过敏性紫癜患儿Th17细胞表达及意义

目的 探讨Th17细胞在儿童过敏性紫癜(henoch-schonlein purpura,HSP)免疫发病机制中的作用.方法 过敏性紫癜急性期患儿55例,采用流式细胞分析法检测外周血Th17细胞的比例,ELISA法检测血浆相关细胞因子IL-17和IL-6的水平,并进行相关性分析.同期选取20例同龄健康儿童作为对照.结果 HSP患儿外周血Th17/CD4+T细胞比例显著高于对照组[(1.91±0.78)% vs(0.52±0.24)%,(P＜0.01)];HSP患儿血浆IL-17和IL-6的水平亦明显高于对照组[IL-17:(47.4±17.6)pg/ml vs (15.6±11.2) pg/ml;IL-6:(273.8±42.4)pg/ml vs(228.7±37.4)pg/ml,(P＜0.01)].患儿血浆IL-17和IL-6的水平呈正相关(r=0.762,P＜0.01).结论 过敏性紫癜急性期患儿Th17细胞比例增加,IL-17和IL-6水平升高,提示Th17细胞可能参与了HSP的发病及其炎性反应过程.     

过敏性紫癜患儿外周血单个核细胞TLR6表达及其与Th1、Th2和Th17细胞免疫应答相关性研究

目的探讨TLR6在过敏性紫癜(HSP)患儿外周血单个核细胞(PBMC)的表达及其与Th1、Th2和Th17细胞免疫应答的相关性,探讨TLR6与HSP发病机制的关系。方法选取我院住院的急性期HSP患儿42例为研究对象,另选取健康儿童30例作为正常对照组。采用流式细胞术检测外周血单个核细胞TLR6蛋白表达,实时荧光定量PCR技术检测外周血单个核细胞MyD88mRNA的基因相对表达量,ELISA法检测血浆IFN-γ、IL-4、IL-17水平。结果 (1)HSP患儿外周血单个核细胞TLR6蛋白表达(TLR6阳性细胞百分率及平均荧光强度)显著高于正常对照组(t'=9.40,P<0.01;t'=10.49,P<0.01),HSP组外周血单个核细胞MyD88 mRNA相对表达量显著明显高于正常对照组(t'=2.46,P<0.01)。(2)HSP组血浆IL-4水平显著高于对照组(t'=3.44,P<0.01),IFN-γ水平高于对照组(t'=2.44,P<0.05),IFN-γ/IL-4比值低于对照组(t'=2.27,P<0.05),IL-17水平显著高于对照组(t'=2.64,P<0.01)。(3)HSP组单个核细胞TLR6蛋白表达与MyD88 mRNA呈显著正相关(r=0.79;P<0.01);与血浆IL-4水平呈显著正相关(r=0.69,P<0.01);与IFN-γ/IL-4比值呈负相关(r=-0.38,P<0.05);与IL-17水平呈正相关(r=0.36,P<0.05);与血浆IFN-γ水平不存在相关性(P>0.05)。结论 TLR6活化可能参与了HSP的免疫发病机制;HSP患儿体内存在Th1/Th2失衡,Th17异常活化,活化的TLR6可能通过上调Th2、Th17免疫应答介导HSP的免疫发病机制。     

Th17细胞在过敏性哮喘患者中的临床研究

目的探讨Th17细胞及其分泌的细胞因子白细胞介素-17(IL-17)、白细胞介素-10(IL-10)在过敏性哮喘患者外周血中的变化及临床意义。方法选取过敏性哮喘患者和健康体检者各60例,选用流式细胞术检测外周血Th17细胞的百分率;ELISA法检测外周血培养上清液中IL-17和IL-10的表达;电化学发光法检测血清中IgE的含量。结果哮喘组外周血Th17细胞比例、血清中IgE的含量及IL-17水平均高于健康对照组;而IL-10水平则低于健康对照组。结论 Th17细胞表达失衡可能在过敏性哮喘的发病机制中起重要作用。     

手足口病患儿Th17/Treg及其相关细胞因子的临床意义

目的探讨外周血辅助性T细胞17(Th17)与调节性T细胞(Treg),血清中相关细胞因子白细胞介素-17(IL-17)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-10)、转化生长因子-β(TGF-β)在手足口病(HFMD)中的作用。方法选取125例HFMD急性期患儿和45例健康体检者,其中急性期HFMD患儿分为普通组(69例)和重症组(56例)。外周血Th17、Treg百分数检测采用流式细胞术,血清IL-17、IL-6、IL-10、TGF-β水平检测利用酶联免疫吸附试验测定。结果和对照组相比,重症组和普通组患儿外周血Th17百分比和Th17/Treg比值,以及血清IL-17、IL-6水平均升高(均P0.05),外周血Treg百分比和血清IL-10、TGF-β水平均降低(均P0.05)。重症组患儿外周血Th17百分比和Th17/Treg比值,以及血清IL-17、IL-6水平均高于普通组(均P0.05),外周血Treg百分比和血清IL-10、TGF-β水平均低于普通组(均P0.05)。结论 Th17和Treg及其相关细胞因子水平变化异常与HFMD发病及疾病进程相关。     

Th17细胞、IL-17和MMP-13在过敏性紫癜发病机制中的作用

目的:通过测定过敏性紫癜(Henoch-Schonlein purpura,HSP)患者急性期外周血中Th17细胞、IL-17、基质金属蛋白酶-13(matrix metalloproteinase-13,MMP-13)的水平以及患者皮损处IL-17的表达,探讨HSP的免疫学发病机制。方法:应用流式细胞术(Flow Cytometry,FCM)检测HSP组和健康对照组外周血中Th17细胞比例;双抗体夹心酶联免疫吸附(ELISA)法检测上述研究对象血浆中IL-17和MMP-13的浓度;免疫组织化学法检测HSP组皮损组织和健康对照组皮肤组织IL-17的表达情况。结果:HSP组急性期外周血中Th17细胞比例为(1.21±0.59)%,明显高于对照组的(0.71±0.26)%(t=4.907,P 0.01);HSP组急性期血浆中IL-17和MMP-13浓度分别为(64.58±36.21)pg/ml和(17.57±5.40)ng/ml,均明显高于对照组的(26.16±14.90)pg/ml和(11.55±4.40)ng/ml(t=6.183,P 0.01和t=5.022,P 0.01);HSP组皮损组织中IL-17的免疫组织化学积分光密度值为(7.26±2.34),非常显著高于对照组的(4.61±1.82)(t=2.877,P 0.01)。结论:Th17细胞、IL-17以及MMP-13有可能参与过敏性紫癜的发病过程。     

支气管哮喘患儿外周血Th17和Th9细胞及其细胞因子的表达及临床意义研究

目的检测儿童支气管哮喘患者T细胞17(Th17)、外周血辅助性T细胞9(Th9)的比例及血清中白细胞介素-17(IL-17)、白细胞介素-9(IL-9)和总IgE的表达,探讨其在儿童支气管哮喘发病中的作用及临床意义。方法选取46例哮喘患儿,分为哮喘发作组(26例)、哮喘缓解组(20例),并设健康对照组(20例)。采用流式细胞术分别检测3组外周血中Th17细胞和Th9细胞的比例;应用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测3组儿童血清中IL-17和IL-9的水平;应用特定蛋白分析仪检测3组儿童血清中总IgE的水平。结果与哮喘缓解组、健康对照组相比,哮喘发作组外周血Th17和Th9细胞比例较高,差异有统计学意义(P0.05)。与健康对照组相比,哮喘缓解组外周血Th17和Th9细胞比例较高,比较差异有统计学意义(P0.05)。与哮喘缓解组、健康对照组相比,哮喘发作组血清中IL-17、IL-9和总IgE水平较高,差异有统计学意义(P0.05)。与健康对照组相比,哮喘缓解组血清中IL-17、IL-9和总IgE水平较高,差异有统计学意义(P0.05)。相关性分析结果表明,支气管哮喘患儿血清中IL-17、IL-9与总IgE水平均呈正相关(r值分别为0.717、0.491、0.786,P0.05)。结论支气管哮喘患儿外周血Th17和Th9细胞及其细胞因子在儿童支气管哮喘发病中发挥重要作用,并与哮喘的严重程度呈正相关。     

儿童肺炎支原体感染者血Th17/Treg的变化分析与临床意义

目的 探讨外周血辅助性T细胞17型(helper T cell type 17,Th17)和 CD4+CD25+调节性T细胞(Regulatory T cells,Treg)在肺炎支原体感染儿童体内的变化及临床意义.方法 肺炎支原体(mycoplasma pneumoniae,MP)感染组32例,分为普通肺炎组18例、肺炎合并肺外症状组14例;健康对照组26名.常规分离外周血单个核细胞,流式细胞术检测各组外周血Th17细胞、Treg的表达频率;ELISA方法 检测血清细胞因子IL-6、IL-17水平.结果 1.MP感染组外周血Th17细胞频率高于正常对照组(P＜0.01),肺外症状组血Th17细胞频率水平高于普通肺炎组(P＜0.01);MP感染组外周血Treg细胞表达频率低于正常对照组(P＜0.01),肺外症状组血Treg细胞频率低于普通肺炎组(P＜0.01).2.MP感染组血清IL-6、IL-17水平高于正常对照组(P＜0.01);肺外症状组血清IL-6、IL-17水平高于普通肺炎组(P＜0.01).结论 在儿童MP感染者体内存在Treg与Th17细胞频率明显改变,并伴有炎症性细胞因子水平升高,提示Treg与Th17细胞的频率异常在儿童MP感染的发病机制中起着重要的作用.     

脓毒血症患者外周血中Th17细胞检测及意义

目的 探讨脓毒症患者外周血Th17细胞和细胞因子IL-17、IL-6的表达水平及其对免疫功能的影响.方法 选取2010-04～2010-11住我院ICU病房的脓毒症患者62例,采用流式细胞术检测外周血Th17%(Th17/CD4+T),应用酶联免疫吸附方法(ELISA)检测血浆IL-17和IL-6的表达水平.同时选取来自我院查体中心的健康查体者30例作为对照组.结果 脓毒症患者外周血Th17%明显高于健康对照组(P<0.01);血浆IL-17、IL-6的表达亦显著高于对照组.患者血浆IL-17与IL-6表达水平呈正相关(r=0.886,P<0.01).Th17的表达与IL-17、IL-6的表达亦呈正相关(r1=0.846,r2=0.891,P均<0.01).结论 脓毒血症患者外周血中Th17%增加,血浆IL-17及IL-6表达水平亦升高,提示Th17参与脓毒血症的发病.     

Th17细胞/Treg细胞失衡在儿童过敏性紫癜发病机制中的作用

目的:探讨Th17细胞、CD4+CD25+调节性T细胞(regulatory T cell,Treg)及其特异性转录因子RORγt和FoxP3在儿童过敏性紫癜(Henoch-Schonlein purpura,HSP)发病机制中的作用,为儿童HSP的治疗从调控Th17/Treg失衡作为切入点提供一条新思路。方法:以2012年2月——2013年3月我院(四川省人民医院)儿科诊治的初次发病的HSP急性期患儿40例作为研究对象,以及同期来我院体检的健康儿童40例作为对照,采用SYBR Green I实时荧光定量PCR技术测定外周血单个核细胞中RORγt mRNA和FoxP3 mRNA的表达水平;用流式细胞术测定外周血T淋巴细胞中Th17细胞和Treg细胞的表达水平;用双抗夹心ABC-ELISA技术测定血清IL-17A、TGF-β1、IL-2和IL-6浓度。结果:HSP组Th17细胞(2.75±0.60%)及RORγt mRNA(1.11±0.51)明显高于对照组Th17细胞(1.41±0.29%)及RORγt mRNA(0.65±0.24)(P0.01),而Treg细胞(4.56±1.26%)及FoxP3 mRNA(1.15±0.45)明显低于对照组Treg细胞(7.85±1.97%)及FoxP3 mRNA(2.32±1.13)(P0.01);HSP组血清IL-17A(40.40±11.81 pg/ml)、IL-6(75.38±27.19 pg/ml)、TGF-β1(309.41±81.03 pg/ml)与对照组IL-17A(20.32±10.70 pg/ml)、IL-6(25.16±8.31 pg/ml)、TGF-β1(236.34±66.01 pg/ml)相比明显升高(P0.01),而血清IL-2(25.60±13.19 pg/ml)水平与对照组(34.42±11.69 pg/ml)比较则降低(P0.01);在HSP组Th17细胞表达与RORγt mRNA、IL-17A、IL-6表达呈正相关,相关系数分别为0.887,0.938,0.934(P0.01);Treg细胞表达与FoxP3 mRNA,IL-2表达呈正相关,相关系数分别为0.834,0.932(P0.01)。结论:急性期HSP患儿存在Th17细胞、RORγt mRNA及IL-17A表达水平升高,Treg细胞和FoxP3 mRNA表达水平降低,Th17/Treg细胞的失衡;急性期HSP患儿存在血清TGF-β1、IL-6水平增高,IL-2水平降低,且Th17细胞表达水平与IL-6表达呈正相关,Treg细胞表达水平与IL-2表达呈正相关。     

儿童过敏性鼻炎和支气管哮喘中周围Th17和调节性T细胞的失衡

目的探讨周围Th17细胞(Th17)和调节性T细胞(Treg)在儿童过敏性鼻炎(AR)与支气管哮喘(BA)中的失衡及临床意义。方法选取单纯过敏性鼻炎(AR组)、单纯支气管哮喘(BA组)及过敏性鼻炎合并支气管哮喘儿童(AR+BA组)为研究对象,每组25例。以同期入院体检的25例健康儿童为对照组。比较4组外周血Th17细胞、Treg细胞水平,对比4组免疫球蛋白E(IgE)、转化生长因子β_1(TGF-β_1)、第1秒用力呼气容积占预计值百分比(FEV_1%)及血清白介素IL-6、IL-17、IL-23、IL-10水平,并分析AR合并BA患儿IgE、FEV1%与Th17、Treg、TGF-β_1、IL-17的相关性。结果 AR组、BA组、AR+BA组外周血Th17细胞、Treg细胞、IgE、TGF-β_1、FEV1%与对照组比较均有显著差异(P0.05);AR组、BA组、AR+BA组IL-6、IL-17、IL-23均显著高于对照组(P0.05),且AR+BA组IL-17显著高于AR组、BA组(P0.05);相关分析显示IgE与Th17、IL-17水平呈正相关,与Treg、TGF-β_1水平呈负相关(P0.05)。结论儿童过敏性鼻炎和支气管哮喘中Th17与Treg细胞存在失衡,且其表达与IgE、FEV_1%均存在一定相关性。     

产科子宫切除17例分析

目的：探讨降低产科子宫切除及并发症的可能性。方法：回顾性分析我院1990年1月至2001年6月期间所做的产科子宫切除17例。结果：产科子宫切除术发生率为0．247％，其中剖宫产子宫切除发生率显著高于经阴道分娩者，1995年之后子宫切除发生率显著高于1995年之前。子宫收缩乏力为产科子宫切除的主要原因。结论：做好围产期保健工作，正确掌握剖宫产手术指征，降低剖宫产率可以有效地降低子宫切除发生率。     

IL-17A and IL-17F induce autophagy in RAW 264.7 macrophages

Autophagy is an important cellular catabolic process for the lysosomal degradation of cytoplasmic organelles, proteins and microorganisms. The autophagic process is intertwined with the immune response: autophagy regulates both innate and adaptive immunity, conversely, cytokines produced during the course of the immune response modulate various functions of the autophagic cascade. The IL-17 family member cytokines play a pivotal role in immune protection against extra- and intracellular bacterial pathogens. Since the effects of IL-17A and IL-17F on autophagy have not yet been reported, we have evaluated the autophagic activity in the RAW 264.7 cell line treated with either IL-17A or IL-17F. Both IL-17A and IL-17F proved to promote microtubule-associated protein 1 light chain 3 B-II (LC3B-II) accumulation, enhance the autophagic flux, facilitate the intracellular redistribution of LC3B, increase both the average number and the size of autophagosomes per cell, and foster the formation of acidic vesicular organelles. IL-17F was considerably more efficient than IL-17A in promoting the autophagic process. Further experiments to determine the potential effect of IL-17-induced autophagy on the antibacterial activity of RAW macrophages revealed that IL-17F significantly decreased the intracellular counts of Mycobacterium terrae, while the colony-forming unit values remained comparable in the IL-17A-treated cells and the control cultures. In conclusion, these results demonstrate that IL-17A and IL-17F are capable of inducing autophagy in macrophages, and thereby contribute to the elimination of Mycobacterium terrae. These data may bear on the pathogenesis of infections caused by Mycobacterium terrae, as IL-17 plays a pivotal role in the immune response to mycobacteria. IL-17-mediated activation of autophagy may also be implicated in various infections and other pathological conditions.     

辅助性T细胞17及其分泌的白细胞介素17在类风湿性关节炎患者的表达

目的 通过检测辅助性T细胞17(Th17)及其分泌的白细胞介素17(1L-17)在类风湿性关节炎(RA)患者的表达,探讨其在RA发病机制中的作用及其临床意义.方法 应用流式细胞术检测39例RA患者和20例健康对照者外周血Th17的比率,同时用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测IL-17的水平.结果 RA患者外周血Th17比率和血清中IL-17的水平均较健康对照组显著增高,(1.86±0,75)％ vs (0.46±0.73)％,(13.42±0.62) ng/L vs(5.38±1.67)ng/L (P＜0.01).RA未治疗组外周血Th17比率和血清中IL-17的水平显著高于治疗后未复发组,(2.42±0.69)％ vs (0.84±0.62)％,(14.63±6.02) ng/L vs (8.86±1.35) ng/L(P＜0.01),但未治疗组与治疗后复发组比较差异无统计学意义(P＞0.05);RA患者关节液中IL-17水平明显高于血清中的水平(13.76±0.49)ng/Lvs (12.38±0.54) ng/L( P＜0.05).结论 RA患者Th17的比率及其IL-17的水平均高,它们可能参与了RA的发病和病情进展.     

过敏性哮喘患者外周血Th17细胞及IL-17水平的变化

目的:探讨Th17细胞及其细胞因子IL-17水平在过敏性哮喘患者外周血中的变化及意义。方法:通过测定屋尘螨特异性IgE(sIgE)而选取19例轻度、16例中重度过敏性哮喘患者作为研究对象,并行肺功能及哮喘控制问卷(ACQ)调查,18名正常人作为对照。采用流式细胞术检测外周血Th17细胞的百分率,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血浆以及重组屋尘螨抗原蛋白1(rDerp1)刺激48h后外周血单个核细胞(PBMC)上清液中的IL-17水平。结果:中重度过敏性哮喘患者外周血Th17细胞百分率、血浆以及rDerp1刺激后PBMC上清液中的IL-17水平高于轻度哮喘患者(P值分别为<0.01、<0.01、<0.05)及正常对照组(P值分别为<0.01、<0.01、<0.05)。哮喘患者外周血中Th17细胞百分率、血浆IL-17水平与第1秒用力呼气容积(FEV1)占预计值百分率(%)呈负相关,与ACQ平均分呈正相关(P值均<0.01)。结论:Th17细胞应答增强可能促进哮喘加重,并影响其症状控制。