ELISA测定中细胞内源性碱性磷酸酶与过氧化物酶的抑制方法

本文介绍一种抑制细胞内源性碱性磷酸酶和过氯化物酶的新方法,用生理盐水配制的20mM抗坏血酸在37℃下作用细胞30分钟后,细胞内的碱性磷酸酶和过氧化物酶同时被抑制,而且细胞表面抗原性不受影响。这种方法可应用于ELISA等其它需要排除细胞内源性碱性磷酸酶及过氯化物酶干扰的实验中。     

不同化学发光检测系统测定抗甲状腺过氧化物酶抗体的比较研究

目的 对Roche Cobase E601和SIEMENS Centaur XP两种化学发光检测系统测定抗甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb)结果的可比性和相关性进行评价.方法 使用上述两种发光检测系统测定94例患者血清中的TPOAb浓度,对两组数据进行比较,并对相关性进行分析.结果 两种发光检测系统的批内、批间精密度较好,差异无统计学意义;SIEMENS Centaur XP检测系统阳性率大于Roche Cobase E601检测系统的阳性率,结果比较差异有统计学意义(P<0.05);两检测系统对TPOAb的检测结果总符合率为75.6%,两检测系统检测结果呈正相关(r=0.866,P<0.01).结论建议对TPOAb检测建立标准化的参考系统,现有的检测系统应与标准化的参考系统进行比对.     

分析不同单克隆抗体识别的表位特异性的三种ELISA方法比较

<正> 在单克隆抗体(McAb)的特性鉴定中,确定其对抗原构象表位(或抗原决定簇)的特异性是十分重要的。它可为抗原分子的结构和功能分析以及进行生物学方面的研究提供必要的实验依据。本文采用McAb相加试验、竞争抑制试验和双位点夹心法三种简便的ELISA,分析了已建立的抗甲胎     

三种ELISA法检测HFRSV抗原的比较

本文报告了BA-ELISA、夹心法ELISA和抗体捕获法ELISA对五株肾综合征出血热病毒(HFRSV)细胞培养物和感染乳鼠脑中病毒抗原的检测情况,结果表明BA-EL ISA敏感性最高,对HFRSV细胞培养物的检测滴度平均达1:576～2304,对感染乳鼠脑研磨液上清平均达1:2000～11200。由于三种方法均采用了HFRS单克隆抗体,因此非特异反应显著降低,敏感性得以提高。文中对三种ELISA方法的优缺点进行了讨论。     

抗MPO抗体的ELISA检测和应用

本文应用Ｍａｔｈｅｓｏｎ方法从人白细胞中提取髓过氧化物酶ＭＰＯ，建立ＥＬＩＳＡ法检测６３份血清标本中抗ＭＰＯ抗体，同时与间接免疫荧光法（ＩＩＦ）作比较，结果是：１９例结节性多动脉炎（ＰＡＮ）患者中６例抗ＭＰＯ抗体阳性（３２％），较ＩＩＦ法阳性率提高（１９例中１例），而２２例正常人及２２例其他肾脏病患者血清均为阴性。提示ＥＬＩＳＡ法既可从分子水平鉴定系统性血管炎致病的特异性抗体，又是系统性血管炎敏感的诊断方法。     

三种检测噬菌体阳性克隆的ELISA比较

本研究以抗白细胞介素２受体（ＩＬ－２Ｒα）单抗５Ｇ１筛选噬菌体六肽库为实验体系，比较了三种不同ＥＬＩＳＡ（噬菌体常规包板、固定包板及双抗体夹心法），证实固定包板优于常规包板，夹心ＥＬＩＳＡ效果最佳，实为一种检测噬菌体阳性克隆抗原性的简便、敏感特异的方法     

乙肝标志物ELISA检测不同方法的比较研究

目的 探讨全自动ELISA系统检测HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HbcAb(HBV-M)是否在重复性、准确度等方面优于手工法和半自动法,为其更好地在临床实验室开展工作提供进一步的数据和基础.方法 用以上各项指标的弱阳性质控品,分别做手工法、半自动法和全自动法的批内和批间重复性试验.另用三种方法分别检测临床血清标本,每项810人份.定性结果不完全一致的标本,HBsAg用中和法做确证试验,其余四项用化学发光法作为参考方法进行验证.结果 批内与批间重复性比较,全自动法的CV小于手工法和半自动法.三种方法检测临床标本,定性结果两两比较,均显示一致性非常好(k＞0.8,P＜0.05);进行卡方检验,除HBcAb的半自动法阳性率显著高于全自动法(P＜0.0125)外,其余项目三种方法两两比较,均无显著性差异(P ＞0.0125).经过确证/参考试验验证,全自动法、半自动法、及手工法不完全一致的标本,HBsAg17份,符合个数分别为15、9和4;HBsAb 24份,符合个数分别为17、13、7;HBeAg 9份,符合个数分别为7、2、5;HBeAb 34份,符合个数分别为19、16、19;HBcAb 36份,符合个数分别为28、15、19.结论 ①全自动法比半自动法和手工法具有更好的重复性.②三种方法有非常好的一致性,均能较好的诊断乙型肝炎.③全自动法ELISA检测HBV-M比半自动法和手工法准确度更高,可进一步提高这些项目的检验质量.     

ELISA技术的某些改进

ＥＬＩＳＡ技术的某些改进第二军医大学长征医院内科（上海２００００３）缪晓辉，马亚利，陈士葆微生物学教研室戚中田，潘卫，杜平ＥＬＩＳＡ技术因其灵敏度高、特异性强、重复性好、操作简便等，已成分不可缺少的免疫学检测技术之一。［１］但在技术上尚需完善。我们在...     

PCR技术和ELISA法诊断HCMV宫内感染的敏感性与可靠性比较

用聚合酶链反应(PCR)技术.对78例妊娠早期孕妇进行外周血、尿中人巨细胞病毒(HCMV)DNA测定;用酶联免疫吸附法对78例妊娠早期孕妇进行外周血中人巨细胞病毒IgG、IgM测定.结果:PCR技术中外周血阳性率10%、尿中阳性率11.4%;ELISA反应中血IgG阳性率1.1%、IgM阳性率1.1%.统计结果表明在同一孕妇中HCMV阳性检出率PCR技术明显高于ELISA法,在PCR技术中,尿的阳性率又高于血的阳性率,这进一步证实了PCR技术是诊断宫内感染较理想的手段.     

不同生长底物对体外培养脊髓运动神经元的影响

神经元作为一种高度分化的细胞,在体外难以存活和生长,因此在体外培养时,需在容器表面包被一层类似细胞外基质的生长底物。神经元能否尽快粘贴到包被的底物上是影响神经元体外存活率的关键因素之一。细胞外基质(ECM)可为包埋在其中的细胞提供适宜的物理和化学微环境,同时形成一个网状支架供     

PCR和ELISA检测单纯疱疹病毒的比较

依据ＨＳＶ ＤＮＡ多聚酶基因核苷酸序列设计并合成一对引物，建立了ＰＣＲ方法。用ＰＣＲ和ＥＬＩＳＡ平行检测ＨＳＶ－１，ＨＳＶ－２标准毒株感染的细胞，拟诊ＨＳＶ脑炎患者脑脊液（ＣＳＦ）及多种对照标本。结果表明，两方法特异性完全一致；ＰＣＲ检测阳性率高，比ＥＬＩＳＡ敏感近２０倍，更适用于ＨＳＶ脑炎的早期诊断。     

ELISA和ABC免疫组化染色法在肿瘤McAbs筛选中的比较研究

本文比较分析了ELISA和ABC两种方法在肿瘤McAbS筛选应用中的一些利弊关系。结果表明,ELISA测出为阳性并与结肠癌细胞系反应的99.5％(198/199)孔杂交瘤细胞所分泌的抗体,经ABC法染色后是不与其癌组织反应的,其中只有0.5％(1/199)孔细胞的抗体才是这两种方法同时均能测得为阳性和是有意义的。而ABC法不仅可检出ELISA阳性的抗体,而且亦能检出ELISA漏筛为性阴、最终是有意义的理想抗体。     

组蛋白脱乙酰酶6脱乙酰催化域的底物蛋白及功能

<正>蛋白质的乙酰化修饰是蛋白功能调节的重要机制,影响细胞增殖、迁移、凋亡等多方面功能。靶蛋白的乙酰化状态受组蛋白脱乙酰酶(histone deacety-lases,HDACs)和组蛋白乙酰转移酶(histone acetyl-transferases,HATs)的共同调节。乙酰化和脱乙酰化状态失衡可影响细胞正常的生命活动。HDACs通过对组蛋白及某些非组蛋白的赖氨酸(lysine,Lys)残基脱乙酰化修饰,调控细胞的病理生理过程,参与多     

抑制性底物杂交(SSH)技术研究BXSB小鼠的差异表达基因

目的：利用抑制性底物杂交技术（Ｓｕｐｐｒｅｓｓｉｏｎ ｓｕｂｔｒａｃｔｉｖｅ ｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ,ＳＳＨ）,以ＢＸＳＢ狼疮小鼠为模型,研究系统性红斑狼（ＳＬＥ）发病相关基因。方法：分离ＢＸＳＢ和Ｃ５７－ＢＬ－６小鼠骨髓细胞,ｍＲＮＡ,反转录构建ｃＤＮＡ文库,利用技术研究ＢＸＳＢ小鼠差异表达基因。结果：获得了１２个阳性克隆,其中有３个克隆编码ＴＣＲ、ＭＨＣⅡ类分子及逆转录病毒基因表达产物,均     

神经元特异性烯醇化酶ABC—ELISA方法的建立与应用

应用人脑神经元特异性烯醇化酶(NSE)和兔抗人NSE抗体,建立了测定NSE浓度的ABC—ELISA方法。该法灵敏度高、特异性强,标准曲线线性关系好;可用于临床分析病人血清的NSE浓度和诊断肺小细胞癌。     

改良ELISA测定腹水中单克隆抗体的亲和常数

抗体亲和力对体内外免疫反应有重要影响,为阐明抗体亲和力在免疫学检测及疾病发生发展机理中的作用,需要建立简单准确的测定抗体亲和力的方法。本实验参照Friguet氏利用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定抗体亲和力的基本原理,建立了改良测定法,能准确且方便地直接测得腹水中单克隆抗体的亲和力常数。     

ECLIA法与传统ELISA法检测TNF-α比较

化学发光酶联免疫检测法(ECLIA)是将酶免疫系统与化学发光系统结合起来,通过发光强度(RLU)反映检测样品含量的一种免疫学检测技术[1].本实验建立了ECLIA法,并将其与传统ELISA法在其敏感性上进行对比,结果表明,ECLIA法较ELISA法敏感性提高4倍,报道如下.     

ELISA新底物TMB终止剂的研究

3,3′,5,5′-四甲基联苯胺(TMB)具有高度的敏感性,又无致癌性,但常规应用H_2SO_4终止反应,颜色会由蓝变黄,本底不断加深,阳性和阴性的对比度差,影响推广应用。本文采用了10种药物进行比较研究,发现一种理想的新终止剂——1％十二烷基硫酸钠。它能使底物显色后保持鲜蓝色不变,本底清晰如水,而且久置不会变深,阳性和阴性反应视差十分明显,既有利于目测,又可用酶联免疫检测仪于波长630nm精确判定。通过抗-HBc 108份和抗-HDV 565价标本的考核,均获得了十分满意的结果。     

ELISA检测胰岛素的进一步研究

ＥＬＩＳＡ检测胰岛素的进一步研究石国富，张洪德，王丽娟，葛永新辣根过氧化物酶（ＨＲＰ）是酶联免疫吸附法（ＥＬＩＳＡ）中应用最为广泛的标记酶，邻苯二胺（ＯＰＤ）是ＨＲＰ最为敏感的底物之一，但其最大的缺点是有致癌性［１，２］。目前国内生产的各种ＥＬＩＳＡ...