄)诱导的肝纤维化小鼠和肝星状细胞(HSC-T6)还原型辅酶烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶家族氧化酶4(NOX4)基因及其蛋白表达的变化。方法 采用腹腔注射四氯化碳(CCl₄)构建10只小鼠肝纤维化模型,采用qRT-PCR法和Western Blot法检测小鼠肝组织NOX4基因和蛋白表达水平。将肝星状细胞(HSC-T6)分为对照组、无意干预组和NOX4-siRNA干预组,后两组分别采用脂质体2000将无意义序列或NOX4-siRNA转染HSC-T6细胞,采用qRT-PCR法和Western Blot法检测HSC-T6细胞NOX4、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、I 型胶原(Col1a I)、组织金属蛋白酶抑制剂1(TIMP-1)、金属蛋白酶2(MMP-2)、转化生长因子 β1(TGF-β1)、Smad2和Smad3水平,采用DCFH-DA荧光探针法检测细胞活性氧(ROS)含量,采用MTT法检测细胞增殖,使用流式细胞术检测细胞周期和凋亡情况。结果 模型小鼠肝组织出现明显的病理学损伤,有大量的胶原纤维沉积;模型组小鼠肝组织NOX4 mRNA水平显著高于对照组(P＜0.05);与对照组细胞比,NOX4-siRNA干预组细胞NOX4 mRNA及其蛋白、ROS、增殖活性、S期细胞比例、α-SMA、Col1a I、TIMP-1、MMP-2、TGF-β1、p-Smad2/Smad2、p-Smad3/Smad3表达水平显著降低,而G0/G1期细胞比例和细胞凋亡率显著升高(P＜0.05)。结论 肝纤维化组织NOX4呈高水平,下调NOX4可抑制肝星状细胞的增殖和活化,并促进其凋亡,可能是通过下调TGF-β/Smad信号通路实现的。     

涤痰汤对血管性痴呆大鼠海马NOX2/ROS通路、GSH、HO-1表达的影响

目的观察涤痰汤对血管性痴呆(VD)大鼠海马还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶(NOX)2/活性氧(ROS)通路、血红素氧合酶(HO)-1、谷胱甘肽(GSH)的影响,探讨涤痰汤治疗VD的作用机制。方法 40只大鼠随机分为假手术组、模型组、涤痰汤高剂量组、涤痰汤低剂量组,每组10只,采用改良双侧颈总动脉永久阻断法(2-VO)制备VD大鼠模型,涤痰汤高剂量组、涤痰汤低剂量组分别以9.71 g/kg、4.85 g/kg涤痰汤灌胃,假手术组、模型组给予等量生理盐水,每日1次,给药4 w后,Morris水迷宫实验进行大鼠行为学检测,HE染色观察大鼠海马组织病理学变化,Western印迹法检测海马组织HO-1蛋白的表达,免疫组织化学法检测NOX2表达的变化,生化试剂盒测定海马组织ROS、GSH的含量。结果与假手术组比较,模型组大鼠空间学习记忆能力显著下降(P0.01);海马区神经元数量减少,可见坏死的神经元,细胞形态不规则,染色不均匀,细胞边界模糊,细胞膜、核膜不清晰,细胞核固缩;NOX2、HO-1表达量及ROS含量明显增高(P0.01),GSH含量明显降低(P0.01)。与模型组比较,涤痰汤高剂量组、涤痰汤低剂量组大鼠空间学习记忆能力改善(P0.01,P0.05);海马神经元数量增多,细胞形态较规则,染色较均匀,细胞边界较清晰;NOX2表达量及ROS含量显著降低(P0.01,P0.05),HO-1表达量及GSH含量显著升高(P0.01,P0.05);与涤痰汤高剂量组比较,涤痰汤低剂量组大鼠空间学习记忆能力显著下降(P0.05);NOX2表达量及ROS含量显著升高(P0.05),HO-1表达量及GSH含量显著降低(P0.05)。结论涤痰汤可能通过调节VD大鼠海马区氧化应激,保护海马神经元,改善大鼠空间学习记忆能力。     

曲美他嗪对急性心肌梗死大鼠胶原的影响

目的 探讨曲美他嗪对急性心肌梗死(AMI)模型大鼠梗死区、非梗死区胶原蛋白分子表达的影响.方法 将结扎冠状动脉左前降支AMI鼠48只随机分成模型组、倍他乐克(琥珀酸美托洛尔)组(2 mg·kg-1·d-1)、曲美他嗪组(10 mg·kg-1·d-1).另设假手术组.同步药物干预8 w后,RT-PCR检测梗死区胶原-I mRNA.结果 与模型组比较,倍他乐克组、曲美他嗪组梗死区胶原-I mRNA表达均明显下调(P＜0.05);倍他乐克组与曲美他嗪组水平接近,差别不显著(P＞0.05).与模型组比较,倍他乐克组、曲美他嗪组非梗死区胶原-I mRNA表达均明显下调(P＜0.05);倍他乐克组与曲美他嗪组表达水平接近,差别不显著(P＞0.05).结论 曲美他嗪既能减少AMI大鼠梗死区胶原分子的合成又能减少非梗死区胶原分子的合成,可有效延缓整个心肌纤维化的进程.     

曲美他嗪对急性心肌梗死患者QT离散度的影响

曲美他嗪（2,3,4-三甲基苯唑哌嗪二氢盐酸盐）是代谢类抗心肌缺血药物,其作用机制与硝酸甘油、转换酶抑制剂、β-阻滞剂及钙拮抗剂等常用的抗心肌缺血药物不同。QT离散度（QTD）和校正QT离散度（QTcD）已被视为预测冠心病尤其是急性心肌梗死后心源性猝死的独立因素。2002年2月～2004年8月,我们观察了曲美他嗪对初发AMI患者QTD及QTcD的影响。现报告如下。     

曲美他嗪对慢性心力衰竭大鼠肾脏组织Bcl-2、Bax蛋白表达的影响

目的研究曲美他嗪(TMZ)对慢性心力衰竭(CHF)大鼠肾脏组织Bcl-2、Bax表达的影响。方法通过缩窄肾上腹主动脉建立CHF大鼠模型,选择30只雄性Wistar大鼠随机分为假手术组、模型组、TMZ组,每组10只。监测各组心脏血流动力学参数,采用苏木素-伊红(HE)染色观察各组肾脏形态结构改变,TUNEL法检测各组肾脏组织细胞凋亡指数(AI);免疫组织化学法(SP法)检测各组肾脏组织中Bcl-2与Bax蛋白的表达水平,RT-PCR法检测Bcl-2、Bax mRNA含量。结果与模型组比较,TMZ组大鼠肾小管排列整齐,肾小管细胞水肿、脱落减少;AI和Bax蛋白、mRNA表达水平显著下降(P<0.01);Bcl-2蛋白、mRNA表达水平明显升高(P<0.01)。结论 CHF时应用TMZ可通过抑制细胞凋亡保护肾功能,进而改善心功能。     

曲美他嗪对急性冠脉综合征患者血清炎性因子水平的影响

目的探讨曲美他嗪治疗急性冠脉综合征（ACS）的机制。方法将同期收治的100例ACS患者随机分为观察组和对照组各50例,两组均予ACS常规治疗,在此基础上观察组口服曲美他嗪,连续4周。分别测定两组治疗前后血清C反应蛋白（CRP）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白介素-6（IL-6）水平。结果治疗后观察组血清CRP、TNF-α、IL-6水平显著低于治疗前及对照组（P〈0．01）。结论曲美他嗪可通过抗炎作用治疗ACS。     

曲美他嗪对陈旧性心肌梗死的影响

目的探讨曲美他嗪对陈旧性心肌梗死心功能影响。方法检查超声心动图及评定临床心功能级别。结果曲美他嗪对非血运重建和血运重建患者均有明显改善左心室的收缩和舒张功能(P<0.01或P<0.05);显著减小左心室的收缩末期和舒张末期内径(分别P<0.05);明显改善左室室壁运动及临床心功能状态(分别P<0.05)。结论曲美他嗪改善陈旧性心肌梗死患者心功能,提高其生活质量。     

曲美他嗪对糖尿病伴心肌缺血的影响

42例糖尿病伴无症状性心肌缺血的患者给予曲美他嗪20mg，一日三次，连用8周，观察治疗后的心电图改变。结果治疗后心电图缺血性ST-T改善的总有效率达81%。结论曲美他嗪治疗糖尿病伴无症状性心肌缺血安全有效.     

烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶与心房颤动的研究

心房颤动是最常见的心律失常,其发生和维持的分子机制尚未明确。近年来发现心房颤动存在氧化应激,并已从动物实验、临床试验等多方面证实其主要来源为烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（NADPH）氧化酶,推测NADPH 氧化酶可能在心房颤动发生发展过程中起重要作用。以NADPH 氧化酶为靶点的心房颤动干预措施如肾素-血管紧张素系统抑制剂和他汀类等也愈受关注。     

曲美他嗪对急性心肌梗死大鼠心室重构的抑制作用

目的探讨曲美他嗪对急性心肌梗死(AMI)大鼠心室重构的抑制作用及其可能机制。方法取清洁级雄性健康SD大鼠60只,随机数字表法随机分为4组,每组各15只,即假手术组(C组),AMI模型组(M组),曲美他嗪低剂量组(L组),曲美他嗪高剂量组(H组)。C组只穿线不结扎,M、L、H三组均行开胸结扎左冠脉前降支方案,构建大鼠AMI模型,术后12 h开始L、H组分别给予曲美他嗪相应剂量灌胃1次/d(L组10 mg·kg~(-1)·d~(-1),H组20 mg·kg~(-1)·d~(-1)),喂养4 w。各组分别于术后24 h于眼动脉取血2 ml,测定血清肌酸激酶(CPK),丙二醛(MDA),超氧化物歧化酶(T-SOD),游离脂肪酸(FFA)。术后4 w观察各组心肌肥厚指数变化和各组心肌胶原(MC)含量变化,获取心肌细胞结构及心肌胶原纤维增生的有关图像数据。结果术后24 h各组血清CPK、血清MDA均较C组升高(P均0.05),而血清T-SOD较C组则下降(P均0.05),其中M组变化最显著;L、H组血清CPK、血清MDA较M组减低,而血清T-SOD则升高(P均0.05),且H组变化更为显著(P0.05)。另外,M组血清FFA较C组显著升高(P0.05),L、H组较M组则显著降低(P0.05)。术后4 w,与C组比较,M、L、H组心肌肥厚指数均增大(P均0.01),而M组增大最明显;与M组比较,L、H组则明显下降(P0.05)。术后4 w,与C组比较,M、L、H组MC含量均明显升高(P均0.05),而M组升高最显著(P0.001),与M组比较,L、H组则显著下降(P0.05),且呈剂量依赖性。MC含量与血清CPK活力(r=0.85,P0.001)和MDA含量(r=0.76,P0.001)呈正相关。光镜MASSON染色和透射电镜结果显示:M组心肌及线粒体结构破坏最严重,且胶原纤维堆积明显,L、H组较M组改善。结论曲美他嗪对大鼠AMI后心室重构有抑制效果,缓解心肌纤维化。且这可能与其优化心肌代谢、减轻细胞缺血损伤后氧化应激反应、保护线粒体超微结构从而减少心肌细胞损伤作用相关。     

对乙酰氨基酚诱导的急性肝损伤小鼠肝组织糖基转移酶Colgalt2表达的变化*

目的 探讨对乙酰氨基酚（APAP）诱导的急性肝损伤小鼠肝组织糖基转移酶Colgalt2表达的变化。方法 取C57BL/6小鼠100只,采用腹腔注射APAP溶液法建立小鼠急性肝损伤模型。首先建立不同浓度干预组,每组10只,分别给予【0 mg·kg^-1 APAP（对照组）、100 mg·kg^-1 APAP处理组、250 mg.kg^-1 APAP处理组、500 mg·kg^-1 APAP处理组和1000 mg·kg^-1 APAP处理组】,再建立不同时间干预组,每组10只,均给予500 mg·kg^-1 APAP腹腔注射,分别观察【0 h APAP（对照组）、2 h APAP处理组、4 h APAP处理组、8 h APAP处理组和12 h APAP处理组】。采用Real-time quantitative PCR 和Western blot法检测肝组织对糖基转移酶Colgalt2 基因及其蛋白表达情况。结果 在250 mg·kg^-1、500 mg·kg^-1和1000 mg·kg^-1 APAP处理组,血清ALT分别为（1360.5±189.8）IU/L、（3191.2±118.6）IU/L和（5022.7±234.6）IU/L,AST分别为（2147.1±133.4）IU/L、（3628.8±107.9）IU/L和（5854.5±295.1）IU/L,较对照组显著升高（P<0.05）;在4 h、8 h和12 h APAP处理组,血清ALT水平有类似的变化;在100 mg·kg^-1、250 mg·kg^-1、500 mg·kg^-1、1000 mg·kg^-1 APAP处理组,肝组织Colgalt2基因水平较对照组显著升高;在2 h、4 h、8 h和12 h APAP处理组,肝组织Colgalt2基因水平较对照组逐渐显著升高,肝组织Colgalt2蛋白表达水平也随APAP干预剂量的增加和干预时间的延长也呈逐渐增强趋势。结论 肝组织糖基转移酶Colgalt2在对乙酰氨基酚诱导的急性肝损伤小鼠发病过程中发挥着重要的作用。     

A 7-day profile of oxidative stress and antioxidant status in patients with acute liver failure

Purpose  Acute liver failure (ALF) is characterized by a rapid and massive destruction of hepatocytes. The role of oxidative stress in perpetuating the injury is undefined and may be a potential therapeutic target. Our aim was to study serial variation in oxidative stress and antioxidant status in patients with ALF. Methods  The study involved a prospective case–control study set in a tertiary care referral center. Thirty-two consecutive patients admitted with ALF were included with 23 healthy controls for comparison. Level of systemic oxidative stress as defined by superoxide dismutase (SOD), lipid peroxidation products (thiobarbituric acid reactive derivatives [TBARS]), and the total antioxidant capacity as the ferric reducing ability of plasma (FRAP) was measured at baseline on days 3 and 7. Results  The patients were aged 24 years (range 13–60 years) and included 20 females. Thirteen (40.6%) patients died. Patients with ALF had significantly increased systemic oxidative stress at presentation, as reflected by higher levels of SOD (P < 0.001) and TBARS (P < 0.001) than controls. Both TBARS levels and FRAP decreased progressively from admission to the end of first week among the survivors (P = 0.004 and 0.015, respectively). The antioxidant status reflected by FRAP (P = 0.001) was significantly lower in ALF patients than controls. No relation was found between the level of oxidative stress and the mortality or complications. Conclusion  A high level of systemic oxidative stress exists in ALF, with depletion of antioxidant reserves. Further studies are needed to define the clinical correlation of the large pro-oxidant burden.     

Oridonin对急性肝衰竭小鼠肝细胞凋亡的影响及其机制研究*

目的 探讨冬凌草甲素（oridonin）对脂多糖/D-氨基半乳糖氨（LPS/D-Gal）联合诱导的急性肝衰竭（ALF） 小鼠肝细胞凋亡的影响,并探讨其可能的机制。方法 取25只小鼠,随机分成5组,每组5只。采用LPS/D-Gal腹腔注射建立小鼠ALF模型,设生理盐水对照组、LPS/D-Gal诱导模型组、LPS/D-Gal诱导和不同剂量oridonin干预组及oridonin处理组。采用末端转移酶介导的缺口末端标记法（TUNEL）检测肝细胞凋亡,采用real-time PCR法检测肝组织TNF-α mRNA水平,采用Western blot法检测凋亡相关蛋白的变化。结果 模型组小鼠肝细胞凋亡率为（36.4±1.8） %,显著高于两个oridonin干预组的[（19.4±3.3）%和（11.4±0.3）%,P<0.01];模型组小鼠肝组织TNF-α mRNA水平显著高于正常对照组（P<0.01）,而两个oridonin干预组肝组织TNF-α mRNA水平显著低于模型组（P<0.01）;模型组小鼠线粒体凋亡通路相关的促凋亡蛋白c-Jun氨基末端激酶（JNK）、bax、细胞色素C、cleaved caspase9/3活化水平显著高于两个oridonin干预组（P<0.01）,模型组小鼠抗凋亡蛋白bcl-xl水平显著低于两个oridonin干预组（P<0.01）,模型组小鼠死亡受体凋亡通路相关的促凋亡蛋白caspase8活化水平与两个oridonin干预组并无明显差异（P>0.01）。结论 Oridonin可抑制LPS/D-Gal诱导的ALF小鼠肝细胞凋亡,其机制可能与下调促凋亡细胞因子TNF-α水平和抑制JNK介导的线粒体凋亡信号通路有关。     

中药方剂赤白汤对D-氨基半乳糖诱导的急性肝衰竭小鼠肠道菌群的影响研究*

目的 探讨中药方剂赤白汤对急性肝衰竭小鼠肠道菌群的影响。方法 将48只小鼠随机分为正常组、模型组、大剂量中药组、中剂量中药组、小剂量中药组和丽珠肠乐组,每组8只。先给动物生理盐水、中药或丽珠肠乐灌胃8 d,采用D-氨基半乳糖/脂多糖腹腔注射诱导急性肝衰竭（ALF）。采用平板活菌计数法检测小鼠粪便肠道菌群。结果 模型组小鼠血清ALT水平为（1983.3±629.0） U/L,显著高于正常组[（36.9±7.5）U/L,P<0.001],肝脏指数为（6.7±0.6）%,显著高于正常组[（5.2±0.3）%,P<0.001],大肠杆菌为（8.7±0.5） lgCFU/粪便和肠球菌为（9.5±0.3） lgCFU/粪便,显著高于正常组[（7.6±0.9）lgCFU/粪便,P<0.01和（8.8±0.2） lgCFU/粪便,P<0.001],乳酸杆菌为（9.3±0.3） lgCFU/粪便和双歧杆菌为（10.1±0.4） lgCFU/粪便,显著低于正常组[（10.4±0.5） lgCFU/粪便,P<0.001和（11.2±0.5） lgCFU/粪便,P<0.001];与模型组比,大、中、小剂量中药和丽珠肠乐处理动物肝组织出血、坏死改善,肠道菌群部分恢复。结论 中药方剂赤白汤具有改善急性肝衰竭小鼠肝功能和肠道菌群紊乱的作用。     

Orionin对急性肝衰竭小鼠的保护作用及其对肝组织细胞因子水平的影响*

目的 探讨冬凌草甲素（Oridonin）对脂多糖/D-氨基半乳糖氨（LPS/D-Gal）联合诱导的急性肝衰竭（ALF）小鼠的保护作用及其对肝组织细胞因子水平的影响。方法 取150只小鼠,随机分成5组,每组 30 只。采用LPS/D-Gal腹腔注射建立小鼠ALF模型,设生理盐水对照组、Oridonin对照组、LPS/D-Gal诱导模型组和LPS/D-Gal处理及不同剂量Oridonin干预组。采用Real-time PCR法检测肝组织肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素（IL）-1α、IL-1β和IL-6 mRNA水平。结果 模型组小鼠48 h存活率为0.0% （0/30）,而两个Oridonin干预组小鼠48 h存活率分别提高至64.5% （19/30）和80.6% （24/30,P<0.01）; 组织病理学检查显示模型组小鼠肝细胞呈大块或/和亚大块坏死,肝小叶结构消失,残存肝细胞肿胀、空泡变性,肝窦肿胀充血,炎细胞浸润。Oridonin干预组小鼠肝细胞坏死、空泡变性和炎细胞浸润等较模型组有明显的改善;模型组小鼠血清ALT和AST水平分别为（345.3 ± 54.1） U/L和（500.2±53.5） U/L,明显高于对照组的[（42.3±0.6）U/L和（117.1±9.8）U/L,P<0.01],两个Oridonin干预组分别为 （303.9±39.5） U/L和（340.6±2.8） U/L及[（130.2±38.3） U/L和 （209.8±36.2） U/L,P<0.05];模型组小鼠肝组织TNF-α、IL-1α、IL-1β和IL-6 mRNA水平显著高于正常对照组（P<0.01）,而两个Oridonin干预组肝组织TNF-α、IL-1α、IL-1β和IL-6 mRNA水平显著低于模型组 （P<0.01）。结论 Oridonin对LPS/D-Gal诱导的ALF小鼠具有显著的保护作用,其作用机制可能与降低肝组织细胞因子水平有关。     

急性肝衰竭小鼠肝组织IL-25和IL-17受体mRNA水平变化

目的 探讨白介素-25（IL-25）在急性肝衰竭发病中的作用。方法 采用D-氨基半乳糖和脂多糖混合腹腔注射法制备小鼠急性肝衰竭模型;采用实时荧光定量PCR法检测小鼠肝组织IL-25及其受体白介素17受体B（IL-17RB）基因信使核糖核酸（mRNA）水平;采用酶联免疫吸附试验法检测小鼠肝组织匀浆上清IL-25水平。计量资料采用t检验进行统计学分析。结果 肝衰竭小鼠肝组织IL-25和IL-17RB mRNA相对水平分别为（18.05±2.46）和（1.89±0.42）,均显著高于对照组（P<0.05）;肝组织匀浆上清IL-25蛋白表达水平为（26.17±14.00）pg/mg,也显著高于对照组【（12.50±4.68）pg/mg,P<0.05】。结论IL-25可能参与了急性肝衰竭的发生和发展过程。     

甲基莲心碱减轻D-半乳糖胺/脂多糖诱导的小鼠急性肝损伤作用研究

目的 研究甲基莲心碱对D-半乳糖胺/脂多糖诱导的小鼠急性肝损伤的保护作用。方法 将80只小鼠随机分为4组（n=20）,在正常组和模型组小鼠给予生理盐水灌胃,而在另两实验组则分别给予小剂量（100 mg.kg^-1）和大剂量（300 mg.kg^-1）甲基莲心碱灌胃。然后在实验组给予D-半乳糖胺/脂多糖诱导制备急性肝损伤模型。每组选择10只小鼠取血,分别检测血清ALT、AST、SOD、MDA、GSH、TNF-α、IL-6和IL-10水平,并取肝组织,行病理学检查,另10只小鼠用于观察存活期。结果 模型组小鼠血清ALT和AST水平分别为（272.4±42.8） U/L和（497.2±62.1） U/L,甲基莲心碱处理组小鼠血清ALT和AST水平均显著降低,差异有统计学意义（P<0.05）,而以大剂量甲基莲心碱处理组为明显;模型组小鼠血清SOD和GSH水平分别为（37.5±6.2） U/mL和（11.8±2.7）μmol/L,血清MDA水平为（9.2±1.4） mol/L,甲基莲心碱处理组小鼠血清SOD和GSH水平显著高于模型组,而血清MDA水平显著低于模型组（P<0.05）;模型组小鼠血清TNF-α、IL-6和IL-10水平分别为（587.6±48.9） pg/ml、（153.4±18.0）pg/ml和（96.4±9.7）pg/ml,甲基莲心碱处理组小鼠血清TNF-α和IL-6水平显著降低,血清IL-10水平显著升高（P<0.05）,而大剂量甲基莲心碱处理组小鼠血清TNF-α、IL-6和IL-10水平与小剂量甲基莲心碱处理组比,差异无统计学意义（P>0.05）;模型组小鼠12 h存活率为60.0%,24 h存活率为10.0%,小剂量甲基连心碱处理组小鼠12 h存活率为80.0%,24 h存活率为50.0%,而大剂量甲基莲心碱处理组小鼠12 h存活率为90.0%,24 h存活率为70.0%,组间差异有统计学意义（P<0.05）。结论 甲基莲心碱可缓解D-半乳糖胺/脂多糖诱导的小鼠急性肝损伤,其机制可能与抑制氧化应激反应有关。     

磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶在急性肝衰竭小鼠模型及HBV相关慢加急性肝衰竭患者肝组织中的表达及意义磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶在急性肝衰竭小鼠模型及HBV相关慢加急性肝衰竭患者肝组织中的表达及意义

目的：研究磷酸化后的p38丝裂原活化蛋白激酶（p－p38MAPK）在氨基半乳糖（D－GalN）或脂多糖（LPS）诱导的急性肝衰竭小鼠模型以及HBV相关慢加急性肝衰竭（ACLF）患者肝脏中的表达及其意义。方法采用D－GalN／LPS诱导C57BL／6小鼠构建急性肝衰竭模型,分别在给药0、0．5、1、2、4、6、8 h设立实验组,每组4只,处死小鼠取肝组织标本进行HE染色观察肝组织结构的病理变化,分别运用蛋白免疫印迹技术半定量检测及免疫组化染色定位检测肝组织中p－p38MAPK的表达;同时对照研究p－p38MAPK在HBV－ACLF、乙型肝炎肝硬化、慢性乙型肝炎（CHB）患者肝组织中的表达情况。组间比较采用独立样本t检验。结果蛋白免疫印迹法检测p－p38MAPK在肝衰竭小鼠肝组织匀浆中的表达随时间变化持续增高,给药6 h组半定量分析表达量显著高于正常对照组,差异具有统计学意义（t＝－2.727,P＝0．034）。免疫组化染色结果显示随存活时间的延长,小鼠肝组织炎症程度逐渐加重,炎症早期主要为窦细胞表达p－p38MAPK,随着肝组织损害加重,肝细胞表达p－p38MAPK渐多,坏死肝组织附近分布大量p－p38MAPK阳性肝细胞;正常人肝组织中p－p38MAPK的表达量很低,CHB患者肝组织内可见浸润淋巴细胞及肝细胞表达p－p38MAPK,并且随病程进展呈增多趋势,与临床观察病变程度逐渐加重相一致。结论 D－GalN／LPS诱导的小鼠急性肝衰竭模型中,p－p38MAPK表达随肝组织损害加重,表明其在肝衰竭病变过程中占重要地位;在HBV－ACLF患者致病过程中,p－p38MAPK信号通路可能发挥重要作用。     

急性肝衰竭大鼠肝组织组蛋白去乙酰化酶2的表达

目的观察D-氨基半乳糖盐酸盐诱导急性肝衰竭模型大鼠在丙酮酸乙酯保护下,组蛋白去乙酰化酶2(HDAC2)的表达情况。方法将78只雄性Wistar大鼠随机分成正常组、模型组、EP干预组和EP治疗组。采用免疫组织化学法检测肝组织HDAC2表达;采用ELISA法检测肝组织匀浆HDAC2水平。结果与正常组比,模型组HDAC2的表达量减少(P0.05),其中造模12h和24h肝组织HDAC2表达的IOD/Area值分别为0.0817±0.0118和0.0726±0.0111,明显低于正常组(0.1125±0.0047,P0.01);EP干预组和治疗组与模型组间HDAC2的表达无明显差异(P0.05)。结论 EP虽然对肝脏有保护作用,但不能影响HDAC2的表达。HDAC2的减少在急性肝衰竭的进展过程中,可能发挥重要的作用。     

Hyperlactatemia in patients with non-acetaminophen-related acute liver failure

AIM:To characterize hyperlactatemia in patients withnon-acetaminophen acute liver failure(ALF)in anattempt to clarify the mechanisms implicated and therole as a prognosis factor.METHODS:In the setting of liver transplantation,63consecutive patients with non-acetaminophen acute liverfailure were studied in relation to tissue oxygenation,hemodynamic and metabolic parameters.Before andafter transplantation,the number of infected patientsand outcome were registered.RESULTS:Acute ALF showed higher levels of lactatethan subacute ALF(5.4±1 mmol/L versus 2.2±0.6mmol/L,P=0.01).Oxygenation parameters were withinthe normal range.Lactate levels showed good correlationwith respiratory quotient(r=0.759,P<0.005),meanglucose administration(r=0.664,P=0.01)andencephalopathy(r=0.698,P=0.02),but not withsplanchnic arteriovenous difference in PCO2,pH and thepresence of infection(P=0.1).Portal vein lactate washigher(P<0.05)than arterial and mixed venous lactate,suggesting its production of hyperlactatemia in theintestine and spleen.The presence of infection was anindependent predictor of survival.CONCLUSION:Hyperlactatemia is not a prognosisfactor due to byproduct of the overall acceleration inglycolysis.