α3β2与α3β4烟碱型乙酰胆碱受体α和β亚基不同配比的药理活性研究

目的:比较α和β亚基不同配比形成α3β2和α3β4烟碱型乙酰胆碱受体(nAChR)敏感性的差异。方法:体外转录获得α和β亚基的cRNA,采用显微注射将3种不同配比(α∶β分别为1∶10、1∶1和10∶1)的cRNA注入非洲爪蟾卵母细胞,利用双电极电压钳检测受体表达情况。利用激动剂乙酰胆碱(ACh)和拮抗剂α-芋螺毒素Reg IIA(α-CTx Reg IIA)检测在3种配比条件下形成受体药理活性的差异。结果:对于α3β2 nAChR亚型,在3种配比情况下,ACh的半数有效浓度(EC50)分别为91.2μmol/L、104.4μmol/L和130.6μmol/L,α-CTx Reg IIA的半数抑制浓度(IC50)分别为40.2 nmol/L、36.4 nmol/L和42.3 nmol/L。对于α3β4 nAChR亚型,在3种配比情况下,ACh的EC50分别为44.0μmol/L、110.0μmol/L和230.0μmol/L,α-CTx Reg IIA的IC50分别为226.8 nmol/L、71.5 nmol/L和49.4 nmol/L。结论:α3和β4亚基比例的改变会导致α3β4 nAChR结构和药理活性的改变。α3和β2亚基比例的改变对α3β2 nAChR结构和活性没有影响。     

绿色荧光蛋白干扰素-α2b融合基因的构建与表达

干扰素-α2b（IFN-α2b）作为治疗慢性乙肝、丙肝的首选药物，已成为医药生物技术产业的重要产品。目前研究IFN与其受体的作用关系多采用酶联免疫吸附法，间接的分析IFN或测定其受体被封闭的情况，但在细胞水平直观实时的检测IFN与其受体相互作用关系的研究报道甚少。本研究利用来源于维多利亚水母的绿色荧光蛋白（GFP）作为分子标签，构建含有GFP与IFN-α2b融合基因的原核表达载体，并在大肠杆菌中表达融合蛋白。     

淡色库蚊乙酰胆碱酯酶全基因的克隆鉴定及蛋白同源模拟

根据已知的尖音库蚊乙酰胆碱酯酶 (AChE1 )的全基因序列在非编码区设计一对特异性引物 ,对淡色库蚊的cDNA进行扩增。PCR产物经T A克隆 ,PCR鉴定和DNA测序 ,利用DNAStar软件与部分已知物种的AChE1氨基酸序列进行同源性分析并构建系统进化树。淡色库蚊Ace1基因的ORF序列为 2 1 0 3bp ,翻译成蛋白序列为 70 0个氨基酸。蛋白序列与尖音库蚊的AChE1相比只有 1 2个氨基酸的差异 ,缺失了一段 8个残基的序列。同源性分析表明 ,除尖音库蚊外 ,其与冈比亚按蚊的同源性最高 (79 5 % ) ,与黑腹果蝇AChE2相比则比较低 (31 1 % )。应用SWISS MODEL软件对该蛋白进行了同源模拟     

α血红蛋白稳定蛋白与β地中海贫血症

α血红蛋白稳定蛋白（α-hemoglobin stabilizing protein，AHSP）是近年来发现的一种小的、由102个氨基酸构成的红细胞系特异蛋白，它可以作为分子伴侣特异结合并稳定机体内游离α-珠蛋白，防止其产生细胞毒性物质。AHSP该特性的深入研究对与珠蛋白沉积相关疾病，如β地中海贫血症的基因治疗具有潜在的参考价值。本文针对国外关于AHSP的相关研究最新进展进行了综述。     

特异性IFN-α2b多克隆抗体的制备及鉴定

干扰素a家族至少有15个亚型，彼此之间有78％-98％的同源性，尤其是WNα-1和IFNα-22亚型之间的差异更小。以不同亚型的干扰素制备的多克隆抗体与抗原之间有很多的交叉反应。本文利用自行设计的亲和层析组合柱从复杂的多克隆抗体中除去与其他干扰素有交叉反应的抗体，得到针对IFNα-2b的特异性抗体。这种纯化IFNα-2b多克隆抗体的方法非常简便快捷。     

人前列腺LRIG1蛋白三维结构同源模建及其小分子激动剂的虚拟筛选

目的 LRIG1(tandem leucine-rich repeat sand immunoglobulin-like domains 1,LRIG1)是新近发现的抑癌基因,在前列腺癌中表达下降,通过对人前列腺LRIG1蛋白的三维结构进行同源模建,虚拟筛选出LRIG1的功能蛋白,试图为前列腺癌新靶点治疗提供新思路.方法 以LRIG1的同源蛋白LRRC4 C蛋白的晶体结构(PDB号3 ZYJ)为模型,通过MODELLER软件搭建LRIG1蛋白的三维空间结构;采用柔性对接的虚拟筛选技术,以荷兰SPECS公司的202490个化合物进行对接和打分,挑选出排名靠前的10个小分子化合物;通过AMBER软件分别进行20 ns的分子动力学模拟,并分析这10个小分子的结合模式、 动力学轨迹的RMSD、RMSF、 结合口袋的氢键以及它们的结合能量.结果 10个小分子化合物都具有一致的结合模式,而且都具有激活LRIG1活性的潜在能力.结论 发现与人LRIG1具有潜在特异结合能力的激动剂,可以为前列腺癌治疗新靶点的确立及开发具有药理活性的先导化合物提供理论依据.     

血、尿β_2-m、尿α_1-m及A1b联检的临床意义

本文对55例正常人（对照组）及69例糖尿病（DM）患者的血和尿β_2-m、尿α_1-m及Alb进行放射免疫分析,以探讨DM患者肾功能损伤,早期诊断的实用性。 对象和方法 一、对象: （一）对照组:55例（男24,女31）,年龄28～61岁,系本院健康体检者,均无糖尿病、肾脏疾病及其它内分泌疾病。     

流行性出血热患者尿α_1-m、A1b、β_2-m检测及临床意义

为研究出血热病毒对肾脏的损害程度,我们对102例患者尿中α_1-m、Alb、β_2-m进行了RIA测定。 材料和方法 一、对象: （一）EHF患者:112人（男65,女47）。为我院传染料住院病人,经EHF抗体检查为阳性。年龄15～67岁。 （二）对照组:40人（男28,女12）。为健康查体人     

早期胃癌中Runx-3及β-catenin蛋白的表达及临床意义

目的探讨Runx-3及β-catenin蛋白在早期胃癌组织中的表达及两者表达与临床病理特征的关系。方法应用免疫组化En Vision两步法分别检测Runx-3和β-catenin蛋白在30例正常胃黏膜和49例早期胃癌组织中的表达。结果 Runx-3蛋白在正常胃黏膜中的阳性率(86.67%)明显高于早期胃癌组织(34.69%)(P0.05);β-catenin蛋白在正常胃黏膜细胞膜中的阳性率(100%)显著高于早期胃癌组织(57.14%)(P0.05),但其异位表达率(0)显著低于早期胃癌组织(75.51%)(P0.05)。早期胃癌组织中Runx-3及β-catenin蛋白表达与患者性别、年龄、肿块大小等均无关(P0.05),但有脉管侵犯的早期胃癌组织中Runx-3蛋白细胞核阳性率显著高于无脉管侵犯者(P0.05);有脉管侵犯的早期胃癌组织中β-catenin蛋白细胞膜表达缺失率显著高于无脉管侵犯者(P0.05)。结论 Runx-3蛋白在早期胃癌组织中的表达明显减少,提示其可能作为胃癌早期诊断的参考指标;β-catenin蛋白在早期胃癌组织中膜表达缺失而存在核/质异位表达,在脉管侵犯的早期胃癌组织中β-catenin蛋白膜表达缺失,而Runx-3蛋白细胞核阳性表达增加,提示两者与早期胃癌的脉管侵犯相关;联合检测Runx-3蛋白及β-catenin蛋白有助于早期胃癌的诊断。     

ERα、ERβ、pS2蛋白在子宫平滑肌肉瘤组织中的表达及意义

目的研究ERα、ERβ、pS2蛋白在子宫平滑肌肉瘤组织中的表达及意义。方法选取1997年1月~2004年5月间,青岛大学医学院,青岛市第三人民医院,第八人民医院,收治的子宫肌瘤和平滑肌肉瘤患者128例的石蜡块,用免疫组化法测定ERα、ERβ、pS2表达。结果子宫平滑肌肉瘤中,ERα阳性率(36.1%),子宫肌瘤中ERα阳性率(83.6%),两者比较有显著性差异(P<0.01);其强度亦有显著性差异(P<0.01);平滑肌肉瘤ERβ阳性率(18.0%)子宫肌瘤中ERβ阳性率(59.7%),两者比较有显著性差异(P<0.01);其强度亦有显著性差异(P<0.01)。平滑肌肉瘤pS2阳性率(41.0%)子宫肌瘤pS2率(23.9%),两者比较有显著性差异(P<0.05);pS2在子宫平滑肌肉瘤中的表达强度比在子宫肌瘤中高,两者比较有显著性差异(P<0.05)。随着子宫肉瘤临床分期的增加,ERα、pS2的阳性表达率降低,差异有显著性(P<0.05);ERα、ERβ、pS2在绝经前比在绝经后高,各指标在绝经前后比较都有显著性差异P<0.01。结论ERα、ERβ、pS2与子宫平滑肌肉瘤的发病机制有关,与子宫平滑肌肉瘤的预后有关。     

基因工程干扰素α2b治疗多发性骨髓瘤疗效观察

本文报道6例多发性骨髓瘤,应用基因工程干扰素α2b(Intron A)单用或与马法兰、强的松合用作为初治诱导及维持治疗,6例均有效,出现疗效时间为合用治疗开始后5～12周,并有较长缓解期。     

胸腺肽α1联合干扰素α-2b治疗慢性乙型肝炎疗效观察

重组干扰素α - 2ｂ具有抗病毒与免疫调节作用 ,已广泛应用于慢性乙型肝炎的治疗。为了进一步提高慢性乙型肝炎的治愈率 ,我们应用胸腺肽α1联合干扰素α - 2ｂ治疗慢性乙型肝炎取得了较好的疗效 ,现将结果报道如下。1　材料与方法1 1　病例的选择按照全国第五次传染病寄生虫病学术会议修订的“病毒性肝炎防治方案”〔1〕选择慢性乙型肝炎病人(中度 ) 12 0例 ,随机分为 4组 ,干扰素α - 2ｂ组 (Ａ组 )30例 ,胸腺肽α1组 (Ｂ组 ) 30例 ,胸腺肽α1联合干扰素α - 2ｂ组 (Ｃ组 ) 30例和普通护肝组 (Ｄ组 ) 30例。所有病人均为ＨＢｅＡｇ和ＨＢ…     

聚乙二醇干扰素α-2a与干扰素α-2b治疗慢性丙型肝炎疗效分析

丙型肝炎病毒(HCV)感染可导致肝脏炎症坏死和纤维化,抗病毒治疗是丙型肝炎治疗的根本疗法。我们对慢性丙型肝炎(CHC)患者分别采用聚乙二醇干扰素α-2a(PEG-IFNα-2a)和干扰素α-2b(IFNα-2b)治疗,并对两种干扰素的临床疗效进行对比分析。1资料与方法1.1病例选择43例CHC患者为20     

重组干扰素α—2b治疗小儿慢性丙型肝炎及相关因…

为探讨小儿慢性丙型肝炎疗效、相关因素及不良反应，采用年龄分组的方法，对４３例小儿和２４例成人慢性丙型肝炎分别采用重组干扰素（ＩＮＦ）α－２ｂ（Ｉｎｔｒｏｎ Ａ）治疗，４３例小儿慢性丙型肝炎平均年龄８．１５岁，平均病程２３．１月，其中男３１例，女１２例。肝活检病理分型为：慢性迁延性乙型肝炎（ＣＰＨ）１１例，慢性活动性乙型肝炎（ＣＡＨ）２９例，肝硬化（ＬＣ）３例。ＩＮＦα－２ｂ剂量１００Ｕ至３００万Ｕ     

The Multifunctionality of Human Vγ9Vδ2 γδ T Cells: Clonal Plasticity or Distinct Subsets?

The dominant subset of γδ T cells in human peripheral blood expresses Vγ9 paired with Vδ2 as variable TCR elements. Vγ9Vδ2 T cells recognize pyrophosphates derived from the microbial non‐mevalonate isoprenoid biosynthesis pathway at pico‐ to nanomolar concentrations. Structurally related pyrophosphates are generated in eukaryotic cells through the mevalonate pathway involved in protein prenylation and cholesterol synthesis. However, micromolar concentrations of endogenous pyrophosphates are required to be recognized by Vγ9Vδ2 T cells. Such concentrations are not produced by normal cells but can accumulate upon cellular stress and transformation. Therefore, many tumour cells are susceptible to γδ T cell–mediated lysis owing to the overproduction of endogenous pyrophosphates. This explains why Vγ9Vδ2 T cells contribute to both anti‐infective and anti‐tumour immunity. Ex vivo analysed Vγ9Vδ2 T cells can be subdivided on the basis of additional surface markers, including chemokine receptors and markers for naïve and memory T cells. At the functional level, Vγ9Vδ2 T cells produce a broad range of cytokines, display potent cytotoxic activity, regulate αβ T cell responses, and – quite surprisingly – can act as professional antigen‐presenting cells. Thus, an exceptional range of effector functions has been assigned to a population of T cells, which all recognize invariant exogenous or endogenous pyrophosphates that are not seen by any other immune cell. Here, we discuss whether this plethora of effector functions reflects the plasticity of individual Vγ9Vδ2 T cells or can be assigned to distinct subsets.     

梗阻性黄疸患者血清β_2-m及尿β_2-m、A1b、IgG RIA

本文采用放射免疫分析法,测定了梗阻性黄疸患者手术前后血、尿β_2-微球蛋白(β_2-m）及尿白蛋白(Alb)、免疫球蛋白G(IgG)的含量,皆在了解黄疸患者手术前后的肾功能损害,并对其机理进行初步探讨。 对象和方法 一、对象:正常对照组:30例(男16,女14)平均年龄45±15岁,均为健康体检人群中正常者。 无黄疸胆道疾病组:32例(男13,女19),平均年龄48±17岁,均为胆结石患者。 梗阻性黄疸组:32例(男14,女18),平均年龄52±19岁,其中胆总管结石10例,胰头癌8例,胆管癌8例,肝门部肝癌6例。     

α-2b干扰素对人LILAK细胞增殖及杀伤活性的影响

α-２ｂ干扰素对人ＬＩＬＡＫ细胞增殖及杀伤活性的影响付体辉，谢之荣，邓碧芳（四川省肿瘤研究所生化室成都６１００４１）α干扰素可有多种亚型。研究表明［１，２］，基因重组的。α-２ｂ干扰素（ＩＦＮ-α-２ｂ）在治疗白血病及某些其它类型肿瘤方面具有一定作用，其...