电镜细胞化学半薄切片的制作及观察

在电镜半薄切片标本上可以观察到细胞各部分的整体结构,也是电镜细胞化学研究手段之一。现将我们在制做及观察半薄切片的体会简介如下:     

半薄切片技术

半薄切片(semithin section)又称厚切片(thick section).是相对于电镜的超薄切片(Ultrathin section)而讲的。半薄切片厚度是0.5～2μ,介于光镜石蜡切片(7μ)和电镜超薄切片(0.07μ)之间。半薄切片的制法是按电镜常规制备的树脂包埋组织块,在超薄切片机或经     

有关制作半薄切片捞片的改进

在制作电镜的超薄切片前,可用超薄切片机先切数片1μm～2μm 厚的半薄切片进行染色,在光镜下观察以确定方向和部位,同时对特殊细胞观察的筛选更为需要。从而提高所要观察以超薄切片上组织和细胞的准确性。并且半薄切片用甲苯胺     

半薄切片制作技术的几点改进

环氧树脂半薄切片在形态学研究中应用较多,是介于超微结构观察和常规光镜观察之间的制样手段,也是电镜超薄切片定位的必要手段。由于其厚度比石蜡切片薄,清晰度、分辨率均优于石蜡切片,已广泛应用于光电镜定位、对照观察,甚至可代替石蜡切片。但在半薄切片制作技术中还存在一些尚待改进的问题。如切片染色,以往常用的方法有甲苯胺蓝法、H.E法等,前者一般采用水溶液,通常不易着色;后者步骤较复杂,耗时较长,且难以着色。我们对甲苯胺蓝法(单色染色)及Sata变法(多色染色)做了一些改进,得到了较为满意的效果。困扰半薄切片的另一问题是脱片,常致制样失败。以往大多采用甘油蛋白作贴片剂,效果不甚理想。也曾采用涂布树脂包埋剂防止脱片,但操作较麻烦。我们从免疫细胞化学中受到启示,改用明胶-硫酸铬钾液作为半薄切片粘贴剂。方法简便易行,效果也好,在大量的半薄切片染色中,极少发现脱片。……     

甲苯胺蓝浸染半薄切片法的探讨

半薄切片的常规染色方法是用1％甲苯胺蓝在60℃下滴染切片。这种方法虽然简单快速,但技术难度大,常有着色不均,效果不够稳定和难于掌握等弊病,妨碍了半薄切片技术的实际应用。为避免这些缺点,我们进行了本研究。方法与结果一、制作半薄切片:用4％戊二醛和1％四氧化锇双固定家兔心肌组织,Epon812包埋。包埋块在修块机上切厚2μm的半薄切片。二、制备甲苯胺蓝染液:用甲苯胺蓝1.0克、硼砂1.0克和双蒸水100毫升配出1％甲苯胺蓝溶     

对半薄切片苏木素伊红染色法的某些改良

半薄切片染色除可供光镜观察外,还可为超薄切片提供准确部位,以使电子显微镜检查有的放矢,对有关组织、细胞的超微结构进行详细观察。目前国内介绍的半薄切片H-E染色法,除操作较复杂费时外,其不足之处是:经较长时间的氢氧化钾纯酒精饱     

病理半薄切片几种特染及套染的点滴体会

<正> 近年来,病理开展半薄切片先进技术。将各种穿刺组织应用于临床病理诊断,特别是肾穿刺活检组织,它对肾脏疾病的诊断、预后估计及疗效观察有着十分重要的意义。半薄切片主要采用甲基丙酸乙烯丁酯包埋法制出1—2μm薄切片,这种方法的优点切片平整无皱、组织结构完整,特别是肾小球毛细血管清晰可见无挤压较有利于各种染色。本文主要介绍上法特染及套染的几点体会。     

用长刃口玻璃刀切制1微米半薄切片

<正> 目前,制作组织切片所用切片刀有三种,即钢刀、钻石刀和玻璃刀。钢刀不能切半薄切片和塑料包埋的组织块;钻石刀虽能切各种厚度的切片,但因价格昂贵而未能推广和普及。目前电镜制样用的三角玻璃刀,刃口长度为5～6毫米。这种刀虽能切厚度<0.1微米的超薄切片和厚度0.1～2微米的半薄切片,但不能切大片。1976年 Bennett     

大鼠睾丸间质细胞中结晶紫染色法半薄切片技术应用

随着科学技术的不断提高,半薄切片技术在生物医学形态学领域方面的应用也越来越广泛,它的应用弥补了常规组织学石蜡切片较厚,细胞成份重叠,难以分辨细胞的细微结构、细胞成份的破坏以及固有结构的丧失等缺点,尽可能保持材料的结构和某些化学成分生活时的状态。结合用电子显微镜样品制备方法,进行材料的定位,光镜电镜的对比观察以及用电镜包埋法对大白鼠的睾丸间质细胞进行研究。     

电镜半薄切片制备方法的改进

透射电子显微镜生物标本制备中，半薄切片(厚度0．6～0．8μm)的制备是一种常用制样手段。半薄切片图像的清晰度、分辨率远优于石蜡切片，视野大于超薄切片，有利于获得高质量的光镜图像，同时也是电镜超薄切片技术中一种有效的定位方法。半薄切片制备中的一些关键技术如切片、捞片、脱脂、     

一种简单而快捷的半薄切片脱树脂新方法

目前, 在HE染色、特殊染色或免疫组化染色研究方面多采用普通石蜡包埋的切片, 其切片厚度最薄达4 μm,若更薄的切片,切割有一定的难度.对于各种染色而言,越薄的切片,细胞与组织结构越清晰,染色效果越好.环氧树脂包埋的组织块(Epon)不仅用于透射电子显微镜超薄切片的制备,也可用于光镜半薄切片的制备[1].本研究摸索出一种简单而快捷的脱树脂的方法,现介绍如下.     

用树脂包埋块行半薄切片甲苯胺蓝染色显示肥大细胞

经石蜡包埋的组织,用甲苯胺蓝染色显示肥大细胞的方法已得到了广泛的应用。作者用电镜制样过程中的树脂包埋块,行半薄切片,用甲苯胺蓝染色,光镜观察也能显示肥大细胞的特殊形态。另用石蜡切片,甲苯胺蓝染色光镜观察以及电镜观察证实了树脂包埋、半薄切片的观察结果。 材料及方法 取自外科手术切除的组织,     

自制半薄切片调温烤片装置介绍

半薄切片(厚切片)有助于超薄切片的定位,以及光镜与电镜观察的密切结合,是应用电镜技术进行生物医学研究的手段之一。半薄切片制片过程中,在载玻片上展片与贴片及切片染色,是该技术的重要步骤。按传统的方法,展片时用酒精灯火焰加热,温度不易控制,且成批制片费时。贴片则是在玻片上涂蛋白甘油,长期保存易生霉,或置50～70℃烤箱中数小时,因空气导热慢,耗时较多,而染色通过火焰加热,易沸腾造成过染或沉淀。因此,我室用自动恒温电熨斗试制了一种半薄切片调温烤片装置(易制作、成     

树脂包埋半薄切片染色的改进及体会

[目的]树脂包埋半薄切片染色技术的改进及在病理诊断、细胞学细微结构研究等方面的应用.[方法]应用多色和甲苯胺蓝单一染色法对树脂包埋的半薄切片进行染色.[结果]多色染色因其有对比度,接近HE染色,可用于多种组织.甲苯胺蓝单一染色虽缺乏层次,没有对比度,但对神经组织及肌肉组织,由于其组织学特点,仍不失为首选.[结论]树脂包埋半薄切片多色染色,切片清晰、鲜艳颇似HE染色效果,具有高分辨的数种光学染色的综合特征,所显示的细胞学精细结构是任何最好的石蜡切片不能比拟的.     

石蜡半薄切片制作透射电镜的方法

[目的]介绍石蜡半薄切片转制透射电镜的制样方法。[方法]对石蜡半薄切片进行脱蜡、水化、锇酸固定、缓冲液漂洗、梯度酒精脱水、环氧树脂包埋、超薄切片机切片、透射电镜下观察。[结果]组织细胞的超微结构保存完好,足以满足病理诊断之用。[结论]用石蜡半薄切片转制电镜比用石蜡组织块转制电镜方法简单,快速易行。     

利用超薄切片机制作半薄切片技术

近年来,由于半薄切片机的问世,为电镜工作者制作半薄切片进行定向选择,克服超薄切片的盲目性和电镜视野的局限性,创造了良好条件。但是,国内目前所使用的半薄切片机仍靠进口,价格昂贵。而定位部分的照明光源又不能达到满意效果,对定向选择带来一定困难,操作麻烦,花时间多。两年来,我室利用超薄切片机制作半薄切片,对心肌、肾等组织进行定向选择,省时省力,并获得了满意的效果。现将具体操作步骤介绍如下:     

电镜半薄切片美蓝-天青Ⅰ快速染色法

为了提高透射电镜对组织观察的准确性,在进行电镜样品超薄切片前,对大多数研究样品以及临床外检的标本,需做半薄切片进行光镜定位。为缩短整个定位程序的时间,提高电镜观察效率,我们以Field氏染法为基础,改进了半薄切片染色方法,应用于国产环氧树脂618包埋组织的半薄切片染色。通过对肾、肺、胃、皮肤、十二指肠、支气管、骨、神经、耳蜗、角膜等组织染色,均获得较满意的效果。与     

Jones改良法显示半薄切片肾小球基底膜

Ｊｏｎｅｓ改良法显示半薄切片肾小球基底膜肖莎，陈浦辉，郭琳琅珠江医院病理科，广州市，５１０５１５关键词肾小球；染色；方法环氧树脂包埋块为非水溶性质，其半薄切片的特殊染色较为困难．本文运用改进Ｊｏｎｅｓ六胺银法进行肾小球基底膜半薄切片染色，并就其中一些...     

对九十年代微观辨证学研究的展望

本文认为九十年代的《微观辨证学》必须从微观、超微观的角度,运用细胞生物学、生物化学和分子生物学的分析方法,采用定量或半定量办法,把辨证学引入到细胞、亚细胞、分子乃至量子学的水平。     

电镜半薄切片的微波辐射快速HE染色法

微波炉是一种高频的微波辐射加热的新型仪器,有加热快速,穿透力强的特点,已被越来越广泛地用于病理实验室工作。我们将其用于电镜半薄切片的HE染色,取得了满意的效果。材料与方法 1.1 材料①微波炉(MW)WB-750型,2450MHz,功率750W,电脑控制温度和时间。②环氧树脂Epon812包埋的组织和细胞,切成2μm厚