用Bouin液固定不脱钙制作胎儿指骨整体切片

组织学观察是骨组织研究的重要手段之一[1],通常由于骨组织致密,坚硬,并含有骨胶等成分,所以要切好一张高质量的切片(和软组织相比),有一定的困难[2].近年来推出了塑料包埋等[3,4]不脱钙骨切片及染色技术,但目前尚不够成熟稳定[2].我们在教学过程中用胎儿指骨的整体切片做为观察软骨内成骨和骨组织组成及细胞结构的标本,我们在制作此标本时,用Bouin液做为固定液,用氯仿做为透明剂,不需脱钙制作出切片的组织和细胞的形态结构完整,染色鲜明、色泽深浅适当,用于教学效果良好.而连着皮肤和结缔组织等一起固定包埋制作骨切片的文献极少.现将我们的经验报道如下(图1～4).     

不脱钙骨组织标本超薄切片的制作方法

在骨超微结构研究和临床外检工作中,我们利用Epon-812含钙盐的骨组织标本来制备超薄切片.由于不脱钙的超薄切片在电镜下显示了骨组织的真实结构,更利于深入地研究骨组织的形态学.     

塑料包埋不脱钙大块骨组织切片及染色

近 1年来 ,笔者采用Ｌｅｉｃａ 2 5 0 0型切片机 ,制作塑料包埋不脱钙大块骨组织切片 ,获得 8～ 10 μｍ厚完整切片。游离片染色 ,着色效果良好。1　材料与方法1.1　取材部位　狗桡骨 ,大小 35ｍｍ× 15ｍｍ ,于 10 %～2 0 %中性福尔马林液内固定 1～ 2ｄ ,流水冲洗 1～ 2ｈ。1.2　包埋剂的制备　 1号试剂 :甲基丙稀酸甲脂 40 0ｍｌ,邻苯二甲酸二丁酯 10 0ｍｌ,二甲苯 5 0 0ｍｌ。 2号试剂 :甲基丙稀酸甲酯 80 0ｍｌ,邻苯二甲酸二丁酯 2 0 0ｍｌ。 3号试剂 :甲基丙稀酸甲酯 80 0ｍｌ,过氧化苯甲酰 2 0ｇ ,邻苯二甲二丁酯2 0 0ｍｌ。 4号试剂…     

塑料包埋结合四环素荧光标记制作不脱钙骨组织切片的实验研究

目的探讨塑料包埋技术结合四环素荧光标记制作不脱钙骨组织切片的关键步骤及应用。方法选取四环素荧光标记的兔股骨进行塑料包埋,Leica SP 1600切片机切片,荧光显微镜观察后用苦味酸品红染色,并与常规石蜡包埋切片相比较。结果四环素荧光标记不脱钙骨组织经塑料包埋技术处理后,可清楚地观察类骨质形成、植入体及周围骨组织的整合程度,与常规石蜡包埋相比,染色层次分明,组织移位形变小。结论应用塑料包埋技术制作四环素荧光标记不脱钙骨组织切片,有利于行骨形态计量分析以及植入体与骨整合的研究。     

一种用于制作骨骼组织切片的新脱钙液

在日常病理工作中,对某些骨骼组织需作薄切片观察其细微结构,这就要对骨骼进行脱钙处理.通常使用的脱钙液有以硝酸、盐酸、甲酸为主配制的脱钙液、还有以铬酸和螯合剂配制的脱钙液.     

用已固定组织制作冷冻切片体会

经福尔马林固定的组织不能直接做冷冻切片 ,为此作者经过反复试验 ,探索出一种利用液氮快速冷冻制作冷冻切片的方法 ,取得了满意的效果 ,现介绍如下。1　材料和方法　　经常规福尔马林固定 1～ 2天的外检和动物标本 (骨和含钙组织除外 ) ;低温恒冷切片机、ＯＣＴ包埋剂、包埋托、涂有防脱片胶的载玻片、液氮一罐。将福尔马林固定的组织常规取材 ,用滤纸吸干周围水分 ,置包埋托上加ＯＣＴ包埋剂 ,入液氮 3～ 5ｍｉｎ后取出 ,置于冷冻切片机冷冻台上片刻 ,修切组织 ,切片 ,吹干 ,不需固定 ,直接ＨＥ染色。2　体会　　组织从液氮中取出不宜立即…     

介绍一种FAAPT冷冻切片快速固定液

手术中冷冻切片的病理诊断是根据冷冻切片组织学形态来进行 ,以确定病变组织的良恶性为目的〔1〕。制作冷冻切片包括制片、固定、染色三个环节 ,在冷冻切片中固定液的选择是不可忽视的一个因素。我们在工作中经反复试验在众多固定液中选择ＦＡＡ液 (福尔马林 -醋酸 -乙醇 ) ,经改良配成一种适合于冷冻切片的ＦＡＡＰＴ(福尔马林 -醋酸 -乙醇 -苦味酸 -ＴｒｉｔｏｎＸ - 10 0 )快速固定液。该液具有固定速度快、渗透力强、ＨＥ染色鲜艳、组织结构清晰等优点。1　材料与方法1 1　ＦＡＡＰＴ固定液的配制　福尔马林 15ｍｌ,醋酸 3ｍｌ,95 %乙醇…     

固定液对冷冻切片质量的影响

冷冻切片是借助低温冷冻将手术切除的组织块快速冷冻达到一定硬度进行切片的一种方法。高质量的冷冻切片对确保术中病理诊断的准确性、科学性具有极其重要的作用,从而降低术中诊断的风险。固定是冷冻切片的关键,本文选取几种常用的固定液,通过HE染色后观察各自固定效果对染色结果的影响,从而筛选出一种最佳的固定液。     

骨切片固定液和脱钙剂的筛选及效果观察

在研究某些骨病及骨组织内的各种成分时,尽量减少对骨组织内成分的损伤,选择合适的固定液、固定时间和脱钙液,对骨组织制片非常重要。我们查阅了国内外70年代以来的有关文献,找出固定方法40余种,脱钙方法     

一种复合固定脱钙液在临床病理制片中的应用

临床病理检查经常遇到骨及钙化组织标本,常规处理方法是先固定,待充分固定后进行脱钙处理,然后进入常规制片程序,到完成病理诊断需要较长的时间。如何在较短时间内完成固定、脱钙处理,其速度快、效果好,同时制成的切片又和常规处理的不含骨组织的切片一样,不影响对病变组织     

5种固定液对淋巴结冷冻切片HE及免疫组化染色效果的影响

正淋巴结组织纤维成分少,淋巴细胞丰富,往往还附有较多的脂肪组织,在制片过程中容易出现裂纹、细胞核皱缩、染色模糊甚至是脱片等,如需改善应严格控制冷冻的温度和时间,挑选渗透力强、固定作用强的固定液。本文通过对固定液配方的探索,着重与病理医师交流制片的方法与经验,以提高淋巴结组织冷冻切片优良率。1 材料与方法1.1 材料选取2019年1～3月我院手术室送检淋巴结组织标本30例,其中乳腺前哨淋巴结12例,中央组淋巴结14例,其它淋巴结     

四种固定液对肾上腺组织冰冻切片固定效果的比较

目的　以肾上腺组织为例观察比较丙酮、4%多聚甲醛、AAF和95%乙醇四种固定液的固定效果,为临床做出更好的快速冰冻切片,及时、准确的做出病理诊断提供实验基础。 方法　取人正常肾上腺组织,冰冻切片后分别用四种固定液进行固定,然后行HE染色,观察各组的组织结构、细胞核染色、细胞质染色和核质对比度情况。 结果　经冷丙酮固定的肾上腺组织切片,镜下组织结构清晰,高倍镜下观察：细胞核形态清晰完整,核染色和胞质染色清晰对比度好;经4%多聚甲醛固定的切片,镜下组织结构不清,细胞核形态较清晰,核染色和胞质染色对比度差;经AAF液固定的组织切片,镜下组织结构尚清晰,细胞核部分溶解,核染色均一,胞质染色较清晰;经95%乙醇固定的组织,组织结构尚清晰,核溶解普遍,胞质染色不清晰。 结论　四种固定液都可用于固定肾上腺组织及其它细胞成分较多的病理肿瘤组织,但冷丙酮效果最好。     

骨和牙切片的甲酸氯化铝脱钙液及脱钙方法

骨和牙体组织非常坚硬,将其制成几微米薄切片难度较大。常用的方法是先脱钙,使组织变软后再切片,所以脱钙是非常关键的技术。脱钙不好切片破碎甚至切不成片,破坏组织的形态结构和细胞成分的性质,染色不佳甚至染不上色,无法进行观察和研究。脱钙液和脱钙方法虽然很多,但目前尚无公认的理想方法,为此我们在骨和口腔疾病诊断及在大骨节病、氟中毒骨病和很多口腔疾病实验研究中,证明甲酸氯化铝脱钙液及脱钙方法效果优良。     

比较三种不同固定液对淋巴结冷冻切片染色质量的影响

<正>淋巴结活检的主要作用是对恶性肿瘤淋巴转移进行分级,明确肿瘤转移的具体范围,减少不必要的手术及术后并发症^[1]。术中冷冻切片能在较短时间内获得淋巴结的病理诊断结果,对手术治疗方式和手术范围具有较高的指导作用,因此越来越受到临床医师的青睐。淋巴结组织由于其细胞丰富,质地较脆,外围常有脂肪包绕,在日常冷冻切片工作中较难获取高质量切片。     

大鼠视网膜标本石蜡切片的固定方法

目的探讨制备大鼠视网膜石蜡切片的固定方法。方法将大鼠眼球固定于4%多聚甲醛(PFA)和不同浓度(1%、5%、10%、20%)甲醇组成的混和固定液中并制成石蜡切片,经HE染色后在显微镜下观察。结果经4%PFA+不同浓度甲醇固定的眼球外形均无明显变形和收缩。用添加1%和5%甲醇固定液固定的标本未见明显的视网膜脱离,而用添加10%和20%甲醇固定液的眼球的周边部视网膜出现轻度脱离。显微镜下视网膜组织结构完整清晰,各层细胞排列紧密,无明显裂隙,染色鲜艳。相反,采用福尔马林固定的视网膜发生严重脱离。结论 4%PFA+甲醇的固定方法即可保持视网膜结构完整,无脱离,又能提高抗原保存性,效果优于福尔马林固定液,是适合大鼠眼球,尤其是视网膜固定的一种有效方法。     

六种固定液对冰冻切片苏木精-伊红染色效果的比较

<正>让冰冻切片的苏木精-伊红(HE)染色效果等同于石蜡切片,固定液的选择是最关键。目前很多相关文献报道说法不一。我们选用组织学常用和易配制的6种固定液进行苏木精-伊红(HE)染色效果的比较观察。     

内耳切片标本制作

内耳制片的方法在有关组织切片技术的书籍中均有介绍,以火棉胶或石火棉胶双重包埋为主,多选用含汞的固定液,H-E片染,手续繁杂,不易切出较薄的标本。1984年曾小鲁等用抽气等办法实现了常规石蜡包埋和H-E整块染色,效果较理想。多年来,我们应用了此方法,并做了些研究和改进,现介绍如下: