X射线照射后鼻咽癌细胞系HNE1多药耐药基因MDR1的表达研究

目的探讨X射线照射后鼻咽癌细胞系HNE1产生多药耐药的机制。方法利用逆转录PCR检测照射前后HNE1细胞MDR1的基因表达变化，利用Western印迹检测照射前后MDR1基因编码蛋白P-gp的表达变化。结果鼻咽癌细胞系HNE1照射后MDR1基因表达增加，P-gp蛋白表达增加。结论X射线可以诱导鼻咽癌细胞系HNE1 MDR1基因的表达，这可能是照射后鼻咽癌细胞耐药的重要原因之一。     

异长春花碱对耐顺铂人鼻咽癌细胞多药耐药的逆转作用及其机制

目的:研究异长春花碱对耐顺铂(DDP)人鼻咽癌细胞(CNE2/DDP)多药耐药的逆转作用及其机制。方法:以对数生长期的CNE2/DDP细胞为对象,检测0.1、1、5、10、50、100μmol/L异长春花碱作用24 h后细胞的增殖抑制率,与空白对照组比较考察5、10μmol/L异长春花碱对细胞耐DDP的逆转倍数(RF)、细胞内罗丹明123的含量、多药耐药基因1(MDR1)、多药耐药相关蛋白1(MRP1)mRNA及其蛋白表达和磷酸化c-Jun氨基末端激酶(p-JNK)蛋白表达、激活蛋白1(AP-1)活性。结果:异长春花碱与剂量呈正相关地抑制CNE2/DDP细胞的增殖;5、10μmol/L异长春花碱对细胞耐DDP的RF分别为2.81、8.38倍;与空白对照组比较,细胞中罗丹明123含量分别提高了2.16和2.79倍(P<0.05),MDR1、MRP1 mRNA及其蛋白,p-JNK蛋白和AP-1活性均明显降低(P<0.05)。结论:异长春花碱可逆转CNE2/DDP细胞对DDP的耐药性,降低细胞中MDR1、MRP1的表达,其机制可能与抑制JNK磷酸化、下调AP-1活性有关。     

人鼻咽癌细胞CNE2对各种抗肿瘤药敏感性试验

目的 了解人鼻咽癌细胞ＣＮＥ２对各种抗肿瘤化疗药的敏感性。方法：体外噻唑蓝还原（ＭＴＴ）试验法。结果：１３种抗肿瘤药对ＣＮＥ２细胞均有明显的杀伤作用,其中１０种抗肿瘤药的半数抑制浓度（ＩＣ５０）在２０μｍ／ｍｌ以下,另３种药的ＩＣ５０为２７．３～５３．９１μｇ／ｍｌ。结论：人鼻癌细胞ＣＮＥ２对临床应用的各类抗肿瘤药是敏感的。     

P糖蛋白与细胞凋亡及肿瘤多药耐药的关系

综述P糖蛋白与细胞凋亡及肿瘤多药耐药的内在联系及其可能机制。许多抗肿瘤药物可通过诱导细胞凋亡，杀伤肿瘤细胞，而细胞膜上P糖蛋白具有多重生理功能，可通过其药物外排功能和直接或间接参与细胞凋亡的调控，导致多药耐药性的产生。     

环氧合酶-2及其抑制剂与肿瘤多药耐药

肿瘤多药耐药是目前化疗失败的最常见且最难解决的问题，环氧合酶-2参与肿瘤的发生发展，近年来一些研究表明，环氧合酶-2与肿瘤多药耐药密切相关，并且通过多条途径参与肿瘤多药耐药的发生，该文对环氧合酶．2及其抑制剂与肿瘤多药耐药的关系做一综述。     

~(99m)Tc-MIBI评价2-脱氧-D-葡萄糖对鼻咽癌耐药株多药耐药的逆转作用及机制

目的探讨2-脱氧-D-葡萄糖(2-DG)对鼻咽癌顺铂耐药株细胞(HNE-1/DDP)多药耐药(MDR)的逆转机制,观察99m锝-甲氧基异丁基异腈(99mtechnetium-methoxyisobutylisonitrile,99mTc-MIBI)细胞内的摄取变化,评价2-DG逆转肿瘤细胞多药耐药的效果。方法γ计数器检测不同浓度2-DG作用下HNE-1/DDP细胞对99mTc-MIBI的摄取清除情况以及2-DG浓度为10 mmol·L-1时HNE-1及HNE-1/DDP细胞对99mTc-MIBI的摄取清除情况。测定2-DG作用下HNE-1/DDP细胞内ATP值。Western blot检测2-DG作用下HNE-1/DDP细胞内P糖蛋白(P-gp)、多药耐药相关蛋白(MRP)表达。溴化丙啶(PI)单染检测顺铂(DDP)单独及联合2-DG作用下HNE-1/DDP细胞的凋亡情况。结果 HNE-1/DDP细胞对99mTc-MIBI的清除率为54.8%,高于HNE-1细胞的清除率-41.3%(P<0.01),2-DG(10 mmol·L-1)作用后HNE-1/DDP细胞的清除率为-203.7%,较前明显降低(P<0.01)。HNE-1/DDP细胞在2-DG作用下ATP值为对照组的55.69%,且P-gp、MRP蛋白表达较对照组减少。DDP联合2-DG(10 mmol·L-1)作用24 h后HNE-1/DDP细胞凋亡率为49.4%,高于单独使用DDP时HNE-1/DDP细胞的凋亡率(22.5%)。结论99mTc-MIBI可有效检测HNE-1/DDP细胞多药耐药现象及评价2-DG的逆转效果,2-DG逆转机制可能与细胞内ATP生成抑制及相关转运蛋白表达减少有关。     

尼美舒利诱导人鼻咽癌CNE2细胞凋亡作用

目的观察尼美舒利（NIM）诱导人鼻咽癌CNE2细胞凋亡作用。方法0,0.05,0.1,0.2,0.4,0.8 mmol&#8226;L－1NIM作用于体外培养的CNE2细胞株,光学显微镜观察细胞形态和数量变化,透射电子显微镜观察细胞形态和结构变化,噻唑蓝（MTT）法检测细胞悬液吸光度值,流式细胞术（FCM）检测细胞周期分布和凋亡率,蛋白免疫印迹反应（Western Blot）检测细胞环氧化酶2（COX 2）蛋白表达情况。结果不同浓度NIM作用3 d后,CNE2细胞皱缩,数量减少,与药物浓度呈正相关;透射电镜下,细胞形态结构随NIM浓度增加而出现不同程度破坏和死亡征象;相同作用时间下,NIM浓度越高,吸光度值越低;FCM结果显示,NIM各剂量组均在G0/G1峰前出现一个亚二倍体峰（凋亡峰）,随着NIM浓度增高,G0/G1期细胞所占比例逐渐下降,G2/M期细胞比例升高,凋亡率逐渐增高;Western Blot结果显示,随着NIM浓度增加,COX 2蛋白表达量逐渐减少。上述结果均与NIM浓度相关,经统计学处理,与对照组和相邻前一浓度组比较,均差异有统计学意义（P＜0.05）。结论NIM能诱导人鼻咽癌CNE2细胞凋亡,且呈剂量依赖性,该作用与抑制COX 2有关。     

大黄素对人胆管癌多药耐药细胞QBC_（939）/ADM的耐药逆转作用

目的探讨大黄素（Emodin,EM）对人胆管癌多药耐药细胞QBC939/ADM的耐药逆转作用。方法细胞生长周期、凋亡率采用流式细胞术（FCM）,多药耐药P糖蛋白（P-gP）以免疫组织化学（SP）法检测。结果阿霉素（ADM）、紫杉醇分别与EM联合作用于人胆管癌多药耐药细胞QBC939/ADM的凋亡率比单独作用有显著提高。细胞周期分布显示：ADM、紫杉醇分别与EM联合作用于人胆管癌多药耐药细胞QBC939/ADM,使QBC939/ADM阻滞于G2/M期的细胞数明显增加。EM和紫杉醇联合作用后,人胆管癌多药耐药细胞QBC939/ADM中多药耐药P糖蛋白（P-gP）的表达由72.00%降低到46.00%（P〈0.01）。结论EM对QBC939/ADM细胞的多药耐药性有逆转作用。其作用机理可能与人胆管癌细胞P-gP的表达有关,通过与化疗药物竞争性结合P-gP的结合位点发挥疗效。     

孕烷X受体与肿瘤多药耐药

多药耐药（MDR）是肿瘤化疗失败的主要原因之一。MDR的产生主要由ATP结合盒（ABC）转运蛋白超家族的跨膜蛋白所引起,其中P-糖蛋白及其编码基因mdr1的过表达是MDR产生的最主要机制。研究MDR的产生机制,寻找诱发mdr1表达的诱因并阻断其表达,是克服肿瘤多药耐药性行之有效的方法。近来研究发现,孕烷X受体（PXR）可介导mdr1的表达,活化的PXR诱导MDR1的表达。因此,特异性地阻断PXR的活化可抑制mdr1的表达,从而克服多药耐药性。现已发现多种物质可作为PXR抑制剂或拮抗剂。本文即对核受体PXR与MDR、PXR抑制剂及拮抗剂的研究现状做一介绍,以期为克服肿瘤多药耐药提供参考。     

紫杉醇诱导的人白血病CCRF-CEM多药耐药细胞模型的建立

目的建立稳定的紫杉醇(paclitaxel)诱导的人肿瘤多药耐药细胞系,并对其生物学特点进行评价。方法用亚致死浓度(1/50IC50值)的紫杉醇连续诱导对化疗药物敏感的人急性T淋巴细胞白血病CCRF-CEM细胞,使其成为对紫杉醇耐药的CCRF-CEM/paclitaxel细胞,同时观察CCRF-CEM/paclitaxel细胞对柔红霉素(daunorubicin)和长春碱(vinblastine)的交叉耐药;用相应的单抗和FITC标记的二抗与细胞孵育后,用流式细胞仪分别检测细胞表面和细胞总P糖蛋白(P-gp)、多药耐药相关蛋白1(MRP1)和肺癌耐药相关蛋白(LRP)等表达水平的变化,并用流式细胞仪检测细胞周期和细胞凋亡率的变化。结果CCRF-CEM/paclitaxel细胞传至第90代时,对紫杉醇产生了耐药,耐药倍数约为256.4倍;同时对柔红霉素和长春碱也产生了耐药,耐药倍数约为9.8和2.0倍。与CCRF-CEM细胞比较,CCRF-CEM/paclitaxel细胞表面P-gp和细胞总P-gp表达分别升高了18.8和14.4倍,MRP1和LRP分别升高了2.1和1.2倍;S期细胞比例由(48.3±1.2)%降低至(23.8±0.5)%,细胞凋亡百分率由(7.82±0.19)%减少至(2.47±0.37)%。结论成功建立了稳定的紫杉醇诱导的人CCRF-CEM/paclitaxel多药耐药细胞模型,该模型具有一般肿瘤多药耐药细胞的生物学特点。     

P糖蛋白介导的多药耐药逆转剂研究进展

本文报道了主要的Ｐ糖蛋白介导的多药耐药逆转剂，阐述了一些代表ＭＤＲ第二代逆转剂，具有逆转的高效性、广谱性和相对低毒性的药物，如ＳＤＺＰＳＣ８３３及Ｓ９７８８等的基本特征。     

消化道恶性肿瘤多药耐药的临床研究

目的 研究消化道恶性肿瘤化疗耐药与多药耐药基因MDR（p-gP）、谷胱甘肽转移酶（GST）、拓扑异构酶（TOPOⅡ）之间关系。方法 用免疫组化单克隆技术，定量分析P-gp、GST、TOPOⅡ在肿瘤组织中的阳性及阴性表达。结果 P-gp在恶性肿瘤中阳性表达率为39．6％，化疗耐药中占55．9％；GST在恶性肿瘤中阳性表达率为64．0％，化疗耐药中占76．5％；TOPOⅡ在恶性肿瘤中阳性表达率为54．0％，化疗耐药中占35．3％。结论 P-gp、GST、TOPOⅡ参与肿瘤耐药机制的形成。     

多药耐药基因的结构,功能及其表达调控

介绍了多药耐药基因的克隆、基因结构、在染色上的定位，其编码的Ｐ糖蛋白的功能及ｍｄｒ１基因表达调控的新进展，指出研究ｍｄｒ基因的表达调控，除了理论意义外，还能为防止多药耐药的产生提供新途径。     

蛋白激酶C与P—糖蛋白介导的肿瘤多药耐药

肿瘤细胞的多药耐药是化疗失败的重要原因，严重影响肿瘤的预后。蛋白激酶Ｃ是一族结构相近，具有异质性的同工酶，参与细胞信号传递，蛋白质的磷酸化等多种生理、生化及病理过程。近年来的研究表明，ＰＫＣ与Ｐ－糖蛋白介导的ＭＤＲ有关，ＰＫＣ可能通过调节ｍｄｒ１基因和Ｐ－ｇｐ而在ＭＤＲ中起作用，ＰＫＣ抑制剂在ＭＤＲ的逆转方面具有一定作用。     

肿瘤多药耐药逆转剂的研究进展

寻找高效、低毒、具选择性的多药耐药逆转剂是肿瘤化疗中需要解决的难题。本文介绍了P－糖蛋白对多药耐药的作用，并着重报道了一些新的多药耐药逆转剂，它们大多具有逆转的高效性和相对低毒性。本文对一些逆转剂的构效关系亦作了简要阐述。     

多药耐药糖蛋白p-糖蛋白研究进展

多药耐药糖蛋白介导的耐药机制是肿瘤细胞耐药机制非常常见的原因。多药耐药（multidrug resistance,MDR）是肿瘤细胞最重要的耐药形式之一,它是一种抗肿瘤药物出现耐药的同时,对其他许多结构不同、作用机制不同的抗肿瘤药物也产生耐药性,MDR包括天然性耐药和获得性耐药两种表型,天然性耐药是指首次使用化疗药物就产生耐药,而获得性耐药是指在化疗过程中产生耐药。     

卵巢癌多药耐药治疗的研究进展

卵巢癌化疗多药耐药(multidrug resistance,MDR)的发生和发展是多基因参与的极其复杂的过程,其发生机制目前尚不十分明确.既往的研究着重在开发小分子抑制剂靶向多药耐药基因编码的P-糖蛋白逆转多药耐药,但效果不佳.本文总结了近年来对卵巢癌多药耐药发生机制的研究进展以及克服卵巢癌治疗中MDR问题的新方案,包括新型的P-糖蛋白抑制剂,靶向肿瘤干细胞和微小核糖核酸(miRNAs),自噬信号通路调节等,为临床卵巢癌多药耐药的治疗提供参考.     

人骨肉瘤多药耐药细胞模型的建立

目的：建立人骨肉瘤细胞多药耐药亚系。方法：采用ADM间断冲击法，将MG－63暴露于ADM中，残留存活细胞克隆，扩增建系，并用FITC标记的P－gp抗体检测Mdr 1表达情况，用MTT，ABA法及流式细胞术检测肿瘤细胞的耐药特征。结果：本实验建立了六株P－gp表达阳性多药耐药细胞亚系：MG－63／R1，MG－63／R2，MG－63／R3，MG－63／R4，MG－63／R5，MG－63／R6。用免疫荧光术可以检测到P－gp的表达，用MTT可见各亚系细胞相对于亲本细胞对ADM耐药分别增至1.6,4.8,11.8,33,49.2,71.5倍。ABA法显示诱导产生的细胞亚系细胞内ADM累积能力明显下降，这说明Mdr1表达P－gp增加，并用维拉帕米拮抗P－gp的作用，可见细胞内ADM累积能力不同程度上升，柔红霉素荧光直方图可见肿瘤细胞的耐药程度越来越高。结论：MDR1／P170在骨肉瘤的多药耐药的特性上起着至关重要的作用，而且这些骨肉瘤多药耐药细胞亚系为进一步研究骨肉瘤多药耐药的生物学特征及发展新的逆转多药耐药的药物打下基础。     

外排型转运体介导的抗肿瘤药物多药耐药的研究进展

多药耐药（MDR）是指肿瘤细胞接触一种抗肿瘤药物后,也对其他多种结构不同、功能不同的抗肿瘤药物产生耐药性,其中外排型转运体所介导的MDR是其中至关重要的一部分。外排型转运体是指位于肿瘤细胞生物膜上的具有将抗肿瘤药物从细胞内外排到细胞外的转运体。已知的具有外排作用的转运体有P糖蛋白（P-gp）、多药耐药相关蛋白（MRP）、乳腺癌耐药蛋白（BCRP）和肺耐药蛋白（LRP）。综述这几种外排型转运体的一般性质并着重于阐述逆转这些转运体介导的多药耐药的药物及方法。