细胞凋亡与生殖

关于细胞凋亡的一般特点及细胞凋亡与疾病的关系,作者已有综述［１,２］,本文就细胞凋亡与生殖的关系作一综述。１细胞凋亡是生殖调节的机制之一。精原细胞是具有高度增殖能力的细胞,精原细胞不断分裂繁殖,再经两次成熟分裂,最后经变态成为精子。在这一过程中又不断有生精细胞的退化死亡。睾丸中多达７５％的生精细胞要凋亡,这或许是清除多余的或有缺陷的生殖细胞的一种机制［３］。睾丸就是通过精原细胞不断地分裂、分化,同时过量的生精细胞又不断地凋亡,调节精子发生。Ｈｉｋｉｍ等［４］报告人生精细胞的凋亡有种族差异,中国人…     

睾丸波形蛋白表达与生精细胞凋亡的关系

睾丸的生精上皮具有高度增殖能力,生精过程中细胞增殖与凋亡的动态平衡,对于维持精子的生成的数量和质量具有重要的作用。外来化学毒物可以直接引起睾丸损伤,导致生精细胞过量凋亡,从而导致精子生成减少。生精细胞凋亡时细胞骨架蛋白改变的研究成为一个热点,睾丸波形蛋白表达发生了异常改变,但睾丸波形蛋白表达与生精细胞凋亡的相关性还需进一步研究。     

小鼠生精细胞增殖与凋亡的加龄变化研究

精子发生涉及生精细胞的增殖与凋亡等过程。精子发生中 ,约占潜在成熟精子总数 75 %的生精细胞退化。生精细胞退化通过细胞凋亡实现。本研究采用免疫细胞化学、凋亡细胞原位检测、体视学分析等技术方法对胚胎 15天至生后 10月小鼠生精细胞的增殖、凋亡进行了较系统的研究。选用健康昆明种雄性小鼠 ,分为胚胎 15、18天 ,生后 1、3、5、7天 ,2、3、4、6、8周及 6、10月 13组。增殖细胞核抗原 (PCNA)免疫细胞化学标本用 Bouin液固定 ,免疫细胞化学 SP法染色 ,多聚甲醛固定的标本用于凋亡细胞原位检测。结果表明 :胚胎18天到生后 3天 ,生精小…     

精原干细胞的生物学特征

哺乳动物生精上皮是由高度复杂而排列有序的细胞群落组成，其生殖细胞在有丝分裂、减数分裂及减数分裂后细胞中经历着生成精子的变化过程。目前可利用动物模型研究精原细胞分化的停止和再启动，以探讨精原干细胞再生和分化的控制因素。生殖细胞凋亡是精子形成过程中不可避免的环节，其调节机制的研究已取得显著的进展。另外，精原干细胞的移植今后可能有重要的实际应用。     

小鼠精子发生各阶段表达的睾丸相关基因

精子发生是由原始生殖细胞经过一系列复杂的变化,最后分化形成成熟精子的过程.在精子发生的不同阶段,睾丸相关基因的表达及调控具有严格的时间、空间特异性.本文对近年来新发现的小鼠生精和非生精细胞中睾丸相关基因作一综述,以进一步了解生精过程的分子机制.     

PIAS2蛋白和生精细胞凋亡在无精子症中相关性的研究

目的 研究PIAS2蛋白和生精细胞凋亡在无精子症中的作用。方法 选取2020年3月至2021年11月体检的健康男性中的30例,记为A组,同期选取就诊的无精子症患者30例,记为B组,检测两组睾丸组织中PIAS2蛋白和生精细胞凋亡情况,评估并分析其在无精子症中的作用。结果 与A组相比,B组睾丸体积及睾丸取精阳性率显著降低;与A组相比,B组睾丸组织中的PIAS2蛋白表达显著降低;与A组相比,B组生精细胞凋亡显著升高;PIAS2蛋白表达与睾丸体积及取精阳性率呈正相关关系;生精细胞凋亡与睾丸体积及取精阳性率呈负相关关系;PIAS2蛋白表达与生精细胞凋亡呈负相关关系;PIAS2蛋白检测对无精子症诊断的灵敏度为82.31%、特异度为77.26%、AUC值为0.826、约登指数为0.59,生精细胞凋亡检测对无精子症诊断的灵敏度为81.54%、特异度为79.25%、AUC值为0.844、约登指数为0.61。结论 PIAS2蛋白表达和生精细胞凋亡与睾丸体积及取精阳性率存在相关性,对无精子症疾病具有一定的诊断价值。     

精原干细胞冷冻保存后再移植的生精功能

背景:精原干细胞的冷冻保存在男性不育治疗方面具有潜在的临床应用价值,但冷冻保存过的精原干细胞移植后,其精子发生过程及生精能力目前尚不完全清楚。目的:观测精原干细胞冷冻保存后移植的生精功能。方法:采用复合酶消化、差速贴壁结合非连续性Percoll密度梯度离心的方法获取雄性SD大鼠及雄性C57BL/6小鼠精原干细胞;以雄性BALB/c裸小鼠为受体,出生后6周予腹腔注射白消安破坏其内源性生精功能。将供体精原干细胞分为冷冻保存组与非冷冻保存组,分别以曲细精管微注射的方法异种移植精原干细胞,采用形态学方法观察生精过程;采集附睾精液,观察精子形态并进行体外受精实验。移植后1,2,3个月取受体睾丸组织,采用免疫组化SABC法检测α6-Integrin蛋白表达情况;移植后1周、1个月、3个月取受体睾丸组织,应用扫描电镜观察生精过程。结果与结论:冷冻保存前的精原干细胞活性率高于冷冻保存后的细胞活性率(P0.01)。冷冻保存组与未冷冻保存组受体睾丸组织精原细胞膜和细胞质中均有α6-Integrin的阳性表达,随时间增加而增加,两组间α6-Integrin蛋白的表达无统计学差异;SD大鼠精原干细胞移植后能在BALB/c裸小鼠生精上皮中克隆增殖,并能分化形成大鼠形态特征的精子,在小鼠精子发生巢内既有大鼠来源的精子发生,又有小鼠内源性精子发生,其供体来源的精子数量较小鼠自身来源的精子数量多。通过体外受精实验提示移植后的精原干细胞在受体内增殖分化形成的精子功能正常,具有受精的能力。结果说明采用常规方法冷冻保存的精原干细胞,移植后能在受体生精上皮中克隆增殖,并能分化形成成熟的精子。     

饮酒与男性不育的关系研究

目的探讨长期高浓度过量饮酒者精液中一氧化氮（NO）含量其精子质量和生精细胞凋亡与不育的关系。方法随机将146例精液分为5组,采用硝酸还原酶法特异地将NO代谢产物硝酸盐（NO3^-）测还原成亚硝酸盐（NO2^-）总量代表NO水平。用脱氧核苷酸末端转移酶（TdT）介导的缺口末端标记（TUNEL）法和双目光学显微镜,分别检测和观察生精细胞的凋亡率及形态结构。用SQA-V全自动精子质量分析仪,测定精子质量。结果未饮酒生育组精液中NO的含量为（54.81±11.45）μmol/L,生精细胞的凋亡率（4.52±1.23）%,精子质量活率（80.24±0.17）%、活力a＋b（78.32±0.12）%、畸形率（5.30±0.13）%,与长期高浓度过量饮酒各组结果相比,均呈显著性差异（P〈0.01,见表2）。长期高浓度过量饮酒各组NO的含量和生精细胞的凋亡率呈显著的正相关（r=0.93）。凋亡的生精细胞核染色质浓缩于核周形成新月形,核裂解形成凋亡小体。结论长期高浓度过量饮酒者精液中NO的含量和生精细胞的凋亡率均升高,精子质量低下。提示长期高浓度过量饮酒可致机体NO过度产生而促使生精细胞凋亡致男性不育的因素之一。     

染砷大鼠睾丸生精细胞凋亡的变化

目的观察不同剂量的三氧化二砷（As2O3）对成年大鼠生精细胞凋亡的影响。方法40只健康雄性SD大鼠随机分成4组，分别为0．375mg／kg、0．75mg／kg、1．5mg／kg3个染毒组和对照组，灌胃法连续给药16周后对各组大鼠进行睾丸脏器系数、精子头计数，并计算每日精子生成量（DSP）。采用甲基绿—派诺宁染色法和TUNEL原位细胞杂交方法检测大鼠生精细胞凋亡情况。结果①中剂量组（0．75mg／kg）和高剂量组（1．5mg／kg）睾丸精子头计数和DSP均低于对照组（P〈0．05）；②与对照组相比，中剂量组和高剂量组生精细胞凋亡指数（AI）均显著升高（P〈0．01）；③生精细胞凋亡指数与每日精子生成量呈负相关（r=-0．563，P〈0．01）。结论一定剂量的As2O3可通过促进生精细胞凋亡而导致精子生成量的减少，产生生殖毒性。     

E-cadherin在精子发生及精卵融合过程中的作用

精子发生是在睾丸内由生精细胞经过一系列复杂和系统的变化,最终成为精子的过程。精子在曲细精管内生成,随睾丸分泌物进入附睾内逐渐成熟;排出的精子进入女性生殖道获能并粘附在输卵管壁上,等待卵细胞经过并与其相遇,精子通过其顶体酶作用穿过透明带,与卵细胞结合并融合完成受精过程。精子发生、成熟、获能与受精,任一环节出现障碍,均会影响男性生育能力。E-cadherin是钙离子依赖性的介导细胞间粘附和信号转导的跨膜糖蛋白,位于精子头部,覆盖于整个顶体赤道板和顶体后区,参与精子发生与精卵融合过程,保证男性的正常生育能力。     

RNA N6-甲基腺苷(m6A)修饰相关酶在哺乳动物精子发生中的研究进展

N6-甲基腺苷(m6A)核酸修饰是近10年来研究较多的一类表观修饰，RNA通过经典m6A修饰蛋白“Writers”(METTL3/14/WTAP等)、m6A去修饰蛋白“Erasers”(FTO和ALKBH5)和m6A识别蛋白“Readers”(YTHDC1/2、YTHDF1/2/3等)组成的协同调节体系进行转录后核酸m6A修饰、去修饰和识别结合，进而调控转录本下游命运。精子发生是雄性哺乳动物性成熟和维持生育能力的重要过程，涉及生精上皮支持细胞、间质细胞和精原细胞等增殖分化和维持生精微环境过程。多项研究表明m6A调节体系参与哺乳动物精子发生进程，异常的m6A修饰水平和m6A调节体系失衡均会导致睾丸发育异常、精子发生异常和雄性不育。本文综述了精子发生过程中m6A修饰相关酶的作用，深入分析m6A差异修饰转录本之于正常精子发生的作用，对认知哺乳动物精子发生和解析临床生精障碍的分子机制具有重要意义。     

小鼠精子发生与相关基因调控研究进展

精子发生是一个生殖细胞不断增殖和分化的特殊历程,此过程中精原细胞进行自我更新和分化,产生的精母细胞经历2次减数分裂形成了圆形精子,而圆形精子最终经过形态和细胞学变化成为长形精子。文章阐述了这一复杂而有序的过程中受生精细胞内众多基因的调节,这些基因具有时间和空间上阶段性表达特征,在同源重组、染色体联会、染色质浓缩和精子头尾形成等精子发生的特殊过程中起决定性作用。并就近年来许多基因在精子发生中重要作用进行综述。     

生精细胞凋亡及其调控

在细胞生物学领域,细胞凋亡的实现调控着细胞死亡和增殖的平衡,故具有重要的生物学意义。生精细胞的凋亡在生精过程中具有极其重要的作用。近年来,睾丸内细胞凋亡的研究在国内外已成为热点之一。本文将就生精细胞凋亡的的阶段性、生理意义、形态特点、激素调节、基因调控等诸多方面的研究概况作一综述。     

对比研究不同种抗生素对小鼠生精细胞的影响

目的为了对比研究不同种抗生素对小鼠生精细胞数量、活性和凋亡率的影响。方法用林可霉素(4.989 m L/kg)、阿莫西林(62.5 mg/kg)、头孢克肟(4740.8 mg/kg)、氧氟沙星(1175.55 mg/kg)4种不同种抗生素,作用于60日龄小鼠,取睾丸做石蜡切片、HE染色;用血球计数板细胞计数法进行精子数量计算,用TUNEL法检测细胞凋亡的变化,并进行统计学分析。结果阿莫西林、头孢曲松、氧氟沙星这3种抗生素对小鼠生精细胞数量、活性和凋亡率影响较对照组而言差异无显著性,而林可霉素对小鼠生精细胞数量减少、活性减低和凋亡率增加的影响较对照组差异有统计学意义(P0.05)。结论发现4种抗生素中林可霉素对小鼠生精细胞数量、活性和凋亡率有影响。     

人类精子DNA损伤与修复的研究进展

人类精子DNA是遗传信息的载体。其损伤会导致胚胎发育中断或自然流产,自然受孕率下降,产生先天性畸形儿等。一般认为精子DNA损伤与精子发生过程中的核蛋白组型转换异常、氧化应激、细胞异常凋亡、外界刺激等有关。目前,人们普遍认为发育成熟的精子丢失了DNA损伤修复能力,精子DNA损伤后主要依赖于受精卵的修复系统修复。     

细胞周期调控基因在精子发生中的作用

精子发生是一个特殊的雄性生殖细胞的分化过程,也是一个特殊的细胞周期运行过程。其 中,细胞周期相关基因的缺失或过度表达主要影响生殖细胞使其不能发育为成熟精子。本文从细胞周 期正、负调控基因和细胞周期的调控途径这三个方面综述了细胞周期调控基因在精子发生过程中的表 达和蛋白定位,为深入了解生精过程的分子机制奠定基础。     

人精液中生精细胞染色体两种制备方法

人精液中生精细胞染色体两种制备方法庞铁石人减数分裂期（生精细胞和精子）染色体分析是遗传学、组织胚胎学、细胞生物学和生殖生物学研究的重要手段。以往只能采用精子－地鼠卵体外受精法检查成熟精子单倍染色体。相比之下，生精细胞（精原细胞、初级／次级精母细胞、精...     

慢性镉中毒小鼠生精上皮的超微结构观察和立体定量分析

本用透射电镜观察并结合立体定量法研究了慢性镉中毒时小鼠睾丸生精上皮的超微结构。结果为：（1）支持细胞明显受损，细胞核增大，细胞器出现变性变化，有的支持细胞呈现坏死现象，（2）各级生精细胞有不同程度损伤，生精小管管腔内常见未成熟精子和畸形精子。（3）支持细胞的细胞连接被破坏，血－生精小管屏障部分瓦解，本还对慢性镉中毒时影响精子发生的机理进行了初步探讨，认为支持及其细胞连接的结构和功能异常可能是生精障碍的主要原因。     

褪黑激素对小鼠睾丸生精细胞凋亡和睾丸间质细胞nNOS表达的影响

目的：观察外源性褪黑激素(MT)对睾丸生精细胞凋亡和nNOS表达的影响，探讨MT诱导生精细胞凋亡的可能机制。方法：20d和30d小鼠，应用化学发光法检测血清睾酮浓度，TUNEL测定生精细胞凋亡，免疫组化，SABC法观察nNOS在睾丸中的表达。结果：20d和30d实验组血清中睾酮水平明显下降，TUNEL阳性生精细胞数显著增多，TUNEL阳性生精细胞数与睾酮浓度呈负相关；20d实验小鼠中睾丸间质nNOS阳性细胞数与对照组相比明显减少，且与睾酮浓度呈正相关，而与TUNEL阳性生精细胞数呈负相关。结论：MT具有促进生精细胞凋亡的作用，与睾酮分泌受抑制有关；青春期前MT引起生精细胞凋亡可能还与nNOS表达有关。     

细胞色素C和波形蛋白在染锰大鼠睾丸表达及对精子发生的抑制作用

目的研究氯化锰对大鼠生精细胞细胞色素C(cyto-c)和支持细胞波形蛋白(VM)表达的影响及对生精功能的抑制效应。方法雄性SD大鼠随机分为空白对照组,低剂量(15 mg/kg Mn Cl2)和高剂量(30 mg/kg Mn Cl2)组,8只/组。Mn Cl2组分别染锰4周和6周,空白对照组给予等容生理盐水,给药途径均为腹腔注射,取睾丸免疫组织化学(SABC)法检测生精细胞cyto-c和VM表达,测定睾丸脏器系数,取附睾检测精子数量和精子畸形率。结果与空白对照组比较,各染锰组生精细胞cyto-c阳性细胞率和支持细胞VM阳性细胞率及各生精功能指标均显著降低,并呈一定的时间-效应关系和剂量-效应关系。各组大鼠精子数量与cyto-c阳性细胞率和VM阳性细胞率均呈正相关。结论锰可诱导大鼠生精细胞cyto-c和支持细胞VM表达,抑制生精细胞增殖,产生生殖毒性效应。