脑缺血后大鼠蝶腭神经节一氧化氮合酶表达的实验研究

目的　探讨一氧化氮合酶 (NOS)在大鼠蝶腭神经节内神经元中的表达与缺血再灌注脑损伤的关系。方法　 48只SD雄性大鼠 ,采用Pulisislli法制作闭塞大鼠四动脉的全脑缺血模型后随机分为实验组和假手术对照组 ,采用还原型尼克酰胺嘌呤二核苷酸脱氢酶 (NADPH d)组化法显示NOS阳性神经元 ,观察两组蝶腭神经节内NOS阳性神经元细胞数目的变化。结果　再灌注后NOS在蝶腭神经节内神经元表达水平增高 ,与假手术对照组相比 ,差异有极显著意义 (P <0 .0 1)。结论　NOS在大鼠缺血再灌注后蝶腭神经节内神经元中表达水平的增高 ,可能是缺血性脑损伤后的一种自身保护性调节反应     

在大鼠生长发育中翼腭神经节一氧化氮合酶阳性神经细胞的变化

目的：观察在大鼠生长发育中翼腭神经（NOS）阳性神经细胞的变化。方法：用还原型尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸酸脱氢酶－黄递酶（NADPH－d）组织化学法及图像分析，对不同年龄组翼腭神经节NOS阳性神经细胞进行观察。结果：NOS阳性神经细胞在翼腭神经节中呈不均匀散在分布，密度自出生后呈逐渐下降趋势，到成年降到最低，并桓定直到老年。NOS阳性神经细胞胞体大小逐渐增加，至成年时最大，直至老年无明显改变。结论：翼腭神经节NOS阳性神经细胞自大鼠出生后继续后发育直到成年，其变化有其自身的特点。     

大鼠局灶性脑缺血后一氧化氮合酶活性与细胞凋亡关系

目的：了解局灶性脑缺血再灌注过程中一氧化氮合酶（NOS）变化与脑细胞凋亡的关系。探索阻断脑细胞凋亡的时间窗。方法：用线栓法建立局灶性脑缺血模型，大脑中动脉阻塞（MCAO）的时间分别为15、30、60、90、120min，再灌注24h，用还原型尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶（NADPH-d)组化法，检测局灶性脑缺血再灌注后缺血中心区（顶叶皮层和尾壳)NOS活性变化，用苏木精－伊红和TUNEL染色法检测缺血中心式脑细胞凋亡情况。结果：NOS阳性神经元数于30min时增多最显著，90－120min隐剧减少，各组凋亡细胞数随缺血时间延长而增多。结论：局灶性脑缺血再灌注过程中神经型NOS、nNOS对缺血早期的脑损伤尤其是细胞凋亡起主要作用。     

变应性鼻炎大鼠翼腭神经节内NOS和NGF的表达变化

目的:观察一氧化氮合酶(NOS)和神经生长因子(NGF)在变应性鼻炎(AR)大鼠翼腭神经节内的表达变化.方法:建立AR大鼠模型,用HE染色方法观察鼻黏膜内腺体的变化;用组织化学的方法观察翼腭神经节内NOS表达的变化;用免疫荧光的方法观察翼腭神经节内NGF表达的变化.结果:实验组和正常组大鼠翼腭神经节内均有NOS和NGF表达,但实验组大鼠翼腭神经节内NOS和NGF表达均较正常组显著性增加(P＜0.01).结论:NOS和NGF可能通过神经调节机制参与了AR的致病过程.     

VIP在变应性鼻炎大鼠翼腭神经节中的变化

目的：探讨变应性鼻炎大鼠翼腭神经节中血管活性肠肽（VIP）的变化情况.方法：用SABC免疫组织化学的方法观察在变应性鼻炎大鼠和对照组大鼠翼腭神经节神经元中VIP表达的差异.结果：变应性鼻炎大鼠翼腭神经节内VIP神经元表达较正常明显增加.结论：翼腭神经节内VIP神经元可能参与变应性鼻炎的发病.     

大鼠翼腭神经节与耳神经节中NOS神经元的分布研究

目的：探讨大鼠翼腭神经节、耳神经节中NOS神经元的分布。方法：用黄递酶组化法对大鼠翼腭神经节、耳神经节中NOS神经元的分布进行研究。结果与结论：NOS神经元在两种神经节中大量散在分布,表明NO极可能是这两个神经节节后纤维末梢的基本神经递质之一。无区域特异性的分布表明NO在其不同的节后纤维支配区（如颅内血管、颅外血管、腺体血管）可能具有相似的功能和重要性。     

局灶性脑缺血再灌注损伤对大鼠延髓内脏带NOS阳性神经元与FOS蛋白表达的影响

目的：观察大鼠局灶性脑缺血4h再灌注不同时间对延髓内脏带（MVZ）一氧化氮合酶（NOS）阳性神经元分布及FOS蛋白表达的影响;探讨NOS阳性神经元与FOS蛋白表达的变化及相互关系,阐明在缺血状态下MVZ的功能作用机制。方法：以大脑中动脉线栓法建立局灶性脑缺血再灌注模型,采用NADPH－d组织化学（组化）反应、FOS蛋白免疫组化反应及双重色技术显示MVZ在不同时相的3种阳性神经元变化,并以假手术组和正常对照组作对照。结果：脑缺血组MVZ内NOS阳性神经元染色反应增强和FOS蛋白表达随脑缺血后再灌注时程而变化,并见有15％－20％阳性双染细胞。结论：在局灶性脑缺血再灌注损伤过程中,MVZ内NOS阳性神经元与FOS蛋白表达的变化具有相关性,提示MVZ参与机体的应激反应和保护性机制。     

IL—6对大鼠脑缺血再灌注后海马及纹状体NOS和Fos表达的影响

目的：研究IL－6对大鼠脑缺血再灌注（CIRF）后海马及纹状体的NOS和Fos阳性神经元表达的作用。方法：采用大脑中动脉栓塞法（MCAO）对24只Wistar大鼠左侧大脑中动脉构成CIRF模型的基础上分两组：即单纯CIRF对照组（n=8);经同侧脑室事先注入IL－6的实验组（n=16)。分别进行NADPH脱氢酶反应显示NOS和免疫组织化学染色显示Fos表达。观察了CIRF后1、2、4、6小时海马及纹状体处NOS和Fos阳性神经元数量的变化，以及IL－6对其变化的影响。结果：大鼠CIRF后纹状体缺血中心区缺少NOS和Fos的表达。而纹状体周围区NOS和Fos阳性神经元明显增加；海马各部NOS和Fos阳性神经元均明显增加，其中CA1区增加最显著。但预先经侧脑室注射IL－6的实验组中，大鼠海马及纹状体NOS和Fos阳性神经元明显低于对照组。IL－6明显抑制了NOS及Fos表达。结论：提示IL－6可能参与脑缺血性神经元损伤的调控作用。     

丙泊酚、咪唑安定对心肌缺血再灌注损伤Fos蛋白表达的影响

目的：观察丙泊酚、咪唑安定在心肌缺血再灌注损伤（IR）时Fos蛋白表达的影响，从蛋白表达水平探讨其对心肌保护作用的机制。方法：健康SD大鼠36只，每组12只。分别给生理盐水（A组）、丙泊酚（B组）、咪唑安定（C组）静脉输注，在心肌缺血15min后，恢复心肌血液灌注，分再灌注0、15、30、60、120、240min 6个时相．各时相取2只大鼠，多聚甲醛灌注固定后取缺血心肌标本作石腊切片．免疫组化方法检测Fos蛋白表达．显微镜下观察阳性产物。拍片。结果：各组组内再灌注30、60、120min阳性表达灰度值较冉灌注0、240min Fos蛋白表达明显增强（P〈0．05）：A组再灌注30、60、120min Fos蛋白表达均比B、C组增强（P〈0．05）．统计学有显著性意义，结论：丙泊酚、咪唑安定对心肌缺血再灌注损伤有一定的保护作用，能降低缺血再灌注心肌Fos蛋白表达．为心肌缺血再灌注损伤时安全可用的麻醉药．其作用与缺血再灌注时间有关．即在30～120min内对缺血再灌注心肌有明显保护作用．这对临床选择合理时间窗用药有一定的指导意义。     

人参总皂甙对不完全性脑缺血后海马CA1区NOS阳性神经元表达的影响

目的探讨人参总皂甙(GS)对不完全性脑缺血及再灌注不同时间后海马CA1区一氧化氮合酶(NOS)的影响及对神经元的保护作用.方法用双侧颈总动脉夹闭加放血的方法制成大鼠不完性脑缺血及再灌注模型,以还原烟酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶(NADPH-d)组织化学方法观察缺血及再灌注后海马CA1区NOS阳性神经元变化及GS对其的影响.结果单纯缺血组海马CA1区在缺血30min时NOS阳性细胞数最高(44.5±7.42),为假手术组2倍,再灌注2h、12h、24h、3d后逐渐下降,5d时恢复正常水平(21.12±3.50),缺血再灌注3d、5d时出现神经细胞损伤.GS能抑制缺血30min及再灌注各时程中NOS阳性神经元数量变化,并能预防缺血再灌注后迟发的神经元损害.结论GS对大鼠不完全性脑缺血及再灌注不同时程后海马CA1区NOS的异常表达有抑制作用,对神经元的保护作用.     

大鼠局灶性脑缺血再灌注过程中缺血中心区和半暗区NOS变化

目的 :了解局灶性脑缺血再灌注过程中一氧化氮合酶 (NOS)活性变化与脑缺血损伤的关系 ,探索脑缺血的治疗时间窗。方法 :用线栓法建立局灶性脑缺血模型 ,大脑中动脉阻塞 (MCAO)的时间分别为 15、30、6 0、90、12 0min ,再灌注 2 4h。用NADPH d组织化学法 ,检测局灶性脑缺血再灌注后缺血半暗区和中心区NOS活性变化。结果 :半暗区NOS阳性神经元数量于 6 0min达峰值 ;中心区NOS阳性神经元数量于 30min达峰值 ,90～ 12 0min急剧减少。结论 :局灶性脑缺血再灌注过程中NOS参与脑缺血损伤 ,在中心区与半暗区NOS活性变化不一致 ,半暗区NOS达峰值时间较中心区延长。推测中心区运用NOS抑制剂最佳时机在 30min内 ,半暗区最佳时机在 6 0min内     

11,12-环二十碳三烯酸对缺血/再灌注大鼠心肌一氧化氮合酶的影响

目的观察11,12-环二十碳三烯酸(11,12-EET)对缺血/再灌注大鼠心肌一氧化氮合酶(NOS)的影响.方法采用健康雄性Wistar大鼠制备心肌缺血/再灌注模型,实验分为5组:11,12-EET缺血/再灌注组(包括EET1、EET2、EET3)组,EET对照组,缺血/再灌注组,假手术组,正常对照组.观察缺血60min及再灌注30min两个时段心脏收缩期左心室内压上升的最大变化速率及舒张期左心室内压下降的最大变化速率;采用化学比色法观察大鼠心肌组织诱导型一氧化氮合酶(iNOS)及结构型一氧化氮合酶(cNOS)活性.结果缺血/再灌注组缺血60min及再灌注30 min两个时段收缩期左心室内压上升的最大变化速率及舒张期左心室内压下降的最大变化速率均低于假手术组(P＜0.01);EET1、EET2及EET3组均高于缺血/再灌注组(P＜0.01).缺血/再灌注组心肌cNOS低于假手术组(P＜0.01),EET1、EET2及EET3组均高于假手术组(P＜0.01)及缺血/再灌注组(P＜0.01),EET2组高于EET对照组(P＜0.01).假手术组iNOS高于EET对照组(P＜0.05),缺血/再灌注组高于假手术组(P＜0.01);EET1、EET2及EET3组均低于缺血/再灌注组(P＜0.01).结论外源性11,12-EET改善缺血/再灌注心功能损伤同时出现cNOS增加及iNOS减少,提示11,12-EET拮抗缺血/再灌注损伤的作用可能与NOS同功酶改变有关.     

葛根素对家兔脑缺血再灌注损伤的抗自由基作用

目的　观察葛根素 (Pur)对家兔脑缺血、缺血再灌注损伤的抗自由基作用。方法　以“四动脉阻断法”建立家兔全脑缺血再灌注损伤模型 ,观察缺血前、再灌注后应用Pur对家兔大脑皮质丙二醛 (MDA)、一氧化氮 (NO)含量及超氧化物歧化酶 (SOD)、一氧化氮合酶 (NOS)活性的影响。结果　家兔静脉注射Pur 3 0mg kg可显著减少缺血区脑组织的过氧化脂质MDA ,NO含量 ,提高SOD活性 ,降低NOS活性 ,缺血前应用Pur效应优于再灌注后应用 (P <0 .0 1)。结论　Pur可减轻自由基反应对脑组织的损害 ,对缺血的脑组织具有保护与复苏效应     

神经节苷脂对不完全性脑缺血后大脑皮层NOS阳性神经元表达的影响

目的 :探讨神经节苷脂 (GM1 )对不完全性脑缺血及再灌注不同时间后大脑皮层一氧化氮合酶 (NOS)的影响。方法 :用双侧颈总动脉夹闭加放血的方法制成大鼠不完性脑缺血及再灌注模型 ,以还原尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶 (NADPH -d)组织化学方法观察缺血及再灌注后大脑皮层NOS阳性神经细胞变化及GM1 对其的影响。结果 :大脑皮层在缺血 3 0min时NOS阳性细胞数最高 ( 12 .83± 4.49) ,再灌注 2h、12h、2 4h、3d后逐渐下降 ,5天时恢复正常水平。而GM1 能防止脑缺血及再灌注后NOS阳性神经细胞变化。结论 :GM1 对大鼠不完全性脑缺血及再灌注不同时间后大脑皮层NOS的表达有抑制作用     

卡托普利介导缓激肽诱导预适应对大鼠缺血再灌注心肌的保护作用

目的 探讨卡托普利介导缓激肽诱导预适应对大鼠缺血再灌注心肌保护作用的机制。方法 将成年大鼠随机分成正常对照组、缺血再灌注（IR）组、卡托普利预处理组、缓激肽B2受体拮抗剂B1650加卡托普利组,麻醉大鼠冠脉结扎30min后,再灌60min,观察各组缺血再灌注实验动物前后心功能及一氧化氮合酶（NOS）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH—PX）、超氧化物歧化酶（SOD）活性、丙二醛（MDA）和一氧化氮（NO）含量的变化。结果 缺血再灌注组心肌原生型NOS（cNOS）活性（P〈0．01）及总NOS活性（P〈0．01）显著下降,NO产生明显减少（P〈0．05～0．01）,卡托普利预处理组缺血再灌注期间NO水平高于IR组（P〈0．01）,再灌注30min心肌cNOS活性（P〈0．01）及总NOS活性（P〈0．05）显著高于DIR组,心肌损害较IR组为轻。先静滴B1650后再给予卡托普利,则卡托普利对心肌损伤的保护作用明显减弱。结论 NO产生不足是心肌再灌注损伤的主要因素,卡托普利通过调节缓激肽活性,维持正常NO水平对缺血再灌注大鼠心肌损伤可产生药理预适应保护作用,该作用可为或至少部分为缓激肽所介导。     

大鼠肝缺血再灌注损伤Fos和NOS在脑组织的表达

目的:观察肝缺血再灌注损伤(HIRI)过程中脑组织中Fos和一氧化氮合酶(NOS)的变化,探讨两者在脑组织不同部位的改变及可能的作用。方法:建立肝缺血再灌注(I/R)损伤动物模型,分为对照组、缺血30min组(I组)、缺血30min再灌注组(I/R组),I/R组又分为再灌注后1h组(I/R1h)、再灌注后2h组(I/R2h)、再灌注后4h组(I/R4h),应用免疫组化法分别测定各组大鼠不同部位脑组织Fos和NOS的变化。结果:肝缺血再灌注损伤的不同时段可出现脑组织不同部位Fos和NOS改变,尤其在再灌注后期表现明显。结论:HIRI状态下,Fos和NOS在脑内参与了损伤过程。下丘脑中两者的变化在中枢调节作用中可能起着中介作用。     

虎杖苷对胃缺血再灌注损伤的保护作用

目的观察虎杖苷（PD）对大鼠胃缺血再灌注损伤（GIRI）的保护作用及与抗氧化的关系。方法用小动脉夹夹闭腹腔动脉30min,复灌60min的方法建立大鼠GIRI模型,观察各组胃黏膜损伤指数及胃组织脂质过氧化物（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、一氧化氮（NO）和一氧化氮合酶（NOS）含量的变化。结果PD可明显减轻损伤模型中的胃黏膜损伤指数;能明显降低胃组织MDA含量,增加胃组织SOD、GSH-Px、NO、NOS水平。结论PD通过抑制胃缺血再灌注时氧自由基产生,提高组织抗氧化能力,对GIRI具有保护作用。     

缺血预处理对心肌缺血再灌注大鼠一氧化氮系统和ICAM-1mRNA表达的影响

目的:观察大鼠肾脏缺血预处理(R IP)后心肌缺血再灌注(M IR)时细胞间粘附分子-1(ICAM-1)mRNA表达和一氧化氮(NO)水平的变化,探讨缺血预处理对心肌缺血再灌注损伤的影响。方法:大鼠35只,分为假手术对照(sham)组、M IR组、R IP+M IR组,后两组又分为缺血30m in、再灌注60m in、120m in等三个时相。取缺血心肌用原位杂交法检测ICAM-1mRNA表达水平,检测血清(NO)含量及一氧化氮合酶(NOS)活性,进行中性粒细胞(PMN)计数。结果:与Sham组比较,M IR组和R IP+M IR组再灌注各时相ICAM-1mRNA表达均显著增加。与M IR组再灌注对应时相比较,R IP+M IR组ICAM-1 mRNA表达均显著减少。M IR组缺血30m in时相与Sham组相比NO、NOS无差异,再灌注后NO、NOS开始下降,随时间延长,NO、NOS逐渐减少。与M IR组再灌注对应时相比较,R IP+M IR组NO及NOS均显著增加。缺血后再灌注时随时间延长,PMN数量逐渐增加,缺血预处理干预后PMN数量显著下降。结论:心肌缺血后再灌注时有大量PMN浸润,与心肌损伤关系密切。ICAM-1参与介导了中性粒细胞对内皮细胞的粘附、浸润和M IR的发生、发展,R IP通过减少ICAM-1 mRNA表达水平减轻M IR所致的心肌损伤。R IP通过增加NO,减少PMN浸润减轻随后的缺血再灌注损伤,起心肌保护作用。     

心肌缺血再灌注时氧化亚氮与氧化亚氮合酶的变化及L-精氨酸对其的影响

目的：观察大鼠心肌缺血再灌注时氧化亚氮（nitric oxide,NO）和氧化亚氮合酶（nitric oxide synthase,NOS）的变化及L-精氨酸对其的影响,探讨心肌缺血再灌注损伤的可能机制。方法：大鼠80只,分为假手术对照（sham）组,心肌缺血再灌注组,肾脏缺血预处理＋心肌缺血再灌注组和L-精氨酸治疗＋心肌缺血再灌注组,检测血清NO及NOS水平,光镜下进行中性粒细胞计数。结果：缺血再灌注（MIR）组缺血30min时相点与对照组相比NO,NOS无差异,再灌注后NO,NOS开始下降,随时间延长,NO,NOS逐渐减少。与MIR组再灌注对应时相比较,肾脏缺血预处理＋MIR组及精氨酸治疗＋MIR组NO及NOS均显著增加。缺血后再灌注时随时间延长,中性粒细胞数量逐渐增加,给予精氨酸干预或肾脏缺血预处理后中性粒细胞数量显著下降。结论：心肌缺血后再灌注时有大量中性粒细胞浸润,与心肌损伤关系密切。缺血预处理可通过增加NO水平减轻随后的缺血再灌注损伤,L-精氨酸可通过增加NO,减少中性粒细胞浸润起心肌保护作用。