S-P一步染色法检测T细胞亚群的运用体会

外周血T细胞亚群的分布反映了机体的细胞免疫状况。检测T细胞亚群的方法很多,我们利用S-P一步染色法测定了人外周血T细胞亚群,结果与流式细胞术的检测结果比较,同时还分析比较了Ficoll分离液本身对T细胞表面标志的影响。     

帕金森病患者NK细胞亚群及T淋巴细胞亚群变化的临床意义

目的:探讨帕金森病(PD)不同年龄、不同病期、伴随症状患者外周血NK细胞亚群及T淋巴细胞亚群的变化及其临床意义。方法:应用先进的流式细胞仪(FCM)直接免疫荧光染色法检测47例PD患者外周血NK细胞亚群及T淋巴细胞亚群,并与健康人组进行对照与相关分析。结果:PD组CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+水平较对照组均明显降低(P<0.05),而CD16+56水平则较对照组明显增高(P<0.05)。高龄、病情重及伴痴呆和抑郁的PD患者CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+水平降低更显著(P<0.05)。结论:PD发病过程中存在T细胞免疫功能低下及NK细胞免疫平衡失调,高龄、病情重及伴痴呆和抑郁的患者NK、T细胞免疫功能异常降低更明显,此为PD病理生理基础赋予新的内涵,亦为PD的免疫干预性治疗提供新的途径。     

过敏性紫癜患者T细胞亚群和体液免疫功能的检测

过敏性紫癜 (Ｈｅｎｏｃｈ Ｓｃｈｏｎｌｅｉｎｐｕｒｐｕｒａ,ＨＳＰ)的基本病理改变是全身弥漫性小血管炎症反应。由ＨＳＰ引起的肾损伤是常见的肾小球疾病 ,但其发病机制尚不明确。本研究应用多色流式细胞仪 ,检测了ＨＳＰ患者外周血ＣＤ3+ 、ＣＤ4 + 及ＣＤ8+ Ｔ细胞亚群的数量变化 ,并对血清免疫球蛋白和补体Ｃ3、Ｃ4进行了测定 ,旨在探讨其发病机制。1　材料和方法1.1　研究对象　ＨＳＰ患者 4 0例均为 1998年 1月～ 2 0 0 1年6月间的住院患者 ,年龄 2～ 2 5岁 ,平均 9.1岁 ,男 19例 ,女 2 1例 ,其中 15例在经治疗 2～ 4ｗｋ病情有所…     

T细胞亚群的检测在肾移植术后急性排斥反应时的临床意义

通过流式细胞仪对５４例肾移植术后受者外周血Ｔ细胞亚群进行动态监测。结果显示肾移植术后发生稳性排斥反应时，ＣＤ＾３＋，ＣＤ＾＋４细胞及ＣＤ＾４＋／ＣＤ８＾＋比值均升高，经激素冲击治疗有效的病人ＣＤ＾３＋，ＣＤ＾＋４细胞及ＣＤ＾＋４／ＣＤ＾＋８比值逐下降，而ＣＤ＾３＋，ＣＤ＾＋４细胞及ＣＤ＾＋４／ＣＤ＾＋３比会主同不降者说明激素冲击治疗无效。Ｔ细胞亚群检测可作为对是能肾移植术后急性排斥反应监测的一种方     

非霍奇金淋巴瘤患者T细胞亚群、NK细胞检测的临床意义

目的：研究非霍奇金淋巴瘤（NHL）患者外周血T淋巴细胞亚群、NK细胞检测结果的变化与该病的关系及与慢性淋巴腺炎患者细胞免疫功能的不同变化。方法：采用流式细胞仪（FCM）检测非霍奇金淋巴瘤（NHL）患者、慢性淋巴腺炎及正常人外周血T淋巴细胞亚群比例、NK细胞的变化。结果：非雹奇金淋巴瘤患者与正常人比较总的T淋巴细胞、辅助性T淋巴细胞及CD4^＋／CD8^＋比值明显下降（P〈0．05），细胞毒性T淋巴细胞明显升高（P〈0．05），NK细胞则无明显变化（P〉0．05）。非霍奇金淋巴瘤患者与慢性淋巴腺炎患者比较，细胞毒性T淋巴细胞、NK细胞明显升高（P〈0.05），而总的T淋巴细胞、辅助性T淋巴细胞无明显改变（P〉0．05），CD4^＋／CD8^＋比值略有下降但无明显统计学意义。结论：非霍奇金淋巴瘤患者细胞免疫功能明显受到抑制，T细胞亚群及NK细胞的检测对NHL的诊断、治疗、预后判断有一定的临床价值。     

类风湿性关节炎患者2H4+T淋巴细胞亚群的流式细胞仪分析

了解类风湿性关节炎患者免疫功能的异常变化，探讨其发病机制。方法，使用间接免疫荧光和直接免疫荧光方法对１１例ＲＡ患者和１２例健康人的外周血Ｔ淋巴细胞进行了研究。结果：ＲＡ患者与对照组比较ＣＤ３＾＋Ｔ细胞和ＣＤ＾＋４Ｔ细胞地明显变化，ＣＤ８＾＋Ｔ细胞明显减少，     

T细胞亚群和免疫耐受

无论采取什么样的方法，我们在耐受诱导研究中的最终目标大部分是建立在对T细胞的调控上，涉及到TCR、共刺激分子、T细胞生长因子及某些T细胞亚群的诱导增生等方面。这些靶T细胞的活化、无能、凋亡或存活均与耐受状态的建立存在某种关联。本文将对近年来T细胞亚群与免疫耐受关系的研究作一综述。     

T细胞亚群和免疫耐受

无论采取什么样的方法,我们在耐受诱导研究中的最终目标大部分是建立在对T细胞的调控上,涉及到TCR、共刺激分子、T细胞生长因子及某些T细胞亚群的诱导增生等方面.这些靶T细胞的活化、无能、凋亡或存活均与耐受状态的建立存在某种关联.本文将对近年来T细胞亚群与免疫耐受关系的研究作一综述.     

T细胞亚群的检测在肾移值术后急性排斥反应时的临床意义

通过流式细胞仪对５４例肾移植术后受者外周血Ｔ细胞亚群进行动态监测。结果显示肾移植术后发生急性排斥反应时，ＣＤ３＋、ＣＤ４＋细胞及ＣＤ４＋／ＣＤ８＋比值均升高，经激素冲击治疗有效的病人ＣＤ３＋、ＣＤ４＋细胞及ＣＤ４＋／ＣＤ８＋比值逐渐下降，而ＣＤ３＋、ＣＤ４＋细胞及ＣＤ４＋／ＣＤ８＋比值居高不降者说明激素冲击冶疗无效。Ｔ细胞亚群检测可作为对肾移植术后急性排斥反应进行监测的一种方法。     

抗人全T细胞单克隆抗体大鼠杂交瘤细胞株的建立

通过融合大鼠免疫细胞株IR983F和经T细胞株HPB—ALL免疫大鼠脾细胞,获得分泌单克隆抗体LO—CD6a的杂交瘤细胞株。实验证实,LO—CD6a是人全T细胞特异性的。     

T细胞亚群比例失调在血栓闭塞性脉管炎发病机制中的作用

关于血栓闭塞性脉管炎(TAO)的发病机制目前尚无定论。一些学者认为TAO的发生与机体免疫功能紊乱关系密切,主要表现在体液免疫功能亢进和细胞免疫功能低下,而T细胞在机体免疫反应的调控中可能起着主导作用。目前,有关TAO病人外周血T细胞亚群的研究,及其与抗动脉抗体(AAA)产生的关系,以及在疾病发生和发展中所起的作用,国内外报告甚少。本研究对     

广州市健康儿童和成人淋巴细胞亚群数量的对比分析

目的比较儿童和成人淋巴细胞亚群百分率和绝对数量的异同,更好地为本地区临床诊断和治疗提供参考。方法采用双色流式细胞术分析健康儿童和成人外周血T淋巴细胞亚群(CD3+细胞、CD3+CD4+细胞、CD3+CD8+细胞)、B淋巴细胞(CD19+)、CD3-CD56+NK细胞(自然杀伤细胞)的数量。结果儿童组总淋巴细胞(百分率和绝对数)、CD19+淋巴细胞(百分率和绝对数)、CD3+淋巴细胞百分率、CD3+CD4+淋巴细胞百分率、CD3+CD8+淋巴细胞绝对数、CD3-CD56+细胞绝对数、CD4+/CD8+细胞比值与成人组比较差异均有统计学意义;CD3+CD8+淋巴细胞百分率、CD3-CD56+细胞百分率、CD3+淋巴细胞绝对数和CD3+CD4+淋巴细胞绝对数与成人组比较差异无统计学意义。儿童组CD3+CD8+淋巴细胞、CD19+淋巴细胞、CD3-CD56+细胞的百分率和绝对数均高于成人组,CD3+淋巴细胞(百分率和绝对值)、CD3+CD4+淋巴细胞(百分率和绝对值)和CD4+/CD8+细胞比值低于成人组。相同与不同性别组内均有多个指标存在显著差异。结论淋巴细胞亚群的分布受年龄、性别因素的影响,淋巴细胞亚群绝对数与百分率随年龄的变化不总是保持一致的。用于血液性和免疫性疾病诊断时,采用淋巴细胞亚群绝对数作为参考指标优于百分比率。     

流式细胞术检测CFSE标记人T细胞亚群增殖反应

目的探讨应用流式细胞术和活细胞荧光染料CFSE检测T淋巴细胞各亚群增殖反应的方法学。方法人外周血单个核细胞（PBMC）经CFSE染色后,分别用植物凝血素（PHA）、CD3 mAb和结核杆菌抗原（Mtb-Ag）刺激,加IL-2扩增后,用流式细胞术检测活化增殖后T细胞各亚群的比例,并用ModFit软件分析各亚群的增殖动力模型。结果PHA和CD3 mAb主要活化总T细胞,CD8^＋T细胞的增殖优于CD4^＋T细胞,但CD4^＋T细胞前4代细胞明显多于CD8^＋T细胞。Mtb-Ag主要刺激γδT细胞增殖。结论以CFSE标记淋巴细胞,结合流式细胞术可有效检测出不同T细胞亚群对不同刺激剂的增殖反应以及增殖动力学变化。     

Chemokine receptors support infiltration of lymphocyte subpopulations in human hepatocellular carcinoma

The presence of lymphocyte infiltration in human hepatocellular carcinoma (HCC) is evident. However, immune regulation of lymphocytes in HCC is poorly characterized. In this study, we investigated the chemokine receptor and memory, activation and adhesion markers of major leukocyte subsets present in tumor, nontumor liver, and peripheral blood. T cells from both tumor and peritumor liver displayed high levels of activation and homing markers. CCR5 and CXCR3 were expressed in a large proportion of CD45RO+, CD69+, CD27+, and CD11a+ T cells from tumor compared with T cells from circulation. The proportion of CCR6- and CXCR3-expressing natural killer cells (NK) and natural killer T cells (NKT) was significantly increased in the tumor and nontumor liver compared with peripheral blood. This study demonstrates the role of chemokine receptors in the recruitment of specific lymphocyte subsets to the liver in HCC and suggests the importance of these receptors in regulation of immune defense against HCC.     

B/T淋巴细胞间抑制信号研究进展

B7-CD28家族共刺激信号分子在T淋巴细胞激活、抑制机体耐受及产生理想的T细胞免疫应答等方面起着关键作用。B7-CD28家族共信号分子已经被集中的研究,并且引起免疫调控领域充分的重视。CD80/CD86/CD28/CTLA-4经典途径的新功能的发现以及这一家族包括B7-H1/B7-DC/PD-1,B7-H2/ICOS,B7-H4和BTLA的新途径的确定,都拓宽了我们对T细胞介导的免疫应答和免疫耐受调控的理解。本文就CTLA-4、PD-1和BTLA对T细胞应答的负性调节以及在维持外周耐受中起作用的研究进展作一综述。     

T淋巴细胞亚群及其细胞因子在子痫前期患者的表达及意义

目的通过检测T淋巴细胞亚群及其所分泌的细胞因子IL-10、TNF-α在子痫前期患者外周血及胎盘中的变化规律及其相关性,探讨其与子痫前期发病的关系。方法取60例孕妇(正常晚孕组20例;子痫前期组40例,其中轻度20例,重度20例)外周血,分别检测T淋巴细胞亚群比例及其细胞因子IL-10、TNF-α的水平;分娩后检测胎盘组织中的IL-10、TNF-α的表达。结果①轻度子痫前期组胎盘IL-10、TNF-α的表达强度与对照组相比均无显著差异(P>0.05),而重度子痫前期组IL-10表达强度显著降低(P<0.05),且与子痫前期病情呈负相关(rs=-0.342P=0.009);TNF-α表达强度显著升高(P<0.05),且表达强度与子痫前期病情呈正相关(rs=0.349P=0.007)。②子痫前期组IL-10外周血中含量明显低于对照组(P<0.05),其中重度子痫前期组IL-10外周血中的含量比轻度子痫前期者降低(P<0.05),差异有显著性;而TNF-α的含量明显升高(P<0.05)。③子痫前期组血清CD4 、CD8 的细胞百分比与对照组相比无显著差异,但CD4 /CD8 比例上升明显,两者比较有显著性差异(P<0.05)。子痫前期组中重度子痫前期者血清CD4 /CD8 比例比轻度子痫前期者血清CD4 /CD8 比例上升,且差异有显著性(P<0.05)。结论T淋巴细胞亚群及其所分泌的细胞因子的变化可能与子痫前期的发病中起着重要作用,且与病情密切相关。     

Differential expression of lymphocyte homing receptors by human memory/effector T cells in pulmonary versus cutaneous immune effector sites

The heterogeneous expression of lymphocyte homing receptors (HR) by the (CD45RA^low/RO^high) memory/effector T cell population in the human is thought to define subsets with tissue-selective recirculatory potential. To investigate further the localization characteristics of these T cells, we used multiparameter flow cytometry to quantitate T cell subsets defined by expression of the skin-selective HR called the cutaneous lymphocyte-associated antigen (CLA), the peripheral lymph node (PLN) HR L-selectin, the mucosal-associated HR α4β7-integrin, and the mucosal-associated adhesion molecule αeβ7-integrin in either cutaneous or pulmonary immune effector sites and corresponding peripheral blood. Compared to peripheral blood, skin T cells were highly enriched for the CLA⁺/L-selectin⁺/αeβ7-integrin^? memory/effector subset, whereas lung memory/effector T cells were predominantly CLA^{?to low} L-selectin^?, and almost half were αeβ7-integrin⁺. α4β7-integrin expressing memory/effector T cells were diminished in both skin and lung, suggesting that this HR is not a major participant in determining localization specificity in either of these sites. The characteristic pulmonary T cell HR phenotype did not significantly differ between the normal subjects and those with pulmonary inflammatory disease, and did not correlate with markers of T cell activation. Induction of a rapid up-regulation of pulmonary inflammation via intrabronchial allergen challenge in asthmatic patients tended to decrease localization specificity, resulting in a more general importation of memory/effector subsets. Taken together, these results suggest that tissue microenvironments play a major role in determining the character of local T cell infiltrates via their ability to import and retain memory/effector subsets selectively or, more generally, depending on the intensity of local inflammatory stimuli.     

Expression of perforin and cytolytic potential of human peripheral blood lymphocyte subpopulations.

To verify the physiological role of the pore-forming protein perforin in vivo, its expression in subpopulations of human peripheral blood lymphocytes was examined by immunocytochemical staining and their cytolytic potentials compared. In addition to NK cells and gamma delta T cells, which uniformly expressed abundant perforin in their cytoplasmic granules, only a small subpopulation of CD8+ alpha beta T cells contained perforin, namely the CD11b+ subset. However, in vitro activation with an anti-CD3 antibody and IL-2 induced perforin expression in approximately 50% of the CD8+CD11b- T cells and also in a small subset of CD4+ T cells. A distribution of perforin in CD8+ and CD4+ T cells, similar to in vitro activated T cells, was observed in fresh peripheral blood lymphocytes from infectious mononucleosis patients. In all instances, the expression of perforin correlated with the cytolytic potential of these subpopulations. The results strongly suggest that perforin plays a role in the manifestation of cytotoxic activity in vivo.