同型半胱氨酸增高血白细胞表面粘附分子的表达

目的　观察同型半胱氨酸是否改变体外健康人血单核细胞、中性粒细胞及淋巴细胞表面粘附分子CD11b ,CD18,CD14和L 选择素 (L selectin)的表达。方法　细胞表面粘附分子CD11b ,CD18,CD14和L selectin的测定采用直接免疫荧光染色 ,2 4小时内用流式细胞仪测定。结果　同型半胱氨酸在低浓度 (2 0 μmol/L)时明显增加CD11b和CD18在各种白细胞表面的表达 ,同时也增加了CD14在单核及中性粒细胞的表达。这种作用随同型半胱氨酸浓度升高而增强 ,但当浓度升至≥ 1mmol/L时 ,各种粘附分子的表达反而降低。同型半胱氨酸使各种细胞类型表面L selectin降低。结论　同型半胱氨酸可改变白细胞表面粘附分子的表达 ,可能在体内通过此途经导致白细胞粘附并游出于血管内皮。     

同型半胱氨酸通过抑制心肌线粒体自噬诱导线粒体损伤

本研究旨在探究同型半胱氨酸(Hcy)与心肌细胞线粒体自噬及线粒体损伤的关系。通过高蛋氨酸饮食法构建高同型半胱氨酸血症(HHcy)大鼠模型,利用免疫荧光共定位染色法和Western blot检测HHcy大鼠心肌的线粒体自噬水平。运用透射电镜观察HHcy大鼠心肌的线粒体形态结构的改变。体外培养H9C2细胞,用Hcy刺激H9C2,利用流式细胞术和JC-1染色法检测线粒体膜电位(MMP)的改变。采用18F-FDG PET/CT在体心肌代谢成像技术检测心肌葡萄糖摄取情况以及直接检测心肌组织的三磷酸腺苷(ATP)含量来评价HHcy大鼠心肌的能量供应情况。结果显示,与正常对照组相比,在HHcy大鼠模型心肌组织中,线粒体自噬水平降低;线粒体排列紊乱,轮廓模糊,膜破损溶解,嵴消失;Hcy刺激的H9C2细胞,线粒体膜电位降低,膜结构完整性受损。HHcy大鼠心肌葡萄糖摄取率增加,ATP含量下降。结果提示,同型半胱氨酸可通过抑制心肌线粒体自噬诱导线粒体损伤。     

同型半胱氨酸影响Caco-2细胞线粒体功能的实验研究

目的 观察同型半胱氨酸(Hcy)对Caco-2细胞线粒体功能的影响.方法 在Caco-2细胞中加入不同浓度(0、10、25、50、100、500、1 000 μmol/L) Hcy作用不同时间(3、6、12、24 h),采用MTT法及检测乳酸脱氢酶活性,观察Hcy对Caco-2细胞生长活力的影响,检测丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、琥珀酸脱氢酶(SDH)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、三磷酸腺苷酶(ATPase)水平及线粒体肿胀度观察Hcy对Caco-2细胞线粒体功能的影响.结果 随着Hcy作用时间延长及作用浓度的增加,Caco-2细胞的生长活力受到明显抑制,MDA、SOD、GSH-Px水平较对照组明显增加,SDH、ATPase水平下降,线粒体肿胀度下降幅度较正常对照组降低.结论 Hcy具有损伤Caco-2细胞线粒体功能的作用,可能与Hcy氧化损伤有关.     

HT-29肠癌细胞与血管内皮细胞黏附特性及作用机制研究

目的:探讨HT-29肠癌细胞与ECV-304血管内皮细胞的黏附力学特性及其黏附分子的作用机制.方法:采用微管吸吮技术分别测量了HT-29肠癌细胞、正常肠上皮细胞与ECV-304血管内皮细胞间的黏附特性,利用抗体阻断实验验证HT-29肠癌细胞与ECV-304血管内皮细胞黏附行为中E-selectin、Integrin β1及ICAM-1的作用.结果:HT-29肠癌细胞与ECV-304血管内皮细胞的黏附力值为[(265.38±64.72)×10-10N],较之正常肠上皮细胞黏附力明显升高[(144.51±71.65)×10-10 N],两者差异有显著性(P＜0.01).抗体阻断前后细胞对之间的粘附力差异存在显著性(P＜0.05).结论:HT-29肠癌细胞比正常肠上皮细胞黏附力显著增高,且受黏附分子E-selectin、Integrin β 1及ICAM-1调控.     

同型半胱氨酸通过促进细胞焦亡和上调琥珀酸脱氢酶亚基A诱导神经炎症反应

目的探索同型半胱氨酸(Hcy)是否通过促进细胞焦亡和上调琥珀酸脱氢酶亚基A(SDHA)蛋白表达诱导神经炎症反应。 方法使用不同浓度Hcy(1.25、2.50、5.00 mmol/L)处理小鼠海马神经元细胞系HT22细胞。CCK-8检测细胞活力;免疫荧光法观察细胞形态和焦亡相关蛋白消皮素(GSDMD)与细胞膜的共定位情况;Western blotting检测细胞核苷酸结合寡聚化结构样受体蛋白3(NLRP3)、天冬氨酸蛋白水解酶-1前体(pro-Caspase-1)和Caspase-1的活性片段(cleaved-Caspase-1)、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、GSDMD和GSDMD的N端结构域(GSDMD-N)等焦亡相关蛋白及SDHA蛋白表达水平。酶联免疫吸附测定法检测炎症因子白细胞介素-1β(IL-1β)和白细胞介素-18(IL-18)水平。 结果Hcy可显著降低HT22细胞活力,损伤HT22细胞突触,增加GSDMD与细胞膜的共定位和细胞膜破裂程度,上调HT22细胞NLRP3、pro-Caspase-1、cleaved-Caspase-1、ASC、GSDMD和GSDMD-N等焦亡相关蛋白及SDHA蛋白表达水平,并增加IL-1β和IL-18水平。 结论Hcy可诱导神经炎症反应,其机制与其促进细胞焦亡和上调SDHA蛋白表达密切相关。     

哮喘患儿外周血树突状细胞共刺激分子表达研究

目的　探讨小儿哮喘发作时外周血树突状细胞 (DC)表面协同刺激分子CD4 0、CD80、CD86和HLA DR的表达 ,以及其激发同种异体T淋巴细胞和脐带血幼稚T淋巴细胞 (Na veTcells)的作用 ,为进一步研究小儿哮喘的发病机制及治疗提供新的思路。方法　以Thomas法分离、培养并诱导哮喘患儿和健康儿童外周血DC细胞 ,流式细胞仪 (fluorescentactivatedcellsorter,FACS)检测DC表面协同刺激分子CD4 0、CD80、CD86和HLA DR的表达 ,以及其激发同种异体T淋巴细胞和脐带血幼稚T淋巴细胞的作用。结果　哮喘患儿外周血DC表面CD86和HLA DR的表达较对照组明显升高 (t分别 =3 .3 0 4、9.4 81;P分别 <0 .0 1、0 .0 0 1) ,而CD4 0则显著降低 (t=5 .65 9,P <0 .0 0 1) ;其激发同种异体T淋巴细胞和脐带血幼稚T淋巴细胞的能力较对照组明显增强 (P <0 .0 1～ 0 .0 0 1)。结论　哮喘患儿可通过其DC表面差异表达CD4 0、CD86和HLA DR等协同刺激分子 ,从而使其激发T淋巴细胞的作用增强。所以DC在小儿哮喘发作时起重要作用。     

同型半胱氨酸诱导人脐静脉内皮细胞MCPIP表达

目的 探讨同型半胱氨酸是否可以诱导人脐静脉内皮细胞中MCPIP的表达.方法 体外培养并鉴定人脐静脉内皮细胞;分别用10、50、100、200、500 μmol/L Hcy与HUVECs孵育24 h;用100 μmol/L Hcy与HUVECs分别孵育1、2、4、8、12、24 h;Real-time PCR检测MCPIP mRNA的表达,Western blot检测MCPIP蛋白质的表达.结果 Real-time PCR和Western blot分析结果表明,在所设置浓度下,Hcy均可诱导HUVECs中MCPIP的表达（P＜0.05）,其中以100 μmol/L Hcy作用24 h时MCPIP表达量最多;100 μmol/l Hcy与细胞作用2h时后MCPIP表达与对照组相比即有明显增高（P＜0.05）,并存在时间依赖效应.结论 Hcy可诱导HUVECs中MCPIP的表达,这可能与它致As的机理有关.     

当归多糖对小鼠骨髓和外周血单个核细胞黏附分子表达及黏附功能的影响

目的：研究当归多糖（APS）对小鼠骨髓和外周血单个核细胞（MNC）黏附分子表达及黏附功能的影响,旨在为APS在造血调控和动员方面的机制提供实验依据.方法：流式细胞术检测APS对小鼠骨髓和外周血MNC CD49d和CD44的表达影响;MTT法检测APS体内外作用对小鼠骨髓和外周血MNC黏附功能的影响.结果：APS（4 mg/kg）体内作用后骨髓和外周血MNC表面CD49d表达的阳性率均明显下降（P〈0.01）;骨髓MNC表面CD44也有所下降（P〈0.05）,外周血MNC表面CD44无明显变化（P〉0.05）.APS（4 mg/kg）体内作用后,小鼠骨髓和外周血MNC对纤维连接蛋白（FN）的黏附率明显低于NS组（P〈0.01）,且APS组与rhG-CSF组比较无显著性差异（P〉0.05）;除50 mg/L APS组以外各浓度实验组均能使小鼠骨髓和外周血MNC对FN的黏附率减弱（P〈0.05）,同一APS浓度体外作用后各作用时间点的骨髓和外周血MNC黏附率均无明显差异（P〉0.05）.结论：APS能降低骨髓的CD49d和CD44及外周血的CD49d的表达,且体内外作用均能降低骨髓和外周血MNC对FN的黏附率.     

脑血管病血浆同型半胱氨酸水平测定及其临床意义

目的研究同型半胱氨酸(Homocysteine,Hcy)与脑血管病的关系.方法采用荧光偏振免疫分析检测法(FPIA),测定75例脑梗死患者急性期、恢复期血浆Hcy浓度,30例脑出血患者血浆Hcy浓度;选取30例脑血管病病例进行药物干预治疗;对照组30例来自上述脑血管病人的家属,均为无脑血管病的健康人.结果①脑梗死、脑出血患者血浆Hcy浓度显著高于正常参考值(P＜0.05),对照组与正常参考值差异无统计学意义;②脑梗死与脑出血患者血浆Hcy浓度比较差异无统计学意义(P＞0.05);③脑梗死患者急性期与恢复期血浆Hcy浓度差异无统计学意义;④单因素相关分析显示Hcy水平与性别有相关性,与年龄无相关性.结论血Hcy增高与脑梗死和脑出血发生密切相关;选自脑血管病人家属的对照组也呈高Hcy血症,说明Hcy与高蛋氨酸饮食有关;Hcy与应激状态无关,是一稳定的指标;短期、中等剂量药物干预治疗能显著降低Hcy水平.     

银杏叶提取物对体外循环脑损伤中粘附分子的干预作用

目的 探讨粘附分子在体外循环脑损伤中的作用机制及银杏叶提取物的干预作用.方法 选择44例心脏病需体外循环下手术的风湿性心脏瓣膜病患者,随机分为观察组和对照组,每组22例.观察组在体外循环予充液中加入银杏叶提取物2mg/kg(体重),对照组应用常规予充液.分别在术前、主动脉阻断后1 h、CPB结束即刻、术后6 h、12 h、24 h和48 h抽取静脉血标本,检测血清P-选择素、ICAM-1和NSE浓度水平.结果 对照组P-选择素于主动脉阻断1 h开始升高,一直保持高水平至术后48 h实验结束;观察组P-选择素于主动脉阻断1 h后有所降低,持续至术后24 h,术后48 h恢复正常;自主动脉阻断1 h开始至术后48h实验结束,血清P-选择素水平观察组显著低于对照组.对照组血清ICAM-1自主动脉阻断1 h后,血清ICAM-1开始升高,并维持高水平至术后24h;观察组ICAM-1于CPB结束后开始升高,维持高水平至术后48 h实验结束:主动脉阻断1 h至体外循环结束,血清ICAM-1水平观察组显著低于对照组,但自术后12 h开始至结束,观察组显著高于对照组.对照组血清NSE自CPB结束后开始升高,高水平维持至术后48 h至实验结束;观察组血清NSE于CPB结束后开始升高,维持至术后12 h,至术后24 h恢复至正常;自主动脉阻断1 h开始至结束,观察组血清NSE显著低于对照组.结论 体外循环可引起粘附分子P-选择素和ICAM-1的升高,应用GBE可显著抑制P-选择素过度表达;GBE可能通过抑制ICAM-1的表达或封闭ICAM-1的受体途径而发挥抗炎作用,从而使脑损伤减轻.将GBE加入体外循环予充液中,对体外循环心脏手术的大脑具有显著的保护作用.     

细胞黏附分子、细胞外基质在肿瘤细胞迁移中功能的研究进展

肿瘤细胞的迁移包括从原发肿瘤细胞中释放并侵入周围组织、进入血液循环或淋巴循环、在循环系统中转移、被远处器官的毛细血管床捕获、从循环系统中迁出和在选择位点开始生长等过程。在这些过程中，癌细胞之间，癌细胞与正常宿主细胞之间，以及癌细胞与细胞外基质之间的黏附作用发挥了至关重要的作用。作者以肿瘤细胞迁移中重要的生物学事件为线索，对其中涉及细胞黏附分子、细胞外基质重要作用的分子机制进行综述。     

固本化痰通脉方对痰阻血脉大鼠主动脉巨噬细胞和黏附分子表达的影响

目的:观察固本化痰通脉方对痰阻血脉大鼠主动脉巨噬细胞和黏附分子表达的影响,探讨痰邪的致病机制。方法:7周龄正常雄性Wistar大鼠50只随机分为正常对照组、模型组、固本化痰通脉方低剂量组、固本化痰通脉方高剂量组、辛伐他汀对照组5组,在高脂饮食基础上建立痰证模型,比较各组大鼠血脂代谢的改变,免疫组化方法观察主动脉内皮巨噬细胞和细胞间黏附分子-1(intercellularadhesionmolecule-1,ICAM-1)、血管细胞黏附分子-1(vascularcelladhesionmolecule-1,VCAM-1)、P-选择素、E-选择素的表达,并经图像分析定量。结果:与正常对照组相比,模型组血脂水平、巨噬细胞和黏附分子的表达差异有统计学意义(P<0.01);各治疗组与模型组相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论:固本化痰通脉方能降低血清胆固醇、甘油三酯,升高高密度脂蛋白水平,抑制主动脉内皮巨噬细胞、ICAM-1、VCAM-1、P-选择素和E-选择素的表达。     

血清同型半胱氨酸水平与抑郁症的关系

目的：研究血清同型半胱氨酸（Hcy）水平与抑郁症的关系，以及治疗后血清Hcy水平的变化。方法：用荧光偏振免疫法分剐检测对照组（30例）的血清Hcy含量及患者组（30例）治疗前后的血清Hcy含量；患者组治疗前后的血清Hcy含量分别与对照组进行比较。结果：患者组治疗前血清Hcy含量为（17．94±8．56）μmol／L明显高于对照组（10．09±4．13）μmol／L（P〈0．05）。患者组治疗后血清Hcy含量为（11．19±5．81）μmol／L与对照组比较差异无显著性（P〉0．05）。结论：本研究显示升高的血清Hcy水平与抑郁症有密切关系。     

颈动脉硬化瘀证与血清同型半胱氨酸的关系探讨

目的：探讨颈动脉硬化血瘀证与血清同型半胱氨酸的关系。方法：测定颈动脉硬化瘀证、非瘀证患者的颈动脉内-中膜厚度（IMT）和血清同型半胱氨酸（Hcy）,并与正常人对照。结果：①颈动脉硬化瘀证组与非瘀证组IMT无明显差异;②颈动脉硬化瘀证组与非瘀证组Hcy水平有显著差异;瘀证组与正常人组Hcy水平亦有显著差异。结论：颈动脉硬化血瘀证与血清同型半胱氨酸水平升高可能有关。     

冠心病危险因素与血小板及白细胞黏附分子的关系

目的　探讨冠心病危险因素与血小板及白细胞黏附分子的关系。方法　使用流式细胞仪检测 73例心脑血管病、糖尿病、高脂血症患者血小板P -选择素 ,白细胞L -选择素、细胞间黏附分子 (I CAM) - 1、ICAM - 3的表达 ,年龄相当而无重要冠心病危险因素的正常人 2 7例作为对照 ,观察患者与正常对照黏附分子表达指标间的差别 ,并分析年龄、体重指数、血压、血糖以及血脂与黏附分子之间的关系。结果　观察组体重指数、收缩压、空腹血糖、血清总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇高于对照组 ,有显著性差异 ;观察组P -选择素阳性血小板百分率高于对照组 (t=3 .890 ,P <0 .0 0 1 ) ,L -选择素阳性单核细胞、淋巴细胞百分率低于对照组 (t=2 .1 2 6及 2 .46 6 ,P <0 .0 5 ) ;P -选择素阳性血小板百分率与空腹血糖、P -选择素阳性血小板平均荧光强度与高密度脂蛋白胆固醇分别呈正、负相关 (γ =0 .3 0 9,P <0 .0 1 ;γ =- 0 .2 6 1 ,P<0 .0 5 ) ;L -选择素阳性单核细胞与空腹血糖、总胆固醇、甘油三酯呈负相关 (γ =- 0 .2 4 4 ,- 0 .2 4 6 ,-0 2 74,P均 <0 .0 5 ) ,L -选择素阳性淋巴细胞与舒张压、空腹血糖呈负相关 (γ =- 0 .2 4 1 ,- 0 .2 5 6 ,P <0 .0 5 ) ;ICAM - 3阳性单核细胞平均荧光强度与年龄呈负相关 (γ =- 0 .     

高压芒刺静电场对小鼠免疫共刺激分子表达的影响

［摘 要］ 目的：通过时程/量效观察不同强度高压芒刺静电场对免疫细胞表面共刺激分子表达的影响。方法：采用不同强度高压芒刺静电场对小鼠进行全身辐照,流式细胞术检测其胸腺细胞CD2和腹腔巨噬细胞CD48表达的变化。结果：低电压(10~20 kV)处理组的CD2及CD48表达量显著高于0 kV组（P<0.01）;而高电压(35 kV)处理组的表达量明显低于0 kV (P<0.01);低电压时程的结果表明,处理后2 h CD2和CD48表达量开始增加,4~8 h达到高峰,与0 kV组比较差异具有非常显著性（P<0.001）;高电压的时程结果表明,于处理后2~4 h CD2和CD48表达量即达到最低值,之后逐步回升(P<0.001),但到24 h未能恢复到对照组水平。结论：不同强度高压芒刺静电场可引起免疫共刺激分子表达量不同的生物效应,在免疫调节反应中发挥重要功能。     

血浆同型半胱氨酸水平与卒中后抑郁相关性研究

目的:探讨血浆同型半胱氨酸水平(HCY)与卒中后抑郁(PSD)的相关性。方法:对经头颅CT和(或)MRI确诊的172例缺血性卒中患者进行汉米尔顿抑郁量表评分,分为PSD组和对照组,同时所有患者检测HCY,并分析HCY与PSD的相关性。结果:PSD组患者平均血浆HCY水平显著高于对照组(P<0.05)。PSD组高同型半胱氨酸血症者显著高于对照组(P<0.05)。结论:HCY与PSD具有密切的相关性。     

多发性骨髓瘤患者外周血白细胞糖皮质激素受体的变化

探讨多发性骨髓瘤外周血白细胞糖睦质激素受体表达水平与糖皮质激素疗效着关系。应用放射配体结合一点分析法检测了２３例ＭＭ和１０例正常对照外周血白细胞ＧＲ表达水平。ＭＭＧＲ水平，初诊未化疗组位点／细胞，部分缓解组位点／细胞，与正常对照组比较均无显著差异。难治性ＭＭ组位点／细胞，明显低于其他组。ＭＭ患者外周血白细胞ＧＴ检测有助于预测糖皮质激素疗效。     

颈动脉硬化瘀证与血清同型半胱氨酸的关系探讨

目的:探讨颈动脉硬化血瘀证与血清同型半胱氨酸的关系。方法:测定颈动脉硬化瘀证、非瘀证患者的颈动脉内-中膜厚度(IMT)和血清同型半胱氨酸(Hcy),并与正常人对照。结果:①颈动脉硬化瘀证组与非瘀证组IMT无明显差异;②颈动脉硬化瘀证组与非瘀证组Hcy水平有显著差异;瘀证组与正常人组Hcy水平亦有显著差异。结论:颈动脉硬化血瘀证与血清同型半胱氨酸水平升高可能有关。     

充血性心力衰竭患者血浆同型半胱氨酸水平及临床意义

目的探讨充血性心力衰竭患者血浆同型半胱氨酸水平及其临床意义。方法106例充血性心力衰竭住院患者,其中40例为心力衰竭初诊患者,66例为心力衰竭复诊患者,除常规生化、超声心动图检查外,测定血浆同型半胱氨酸水平,并与30名健康者比较。结果66例心力衰竭复诊患者血浆同型半胱氨酸水平为(13.25±5.45)μmol/L,明显高于30名健康者的(7.52±1.73)μmol/L(P<0.01);而40例心力衰竭初诊患者血浆同型半胱氨酸水平为(14.87±5.22)μmol/L,更高于健康者(P<0.01)。相关性分析发现,血浆同型半胱氨酸水平与左室舒张、收缩末期内径呈正相关,与左室射血分数呈负相关(P<0.05)。结论充血性心力衰竭患者的血浆同型半胱氨酸水平升高,提示血浆同型半胱氨酸可能在心力衰竭发展中起重要作用。