大鼠肾移植慢性排斥反应期间白细胞介素—2受体和细胞间粘 …

为探讨移植肾白细胞介素－２受体（ＩＬ－２Ｒ）和细胞粘附分子－１（ＩＣＡＭ－１）的 肾移植慢性排斥反应中的地位及诊断价值,选用近交大鼠Ｆ３４４和ＬＥＷ进行左侧原位肾移植,于手术后１０天切除右侧自体肾分别于术后第４、１２～、６,〉３２周处死各组动物,取移植肾标本进行病理检查,并应用免疫组织化学技术ＳＰ法检测移植肾中ＩＬ－２Ｒ和ＬＣＡＭ０１的表达,结果发现同种异体肾移植组于条４周开始出现ＩＬ２Ｒ及ＩＣＡ     

同一供体移植二受体出现排斥反应的病例分析

同种异体肾移植由于遗传免疫因素影响 ,移植肾排斥反应不可避免 ,但同一供体分别移植于两受体 ,先后出现排斥反应致移植手术失败较为少见。我院遇到 1例 ,供体为男性尸肾 ,现报告如下 :临床资料　　例 1 ,女性 ,5 7岁 ,“Ｏ”型血 ,慢性肾炎出现尿毒症 2 0余年 ,血ＢＵＮ 1 2 .0 8ｍｍｏｌ/Ｌ ,Ｃｒ 35 6 μｍｏｌ/Ｌ ,术前血透 6个月共 31次 ,淋巴细胞毒试验 8% ,术中肾动脉与髂内动脉端端吻合 ,肾静脉与髂外静脉端侧吻合 ,血管开放以后 ,肾脏充血良好 ,半小时后移植肾变软、发紫 ,肾动脉搏动消失 ,无尿液排出 ,诊断为超急排斥 ,摘除移植肾…     

反义核酸对大鼠在体血栓素A2合成和血栓形成的影响

血栓素Ａ２（ＴＸＡ２）具有强效缩血管和促血小板聚集的功能，许多心血管疾病的发生发展与ＴＸＡ２过量生成有关。ＴＸＡ２由花生四烯酸经环氧酶、血栓素合酶（ＴＸＳ）催化产生。反义寡核苷酸片段Ｉ（ＯＤＮＩ）是针对ＴＸＳｃＤＮＡ设计的反义核酸，体外实验证明它能有效抑制ＴＸＳ基因表达和ＴＸＡ２的合成［１］。本实验旨在研究在体条件下ＯＤＮＩ对ＴＸＡ２生成和血栓形成的影响。１材料与方法 花生四烯酸（ＡＡ，Ｓｉｇｍａ）溶于１ｍｍｏｌ／ＬＮａ２ＣＯ３溶液中。实验组：ＳＤ雄性大鼠（体重 ２００ ｇ，同济医科大学实验动物学…     

肾移植排斥反应时的大鼠血浆中NO^—2的研究

先前研究已证实，肝脏，心脏和小肠等器官移植排斥仅应时的大鼠血浆中ＮＯ＾－２明显升高，本研究旨在运用大鼠原位肾移植模型，采用示波极谱法及动态测定肾移植术后大鼠血浆中ＮＯ＾－２的含量，从而说明ＮＯ＾－２的肾移植排斥反应中的作用，结果显示：大鼠异系肾移植术后４天起，各组移植肾均出现明显的排斥反应的病理改变，而异系肾移植主后２ｄ起，大鼠血浆中ＮＯ＾－２的含量较对照缚明显升高（Ｐ〈０．０５），说明了大鼠肾移     

血清IL—2水平在大鼠心脏移植术后早期急性排斥反应诊断中 …

大鼠同种异体心脏异位移植模型实验动物分为：对照组、ＡＬＳ组、ＣｓＡ组及不用药组，分别于术后２、４、６天应用ＭＴＴ法测定受体大鼠血清ＩＬ－２水平，并于处死后行病理组织学检查。其中ＡＬＳ组为受体胸腺内注射供体脾细胞及腹腔注射ＡＬＳ（抗淋巴细胞血清）移植组。实验结果：不用药组的ＩＬ－２水平较对照组、ＡＬＳ组、ＣｓＡ组明显增强。病理组织学检查不用药组的排斥反应明显高于其它３组。结论：受体胸腺内注射供体脾细     

半乳糖修饰的反义核酸在小鼠体内肝脏导向作用研究

半乳糖修饰的反义核酸在小鼠体内肝脏导向作用研究周永兴，郭军，姚志强，温守明，王升启，冯志华，张文彬，李光玉（唐都医院传染病科西安７１００３８空军总医院，军事医学科学院）关键词半乳糖受体；肝脏导向；反义核酸；基因治疗中图号Ｒ５１２．６国外曾有人将天然去...     

反义bcl-2基因抗白血病作用的研究

目的 研究反义bcl-2基因抗白血病作用及其特点,探讨反义基因或联合药物体外净化和治疗白血病可行性。方法 （1）RT－PCR和蛋白印迹方法检测HL－60、U937、K562、CEM白血病细胞株以及常见白血病类型的bcl-2 mRNA和P26蛋白表达情况。（2）选择高表达bcl-2基因的HL－60细胞株作为靶细胞,用人工合成bcl-2正反义硫代寡聚脱氧核苷酸（PS－ODN）体外培养处理。检测bcl-2 mRNA和P26蛋白的变化;DNA梯形分析细胞凋亡,锥虫蓝拒染法和克隆培养观察细胞生长;同时将HL－60细胞与PS－ODN培养孵育7天后的活细胞腹腔接种Scid鼠,半巢式RT－PCR和病理分析该HL－60细胞在体内生物学行为改变。（3）建立三种白血病细胞株CEM、K562、HL－60 Scid鼠白血病模型和有效监测与追踪白血病细胞株的方法,掌握体内白血病细胞株生物学行为;用bcl-2正反义PS－ODN腹腔给药治疗HL－60 Scid鼠白血病模型,观察治疗后体内白血病进展变化。（4）用RT－PCR方法克隆bcl-2基因和构建其两种不同的反义RNA逆转录病毒表达载体。（5）转染高表达bcl-2的HL－60细胞,比较两种反义RNA在对抗bcl-2的作用与降低内源性bcl-2蛋白水平上的异同性。观察两种反义RNA介导的靶基因抑制对烷化溶血磷脂（ALP）和四种化疗药物诱导的HL－60细胞凋亡的影响。（6）RT－PCR检测基因转染HL－60在化疗药物作用下FGFβ1表达。结果 （1）白血病细胞株表达bcl-2有差异,bcl-2 mRNA和它的P26蛋白不平行。（2）三种白血病细胞株HL－60,K562,CEM可在Scid鼠增殖,产生典型白血病浸润模型特征,白血病增殖和浸润程度与白血病细胞生物特性有关,其顺序为CEM＞K562＞HL－60。（3）人工合成的bcl-2反义硫化寡脱氧核苷酸（ASPO）能够下调HL－60细胞bcl-2表达,诱导凋亡,抑制增殖和克隆形成;同时使其失去在体内的致白血病能力。（4）bcl-2反义硫代寡脱氧核苷酸,腹腔给药能够抑制肿块增长,白血病扩张,延长Scid鼠生存期,呈剂量依赖性。（5）部分编码区的反义RNA能够降低HL－60细胞内源性Bcl-2蛋白水平,提高ALP和四种化疗药物对HL－60杀伤率,促进它们诱导的HL－60细胞凋亡。（6）反义基因转染的HL－60细胞在化疗药物作用下负调控因子TGFβ1基因表达增加。结论 bcl-2反义基因可有效对抗bcl-2原癌基因表达,发挥明显的抗白血病作用,为体外净化白血病细胞和体内治疗白血病提供依据。     

反义肽核酸抑制树突细胞趋化因子受体CCR7表达的实验研究

目的探讨靶向趋化因子受体CCR7的反义肽核酸(PNA)对树突细胞(DCs)CCR7的表达及趋化活性的影响。方法体外培养大鼠骨髓来源DCs,设计靶向CCR7mRNA翻译起始区的反义PNA,以随机PNA、空白组为对照处理体外培养7d的DCs,分别于24h,48h,72h后收集细胞,利用Western-blot和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测反义PNA对CCR7分子表达的影响,通过趋化实验检测DCs的趋化活性。结果DCs经PNA处理后24h,各组DCs其CCR7表达无明显差别,在48h,Western-blot检测显示反义PNA组CCR7蛋白表达明显低于对照组,而RT-PCR检测在mRNA水平却无明显差别。在72h,反义PNA组CCR7的表达在不同水平均明显低于对照组。经趋化实验证实,在48h以后反义PNA组DCs趋化活性受到明显抑制(P<0.05)。结论CCR7反义PNA能够有效抑制体外培养的大鼠树突细胞趋化因子受体CCR7的表达及其趋化活性,为进一步研究体内应用反义PNA抑制DCs的定向迁移和抗原递呈,调节免疫反应和诱导免疫耐受提供了新的策略。     

雄激素受体反义RNA对前列腺癌细胞雄激素受体表达的抑制作用研究

目的 观测雄激素受体（AR）反义RNA逆转录病毒表达载体在前列腺癌细胞中的表达及其对AR表达的影响。方法 将AR反义RNA逆转录病毒表达载体导入前列腺癌细胞株LNCaP，PCR检测AR目的片段在重组LNCaP细胞基因组中的存在，RT－PCR检测AR反义RNA表达和AR mRNA水平，Western blot检测AR蛋白表达水平。结果 PCR在LNCaP^as-AR基因组DNA中扩增出了AR目的片段，表明AR目的片段整合到了细胞基因组。RT－PCR证实LNCaP^as-AR有AR反义RNA表达，且其AR mRNA水平较LNCaP和空载体转染的LNCaP^Neo显著下调（P＜0.05)，Western blot证实LNCaP^as-AR细胞AR蛋白含量显著下降（P＜0.05)。结论 AR反义RNA可抑制前列腺癌细胞AR表达。     

可溶性白细胞介素－2受体在体外对白细胞介素－2介导免疫反应的抑制

用酶联免疫吸附法￣３Ｈ－ＴｄＲ掺入法探讨了可溶性白细胞介素－２受体（Ｓｏｌｕｂｌｅｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ２ｒｅｃｅｐｔｏｒ，ｓＩＬ－２Ｒ）与ｒＩＬ－２的结合特性以及ｓＩＬ－２Ｒ对ＩＬ－２依赖性ＣＴＬＬ－２细胞、ＰＨＡ激活的正常人外周血淋巴细胞增殖反应的作用，结果显示ｓＩＬ－２Ｒ保持了与ｒＩＬ－２结合的特性。在体外ｓＩＬ－２Ｒ对ＰＨＡ诱导正常人ＰＢＬ增殖以及ＣＴＬＬ－２细胞、ＰＨＡ－ＰＢＬ对ＩＬ－２依赖性增殖均有明显的抑制作用，尤其高浓度的ｓＩＬ－２Ｒ抑制作用更为突出。     

IL-27与结核菌核酸检测在结核性胸膜炎诊断运用中的比较

目的 通过与胸水中结核菌核酸检测法比较,评价IL-27在检测结核性胸膜炎中的诊断价值。方法 选择2017年11月至2018年5月无锡市第五人民医院结核科收治的53例结核性胸膜炎患者和49例恶性胸腔积液患者,检测两组患者胸水及血清中IL-27水平,同时对两组患者胸水进行结核菌核酸检测,对检测结果进行统计分析。结果 结核组患者胸水IL-27浓度为（516±14） ng/L,高于恶性组（313±87） ng/L（P<0.001）,恶性组患者血清IL-27浓度虽高于结核组,但差异无统计学意义。胸水IL-27应用ROC曲线诊断结核性胸膜炎的敏感度为88.0%,特异度为78.0%。胸水IL-27检测诊断结核性胸膜炎的敏感度高于结核菌核酸检测（P<0.001）。结论 胸水IL-27检测用于诊断结核性胸膜炎具有较高的敏感度和特异度,是辅助诊断结核性胸膜炎的一种较为简便、高效的方法 。     

青蒿琥酯对IgA肾病模型大鼠血清IL-2、IL-6含量的影响

目的观察青篙琥酯对IgA肾病模型大鼠血清IL-2、IL-6含量的影响。方法雄性SD大鼠50只,随机平均分为正常对照组、模型对照组、青蒿琥酯小剂量组、青蒿琥酯大剂量组和科素亚组,其中10只建立IgA肾病大鼠模型ELASIA法检测大鼠血清IL-2、IL-6含量。结果大鼠IgA肾病造模成功。青蒿琥酯可以明显抑制IgA肾病模型大鼠血清IL-2、IL-6含量。结论青蒿琥酯能够降低IgA肾病模型大鼠血清IL-2、IL-6含量,这可能是青蒿琥酯治疗IgA肾病的作用机制之一。     

IL-2免疫靶向脂质体的制备及稳定性研究

目的:寻求一种简便、快速、结合率高的制备白介素-2(Interleukin-2,IL-2)免疫脂质体的方法.方法:分别用戊二醛法、十一醛法、衍生化法制备IL-2免疫脂质体.对上述几种制备方法进行分析比较,Bradford比色法测定IL-2的结合效率;离心加速实验考察脂质体稳定性.结果:十一醛法通过席夫碱一对一的结合IL-2和脂质体,不会引起IL-2、脂质体自身相互交联,结合率高,稳定性好.结论:拟采用十一醛法作为后期细胞实验中IL-2免疫脂质体的制备方法.     

抗IL-2R单克隆抗体在肾移植高危患者中应用效果的临床观察

目的 探讨抗白介素-2受体（IL-2R）单克隆抗体舒莱和塞尼哌在肾移植高危患者中应用的疗效及安全性。方法 69例肾移植高危患者被随机分为抗IL-2R单克隆抗体治疗组（39例）和非治疗组（30例），前者在三联免疫抑制荆基础上加用抗IL-2R单克隆抗体舒莱（术前2h及术后第4天各20mg静滴）或赛尼哌（术前24h及术后第14夭各50mg静滴）治疗，后者未给与抗IL-2R单克隆抗体。观察移植术后1年排斥反应发生率、人／肾存活率及不良反应事件发生率。结果 术后1年，抗IL-2R单克隆抗体治疗组和非治疗组排斥发生率分别为5．13％和16．67％，差异有统计学意义。两组比较，1年人／肾存活率及不良反应事件发生率差异均无显著性。结论在肾移植高危患者中应用抗IL-2R单克隆抗体（塞尼哌、舒莱）可明显减少患者移植术后急性排斥反应发生率，但在提高患者人／肾1年存活率及减少不良反应发生率方面未见明显疗效。     

L1210细胞表面IL—2受体的表达和以IL—2为导向的免疫？…

目的 证明Ｌ１２１０细胞表面表达ＩＬ－２受体（ＩＬ－２Ｒ）,并以此为基础建立检测以ＩＬ－２为导向的免疫毒素的杀伤细胞活性的体内、体外实验模型。方法 采用免疫荧光染色及流式细胞测定技术,测定Ｌ１２１０细胞表面ＩＬ－２Ｒ。用ＭＴＴ法测定ＩＬ－２与两种由突变改型的绿脓杆菌毒素片段构建的两种融合蛋白（ＩＬ－２－ＰＥＺＮＭ和ＩＬ－２－Ｋ－ＰＥＺＮＭ）的体外杀伤细胞活性;以腹腔注射Ｌ１２１０细胞诱发小鼠腹水瘤     

喉癌患者白细胞介素2及可溶性白细胞介素2受体的检测

目的：观察喉癌患者的白细胞介素2（IL—2）与可溶性白细胞介素2受体（sIL—2R）水平的变化．方法：IL—2测定采用IL—2诱生及活性测定法,sIL—2R采用双抗体夹心法。结果：喉癌患者IL—2水平明显低于对照组，经统计学处理差异显著（P＜0．01），而sIL—2R水平则显著增高（P<0．01），并且与喉癌的分型及分期有明显的相关性；结论：sI-2R水平测定配合IL—2测定可作为喉癌临床监测的重要指标。     

抗精神病药合并盐酸丁咯地尔治疗Ⅱ型精神分裂症疗效与IL-2和IL-6水平变化的研究

目的探讨抗精神病药合并盐酸丁咯地尔治疗Ⅱ型精神分裂症的临床疗效与IL-2和IL-6水平的变化.方法Ⅱ型精神分裂症患者共68例,随机分为研究组与对照组,研究组采用抗精神病药和盐酸丁咯地尔治疗,而对照组则单用抗精神病药治疗,治疗时间均为4周,采用简明精神病评定量表(BPRS)、阴性症状量表(SANS)、阳性症状量表(SAPS)来评定患者治疗前后症状的改变,用BPRS减分率来评价临床疗效,同时测定治疗前后IL-2、IL-6水平.结果治疗后研究组BPRS(26.33±2.54)分、SANS(16.29±3.57)分、SAPS(1.43±1.69)分,分值较对照组有明显下降(P＜0.05),临床疗效则有明显提高(P＜0.05),且IL-2[(10.57±9.43)pg/ml]和IL-6[(10.38±6.81)pg/m1]水平有明显下降(P＜0.05).结论合并盐酸丁咯地尔有助于提高阴性精神分裂症患者的临床疗效,降低细胞因子水平.