牛磺酸对大鼠移植胰腺缺血再灌注损伤的保护作用

目的:探讨牛磺酸在大鼠胰腺移植中对移植胰腺缺血再灌注损伤的保护作用及其机制.方法:采用大鼠胰十二指肠移植模型.Wistar大鼠30只随机分为三组(n=10):(1)对照组:CMU-1液保存6h再移植;(2)实验组A:CMU-1液 牛磺酸(5 mmol/L)保存6h再移植;(3)实验组B:CMU-1液 牛磺酸(10 mmol/L)保存6 h再移植(CMU-1液是本实验室配制的多器官保存液).于移植术后6h取静脉血作胰腺外分泌功能即血清淀粉酶测定,取胰腺组织作病理检查.通过免疫组化染色观察炎性细胞因子TNF-α及IL-1β表达情况.应用计算机图像分析系统测定其积分光密度值(IOD).结果:移植胰腺在通血后6h血清淀粉酶均升高,与对照组相比较,加入牛磺酸后淀粉酶升高较对照组降低(911.2±9.9,959.9±12.5 U/L vs 1239.5±68-3 U/L,P<0.05).随着牛磺酸浓度的增大其作用也显著.免疫组化结果显示,移植后6h胰腺组织TNF-α(12346.4±4933.69,16 016.33±4592.06 vs 22 039.71±4782.62,P<0.05及IL-1β(12 417.4±2222.9,1 5 047.68±4484.4 vs 19 284.46±3178.19.P<0.05)在各组均表达,但加入牛磺酸后能明显下调TNF-α及IL-1β的表达,各组内的差异具有显著性(P<0.05).光镜检查可见试验组的移植胰腺炎性改变明显减轻.结论:牛磺酸作为一种细胞保护剂能够抑制TNF-α和IL-1β的产生、抗细胞水肿,减轻胰腺缺血再灌注损伤,减轻胰腺炎症.     

慢性饮水砷暴露致小鼠肝纤维化作用的研究

目的 探讨慢性饮水砷暴露致小鼠肝纤维化的作用,为临床地砷病的防治提供实验动物模型.方法 小鼠分别自由饮用亚砷酸钠水(75、150、300 mg/L)连续10个月后处死,检测肝组织总砷含量和肝功能,H-E染色和Masson染色观察肝组织病理学变化,实时荧光定量PCR检测肝组织基质金属蛋白酶8(MMP-8)、基质金属蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)、Ⅲ型胶原(Col-3)mRNA的表达,免疫组化SABC法测定肝组织TGF-β蛋白的表达.结果 染砷大鼠肝组织中有明显的砷蓄积和不同程度的肝功能损害,染砷大鼠病理检查示小鼠肝组织出现肝细胞变性、坏死、再生、炎细胞浸润、有明显的纤维条索形成,肝组织中TIMP-1、Col-3 mRNA表达增强、MMP-8 mRNA表达降低、TGF-β蛋白表达上调,以饮用高浓度大鼠为著(P均＜0.05).结论 长期饮水砷暴露可刺激肝组织TIMP-1、Col-3、TGF-β的表达,导致肝纤维化发生,各剂量亚硝酸钠水均可复制出肝纤维化大鼠模型,尤其是300 mg/L.     

牛磺酸对高葡萄糖损伤血管内皮细胞的保护作用

目的探讨牛磺酸对高浓度葡萄糖(HG)损伤血管内皮细胞(EC)是否有保护作用及可能机制。方法以体外培养的人脐静脉内皮细胞为对象,研究了HG(20mmol/L)对EC产生的前列环素(PGI2)、一氧化氮(NO)和丙二醛(MDA)的影响及牛磺酸的干预作用。PGI2测定采用放射免疫法,而NO及MDA的测定则分别应用Griess法与Schuh法。结果HG明显降低EC的NO与PGI2生成,同时增加MDA的含量。而牛磺酸则能拮抗HG所致EC的NO与PGI2生成的减少,并能降低MDA。结论牛磺酸对HG损伤的内皮细胞有一定保护作用,其可能机制与牛磺酸能增加EC的NO与PGI2合成、降低MDA的产生有关。     

牛磺酸对阿霉素所致大鼠心肌损伤的保护作用

目的探讨牛磺酸(Taurine,Tau)对阿霉素(adriamycin,ADR)所致心肌损伤的保护作用。方法 Wistar大鼠60只,随机分为正常对照组、模型组(ADR组)、Tau剂量组(高400mg·kg-1.d-1、中200mg·kg-1.d-1、低100mg·kg-1.d-1),每组12只。除正常组外,其他各组腹腔注射ADR2.5mg·kg-1.w-1,连续4w,制备大鼠心肌损伤模型。各Tau剂量组腹腔注射ADR第2天灌胃给予相应剂量Tau,连续30d。应用自动生化分析仪测定血清中乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)、谷草转氨酶(GOT)含量,采用硫代巴比妥比色法测定丙二醛(MDA)含量,采用改良的黄嘌呤氧化酶法测定超氧化物歧化酶(SOD)含量,ELISA法测定转化生长因子β1(TGF-β1)及肿瘤坏死因子α(TNF-α)的含量。结果 Tau各治疗组的LDH、CK、GOT及MDA的含量明显低于ADR模型组;TGF-β1蛋白及TNF-α含量均低于ADR模型组(P0.001)。结论 Tau可通过提高SOD的活性,并抑制TGF-β1蛋白及TNF-α的表达对ADR所致心肌损伤发挥保护作用。     

积雪草苷对砷暴露所致小鼠脂肪肝肝损伤的保护作用研究

目的 研究积雪草苷对砷暴露所致小鼠脂肪肝肝损伤的保护作用。方法 选择60只SD小鼠,随机分为积雪草苷组、模型组、对照组,各20只,模型组、积雪草苷组均建立砷暴露所致脂肪肝肝损伤模型,对照组常规饮水,持续8周。而后给予积雪草苷组小鼠积雪草苷处理,并给予模型组、对照组小鼠等量生理盐水处理,持续4周。对比三组小鼠肝功能、肝指数,肝组织诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)及环氧合酶-2(Cox-2)蛋白表达,肝组织白细胞介素-1β(IL-1β)、IL-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达水平,以及超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)表达差异。结果 积雪草苷组、模型组小鼠均成功建立砷暴露所致脂肪肝肝损伤模型,积雪草苷组脂肪肝严重程度低于模型组(P<0.05)。积雪草苷组TC、TG、ALT、AST及肝指数,肝组织iNOS、Cox-2蛋白表达,肝组织IL-1β、IL-6、TNF-α水平均高于对照组,模型组TC、TG、ALT、AST及肝指数,肝组织iNOS、Cox-2蛋白表达,肝组织IL-1β、IL-6、TNF-α水平均高于积雪草苷组(P<0.05)。...     

砷对小鼠肝、肾毒性作用的研究

目的观察染砷对小鼠的肝、肾脏组织超氧化物歧化酶(SOD)水平、丙二醛(MDA)含量及细胞超微结构的影响,并初步探讨其作用机制.方法将小鼠随机分为高、中、低3个剂量组,采用喂饲法进行急性毒性实验,6周后检测肝、肾组织SOD活性和MDA含量并进行病理组织学检查.结果随染毒剂量增加,中、高剂量组肝脏和高剂量组肾脏中SOD活性降低(P＜0.01);而肝脏和肾脏中MDA含量均表现出逐渐增加的趋势病理组织学检查发现肝组织细胞病变和肾组织病变均有加重.结论提示随砷摄入量增加,小鼠肝、肾脏组织脂质过氧化水平增高,发生组织形态学的改变.     

牛磺酸对心肌细胞缺氧—再给氧损伤的保护作用

在心肌细胞缺氧－再给氧模型上，发现缺氧及再给氧后细胞膜荧光偏振度明显增加；线粒体，肌原纤维等结构受损；细胞内脂质过氧化物荧乐强度及荧光比率升高，上述变化再给氧组均比缺氧组更明显。     

牛磺酸对马兜铃肾损害保护作用的初步研究

目的：观察 磺酸对马兜铃肾损害的治疗作用,并探讨其机制。方法：给大鼠喂服马兜铃煎剂及马兜铃煎剂加牛磺酸溶液,观察对比血压（尾部收缩压）,SCr,BUN,血,尿渗稼压,血色素,尿蛋白SDS－PAGE电泳以及肾组织脂质过氧化物－丙二醛（Malondialdehyde,MDA)含量,肾组织的病理改变。结果：四月后单服马兜铃组大鼠血清尿素氮,肾组织中MDA高于马兜铃加牛磺酸组（P,0．002,P＜0．005）,但全血血红蛋白含量,体重较低（P＜0．02,P＜0．02）,马兜铃加牛磺酸组大鼠肾组织的病理损害较轻。结论：口服牛磺酸能够减轻马兜铃引起的大鼠肾脏损害,并维持了较好的营养状态。     

牛磺酸对心肌细胞缺氧－再给氧损伤的保护作用

在心肌细胞缺氧－再给氧模型上，发现缺氧及再给氧后细胞膜荧光偏振度明显增加；线粒体、肌原纤维等结构受损；细胞内脂质过氧化物（ＬＰＯ）荧光强度及［Ｃａ２＋］ｉ荧光比率升高，上述变化再给氧组均比缺氧组更明显。牛磺酸能剂量依赖性地降低细胞膜荧光偏振度，提高细胞膜脂质流动性；改善细胞的超微结构；可能与其明显降低细胞内ＬＰＯ荧光强度及［Ｃａ２＋］ｉ荧光比率有关。     

砷对小鼠子代免疫功能的影响及硒的拮抗作用

目的 研究砷对小鼠子代免疫功能的影响，同时观察硒对砷的拮抗作用。方法 利用一代一窝繁殖试验获得子代。结果 ①随着砷剂量的增加，小鼠各项免疫指标均显著降低；免疫组化实验显示脾脏中指环样T、B淋巴细胞减少；②脱离砷环境后，小鼠溶血A值虽升高但仍低于对照组，其余各项指标与对照组比较无统计学意义；③给予不同剂量的硒拮抗时，仅硒浓度为0．3mg／L组小鼠外周血白细胞数、溶血A值低于对照组。结论 砷可导致小鼠免疫功能降低，且体液免疫受损较严重，但损害是可逆的；硒能够拮抗砷的免疫毒性。     

牛黄酸与维生素C对慢性砷暴露小鼠肝组织DNA损伤的保护作用

目的:观察牛黄酸与维生素C对慢性砷暴露小鼠肝组织DNA损伤的保护作用.方法:将小鼠40只随机分为4组,即:染砷组(4 ppm As_2O_3)、牛黄酸保护组(4 ppm As_2O_3) 150 mg/kg牛黄酸)、维生素C保护组(4 ppm As_2O_3 45 mg/kg维生素C)以及生理盐水对照组,用HE染色法进行组织病理学观察,用免疫组化及图像分析检测肝组织内8-OH-dG的水平.结果:染砷组小鼠肝组织出现胞质疏松化和气球样变等病理学改变,牛黄酸和维生素C保护组肝组织上述病理学变化较轻.免疫组化结果表明,染砷组肝组织呈现8-OH-dG的高表达(P<0.01).两保护组小鼠肝组织8-OH-dG的表达显著低于染砷组(P<0.01),其中牛黄酸保护组小鼠肝组织8-OH-dG免疫染色总光密度值(0.824±0.1062)显著低于维生素C保护组(246.7±61.81,P=0.012).结论:牛黄酸和维生素C对慢性砷暴露小鼠肝组织DNA损伤具有保护作用,其中牛黄酸的保护作用更明显.     

乙型肝炎核酸疫苗肌注小鼠后质粒的存续及局部组织内C-myc mRNA的检测

研究乙型肝炎核酸疫苗质粒ＮＶ－ＨＢ／ｓ接种小鼠后小鼠产生体液免疫应答的规律，质粒在注射局部的存续规律及对癌基因Ｃ－ｍｙｃ的可能影响。方法 ＥＬＩＳＡ法检测小鼠外周血中的抗ＨＢｓ；分别用原位杂交和Ｓｏｕｔｈｅｒｎ吸印杂交检测小鼠肌组织标本中的疫苗质粒；并以原位杂交检测肌组织中的Ｃ－ｍｙｃ ｍＲＮＡ。结果 小鼠在接种ＮＶ－ＨＢ／ｓ后１月均已产生抗原ＨＢｓ，肌组织中ＮＶ－ＨＢ／ｓＤＮＡ的原位杂交阴性，仅     

急性砷暴露小鼠尿砷甲基化代谢的研究

目的探讨急性砷暴露小鼠尿砷排泄及其甲基化代谢模式。方法健康雌性昆明种小鼠一次性灌胃染毒亚砷酸钠(NaAsO2),染毒剂量为2.5、5.0、10.0、20.0 mg/kg,染毒时间为12、24、48、72 h。染毒结束前一天将小鼠放入代谢笼并收集24 h尿样(12 h组收集12 h尿样)。采用超低温捕集-氢化物发生-原子吸收分光光度法分别测定尿中的无机砷(inorganic arsenic,iAs)、一甲基砷(monomethylated arsenic,MMA)和二甲基砷(dimethylated arsenic,DMA)含量,并计算iAs%、MMA%、DMA%、一甲基化率(primary methylation index,PMI)和二甲基化率(secondary methylation index,SMI)。结果急性砷暴露小鼠,随着染砷剂量增加,尿总砷(T-As)含量、iAs%、MMA%明显增加,DMA%和SMI逐渐降低,PMI基本保持不变;而一次性砷染毒后,随时间的延长,尿T-As含量、iAs%、MMA%逐渐降低,DMA%、PMI和SMI明显增加。24 h内尿砷大部分排泄,其百分含量及甲基化率都基本在同一水平,48 h和72 h的尿砷排泄量很少,其百分含量及甲基化率都基本一致。结论急性砷暴露小鼠尿砷排泄具有明显的剂量-效应和时间-效应关系;高砷暴露可以抑制砷的甲基化代谢;24 h内尿砷含量可作为判断急性砷中毒体内砷负荷的指标。     

三氧化二砷对自发性狼疮BXSB小鼠免疫系统的影响

目的　探讨三氧化二砷对自发性狼疮BXSB小鼠免疫系统和脾脏淋巴细胞亚群的影响。方法　BXSB小鼠 12只 ,随机分为两组 ,对照组 (生理盐水 )和治疗组 (三氧化二砷0 4mg·kg-1·d-1) ,隔日腹腔注射共 5 5d ,观察血清IgG、抗dsDNA抗体、抗核抗体 (ANA)和脾脏淋巴细胞亚群的变化。结果　治疗组的血清IgG和抗dsDNA抗体均比对照组低 ,P值分别为 0 0 4 7和0 0 0 3。治疗组的ANA有 2例阳性 ,而对照组有 3例阳性。治疗组的CD4 %和CD3%比对照组明显低 ,其P值分别为 0 0 32和 0 0 0 9。结论　适当剂量的三氧化二砷可能会抑制BXSB小鼠的自身免疫系统功能 ,并降低其脾脏淋巴细胞CD4 %和CD3%亚群数     

Excretion and detection of SARS coronavirus and its nucleic acid from digestive system

AIM: To study whether severe acute respiratory syndrome coronavirus (SARS-CoV) could be excreted from digestive system. METHODS: Cell culture and semi-nested RT-PCR were used to detect SARS-CoV and its RNA from 21 stool and urine samples, and a kind of electropositive filter media particles was used to concentrate the virus in 10 sewage samples from two hospitals receiving SARS patients in Beijing in China. RESULTS: It was demonstrated that there was no live SARS-CoV in all samples collected, but the RNA of SARS-CoV could be detected in seven stool samples from SARS patients with any one of the symptoms of fever, malaise, cough, or dyspnea, in 10 sewage samples before disinfection and 3 samples after disinfection from the two hospitals. The RNA could not be detected in urine and stool samples from patients recovered from SARS. CONCLUSION: Nucleic acid of SARS-CoV can be excreted through the stool of patients into sewage system, and the possibility of SARS-CoV transmitting through digestive system cannot be excluded.     

Incorporation studies of nucleic acid precursors in gastric cancer

Summary Measurements of the rate of incorporation of radioactively labeled nucleic acid precursors into the DNA and RNA of gastric carcinoma cell suspensions indicated variable rates of proliferation for the tumors. The rate of incorporation generally correlates to the cytological level of differentiation of the carcinoma. Reduced differentiation of the tumors showed a corresponding increase in the rate of proliferation. Knowing the proliferation-dependent effect of most cytostatica, this results in a resistance to cytostatica of highly differentiated gastric cancers. The nucleic acid synthesis of proliferatively active tumors could only be partially inhibited by the cytostatica tested (5-fluorouracil, adriamycin). Carcinomas with metabolic possibility for compensation of the active mechanism of the cytostatica were biochemically resistant. Due to the resulting methodical problems and unaccountable patient-dependent causes of resistance, a conclusive statement about cytostatica-sensitive tumors is difficult to make in incorporation studies.     

血吸虫病核酸诊断技术的研究进展

血吸虫病是一种危害严重的重要人兽共患寄生虫病.由于多年积极有效的防治,血吸虫的感染率和感染度明显下降,传统的病原学和免疫学诊断方法已无法满足疫区查病的需要.近年来,国内外研究者们发展了一些针对血吸虫来源DNA的核酸诊断技术,显示了很好的应用前景.该文就核酸检测在血吸虫病诊断中的最新进展进行综述,主要包括靶DNA片段的选...     

2019—2020年山西省临汾市结核病分子生物学核酸检测技术应用情况分析

目的 分析山西省临汾市2019—2020年“探索提高贫困地区肺结核发现”项目实施期间结核病分子生物学核酸检测技术应用情况,为优化临汾市结核病防控策略提供依据。方法 利用《中国疾病预防控制信息系统》及其子系统《结核病管理信息系统》和“探索提高贫困地区肺结核发现”项目月报表相关数据,以2018年数据为基线,对2019—2020年临汾市及所属项目县(大宁县及永和县)肺结核患者和病原学阳性肺结核患者发现、药物敏感性筛查等情况进行分析。结果 临汾市2018—2020年病原学阳性率分别为29.6%(442/1495)、36.4%(476/1307)和50.5%(652/1292),呈逐年上升趋势,差异有统计学意义$χ{^{2}_{趋势}}$=152.410,P=0.000)。到2020年,17个县区中,除大宁县及永和县外[69.4%(25/36)、81.8%(18/22)和59.3%(16/27)、66.7%(8/12)],浮山、洪洞、安泽、翼城县的肺结核患者[分别为76.2%(32/42)、64.7%(174/269)、60.0%(9/15)、55.9%(38/68)]和病原学阳性肺结核患者[76.5%(13/17)、70.4%(81/115)、7/7、66.7%(24/36)]超过50%为市级(临汾市第三人民医院)诊断。2018—2020年临汾市药物敏感性筛查率分别为75.1%[229/(442-137)]、88.5%[339/(476-93)]和90.7%[489/(652-113)],呈逐年上升趋势,差异有统计学意义($χ{^{2}_{趋势}}$=25.505,P=0.000)。2018—2020年大宁县及永和县病原学阳性率分别为31.2%(15/48)、25.0%(14/56)和54.0%(34/63),差异有统计学意义(χ²=170.407,P=0.000)。2018—2020年,大宁县及永和县初诊患者在市级诊断的比例分别为38.4%(106/276)、43.4%(75/173)和56.3%(98/174),呈逐年上升趋势($χ{^{2}_{趋势}}$=36.564,P=0.000)。结论 临汾市第三人民医院为临汾市提供了全方位的结核病分子生物学检测服务。应继续优化或完善诊疗流程,达到普通肺结核患者诊疗不出县的分级诊疗要求,同时发挥市级诊断作为区域性结核病分子生物学诊断实验室的作用。     

抗坏血酸联合三氧化二砷对不同髓系白血病细胞凋亡与分化效应的差异化影响

目的 观察抗坏血酸(ascorbic acid,AA)对三氧化二砷(arsenic trioxide,As2O3)促进髓系白血病细胞分化和凋亡效应的影响.方法 采用细胞培养的方法,体外培养急性早幼粒细胞白血病(APL)的不同亚型细胞株(NB4、MR2)和红白血病细胞株(K562).根据加入As2O3的剂量不同(0、0.1、0.2、0.5、1.0μmol/L和0、1.0、2.0 μmol/L)分组,再以上述各组为对照组,分别加入113.0 μmoL/L的AA,培养96 h后,光镜下观察NB4、MR2、K562细胞株形态改变,流式细胞仪检测NB4、MR2、K562细胞株凋亡[Annexin V(+)PI(-)、Annexin V(+)/PI(+)]和分化[细胞表面抗原(CD)11b、CD33]改变.结果 ①NB4、MR2、K562细胞株在As2O3联合AA作用后.均可见到明显凋亡的细胞,表现为胞浆中出现空泡,核染色质浓缩,碎裂块弥散于胞浆中.可见凋亡小体;在分化的细胞中,细胞出现胞核凹陷、分叶、核浆比例明显减低.②AA联合As2O3后,细胞凋亡的比例增加,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05或<0.01).③AA能降低As2O3对NB4、MR2细胞的分化效应,使CD11b减少、CD33增加,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05或<0.01);AA能显著增强As2O3对K562细胞的部分分化效应,使CD33明显减少,CD11b明显增多(P<0.01).结论 从可增强As2O3对各种髓系白血病的凋亡效应.但对不同的髓系白血病细胞,AA对As2O3的分化效应具有差异化,对NB4、MR2细胞表现为抑制作用,对K562细胞表现为增强作用.     

慢性砷暴露对小鼠动情周期的影响

目的探讨慢性砷暴露的雌激素样效应。方法采用宫颈黏液结晶法对不同浓度慢性砷暴露小鼠动情周期和动情期进行检查。结果不同浓度的三氧化二砷均使小鼠动情周期和动情期发生紊乱,但与对照组无显著差异（P〉0．05）,也无明显规律（或缩短、或延长）,尤其是动情期。结论动情周期的紊乱是反应性激素代谢失调的敏感指标,本研究初步证明砷具有影响机体内分泌的作用,当属环境内分泌干扰物。