血清白介素8固相放射免疫法的建立及应用

本方法将兔抗人白介素8(IL-8)特异性抗体IgG包被塑料试管内壁,建立了一种快速、简便、高灵敏、特异的固相竞争放射免疫分析法(RIA)测定人血清中的IL-8.标准曲线范围为0.2～9.6ng/mL,最小检出值和正常值分别为0.16 ng/mL和0.30±0.05ng/mL.批内CV%为6.8%,批间CV%为9.6%.本文所建的固相RIA法与液相RIA法平行测定58份样品的IL-8浓度(0.26～3.56 ng/mL),经统计学处理,两者之间具有良好的直线相关(r=0.954,P<0.001,Y=0.994X).表明本文建立的固相RIA法可以代替液相RIA法测定血清IL-8浓度,并适用于大批样品和自动化检测.     

HCG放射免疫分析与电化学发光分析的比较

2 2　重复性测定　分别用两种方法对各自的质控 1、质控 2浓度样本进行 10个批次以上的HCG测定。RIA法批内变异系数分别为 8 6 2 %、8 73% ;批间变异系数分别为14 38%、9 0 9%。ECLIA法批内变异系数分别为 3 84 %、3 2 9% ;批间变异系数分别为 5 90 %、5 31%。3　讨论83份受检者用两种方法测出血清HCG结果的相关分析表明 ,放射免疫分析和电化学发光分析测定重复性均在允许范围内 ,重复性测定结果表明ECLIA法明显优于RIA法可达到批内CV <4 % ,批间CV <6 %。其原因可能为ECLIA法为全自动操作 ,保证各次实验条件一致 ,且方法学本身和试剂盒质量均优于RIA所致。RIA法系手工操作 ,易受操作者情绪、熟练程度等多方面的影响。两方法所测结果呈显著正相关 ,r =0 .84 9。ECLIA法未孕健康妇女HCG测值低于RIA法 ,而孕妇及患者则明显高于RIA法 ,ECLIA法最低可测值为 0 1U/L ,显示其灵敏度明显高于RIA法。两方法均能满足临床需要。ECLIA法灵敏、准确但价格昂贵。RIA法成熟、便宜、易于开展。     

双抗体夹心ELISA检测人血清生长激素

本文用两株高亲和力,特异性好的hGH单克隆抗体(McAb),建立了高灵敏度的人血清生长激素(GH)ELISA双抗体夹心法。方法灵敏度为0.05～0.1μg/L,批内、批间变异系数分别为6.1％,11.4％。稀释度试验线性关系好(r=0.99),且通过原点。本法与放射免疫分析法(RIA)结果之间相关性好(r=0.92),与其他垂体激素皆无交叉反应。用本法测定了20名正常儿童,18名正常成年人,10例肢端肥大症,8例GH完全缺乏性侏儒症患者血清hGH基础值,说明本法灵敏,方便,能够满足临床要求。     

血清及胆汁SIgA夹心EIA测定法

本SIgA夹心酶免疫(EIA)定量分析法是以抗人分泌成分(SC)抗体包被固相载体、辣根过氧化物酶(HRP)标记抗人IgA抗体的Fab′片断作为酶标抗体。本方法灵敏度达O.625ng/孔,特异性强,批内变异系数和批间变异系数分别为5.8～9.3％和6.2～9.2％,回收率为99.6～108.7％,与相应的RIA法高度相关(r=0.961),标本用量甚微,2～4μl血清就可测定。用本方法测定117例正常成人血清,SIgA正常值为2.98～18.15μg/ml(8.04±3.60μg/mld);16份“T”管胆汁标本测定结果为40.8±25.0μg/ml。     

塑料试管固相放射免疫法测定甲胎蛋白

本文将甲胎蛋白(AFP)特异的抗体IgG包被在塑料管内壁,建立了一种快速、简便、高灵敏、特异的固相竞争放射免疫分析(RIA)法测定AFP。标准曲线范围为10～800ng/ml,最小检出值和正常值均<10ng/ml。批内CV％为7.1％,批间CV％为10.3％。本文与液相RIA法平行测定61扮样品的AFP浓度(10.1～3030ng/ml)。经统计学处理,两者之间具有良好的直线相关,表明本文建立的方法可以替代液相RIA法测定AFP,并适用于大批样品和自动化检测。     

β-m RIA在肝硬化、肝癌中的诊断价值

我们用放射免疫方法检测了36例肝硬化及33例肝癌患者血清β_2-m。现报告如下。材料和方法一、病例选择:经B超、CT、组织活检、内窥镜检查已确诊的肝癌病人33例(男24例,女9例),肝硬化36例(男25例,女11例),另以健康人48例作为对照。二、β_2-m RIA:北方免疫试剂所生产按说明书操作。三、重复性与回收试验:批内变异系数(n=10次)5.0～7.3％,批间变异系数9.2～11.1％,回收率     

Leptin固相放射免疫分析法的建立

目的：研究瘦素（Leptin）固相放射免疫分析法的建立。方法：将提取的兔抗人Leptin特异性抗体IgG,包被在活化的塑料试管内壁,建立了简便、快速、高灵敏、特异的固相竞争RIA,测定人血清Leptin。结果：标准曲线范围为（0.5～24）ng/ml;测定69例健康人血清正常值为（3.68±1.46）ng/ml;最小检出值为0.38ng/ml,批内CV%为5.6%,批间CV%为8.8%;回收率为92%。本文所建方法与液相RIA标准曲线具有良好的平行性;使用两种方法平行测定88份血清Leptin浓度（1.00～7.68）ng/ml,经统计学处理两者之间具有良好的直线相关（r=0.987,P〈0.001,Y=0.977X）。结论：所建立的Leptin固相放射免疫分析法为科研及临床病人血清Leptin浓度的测定提供了一种新的检测方法。     

抗孕酮单克隆抗体的制备与鉴定及其初步应用

目的:获得一株特异性强,灵敏度高的抗孕酮单克隆抗体,用辣根过氧化物酶标记孕酮-11α-羟基孕酮半琥珀酸酯制成酶标记物,建立酶联免疫分析(ELISA)方法,用于检测人血清中孕酮含量。方法:用免疫原11α-OH-孕酮-BSA免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术,得到14株抗孕酮单克隆抗体;用反射免疫分析(RIA)方法测定抗孕酮单克隆抗体的亲和常数和交叉反应率。结果:获得的14株抗孕酮单克隆抗体具有较高的亲和性和较小的价差反应率;建立ELISA方法学的灵敏度为0.12 ng/ml;批内变异系数为7.5%～11.4%;批间变异系数为:8.2%～12.1%;回收率93.8%～124.7%;高值临床样品系列倍比稀释后,测定值与稀释度呈线性相关,相关系数为r=0.995 7;与全自动化学发光测定的临床样品值比对结果较好,线性方程为y=0.789 4x+0.760 0,r=0.912 6。结论:方法学鉴定结果符合免疫分析的基本要求。     

游离三碘甲状腺原氨酸酶免疫分析

将三碘甲状腺原氨酸（T3）与β－D半乳糖昔酶联结，制成T3-酶联结物（T3－E）。用T3－E作为示踪剂建立了游离T3（FT3）酶免疫分析（EIA）。本法灵敏度为0.29pmol／L，批内和批间变异系数分别为7.6％－8.7％和7.8％～14.9％，与二碘甲状腺原氨酸（T2）、反T3（rT3）和甲状腺素（T4）的交叉反应率分别为9.7×10-4、1.1×10-4和3.1×10-5。本法与FT3放射免疫分析（RIA）相关性好（r=0.91，P＜0.01）。用本法测定了36名正常人、16名健康孕妇、15例甲亢患者和15例甲低患者的血清中FT3值，其结果与临床相符。     

尿游离皮质醇化学发光免疫分析

目的 :应用IMMULITE化学发光系统测定尿游离皮质醇并进行评价。方法 :尿液以二氯甲烷抽提后行化学发光免疫分析。结果 :抽提回收率为 (92 7～ 10 5 33) % ,平均为 97 74 % ;稀释试验O/E比值为 87 9～ 10 7 9,平均为 10 0 76 % ;批内变异系数分别为 9 4 %、3 7%、8 1% ,平均 7 1% ,批间变异系数为 7 7%、5 7%、9 7% ,平均 7 7% ;4 2份样本结果分析本法与RIA相关性好r =0 .90 5 (P <0 .0 1) ;正常人参考范围(17 34～ 116 0 2 ) μg/2 4h。结论 :本法具有良好的准确性、健全性和重复性 ,适用于临床常规测定。