HLA—DQA反相杂交法分型与多聚酶链反应—单链构象多态性配型的…

为了验证多聚酶链反应－单链构象多态性方法在骨髓移植型中的可靠性和准确性，采用掺入生物素的多聚酶链反应对ＨＬＡ－ＤＱＡ位点基因进行特异性扩增。将所选区分ＨＬＡ－ＤＱＡ位点等位基因的特异性探针点于尼龙膜上，用标记的扩增产物与膜上探针杂交，并用碱性磷酸酶显色法杂交信号，确定待测标本的基因型。     

HLA-DQA反相杂交法分型与多聚酶链反应－单链构象多态性配型的比较

为了验证多聚酶链反应－单链构象多态性方法在骨髓移植配型中的可靠性和准确性，采用掺入生物素的多聚酶链反应对ＨＬＡ－ＤＱＡ位点基因进行了特异性扩增。将所选区分ＨＬＡ－ＤＱＡ位点等位基因的特异性探针点于尼龙膜上，用标记的扩增产物与膜上探针杂交，并用碱性磷酸酶显色法检测杂交信号，确定待测标本的基因型。对２０对异基因骨髓移植的供、受者进行ＨＬＡ－ＤＱＡ位点的基因分型，并与多聚酶链反应－单链构象多态性配型作比较。结果表明，２０对供、受者的多聚酶链反应－单链构象多态性配型结果与该反相杂交法基因分型结果一致。多聚酶链反应－单链构象多态性方法是一种骨髓移植的供、受者配型，快速可靠的方法     

HLA逆向杂交基因分型技术

逆向杂交是近年用于HLA基因分型的技术,它是将一组具有等位基因特异性的探针固定在膜条上,在严格条件下与样本DNA杂交分析其多态性。该方法简便、快速,2小时可完成实验,已用于HLA-DP、DR、DQ等位基因多态性分析,优于传统的寡核苷酸探针杂交技术。     

HLA基因分型方法学进展

ＨＬＡ基因分型方法学进展５１８０２０深圳市血站杨春森ＨＬＡ复合体由一组紧密连锁的复等位基因组成，具有高度的多态性。ＨＬＡ－Ａ座位有５９个、Ｂ座位有１２６个、Ｃ座位有３９个、Ｄ座位有约２８０个等位基因，ＨＬＡ－Ⅱ类基因区至少有３６个基因座位，因此总共至...     

HLA的PCR—SSP分型技术

ＰＣＲ－ＳＳＰ是采用ＰＣＲ技术，针对被检基因设计一系列具有等位基因多态性的序列特异上物扩增被检标本，分析ＰＣＲ产物判定ＨＬＡ型别，ＨＬＡ－ＤＲＩ￣ＤＲ１８可以采用１９对引物检定，采用两步法以７９对引物可以检定ＤＲ全部基因型。ＨＬＡ－ＤＱ采用２０条引物不同组合，陈检定与血清学型别一致的特异性还可分析部份基因型；以２２对引物则可检定ＤＱＢ１全部基因型。ＰＣＲ－ＳＳＰ技术比ＰＣＲ－ＳＳＯＰ及ＰＣＲ－ＲＥ     

两个糖尿病家庭HLA—DQA1和—DQB1等位基因比较

糖尿病是一种多病因的疾病，具有遗传因素的作用。胰岛素依赖型糖尿病（ＩＤＤＭ）的遗传与ＨＬＡ－ＤＱ基因具有高度相关性。本文通过对ＭＯＤＹ和ＩＤＤＭ两个糖尿病家庭成员的ＤＮＡ进行ＨＬＡ－ＤＱＡ１和ＤＱＢ１基因ＰＣＲ扩增，以Ｂｉｏ－１１－ｄＵＴＰ标记核苷酸探针杂交分析，证实：１，ＭＯＤＹ的遗传与ＨＬＡ－ＤＱ基因无关联。２．ＩＤＤＭ的遗传不仅与ＨＬＡ－ＤＱ基因高度相关而且具有环境因素作用。３．易感基因之间     

聚合酶链反应—单链构象多态性分析与反向杂交法进行骨髓移植…

用聚合酶链反应（ＰＣＲ），扩增骨髓移植（ＢＭＴ）受者及７８例无关供者ＨＬＡ－ＤＰＢ１基因，作单链构象多态性（ＳＳＣＰ）分析，初步选出与受者ＨＬＡ－ＤＰＢ１ＳＳＣＰ带型相同者；最后进行反向杂交检测，确定ＨＬＡ－ＤＰＢ１更为相容的供者。应用上述技术，从７８例无关供者中选择出１例与ＢＭＴ受者基因相同的供者。整个过程快速、经济、准确性高。     

应用PCR－SSP对异基因骨髓移植供受者HLA－DQA1位点的基因分型

为探索一种可靠性和灵敏性高的ＨＬＡⅡ类基因的配型方法，根据Ｏｌｅｒｕｐ提出的１６个特异性引物序列，用多聚酶链反应－序列特异性引物（ＰＣＲ－ＳＳＰ）方法，对ＤＱＡ＿１基因位点的多态性进行检测和分型，并与多聚酶链反应－序列特异性寡核苷酸探针杂交（ＰＣＲ－ＳＳＯＰＨ）及多聚酶链反应－单链构型多态性（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）检测结果进行比较，获得了一致的分型结果。ＰＣＲ－ＳＳＰ可分辨出ＤＱＡ＿１位点的纯合体和杂合体等位基因，并能检测出单一碱基的点突变；它将ＰＣＲ扩增和检测两个步骤合并为一次完成，操作更简便、快速。并已将ＰＣＲ－ＳＳＰ方法成功地用于１５对异基因骨髓移植的供、受者的分型。ＰＣＲ－ＳＳＰ作为基因分型的有效技术，可为骨髓来源提供直接的科学依据。     

微量聚合酶链反应对人类白细胞抗原的基因分型

目的 探讨应用于移植的人类白细胞抗原（ＨＬＡ）二类基因（ＤＲＢ／ＤＱＢ）快速分型新技术。方法 采用快速ＤＮＡ抽提技术,建立了ＨＬＡ＿ＤＲＢ／ＤＱＢ微量序列特异性引物聚合酶链反应基因分型方法,对１４２份供受者ＤＮＡ进行ＨＬＡ－ＤＲＢ／ＤＱＢ基因分型,并与单克隆抗体一叔法ＨＬＡ血清学分型技术进行对比研究。结果 应用微量ＰＣＲ－ＳＳＰ方法共检出１３种ＤＲＢ１等位基因和 ＤＱＢ１等位基因,与血清学分型结果     

支气管哮喘HLA—DRB1等位基因研究

目的：研究山西汉族支气管哮喘患者的ＨＬＡ－ＤＲＢ１等位因基的频率。方法：采用顺序特异引物聚合酶链反应（ＰＣＲ／ＳＳＰ）技术检测山西汉族６４例支气管哮喘患者ＨＬＡ－ＤＲＢ１等位基因频率,并与山西正常人群进行比较分析。结果：支气管哮喘组ＨＬＡ－ＤＲＢ１＊１５０１／１５０２基在频率明显增高（Ｐ〈０．０５）,Ｏ ２３．４４％;其它等位基因频率在两组间无显著差异。结论：在山西汉族人群中ＨＬＡ－ＤＲＢ１＊１５     

应用PCR-RFLP技术对HLA-DRB1*04位点进行基因分型

目前对ＨＬＡ－ＤＲＢ１等位基因分型，应用较多方法是ＰＣＲ－ＳＳＯＰ法，其优点是结果准确可靠，缺点是需合成许多探针，有放射性辐射，操作复杂及耗时长。为了探索快速、简便、精确的ＤＲＢ１＊０４等位基因分型方法，笔者对Ｏｔａ等［１］的方法加以改进，用ＰＣＲ－...     

应用序列特异引物PCR法对广西壮族HLA－DQA_1进行基因分型

应用序列特异引物多聚酶链反应（ＰＣＲ）方法对８２名无血缘关系的广西壮族健康人的ＨＬＡ－ＤＱＡ＿１进行基因分型。共检出７种ＤＱＡ＿１等位基因，以ＤＱＡ＿１＊０３０１的频率最高，达３１％，其次为ＤＱＡ＿１＊０１０４，０１０２和０５０１，检出率分别为２４．３％，１６．９％和１１．７％。未检出的等位基因有ＤＱＡ＿１＊０２０１，０３０２和０６０１。结果表明，壮族的ＨＬＡ－ＤＱＡ＿１等位基因频率分布除与中国南方人相似外，尚有其特点。序列特异引物ＰＣＲ方法不需要放射性同位素，简便快速、准确可靠的ＨＬＡ－ＤＱＡ＿１基因分型新方法。     

应用PCR—SSP对异基因骨髓移植供受者HLA—DQA1位点的基因分型

为探索一种可靠性和灵敏性高的ＨＬＡⅡ类基因的配型方法，根据Ｏｌｅｒｕｐ提出的１６个特异性引物序列，用多聚酶链反应－序列特异性引物（ＰＣＲ－ＳＳＰ）方法，对ＤＱＡ１基因位点的多态性进行检测和分型，并与多聚酶链反应－序列特异性寡核苷酸探针杂交（ＰＣＲ－ＳＳＯＰＨ）及多聚酶链反应－单链构型多态性（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）检测结果进行比较，获得了一致的分型结果。ＰＣＲ－ＳＳＰ可分辨出ＤＱＡ１位点的纯合体和杂合体     

应用序列特异引物PCR法对广西壮族HLA—DQA1进行基因分型

应用序列特异引物多聚酶链反应（ＰＣＲ）方法对８２名无血缘关系的广西壮族健康人的ＨＬＡ－ＤＱＡ１进行基因分型。共检出７种ＤＱＡ１等位基因，以ＤＱＡ１＊０３０１的频率最高，达３１％，其次为ＤＱＡ＾０１０４，０１０２和０５０１，检出率分别为２４．３％，１６．９％和１１．７％。未出的等位基因有ＤＱＡ１＊０２０１，０３０２和０６０１。结果表明，壮族的ＨＬＡ－ＤＱＡ１等位基因频率分布除与中国南方人相似外。     

类风湿关节炎患者HLA－DR_4等位基因的检测

类风湿关节炎患者ＨＬＡ－ＤＲ_４等位基因的检测王保龙，高萍，黄尊波（安徽省临检中心，安徽合肥２３０００１）李向培，厉小梅，汪国生（安徽省立医院内科）关键词等位基因，类风湿关节炎，类风湿因子，ＨＬＡ－ＤＲ_４许多自身性免疫疾病与一些特定的Ⅱ类分子等位基因...     

HLA—DPB1等位基因与特发性血小板减少性紫癜的相关性研究

采用多聚酶链反应（ＰＣＲ）结合限制性片段长度多态性（ＲＦＬＰ）技术对５３例正常人和５５例慢性特发性血小板减少性紫癜（ＩＴＰ）患进行ＨＬＡ－ＤＰＢ１等位基因分型。结果显示，对照组无一例有ＤＰＢ１·１３０１等位基因，ＩＴＰ组６例存在ＤＰＢ１·１３０１等位基因（ＲＲ＝１４．０２，Ｐ〈０．０５），此外，ＤＰＢ１·０２０１＋０２０２所对应的ＤＰｗ２抗原纯合子在ＩＴＰ组明显多于对照组（ＲＲ＝３．９４，Ｐ〈０     

严重药物不良反应分子标志物 ＨＬＡ Ｂ ５８：０１、ＨＬＡ Ｂ １５：０２ 和 ＨＬＡ Ａ ３１：０１ 在山东汉族人群中的分布

目的 调查山东汉族人群 ＨＬＡ Ｂ ５８：０１、ＨＬＡ Ｂ １５：０２ 和 ＨＬＡ Ａ ３１：０１ 等位基因携带率和等位基因频率，指导患者 临床用药，并评估进行临床基因筛查的必要性。方法 调查山东省骨髓库具有 ＨＬＡ Ａ、ＨＬＡ Ｂ 位点高分辨数据的汉族人群样 本，统计 ＨＬＡ Ｂ ５８：０１、ＨＬＡ Ｂ １５：０２ 和 ＨＬＡ Ａ ３１：０１ 等位基因携带率和等位基因频率，并按照志愿者籍贯进行分组，归为 １４ 个地市。结果 山东汉族人群中，ＨＬＡ Ｂ ５８：０１、ＨＬＡ Ｂ １５：０２、ＨＬＡ Ａ ３１：０１ 等位基因携带率分别为 ８．６５％、３．０３％和 ７．３％。日照、东营、临沂地区 ＨＬＡ Ｂ ５８：０１ 等位基因携带率达 １０％以上；枣庄、滨州和济南地区 ＨＬＡ Ａ ３１：０１ 等位基因携带 率达 ８％以上；聊城、济南、淄博地区 ＨＬＡ Ｂ １５：０２ 等位基因携带率分别为 ３．９６％、３．８４％和 ３．７７％。结论 山东地区汉族人群 患者在使用别嘌醇和卡马西平药物之前进行 ＨＬＡ Ｂ ５８：０１ 和 ＨＬＡ Ａ ３１：０１ 基因筛查是有必要的，ＨＬＡ Ｂ １５：０２ 等位基因 携带率虽较低，但有条件的地区可以在开展用药前进行基因筛查，以减少严重药物不良反应的发生。     

免疫遗传学分子基础及在输血等领域的应用(续三)

免疫遗传学分子基础及在输血等领域的应用（续三）美国国立卫生研究院赵桐茂４．１．４ＨＬＡ的遗传多态性４．１．４．１ＨＬＡ座位间的连锁不平衡ＨＬＡ遗传系统的一个重要特点是不同座位上的等位基因之间存在连锁不平衡，即实际上观察到的某２个基因出现在同１条单体型...     

用序列特异性引物的PCR方法分析慢性淋巴细胞性甲状腺炎患者…

慢性淋巴细胞性甲状腺炎（ＣＬＴ）是一种器官特异性自身免疫性疾病，其遗传易感性与ＨＬＡ－Ⅱ类基因具有相关性，本研究用序列特异性引物的ＰＣＲ（ＰＣＲ－ＳＳＰ）方法，分析２６名由病理证实的ＣＬＴ及正常对照２０例外周血白细胞基因组ＤＮＡ的ＭＨＣ－ＤＱＡ１位点的基因多态性分布，发现两组间有明显不同，其中ＤＱＡ１＊０３０１的等位基因频率显著高于对照组（Ｐｃ小于０．０５）ＤＱＡ１＊０３０１／０３０１的纯合子频率     

广西壮族人HLA-DQB1等位基因与β地中海贫血的相关性

目的：探讨ＨＬＡ抗原与β地中海贫血（地贫）的相关性。方法：应用聚合酶链反应序列特异引物（ＰＣＲＳＳＰ）方法对６４名随机抽样的，无血缘关系，三代以上均为壮族并三代以上居住在广西，籍贯分布广西各地，均在本实验室经基因诊断证实为β地贫的患者进行ＨＬＡＤＱＢ１基因分型。结果：发现ＨＬＡＤＱＢ１０６０４等位基因在该群体中频率为１２．５％，对照组为１．４％；其相对危险度为９．９，与对照组比较，有非常显著差异（显著性检验χ２＝２０．７８，Ｐ＜０．００５）。结论：提示ＨＬＡＤＱＢ１０６０４等位基因与广西壮族居民β地贫的易感性有关联