高糖通过激活人脐静脉内皮细胞ⅠκB-α/NF-κB途径诱导MCP-1的表达

目的观察高糖诱导人脐静脉内皮细胞NF-κB的活性和单核细胞趋化蛋白1（MCP-1）的表达,探讨糖尿病并发动脉粥样硬化的发病机制。方法在培养的人脐静脉内皮细胞中加入不同浓度葡萄糖,检测内皮细胞中MCP-1mRNA、MCP-1蛋白的表达,NF-κB的活性及IκB-α的磷酸化水平。结果高糖明显地诱导了血管内皮细胞NF-κB的活性、MCP-1的表达及IκB-α的磷酸化;NF-κB活性抑制剂明显地降低了高糖所诱导的MCP-1的表达。结论高糖通过诱导血管内皮细胞IκB-α的磷酸化激活NF-κB,从而诱导了MCP-1的表达。提示在糖尿病并发动脉粥样硬化的发病过程中,高血糖通过激活血管内皮细胞IκB-α/NF-κB途径诱导MCP-1的表达,进而发挥了重要的作用。     

MCP-1诱导人胃癌细胞NF-κB-p65的表达和核移位

目的 研究MCP-1对人胃癌细胞NF-κB-p65的表达和核移位的影响.方法 人胃癌细胞系SGC7901中加入MCP-1及其受体(CCR2)拮抗剂RS102895,应用Western blotting方法分别检测NF-κB-p65和p65-NLS(活性p65)蛋白的表达,同时应用免疫组化方法分别检测42例人胃癌石蜡包埋组织中MCP-1、NF-κB-p65和p65-NLS蛋白的表达.结果 MCP-1能显著上调人胃癌SGC7901细胞NF-κB-p65和p65-NLS蛋白的表达(P＜0.01),而RS102895预先处理能显著抑制MCP-1的上调效应(P＜0.01);人胃癌组织中MCP-1蛋白与NF-κB-p65和p65-NLS蛋白的表达显著相关(P均＜0.05).结论 MCP-1能显著诱导人胃癌细胞NF-κB-p65的表达和核移位,从而在NF-κB通路的活化过程中发挥作用.     

NF-κB在TNF-α致人脐静脉内皮细胞凋亡中的作用

目的研究核转录因子-κB（nuc lear factor-κB,NF-κB）在TNF-α诱导培养的人脐静脉内皮细胞凋亡过程中的作用。方法体外培养人脐静脉内皮细胞,并用10 ng/m l的TNF-α进行诱导,不同时间段观察NF-κB活性、NF-κB抑制物IκBα表达以及细胞凋亡的情况,EMSA测定NF-κB活性,W estern-b lot检测IκBα的表达情况;Tunel法检测细胞凋亡;并用NF-κB的抑制剂PDTC预处理细胞后来观察TNF-α诱导细胞凋亡的情况。结果TNF-α以时间依赖性诱导人脐静脉内皮细胞凋亡,NF-κB的活性在处理后10 m in开始增强,2 h后恢复正常,IκBα的表达在10m in开始下降,2 h恢复正常;PDTC能抑制TNF-α诱导的凋亡。结论TNF-α在诱导体外培养的人脐静脉内皮细胞时,IκBα降解,NF-κB激活,从而引起细胞的凋亡。     

罗格列酮对高糖诱导的大鼠系膜细胞NF-κB活性及MCP-1表达的抑制作用

采用正常糖（NG）、高糖（HG）及HG＋不同浓度罗格列酮培养大鼠系膜细胞株。发现HG组单核细胞趋化蛋白1（MCP-1）mRNA的表达量明显高于NG组，20μmol／L罗格列酮可显著抑制MCP-1mRNA的表达。HG刺激系膜细胞24h可引起系膜细胞核因子κB（NF-κB）的DNA结合活性增强25倍，高糖诱导的NF-κB活化可被罗格列酮所抑制。罗格列酮可通过抑制NF-κB信号转导途径降低高糖诱导的系膜细胞MCP-1的表达。为进一步认识和评价罗格列酮在糖尿病肾病防治中的作用提供了实验依据。     

重组腺病毒IκBαM抑制高糖诱导的血管内皮细胞炎症因子的异常分泌

构建携有核因子κB抑制物IκBα的突变体IκBαM的重组腺病毒(AdIκBαM)，并感染ECV304血管内皮细胞，采用Westem blot、电泳迁移率变动分析和逆转录-聚合酶链反应等方法研究核因子κB在高浓度葡萄糖刺激的ECV304细胞分泌功能中所起的作用以及阻断其活性对内皮细胞分泌功能的影响。结果发现，高糖能诱导ECV304细胞IκBa的降解和核因子κB的激活，同时上调炎症因子细胞间粘附分子1、单核细胞趋化蛋白1和内皮素1mRNA表达水平，而感染AdlIκBαM的ECV304／IκBαM细胞则能拮抗高糖所致的IκBα降解与核因子κB激活，同时下调这些炎症因子的异常分泌水平。结果提示，核因子κB的激活在高糖所致的内皮细胞分泌功能改变中起中轴作用，抑制核因子κB的活化，有助于改善血管内皮细胞功能。     

NF-κB在氧化型低密度脂蛋白引起人脐静脉内皮细胞表达CD40中的作用

目的研究氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)对人脐静脉内皮细胞表达分化抗原CD40中核因子κB(NF-κB)的作用,进一步探讨卡托普利可能的抗动脉硬化作用。方法在ox-LDL作用人脐静脉内皮细胞前预先用卡托普利、NF-κB阻断剂(PDTC)、卡托普利+一氧化氮合酶阻断剂(L-NAME)、卡托普利+PDTC作用后,应用流式细胞技术检测细胞表面CD40的表达。结果预先加入卡托普利、PDTC人脐静脉内皮细胞的CD40的表达低于ox-LDL组(P<0.05),卡托普利组内皮细胞CD40的表达值低于卡托普利+PDTC组和卡托普利+NAME组,组间相比差异显著(P<0.001)。结论ox-LDL通过NF-κB途径激活了CD40的表达,卡托普利通过一氧化氮(NO)途径及NF-κB的转录使ox-LDL引起的内皮细胞CD40的表达下降,从而具有抗动脉硬化作用。     

霉酚酸对内皮细胞核因子-κB及其抑制因子IκBα的影响

目的研究霉酚酸(mycophenolic acid,MPA)对内皮细胞核因子-κB(NF-κB)活力及其抑制因子IκBα的影响.方法利用凝胶迁移率实验(electrophoretic mobility shift assay,     

赖诺普利对糖尿病大鼠肾组织中NF—κB、MCP-1表达的影响

将30只Wistar大鼠随机分为正常对照组（NC组）、糖尿病组（DM组）和赖诺普利治疗组（DT组）各10只。DM、DT组制备糖尿病大鼠模型。造模后DT组予0．1％赖诺普利水溶液10mg／（ks·d）灌胃,余组予等量饮用水灌胃;8周后采用免疫比色法测定24h尿蛋白排泄率,取出肾脏,应用免疫组化法检测肾组织中核因子-κB（NF-κB）、RT-PCR法检测单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）mRNA水平。结果与NC组比较,DM组24h尿蛋白排泄率及肾组织中NF-κB阳性细胞数和MCP-1 mRNA水平显著升高（P〈0．01）;与DM组比较,DT组上述指标水平明显降低（P〈0．01）。认为赖诺普利可能通过抑制NF-κB、MCP-1表达发挥肾脏保护作用。     

刺槐素通过抑制NF-κB通路活化减少TNF-α诱导气道平滑肌细胞表达、分泌MCP-1

目的 探讨刺槐素(Acacetin)对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导的人气道平滑肌细胞(HASMCs)分泌、表达单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemotactic protein 1,MCP-1)的影响及可能的机制.方法 CCK-8法测HASMCs增殖活性;酶联免疫吸附法(ELISA)测HASMCs上清液中MCP-1含量;实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测MCP-1 mRNA表达量;蛋白印迹法(Western blot)检测HASMCs中磷酸化P65(P-P65)蛋白的表达情况.结果 ①Acacetin及NF-κB抑制剂JSH-23均能显著降低TNF-α诱导的HASMCs MCP-1生成,且Acacetin的抑制作用具有浓度依赖性(P＜0.05);②同时,Acacetin及JSH-23均能显著减少TNF-α诱导的MCP-1mRNA的表达(P＜0.05);③Acacetin 能显著降低TNF-α引起的HASMCs P65蛋白磷酸化(P＜0.05).结论 降低NF-κB通路的活化水平可能是Acacetin抑制TNF-α诱导HASMCs合成、分泌MCP-1及其mRNA,从而发挥抗炎作用的机制之一.     

NF-κB及JNK通路与高糖下内皮细胞凋亡

高糖在内皮细胞功能异常尤其是凋亡中起重要作用,高糖诱导的活性氧簇增加参与NF-κB和JNK通路激活,经半胱天冬酶-3促进细胞凋亡的发生。NF-κB与JNK通路间存在密切联系,NF-κB使JNK磷酸化激活从而形成如下凋亡通路:高糖-活性氧簇-NF-κB-JNK-半胱天冬酶-3-凋亡,但NF-κB和JNK通路引起高糖下内皮细胞凋亡的机制还不完全清楚,两通路间的确切联系也有待进一步阐明。     

Ghrelin通过NF-κB抑制尼古丁诱导的人脐静脉内皮细胞VCAM-1的表达

将用于实验的人脐静脉内皮细胞随机分成4组:空白对照组(无血清DMEM培养基),尼古丁组(100nmol/L尼古丁,24 h),Ghrelin组(10 ng/ml Ghrelin 1 h后,加入100 nmol/L尼古丁),PlYTC组(100 ìmol/L PDTC和100 nmol/L尼古丁).Western blot法检测人脐静脉内皮细胞VCAM-1的表达;TransAM NF-êB p50试剂盒检测人脐静脉内皮细胞NF-êB的活化.发现尼古丁可明显诱导人脐静脉内皮细胞VCAM-1的表达,这一作用可被NF-êB抑制剂PDTC阻断.Ghrelin可显著抑制尼古丁对VCAM-1的诱导作用;Ghrelin亦可抑制尼古丁诱导的NF-êB的活化.认为Ghrelin可通过抑制尼古丁诱导的NF-êB活化,抑制尼古丁引起的内皮功能紊乱,从而改善内皮细胞功能.     

NF-κB及JNK通路与高糖下内皮细胞凋亡

高糖在内皮细胞功能异常尤其是凋亡中起重要作用,高糖诱导的活性氧簇增加参与NF-κB和JNK通路激活,经半胱天冬酶-3促进细胞凋亡的发生.NF-κB与JNK通路间存在密切联系,NF-κB使JNK磷酸化激活从而形成如下凋亡通路:高糖-活性氧簇-NF-κB-JNK-半胱天冬酶-3-凋亡,但NF-κB和JNK通路引起高糖下内皮细胞凋亡的机制还不完全清楚,两通路间的确切联系也有待进一步阐明.     

颅内动脉瘤患者血清MCP-1、ICAM-1、NF-κB水平变化及介入手术后阿托伐他汀的治疗效果

目的 探讨颅内动脉瘤患者血清单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)、细胞间黏附因子1(ICAM-1)、核因子κB(NF-κB)水平变化及介入手术后阿托伐他汀的治疗效果。方法 选择颅内动脉瘤患者60例（观察组），随机分为观察1组和观察2组各30例，均接受介入性血管内栓塞术治疗，观察1组介入手术后予那屈肝素钙注射液治疗，观察2组在观察1组基础上予阿托伐他汀钙治疗。同期另选体检健康的志愿者30例（对照组）。比较观察组与对照组血清MCP-1、ICAM-1、NF-κB水平，以及观察1组与观察2组治疗前后血清MCP-1、ICAM-1、NF-κB、TG、TC、HDL-C、LDL-C及Ang-1、Ang-2水平，统计介入手术后1个月内颅内动脉瘤破裂情况。结果 观察组血清MCP-1、ICAM-1、NF-κB水平均显著高于对照组（P均<0.05）。观察1组与观察2组治疗后血清MCP-1、ICAM-1、NF-κB水平均显著低于治疗前，并且观察2组治疗后显著低于观察1组治疗后（P均<0.05）。观察1组与观察2组治疗后血清TG、TC、LDL-C水平均显著低于治疗前，血清LDL-C水平显著高于治疗前（P均...     

晚期糖基化终产物激活内皮细胞核因子κB

目的 探讨晚期糖基化终产物对人血管内皮细胞核因子κB的激活及作用机制.方法 用晚期糖基化终产物修饰的人血清白蛋白与人脐静脉内皮细胞株ECV304体外共同培养.用Western blot检测核因子κB抑制蛋白水平,凝胶滞留法检测核因子κB的活性.结果 晚期糖基化终产物修饰的人血清白蛋白可致ECV304核因子κB抑制蛋白降解及核因子κB激活,并且呈时间、剂量依赖关系,抑制核因子κB抑制蛋白的降解,可抑制核因子κB的激活.结论 晚期糖基化终产物修饰的人血清白蛋白通过引起核因子κB抑制蛋白降解,导致核因子κB的激活,这一作用机制可能参与动脉粥样硬化的进程.     

瘦素对人脐静脉内皮细胞表达CD40和NF-κB的影响

目的:探讨瘦素对人脐静脉内皮细胞(ECV-304)表达CD40和NF-κB的影响.方法:人脐静脉内皮细胞培养及分组(6 h作用组和24 h作用组),用10 μg/L、30 μg/L、50 μg/L的瘦素及50 μg/L瘦素加上NF-κB阻断剂PDTC处理;免疫组织化学方法检测CD40和NF-κB的表达.结果:CD40为棕黄色颗粒,主要分布于细胞膜和细胞质;在10 μg/L的瘦素处理后,随着时间的延长,CD40表达水平不变,在30 μg/L、50 μg/L的瘦素处理后,随着时间的延长,CD40表达水平升高,在相同的作用时间下,随着浓度的增高,CD40表达水平升高,差异有统计学意义.NF-κB(P65)为棕黄色颗粒,主要表达于细胞质,在10 μg/L的瘦素处理后,随着时间的延长,NF-κB(P65)表达水平不变,在30 μg/L、50 μg/L的瘦素处理后,随着时间的延长,NF-κB(P65)表达水平升高;在相同的作用时间下,随着浓度的增高,NF-κB(P65)表达水平升高,差异有统计学意义;按20 μl/105细胞加入CD40单克隆抗体处理6 h后,NF-κB(P65)表达水平下降,经统计学检验,CD40和NF-κB(P65)的表达有相关性.结论:高浓度瘦素可以诱导脐静脉内皮细胞同时表达CD40和NF-κB(P65),同时, CD40表达被阻止后,NF-κB(P65)表达水平降低,说明二者的表达有相关性, CD40和NF-κB(P65)可能共同参与了高瘦素血症引发的动脉粥样硬化的发生和发展.     

组织因子对人脐静脉内皮细胞单核细胞趋化蛋白-1表达的影响

目的通过观察不同浓度组织因子(TF)对人脐静脉内皮细胞单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)表达的影响,探讨TF对MCP-1的作用及可能机制。方法体外培养人脐静脉内皮细胞,分为对照组及10、100、103、104 ng/L的TF处理组,对照组加入生理盐水,4个处理组分别加入相应浓度的组织因子,分别采用ELLSA法和RT-PCR法检测人脐静脉内皮细胞MCP-1和MCP-1 mRNA的表达。结果 ELLSA和RT-PCR的检测结果显示各组人脐静脉内皮细胞均有MCP-1、MCP-1 mRNA表达,MCP-1和MCP-1 mRNA的表达水平为对照组<10 ng/L组<100 ng/L组<103 ng/L组<104 ng/L组(均P<0.05)。结论 TF呈浓度依赖性的促进人脐静脉内皮细胞MCP-1的表达。     

高浓度葡萄糖条件下血管紧张素Ⅱ对内皮细胞核因子κB和单核细胞趋化蛋白1的影响

观察高糖环境下血管紧张素Ⅱ对内皮细胞核因子κB活性、单核细胞趋化蛋白1表达及氯沙坦的干预作用。应用激光共聚焦显微镜观察核因子κB活性变化，逆转录．聚合酶链反应测定内皮细胞单核细胞趋化蛋白1mRNA表达，酶联免疫吸附法检测培养基中单核细胞趋化蛋白1含量变化。结果发现，高糖(25mmol/L)、10^-7mol/L血管紧张素Ⅱ均能显著刺激内皮细胞核因子κB活化、单核细胞趋化蛋白1mRNA表达，培养基中单核细胞趋化蛋白1含量及其对单核细胞趋化活性亦显著增强，高糖环境显著增加血管紧张素Ⅱ诱导的核因子κB活化、单核细胞趋化蛋白1表达，氯沙坦有显著抑制作用。提示高糖促进血管紧张素Ⅱ对内皮细胞的刺激作用，氯沙坦通过抑制内皮细胞核因子κB活化和单核细胞趋化蛋白1的表达．对动脉粥样硬化发展起到防治作用．     

黄芪多糖对肾阳虚型糖尿病大鼠肾组织NF-κB及IκB的影响

[目的]研究黄芪多糖（APS）对肾阳虚型糖尿病大鼠肾组织核因子κB（NF-κB）mRNA和细胞内抑制性蛋白κB（IκB）mRNA的影响。[方法]将纯种SD雄性大鼠随机分为4组：对照组，模型组，苯那普利治疗组，APS治疗组。实验第8周时统一处死，以RT-PCR法检测各组大鼠肾组织NF-κBmRNA和IκBmRNA表达，并测定大鼠肾重／体重，血糖（HS）、血脂及肾功能。[结果]与苯那普利相比，APS能减少大鼠肾组织NF-κBmRNA表达，增加IκBmRNA表达，并可明显降低肾重／体重、BS、血脂，改善肾功能。[结论]APS能上凋IκBmRNA表达，抑制NF-κBmRNA的过度表达，从而延缓肾阳虚型糖尿病肾病的进展。     

霉酚酸对内皮细胞核因子—κB及其抑制因子ⅠκBα的影响

目的：研究霉酚酸（mycophenolic acid,MPA)对内皮细胞核因子－κB（NF－κB）活力及其抑制因子ⅠκBα的影响。方法：利用凝胶迁移率实验（electrophoretic mobility shift assay,EMSA)检测不同浓度的MPA对于一般培养状态和佛波酯（phorbol myristate acetate,PMA)激活的内皮细胞的NF－κB的活力,并用Western Blot方法检测MPA对NF－κB抑制因子ⅠκBα的作用。结果：PMA显著激活内皮细胞中的NF－κB活力,降低ⅠκBα的蛋白水平。MPA可以降低一般培养状态下和PMA激活状态下的NF－κB活力并抑制两种状态下ⅠκBα蛋白的降低。结论：MPA可以增加内皮细胞的ⅠκBα蛋白水平,降低NF－κB的活力。     

黄芩苷通过降低高脂血症大鼠肾小球核因子κB及可溶性单核细胞趋化蛋白表达抑制肾脏炎性反应

目的 观察黄芩苷对高脂血症实验性大鼠肾小球核因子κB及外周血单核细胞趋化蛋白1表达的干预作用.方法 实验组动物采用高脂混合饲料+维生素D3喂养方式,建立高脂血症大鼠模型,黄芩苷组在制备模型同时选用20 mg/ (kg·d)的黄芩苷水溶液灌胃,对照组喂以标准饲料.4周末测定血脂,取肾小球组织比较病理形态学变化,采用双抗体夹心ELISA法定量分析血清单核细胞趋化蛋白1水平,SABC免疫组织化学法检测肾小球核因子κB表达.结果 黄芩苷组大鼠血清中总胆固醇、低密度脂蛋白量减少,单核细胞趋化蛋白1分泌降低,与模型组相比黄芩苷组肾小球病理改变有所减轻,核因子κB表达下调明显,两者间差异有统计学意义(P<0.01).结论 黄芩苷具有降低低密度脂蛋白含量,降低核因子κB在肾小球细胞内激活,下调单核细胞趋化蛋白1表达水平,调节血脂紊乱及抗炎的作用.