脾细胞门静脉注射后家犬肾移植后IL-2、IL-6变化的研究

目的：利用家犬肾脏移植模型，探讨门静脉注射供体脾细胞诱导免疫耐受的机制。方法：应用供体家犬脾细胞行门静脉注射，一周后行肾脏移植，EIASA方法测定对照组、门静脉注射组、环孢素组肾移植后IL-2、IL-6水平。门静脉注射组、对照组进行移植肾病理检查。结果：在肾移植后门静脉注射组、环孢素组IL-2、IL-6水平低于对照组，有显著性差异。而门静脉注射组与环孢素组之间无差异。门静脉注射组移植肾病理检查病变轻于对照组。结论：供体家犬脾细胞行门静脉注射可诱导受体家犬产生免疫耐受。     

GM-CSF与TGF-β联合处理小鼠供体骨髓细胞诱导特异性免疫耐受

目的:观察用GM-CSF和TGF-β在体外处理供体骨髓细胞(BM)后,输给受体鼠,观察能否诱导受体鼠对供体鼠淋巴细胞的特异性耐受。方法:体外用GM-CSF与TGF-β联合处理供体BM细胞诱导非成熟树突状细胞(iDC),并检测其成熟度。将BALB/c受体鼠随机分为3组,进行不同的预处理:(1)BM预免疫组:经尾静脉输入体外诱导的iDC,1×105细胞/只;(2)脾细胞预免疫组:经尾静脉输入C57BL/6供体鼠脾细胞,1×105/只;(3)阴性对照组:经尾静脉输入同体积的PBS。每组小鼠均需经过2次预免疫,每次间隔1周。第2次处理后1周,所有组的小鼠均接受相同剂量的C57BL/6来源的脾细胞腹腔注射,1×105/只。脾细胞攻击后3d,检测各组小鼠对C57BL/6小鼠脾细胞的同种异体反应水平,检测指标包括:采用单向混合淋巴细胞培养方法检测受体鼠淋巴细胞对供体鼠淋巴细胞的增殖指数;采用双抗体夹心ELISA检测受体鼠血清中IFN-γ和IL-10水平、FCM检测脾脏CD4+CD25highTreg细胞含量、及NK细胞抑制性受体KLRG1的表达、采用乳酸脱氢酶释放法检测NK细胞杀伤功能。结果:经GM-CSF和TGF-β体外处理的供体BM细胞能够抵抗脂多糖(LPS)促成熟的作用;与脾细胞预免疫组相比,经此BM细胞预处理的小鼠,再次遭遇供体小鼠淋巴细胞时,血清IL-10的含量降低(P0.05)、脾脏中CD4+CD25highTreg细胞的比例明显升高、对C57BL/6小鼠淋巴细胞增殖反应减弱(P0.01);NK细胞杀伤率降低。结论:用GM-CSF与TGF-β联合处理供体小鼠BM细胞在一定程度上能够诱导小鼠对供体小鼠脾细胞的免疫耐受,除Treg外,NK细胞可能也参与了诱导免疫耐受。     

环孢素A对LPS诱导的早期炎症反应的影响

目的研究环孢素A(cyclosporin A,CsA)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的小鼠早期炎症反应的影响。方法小鼠腹腔内注射LPS诱导炎症反应,静脉注射不同浓度的CsA。6h后取血清,使用ELISA方法观察炎性因子IFN-γ和IL-6的含量;取脾细胞,使用流式细胞仪观察CD4+和CD8+T细胞表面的活化分子CD69表达;并使用细胞内细胞因子染色的方法,观察CD4+和CD8+T细胞IFN-γ和IL-4的产生水平。结果 CsA可以明显降低LPS诱导的小鼠血清中IFN-γ的水平,抑制CD4+和CD8+T细胞表面CD69分子的表达,抑制T细胞IFN-γ和IL-4的产生,均表现为剂量依赖性抑制关系。结论 CsA剂量依赖性抑制LPS诱导的小鼠早期炎症反应。     

供体与受体移植前预处理延长大鼠移植心脏成活时间

目的：用供体品系大鼠皮肤致敏方法及腹腔内异位心脏移植模型研究雷公藤多式供体预处理及供体脾细胞受体胸腹内注射诱导免疫耐受对移植心脏存活影响及二种方法的协同效果。方法：SD大鼠作供体,Wistar大鼠作受体,所有受体在心脏移植前均无用供体皮肤致敏,A组作单纯心脏移植,B组作经供体预处理后的供心移植,C组用供体脾细胞胸腺内注射诱导耐受后作心脏移植,D组考察供受体两种预处理方法的协同效果。结果：各处理组供心存活时间均校对照组明显延长,C,D二组病检见淋巴细胞浸润及心肌坏死明显减轻,但微血管病变较严重。结论：两种方法均能明显延长移植供心成活时间,并有良好的协同效果,经胸腺途径诱导的耐受能明显抑制细胞免疫,但对急性血管排斥没有预防作用。     

T细胞疫苗抑制了Flt3-L介导的小鼠肝移植急性排斥反应

目的:探讨供体抗原特异性T细胞疫苗诱导肝移植免疫耐受的作用及其机理,同时对肝移植"自动耐受"机制进行探讨。方法:以CBA小鼠作为受体,以B6小鼠作为供体,建立小鼠原位肝移植模型;制备T细胞疫苗:用B6小鼠的脾细胞免疫CBA小鼠,取CBA小鼠的脾淋巴细胞加以灭活,制备成T细胞疫苗(TCV)备用;实验分为3组:组1:单纯移植组,以CBA小鼠作为受体,以B6小鼠作为供体,做原位肝移植。组2:用Flt3-L治疗的B6小鼠作为供体,以CBA小鼠作为受体,做原位肝移植。组3:用Flt3-L治疗的B6小鼠作为供体,以TCV免疫过的CBA小鼠作为受体,进行原位肝移植。组间比较移植物存活时间(MST);测定肝移植小鼠血清中的IL-10、IL-4和IFN-γ水平;组内比较移植前后单向混合淋巴细胞反应(MLR);分离移植物浸润细胞(GICs)组间比较GICs凋亡率。结果:Flt3-L诱导了同种移植急性排斥反应,应用TCV于移植前和移植后可以显著抑制Flt3-L诱导的同种肝移植排斥反应。在没有Flt3-L刺激作用的情况下移植排斥反应非常轻微。肝移植小鼠血清中的IL-10、IL-4和IFN-γ水平检测发现,Flt3-L治疗组IFN-γ水平显著升高,IL-10、IL-4水平降低;TCV免疫组IL-10、IL-4水平显著升高,IFN-γ水平显著下降;单纯移植自动耐受组与TCV免疫组变化趋势一致。单向混合淋巴细胞反应(MLR)显示:在单纯移植组,淋巴细胞增殖效应不明显,CPM为3 318±1 190;在Flt3-L治疗组,效应细胞增殖显著增强,CPM为9 790±1 369,在TCV免疫组,TCV免疫加Flt3-L治疗,淋巴细胞增殖效应被显著抑制,CPM为4 017±880。分离肝脏移植物内浸润细胞凋亡,TCV免疫组引起TIL凋亡率为(54.20±3.12)%,有效抑制了TIL引起的免疫排斥反应,诱导了免疫耐受。而在Flt3-L治疗组,TIL凋亡率为(3.34±2.49)%。结论:小鼠同种肝移植存在"自动耐受"现象;这种"自动耐受"现象的免疫平衡可以被Flt3-L打破,从而诱发急性排斥反应。针对排斥效应T细胞的特异性T细胞疫苗可以显著抑制Flt3-L诱导的同种肝移植排斥反应。     

TLSFJM抑制大鼠心脏移植排斥反应的作用

目的　在同种异体大鼠异位心脏移植模型中 ,探讨TLSFJM对急性移植排斥反应的抑制作用及机制。方法　以F344大鼠作为心脏移植受体 ,以LOU/CN大鼠作为心脏移植供体 ,建立大鼠异位心脏移植模型。受体大鼠分为 3组 ,于移植前后分别施以RPMI16 4 0、CsA或TLSFJM。每天观察移植心脏跳动情况 ,并于停跳当天或之前解剖观察。分别取供体大鼠脾细胞作为刺激细胞 ,取受体大鼠脾细胞作为反应细胞 ,进行单向混合淋巴细胞反应。结果　TLSFJM可明显延长大鼠异位移植心脏的存活时间 :RPMI16 4 0对照组移植心脏的存活期全部为 6d ,TLSFJM治疗组最长均可存活 2 7d ,高剂量 (15mg/kg·d)CsA治疗组存活期超过 2 7d。TLSFJM治疗组大鼠脾细胞增殖的cpm值均低于对照组。结论　TLSFJM具有良好的抗急性移植排斥反应作用。TLSFJM对同种异体抗原诱导T细胞增殖的明显抑制 ,可能是其发挥免疫抑制作用的机制之一     

环孢素A对小鼠脾细胞IFN-γ产生的影响

目的研究在不同刺激条件下,环孢素A(CsA)对小鼠γ-干扰素(IFN-γ)产生的影响。方法小鼠脾淋巴细胞分别使用抗CD3单克隆抗体(mAb)、抗CD3mAb 抗CD28mAb及抗CD3mAb rIL-12刺激后,用ELISA法检测CsA对小鼠脾细胞IFN-γ产生的影响。在单个细胞水平上,用流式细胞仪检测CsA对脾细胞表面CD25和CD69表达及IFN-γ产生的影响。结果CsA对不同条件下诱导的小鼠脾细胞IFN-γ产生,均表现为剂量依赖性的抑制作用,其抑制机制与细胞的活化有关。结论CsA可以剂量依赖的方式抑制小鼠脾细胞表达CD25、CD69及产生IFN-γ。     

输注同基因骨髓间充质干细胞联合脾组织移植诱导肝移植大鼠的免疫耐受

背景:有研究显示在免疫抑制剂的作用下,同种脾脏细胞移植可诱导免疫耐受,使移植物长期存活。另有研究还显示异种骨髓间充质干细胞移植可延长移植肝存活时间。目的:观察输注与受体同基因骨髓间充质干细胞联合脾组织移植对诱导大鼠肝移植后免疫耐受的作用。方法:将受体Lewis大鼠以数字表法随机分为4组:急性排斥组行DA-Lewis大鼠原位肝移植;环孢素A组行DA-Lewis大鼠原位肝移植后灌胃给予环孢素A;干细胞组行DA-Lewis大鼠原位肝移植,同期输注异体Lewis大鼠骨髓间充质干细胞;脾组织移植组在干细胞移植组的基础上同期移植DA大鼠脾组织。观察各组生存期,肝功能情况,血清细胞因子水平,嵌合体的形成情况及肝脏病理变化。结果与结论:与其他各组相比,脾组织移植组大鼠存活时间明显延长,术后血清丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基转移酶、总胆红素、白细胞介素2、干扰素γ水平明显降低(P0.05),白细胞介素6、白细胞介素10明显升高(P0.05),30d后受体脾脏中供体阳性细胞明显升高(P0.05)。肝脏病理显示,环孢素A组和干细胞组移植肝仅呈急性轻度排斥反应,急性排斥组呈急性重度排斥反应,脾组织移植组未见明显排斥反应。说明大鼠肝脏、脾组织移植后输注同基因骨髓间充质干细胞可减轻移植肝的排斥作用,甚至诱导免疫耐受。     

胸腺应急修饰诱导大鼠同种心脏移植免疫耐受

目的：与以往术前21天进行胸腺修饰常规方法不同，在手术当天进行胸腺内注射抗原，诱导大鼠同种心脏移植免疫耐受。方法：在大鼠腹腔异位心脏移植模型中，实验组在手术当天将供体SD大鼠脾细胞注射到受体Wistar大鼠胸腺，并以FK506短程处理受体鼠。单纯药物对照组在围手术期使用FK506但不进行胸腺内注射供体脾细胞；经典方法诱导组，腹腔注射抗淋巴细胞血清ALS(-1天) 胸腺内注射供体脾细胞(-21天)；无处理组，单纯将SD大鼠心脏移植到Wistar大鼠腹腔。观察供心存活天数、病理改变及混合淋巴细胞反应等指标的变化。结果：实验组供心存活时间较对照组明显延长，而与经典诱导组比较无统计学差异。实验组和经典诱导组的供受体脾细胞混合淋巴细胞培养各组增殖反应均较元处理组降低，而两者之间无差异。结论：心脏移植手术当日胸腺内注射供体同种抗原，同时给予短程免疫抑制剂与术前21天胸腺注射的经典诱导组同样能诱导宿主对移植物的低反应状态(免疫耐受或免疫抑制)。     

诱导HO-1表达延长大鼠心脏移植物存活时间

目的了解血红素加氧酶-1(HO-1)在延长异基因大鼠心脏移植物存活中的作用及其机制。方法雄性LEW(RT11)和LEW.1W(RT1u)大鼠分别作为供体和受体,受体鼠分别应用CoPPIX 5 mg/(kg.d),SnPPIX5 mg/(kg.d)。对照组及实验组均6只鼠。由移植手术前1日开始至发生排斥,比较心脏移植物存活时间,分别在移植后第5天取心脏进行HE染色及CD3、CD25、ED1和K i-67染色;并测定HO-1活性和用W estern b lot定量HO-1蛋白;进行受体脾细胞接受供体脾细胞刺激的混合淋巴细胞培养。结果对照组心脏移植物平均7 d出现排斥;应用CoPPIX诱导HO-1表达后存活时间为13.5 d,显著长于对照组(P<0.05)。而应用SnPPIX治疗后存活时间为6.5 d。对照组与SnPPIX治疗组的心脏移植物中有中等量的细胞浸润,CoPPIX治疗组移植物组织中的CD3 T细胞、CD25 细胞、巨噬细胞和增殖细胞都明显少于SnPPIX及对照组。同对照组相比,CoPPIX诱导HO-1表达明显抑制体内脾细胞增生(P<0.05),而SnPPIX无抑制。结论诱导HO-1表达能够抑制大鼠淋巴细胞的免疫活性并延长异基因心脏移植物的存活。     

供体骨髓细胞促进大鼠心脏移植耐受及机制的研究

经门静脉给予受体LEW大鼠3×10~8个DA大鼠供体脾细胞,2d后腹腔注射80mg/kg的环磷酰胺,第4天由舌静脉输注1×10~8骨髓细胞。2周后实施心脏移植手术。观察、记录移植物的存活时间,通过过继性转移实验,MLR、CTL活性测定及嵌合体分析,探讨耐受机制。结果表明,异基因心脏移植物的存活时间进一步延长;该耐受状态可被过继性转移;MLR、CTL活性表明,受体大鼠的免疫应答被特异性抑制;嵌合体水平提高。结论:异基因骨髓细胞输注可加深由脾细胞和环磷酰胺诱导的大鼠心脏移植耐受,该耐受与嵌合体水平、抑制细胞的存在有关。输注骨髓细胞对于改善、维持耐受状态,延长大鼠心脏移植物存活时间是一有效的方法。     

供肝NK细胞对肝移植免疫反应中NF-κB 活性和IL-15表达的影响

 目的：观察大鼠移植肝组织内和外周血白细胞介素15（IL-15）的表达水平及脾组织内核因子κB(NF-κB)的表达活性变化,探讨供肝NK细胞减轻肝移植术后急性排斥反应的机制。方法：Lewis大鼠为肝移植供体,BN大鼠为受体,改良“二袖套”法建立大鼠肝移植模型。应用［60Co］射线照射清除供体免疫细胞和经门静脉回输供肝NK细胞等技术,实验设立3组。A组: 急性排斥组;B组: 单纯［60Co］照射排斥组;C组: ［60Co］照射+供肝NK细胞门静脉回输排斥组。移植术后第1、3、7天收集受鼠外周血清,ELISA法检测IL-15分泌水平,同时切取移植肝行病理学检查,Western blotting法检测移植肝组织IL-15蛋白的表达,凝胶电泳迁移实验（EMSA）检测受鼠脾组织NF-κB表达活性。另外每组各设亚组观察移植后大鼠自然生存时间。结果：B组术后大鼠自然存活时间较A、C组明显缩短,术后发生急性排斥反应程度较A、C组严重;术后第3、7天,3组受鼠外周血IL-15水平均较第1天时显著升高;移植术后第3、7天,B组大鼠血清IL-15 浓度均显著高于A、C组;术后第3、7天,移植肝组织中B组IL-15表达也显著高于A、C组,受鼠脾组织中B组NF-κB表达活性亦显著高于A、C组。结论：IL-15可能作为肝移植急性排斥反应的监测指标,对急性排斥反应的早期诊断和移植物的预后估计具有临床指导意义;供肝NK细胞可能通过下调NF-κB的表达活性来调节IL-15的水平,进而减轻肝移植术后急性排斥反应。     

大动物胸腺修饰诱导同种心脏移植免疫耐受的实验研究

使用胸腺修饰和γ射线全身照射方法预处理受体猪 ,来评估该诱导免疫耐受方法用于大动物同种异体心脏移植的可能性。动物分组 :空白组不加处理行异位心脏移植 ;对照组受体单用 2Gyγ 射线全身照射 ;实验组受体全身照射加胸腺内注射供体脾细胞 ,两组预处理后 ,观察外周血中淋巴细胞及其亚群CD4、CD8水平的变化以及使用混合淋巴细胞反应(MLR )来了解其免疫功能的相关改变。预处理后 14d ,行异位心脏移植 ,观察移植物生存时间 ,并检测术后IL 2、IL 10水平变化。接受照射 4 8h后淋巴细胞较照射前显著减少 (P <0 0 5 ) ,流式细胞仪计数CD4、CD8水平也明显下降 ,但CD4下降更为明显 ;实验组受体胸腺修饰后第 2周 ,混合淋巴细胞反应刺激效应有所下降 (P <0 0 5 ) ,而单纯照射组预处理前后无显著差异 (P >0 0 5 )。实验组供心存活期 (MST 7 4d )较空白组 (MST 4 2d )和照射组 (MST 4 6d )明显延长 (P <0 0 5 ) ,而空白组与单纯照射组比较无显著差异 (P >0 0 5 )。实验组移植后 1～ 5dIL 2的水平明显低于对照组和空白组 (P <0 0 5 ) ,IL 10水平三组无明显差异 (P >0 0 5 )。实验组预处理后 ,机体产生了一定程度的免疫抑制 ,但并未获得在小动物实验中所获得的所谓“永久性”免疫耐受 ,其原因有待进一步研究     

Marked prolongation of murine cardiac allograft survival using recipient immature dendritic cells loaded with donor-derived apoptotic cells

We investigated whether recipient dendritic cells (DCs), pretreated with nuclear factor-kappaB oligodeoxyribonucleotide decoy (NF-kappaB ODN decoy) and loaded with ultraviolet B-irradiated donor apoptotic splenocytes (Apo-SCs), were able to induce murine cardiac allograft tolerance. Heterotopic vascularized heart transplantation was performed from BALB/c to C57BL/6 mice, and recipients (C57BL/6) were given one injection of recipient DCs pretreated with NF-kappaB ODN decoy and loaded with donor (BALB/c) apoptotic SCs (decoy Apo-SCs DCs) through the portal vein at 7 days, before heart transplantation in the absence of immunosuppression. The cardiac allograft survival time and the expressive levels of intragraft cytokine genes [interleukin (IL)-2, IL-10, and interferon-gamma] were evaluated. Our results indicated that injection of decoy Apo-SCs DCs significantly prolonged vascularized heart allograft survival and led to skewing of intragraft cytokine expression towards T helper 2 (IL-10). The mechanisms can be useful for therapy of allograft rejection with minimization of systemic immunosuppression.     

Effective induction of immune tolerance by portal venous infusion with IL-10 gene-modified immature dendritic cells leading to prolongation of allograft survival

Dendritic cells (DC) not only initiate T cell responses, but are also involved in the induction of tolerance. The functional properties of DC are strictly dependent on their state of maturation. It has been shown that immature DC can induce immune tolerance and prolong allograft survival. Interleukin-10 (IL-10) is an important immunosuppressive cytokine which inhibits maturation and function of DC. In order to improve the tolerogenicity of DC, we and others showed that adenovirus vectors can effectively mediate IL-10 genetic modification of DC, and IL-10 genetic modification can inhibit MHC II, B7.2, and CD40 expression, IL-12 secretion and the T cell stimulatory capacity of DC. The primary aim of this study is to examine the in vivo effects of this approach on allograft survival in a murine cardiac allograft transplantation model. To our surprise, we observed that infusion of immature DC genetically modified to express IL-10 (DC-IL-10) via the tail vein could not prolong allograft survival in the recipients, but shortened their survival. More interestingly, portal venous infusion of DC-IL-10 markedly prolonged allograft survival. The diverse effects of DC-IL-10 infusion through different routes may be due to the different immune responses to alloantigens in recipients that received DC-IL-10 via either the portal or the tail vein. Decreased cytotoxicity, polarization of Th2 response, poor T cell stimulating activity of liver DC and enhanced incidence of donor DC in the recipients may contribute to the more efficient prolongation of allograft survival observed after portal venous infusion of DC-IL-10. These results suggest that portal venous infusion may be an effective approach for immature DC to induce immune tolerance or hyporesponsiveness against donor antigens, and prolong allograft survival.Abbreviations APC Antigen-presenting cells - CTL Cytotoxic T lymphocytes - DC Dendritic cells - DC-IL-10 IL-10 gene-modified immature dendritic cells - iDC Immature dendritic cells - IL-10 Interleukin-10 - MLR Mixed leukocyte reaction - MOI Multiplicity of infection     

猪到猴异种胸腺修饰对猪心脏移植物存活及与外周血IL-2水平的影响

选用猪 新生猴腹腔心脏异位模型 ,通过异种胸腺修饰加60 Coγ照射途径 ,来探讨此途径对异种器官移植中T细胞的作用及诱导异种T细胞中枢性耐受的可能性 ,并进一步研究外周血IL 2水平与排斥反应的关系。结果发现 :MLR检测在照射 +胸腺注射组接受脾细胞胸腺内注射后第 3周 ,其刺激效应较空白组、照射组下降明显 (P <0 0 1 )。照射 +胸注组存活期较空白组明显延长 (P <0 0 1 ) ,照射 +胸注组存活期较胸注组和照射组延长 (P <0 0 5 )。IL 2和IL 1 0检测的结果表明 ,各组在排斥时均表现为IL 2水平较移植前显著升高 (P <0 0 0 1 ) ,胸注 +照射组和胸注组 ,受体体内IL 2水平 ,在移植后早期与移植前比较无显著性差异 (P >0 0 5 ) ,与同时期单纯照射和空白组术后比较有显著差异 (P <0 0 1 )。结果表明 :异种胸腺注射可诱导供体特异性的T细胞功能抑制 ,异种胸腺注射联合照射可有效地延长供心存活时间。IL 2水平与排斥反应的发生关系密切 ,可以作为监测晚期排斥反应发生的一个重要指标     

供体脾细胞输注诱导小鼠移植耐受及其机理的研究

目的以持续供体脾细胞输注的方法建立异基因嵌合体动物模型,并探讨移植耐受形成的机制。方法BALB/c（H-2     

Oral administration of lactoferrin increases NK cell activity in mice via increased production of IL-18 and type I IFN in the small intestine.

Evidence that lactoferrin (LF) influences various immune functions is now accumulating. Recent reports have shown that bovine LF (BoLF) enhances antimicrobial, antiviral, and antitumor immune activities when orally administered. Here, we report that orally administered BoLF increases natural killer (NK) cell populations in peripheral blood and spleen in a dose-dependent manner and enhances interferon-gamma (IFN-gamma) production by NK cells. Using intraperitoneal (i.p.) injection of poly(I:C) to induce NK cell trafficking into the peritoneum, oral BoLF increased NK cell migration. Oral BoLF also produced an immediate increase in the levels of interleukin-18 (IL-18) in the portal circulation. In IL-18 knockout (KO) mice, BoLF did not increase the numbers of NK cells, although NK cell cytotoxic activity and poly(I:C)-induced trafficking activity were both enhanced by oral BoLF, even in IL-18 KO mice. Furthermore, oral BoLF increased the expression of IFN-alpha and IFN-beta in Peyer's patches (PP) and mesenteric lymph nodes (MLN). Oral administration of 2- chloroadenosine selectively depleted the PP cells and blocked the ability of oral BoLF to increase NK cell accumulation in the peritoneum following poly(I:C) i.p. injection. Collectively, these results demonstrate that orally administered BoLF stimulates intestine-associated immune functions, including the production of IL- 18 and type I IFNs and increased NK cell activity.     

Unfractionated spleen cells but not natural killer (NK) cells from RFM donors prevent the progression of host-versus-graft disease in murine RFM/(T6 x RFM)F1 chimeras.

Host-versus-graft (HVG) syndrome is the fatal allogenic disease which develops in susceptible strains of inbred mice following their perinatal inoculation with related F1 hybrid spleen cells. Deaths are caused by pathogenic immune complexes. It is thought that the antibody components of these complexes are produced by F1 donor B cells stimulated by the allogenic HVG reaction. To complement previous work that showed that lethal disease could be prevented if the HVG response was suppressed, the present studies tested whether or not it could also be prevented by augmenting HVG reactivity with the adoptive transfer of spleen cells syngenic with the host. The data show that unfractionated RFM spleen cells given on Days 13-14 prevented lethal disease in 86% of RFM/(T6 x RFM)F1 chimeras. Successful therapy was associated with the suppression of formation of nephropathic-immune complexes, and with the rejection of F1 donor cells or their gradual replacement by host cells. RFM spleen cells enriched for NK activity by a new improved method not only failed to prevent HVG disease but appeared to exacerbate it. This was also true of spleen cells that had been activated in vitro for 3 days with IL-2, a procedure that greatly enhanced their cytolytic activity against YAC-1 targets. It is suggested that therapy with NK cells failed, even after IL-2 activation, because they had no effect on proliferating and antibody-forming F1 donor cells that had engrafted in large numbers in the lymph nodes of the RFM hosts.