鼻咽癌高癌家系成员中医体质特征调查

目的:观察鼻咽癌高癌家系成员中医体质特征。方法:建立中医体质证候分类标准,分别调查鼻咽癌高癌家系核心成员、鼻咽癌高癌家系鼻咽癌患者的中医体质类型,并以散发性鼻咽癌患者(外对照组)及高癌家系已婚核心成员配偶(内对照组)进行中医病理体质的对照研究。结果:鼻咽癌高癌家系核心成员中医体质证候类型主要表现为正常质和气虚质,而内对照组成员则多表现为正常质,高癌家系鼻咽癌患者多表现为气虚质、失调热质和复合质,散发性鼻咽癌患者多表现为气虚质和复合质,后三者各组间比较,差异有显著性或非常显著性意义(P<0.05,P<0.01)。而将高癌家系核心成员中医体质类型与外对照组比较,差异无显著性意义(P>0.05)。51例高癌家系核心成员中,共有复合质7例,其中虚热质4例,虚湿质、湿热质、虚热瘀质各1例;而内对照组成员则未见复合质者。高癌家系鼻咽癌患者17例中,共有复合质7例,其中虚热质1例,虚湿质2例,湿热质3例,虚热瘀质1例,与高癌家系核心成员比较,差异无显著性意义(P>0.05)。外对照组成员34例中,有复合质6例,其中虚湿质3例,虚寒质1例,湿热质2例,与高癌家系核心成员及高癌家系鼻咽癌患者比较,差异无显著性意义(P>0.05...     

鼻咽癌家系体质调查研究

目的 :调查鼻咽癌患者及其家系成员的中医体质类型分布情况。方法 :运用中医体质调查表 ,对 16名初诊鼻咽癌患者、38名放疗后鼻咽癌患者、119名鼻咽癌核心家系成员及 98名家系成员之配偶 (作为对照 )的体质类型进行调查。采用SPSS(10 0 )进行统计分析。结果 :鼻咽癌家系成员体质以虚弱质为特点 ,而鼻咽癌放疗后患者以虚热及虚瘀体质为特点。回归分析显示 ,虚弱质为家系成员的主要体质高危因素 ,虚热及虚瘀体质、癌家族史及嗜食腌熏食品为鼻咽癌患者发病相关的主要危险诱因。结论 :虚弱质是鼻咽癌发生的首要内因和基本体质 ,而在鼻咽癌形成后及治疗中则出现虚热及虚瘀体质。     

糖心康对糖尿病大鼠心肌组织基因Slc4a1mRNA表达的影响

目的比较糖尿病性心肌病大鼠和中药复方糖心康治疗组大鼠心肌组织中基因表达的差异,并用Evegreen实时荧光RT—PCR技术定量检测溶质载体家族4阴离子交换体成员（Slc4a1mRNA）在各组大鼠心肌组织的表达水平。方法差异表达基因的筛选;荧光定量RT—PCR的检测。结果糖尿病性心肌病模型组心肌组织基因Slc4a1mRNA表达下调,中药复方糖心康治疗组心肌组织基因Slc4a1mRNA表达上调。结论Slc4a1mRNA在糖尿病状态下心肌组织也有表达,并且表达下调,而中药复方糖心康可使其上调,这也是中药复方糖心康对糖尿病性心肌组织损伤具有保护作用的机制之一。     

FAM150B甲基化致低表达与鼻咽癌气虚癌变研究

目的:采用甲基化芯片及免疫组化研究FAM150B甲基化及其蛋白的表达。方法:3例鼻咽癌发病前后配对患者,采用甲基化芯片技术检测FAM150B甲基化,随机选择100例患者,包括鼻咽癌和鼻咽炎各50例及气虚质44例和正常质56例。采用免疫组化方法检测FAM150B蛋白的表达。结果:FAM150B在鼻咽癌为高甲基化,FAM150B蛋白在鼻咽炎为高表达,在鼻咽癌为低表达,其表达值分别为(0.995±0.511,0.257±0.392);FAM150B蛋白在正常质为高表达,在气虚质为低表达,其表达值分别为(0.765±0.615,0.449±0.498)。结论:FAM150B甲基化致其低表达为鼻咽癌及气虚质的特征,FAM150B为鼻咽癌气虚癌变的分子指标。     

健脾解毒方对肠癌细胞DNA损伤修复相关基因表达的影响

目的观察健脾解毒方对肠癌HCT116细胞DNA损伤修复相关基因表达及其细胞增殖的影响。方法不同浓度健脾解毒方作用于HCT116细胞24、48、72 h后,CCK-8法检测细胞增殖活力;200 mg/L的健脾解毒方处理HCT116细胞24 h后,利用二代基因测序技术测定细胞内基因mRNA相对表达量,筛选明显下调及与化疗耐药相关的DNA损伤修复相关基因;荧光定量PCR鉴定DNA损伤修复相关基因mRNA表达变化,Western blot检测蛋白表达变化。结果 CCK-8法细胞增殖实验结果表明,健脾解毒方对HCT116细胞具有显著的增殖抑制作用,健脾解毒方对HCT116细胞的增殖抑制呈时间-剂量依赖性(P0.01);健脾解毒方对HCT116细胞的24 h、48 h、72 h半数抑制浓度IC50分别为85.7 mg/L、34.44 mg/L、20.56 mg/L。二代测序结果发现,共有52种DNA损伤修复相关基因的表达受到健脾解毒方的调控,结合文献筛选出ATM、ATR、CHEK1、MDC1和XRCC3作为候选基因进行下一步分析;荧光定量PCR的结果表明,健脾解毒方可以显著抑制HCT116细胞ATM、ATR、CHEK1、MDC1、XRCC3的mRNA表达(P0.01);Western blot的结果显示,健脾解毒方可明显降低HCT116细胞ATM、ATR、CHEK1、MDC1、XRCC3基因的蛋白表达(P0.05、P0.01)。结论健脾解毒方可以有效抑制肠癌细胞的增殖,其机制可能是抑制DNA损伤修复相关基因的表达。     

广东籍汉族气虚质鼻咽癌患者HLA基因多态性研究

目的:调查广东籍汉族气虚质鼻咽癌患者的HLA(人类白细胞抗原)易感性。方法:应用聚合酶链反应/序列特异性引物(PCR-SSP)方法对34例广东籍汉族气虚质鼻咽癌患者及正常对照组30例进行HLA-A、HLA-B及DR B1基因分型。结果:广东籍汉族气虚质鼻咽癌患者的HLA-A*02、HLA-B*15、HLA-DR B1*03基因位点的频率高于正常对照组。结论:HLA-A*02、HLA-B*15、HLA-DR B1*03可能是广东籍汉族气虚质鼻咽癌患者的易感性基因。     

肾消康对糖尿病大鼠肾组织基因CcL5mRNA表达的影响

目的：比较糖尿病肾病（DN）大鼠和中药复方肾消康治疗组大鼠肾脏组织中基因表达的差异，并用Evegreen实时荧光RT—PCR技术定量检测CcL5mRNA在各组大鼠肾脏组织的表达水平。方法：（1）差异表达基因的筛选：实验大鼠分为空白组、模型组、治疗组。从肾脏组织中抽提mRNA，由纯化的总RNA合成双链cDNA，并将其纯化，以生物素标记cRNA合成，纯化和质控体外转录（IVT）产物，片断化cRNA，然后进行杂交、洗脱、染色、芯片扫描并用软件进行统计分析，筛选出差异表达数据。不同肾脏组织样本用灰度扫描图和杂交信号强度散点图表示。（2）荧光定量RT—PCR的检测：RNA样品反转录，荧光定量PCR反应。结果：仅对筛选出差异表达基因谱中的CcL5mRNA进行报告。糖尿病肾病模型组肾脏组织基因CcL5mRNA表达上调，中药复方肾消康治疗组肾脏组织基因CcL5mRNA表达下调。结论：CcL5mRNA在糖尿病状态下肾脏也有表达，并且表达上调，而中药复方肾消康可使其下调，这也是中药复方对糖尿病性肾组织损伤具有保护作用的机制之一。     

血瘀质非创伤性股骨头坏死miRNA差异表达筛选及生物信息学分析

目的筛选血瘀质、非血瘀质非创伤性股骨头坏死(NONFH)患者与健康人外周血中差异表达的miRNA,建立miRNA表达谱,分析其生物学信息,为血瘀质NONFH的防治提供依据。方法选取血瘀质、非血瘀质NONFH患者各10例(NONFH组)和健康志愿者8例(正常组),采用RT-PCR检测其血浆miRNA相对表达量,筛选差异表达的miRNA。应用实时荧光定量PCR对差异表达的hsa-miR-365a-3p、hsa-miR-483-3p进行验证。采用TargetScan、microRNAorg、PITA在线数据库对差异miRNA进行靶基因预测,并进行靶基因生物信息学分析。结果与正常组比较,NONFH组有差异表达的miRNA50个,其中上调21个,下调29个。与非血瘀质NONFH组比较,血瘀质NONFH组有差异表达的miRNA 33个,其中上调10个,下调23个。经筛选,最终确定血瘀质NONFH差异表达miRNA 5个。实时荧光定量PCR验证结果与miRNA芯片结果相符。3个在线数据库共筛选出交集靶基因11个,仅表达下调miRNA中hsa-miR-365a-3p检出交集靶基因11个,余未检测出交集靶基因。GO分析显示,差异表达miRNA主要与受体结合、蛋白及酶的活性有关。Pathway分析显示,血瘀质NONFH差异表达miRNA靶基因主要富集于轴突导向、Rap1、赖氨酸降解、Fc epsilon RI、甘油磷脂代谢、T细胞受体、血小板活化、成骨细胞分化等多个信号通路。结论血瘀质NONFH差异表达miRNA可能通过调控Rap1、赖氨酸降解、甘油磷脂代谢、血小板活化、成骨细胞分化、Ras、PI3K-Akt等信号通路参与NONFH发生发展过程。     

三阴性乳腺癌患者中医体质类型分析及其与TOP2A基因表达的相关性

目的探讨TOPA2基因在三阴性乳腺癌中的表达特点及其与中医体质类型的相关性。方法对符合纳入标准的71例三阴性乳腺癌患者进行体质辨识,统计各体质类型分布情况。采用实时荧光定量聚合酶链反应对有肿瘤组织残存的组织蜡块进行TOP2A基因检测。采用相对定量2-ΔΔCt法分析各个样本目的基因表达的变化。采用单因素相关法对体质类型分布情况(频数)与TOP2A基因扩增表达(表达率)进行相关性分析,采用SPSS17.0统计软件进行分析。结果 71例患者可分为平和质(0例)、气虚质(18例)、阳虚质(10例)、阴虚质(12例)、气郁质(7例)、血瘀质(10例)、痰湿质(8例)、湿热质(6例)、特禀质(0例),均为偏颇体质,气虚质所占比例最大(25.35%),阴虚质(16.90%)和血瘀质(14.08%)次之。TOP2A基因扩增表达与各中医体质呈负相关(P0.05)。结论三阴性乳腺癌人群体质主要为偏颇体质,以气虚质、阴虚质和血瘀质为主。三阴性乳腺癌常见发病体质中的TOP2A基因表达呈正常或缺失状态,提示化疗敏感性低,预后差。     

糖心康对糖尿病大鼠心肌基因Alox 12mRNA表达的影响

观察中药复方糖心康对糖尿病心肌损伤大鼠的作用机理。方法：采用链脲佐菌素（S1Z）加高热量饮食建立糖尿病大鼠心肌损伤模型。采用美国Affymetrix Rat2302．0基因表达谱芯片及聚类分析，筛选差异表达基因，采用荧光定量RT—PCR法验证。结果：花生四烯酸12-脂加氧酶mRNA（Alox12mRNA）是筛选出的差异表达基因。在糖尿病状态下，Alox12mRNA基因表达上调，经糖心康治疗后表达下调。结论：Alox12mRNA和糖尿病心肌损伤有重要相关性，糖心康对其有良性调节作用。