虾青素对过氧化氢所致HepG2细胞线粒体氧化损伤及生存能力下降的保护作用

目的探讨虾青素对H_2O_2导致的HepG2细胞线粒体氧化损伤及生存能力下降的保护作用。方法采用H_2O_2损伤HepG2细胞,测定细胞内Ca~(2+)浓度及线粒体膜电位、胞浆中细胞色素c(Cyt-c)的阳性表达率变化考察了虾青素对活性氧所致线粒体氧化损伤的保护作用;测定细胞存活率、乳酸脱氢酶(LDH)释放率考察了虾青素对活性氧所致细胞生存能力下降的保护作用。结果虾青素(1.0×10~(-7)、1.0×10~(-6)、1.0×10~(-5)mol·L~(-1))能明显抑制H_2O_2导致的细胞内Ca~(2+)浓度升高、线粒体膜电位降低、Cyt-c的释放增加;以及细胞存活率下降、LDH释放率增加。结论虾青素对H_2O_2所致细胞线粒体氧化损伤及细胞生存能力下降具有明显的保护作用,其机制可能与其抗氧化作用有关。     

羧甲基壳聚糖对阿霉素所致红细胞膜损伤的保护作用

目的研究羧甲基壳聚糖(CM-COS)对阿霉素所致红细胞膜损伤的影响。方法用阿霉素作用红细胞膜,建立膜损伤实验模型。以红细胞形态学、细胞溶血率、超氧化物歧化酶(SOD)活力、丙二醛(MDA)含量、细胞膜流动性、封闭能力等为指标,观察羧甲基壳聚糖对红细胞膜损伤的保护作用。结果阿霉素能引起红细胞溶血率和MDA含量增加,SOD活性降低、膜流动性以及膜封闭度下降。而经过一定量的羧甲基壳聚糖(400,600,800μg·mL-1)预处理后红细胞溶血率和MDA含量明显减少,SOD活性、膜流动性和膜封闭度提高。结论羧甲基壳聚糖对阿霉素引发的红细胞膜损伤具有一定的保护作用。     

人参皂苷Rg3对H2O2诱导人肾小球系膜细胞氧化应激损伤的保护作用及其机制研究

目的探究人参皂苷Rg_3对H_2O_2诱导人肾小球系膜细胞氧化应激损伤的保护作用及其作用机制。方法采用H_2O_2诱导建立人肾小球系膜细胞氧化应激损伤模型。以不同浓度的人参皂苷Rg_3对人肾小球系膜细胞预处理24 h,采用CCK-8试验、乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒以及丙二醛(MDA)测定试剂盒分别检测细胞凋亡数量、细胞培养液中LDH水平和MDA含量。通过流式细胞术、q RT-PCR以及Western blotting检测细胞周期、CDK4的m RNA水平和蛋白表达。结果 400μmol/L H_2O_2培养细胞4 h能够建立稳定有效的人肾小球系膜细胞氧化应激损伤模型。随着人参皂苷Rg_3浓度的增加,被H_2O_2损伤的细胞的凋亡数量、细胞外LDH活性、细胞产生的MDA的含量均明显下降。40μmol/L人参皂苷Rg_3可以把人肾小球系膜细胞的细胞周期阻滞在G1期,下调CDK4的m RNA水平和蛋白表达水平。结论人参皂苷Rg_3可以通过抑制CDK4而对人肾小球系膜细胞氧化应激损伤发挥保护作用。     

天麻对红细胞膜过氧化损伤的保护作用

目的:考察天麻提取物对活性氧自由基致红细胞(RBC)膜过氧化损伤的保护作用。方法:采用2种活性氧产生体系诱发红细胞膜损伤模型,并以此实验模型考察其对兔RBC膜损伤的影响。结果:天麻提取物(25,50,100 g·L~(-1))能明显抑制邻苯三酚自氧化体系中O_2~-的产生(P<0.01);能显著抑制H_2O_2诱发膜脂质过氧化物丙二醛(MDA)的生成(P<0.01)。结论:天麻对活性氧自由基诱导的RBC膜过氧化损伤有保护作用。     

莲心碱对氧自由基引发红细胞膜损伤的保护作用

目的研究莲心碱对超氧阴离子自由基(O2.)引发的红细胞膜氧化损伤的影响。方法采用邻苯三酚自氧化产生的超氧阴离子自由基O2.致红细胞膜损伤,以此为膜过氧化损伤实验模型,以脂质过氧化产物丙二醛(MDA)、细胞膜封闭能力、细胞膜自氧化速率、膜脂流动性(MFU)为指标,观察莲心碱对红细胞膜氧化损伤的保护作用。结果O2.能引起红细胞膜脂质过氧化,丙二醛(MDA)含量、自氧化速率增加、膜流动性以及膜封闭度下降。而红细胞膜经过一定量的莲心碱(80,100,120mg.L-1)预先处理后,膜MDA含量明显减少,自氧化速率明显降低,膜流动性和膜封闭度提高。结论莲心碱对氧自由基引发的红细胞膜损伤具有一定的保护作用。     

D-聚甘酯对血管内皮细胞损伤的保护作用

目的 用 H_2O_2(200μmol·L~(-1))诱导人脐静脉内皮细胞株ECV304氧化损伤,研究D-聚甘酯(DPS)对血管内皮细胞损伤的保护作用。方法 噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞活性,采用试剂盒测定细胞内脂质过氧化产物丙二醛(MDA)含量、培养液中乳酸脱氢酶(LDH)和超氧化物歧化酶(SOD)活性。同时采用流式细胞仪检测损伤后细胞内Ca~(2+)含量,并观察DPS对H_2O_2导致的内皮细胞内钙离子浓度的影响和细胞凋亡的作用。结果DPS 0.1,1,10μg·L~(-1)对损伤后ECV304具有促进增殖作用。DPS 0.1,1μg·L~(-1)使细胞培养液中SOD水平升高并降低细胞内MDA含量,4个剂量的DPS均能使细胞培养液中LDH释放减少。流式细胞术检测结果显示DPS能降低H_2O_2导致的细胞内Ca~(2+)含量的升高,并抑制细胞凋亡。结论 DPS具有保护H_2O_2致血管内皮细胞损伤的作用,其机理可能与其抗脂质过氧化作用,降低损伤后细胞内Ca~(2+)含量并抑制细胞凋亡有关。     

虾青素对活性氧所致海马神经细胞氧化损伤的保护作用

目的从细胞水平上研究了虾青素对活性氧所致海马神经细胞损伤的保护作用。方法通过B27无血清培养法进行SD乳鼠的大脑海马神经细胞的分离、培养及其鉴定;MTT法检测细胞存活率,比色法测定细胞LDH的释放量,SOD、CAT活性、GSH-Px的活力及MDA的含量。结果虾青素能提高活性氧损伤过的海马神经细胞的存活率,减少细胞LDH的释放量,并增加细胞SOD、CAT活性、GSH-Px的活力,降低MDA的含量。结论虾青素对活性氧诱导的海马神经细胞损伤具有保护作用。     

根皮苷对过氧化氢诱导损伤PC12细胞的保护作用

目的探讨根皮苷对过氧化氢(H2O2)诱导的PC12细胞氧化损伤的保护作用。方法以H_2O_2损伤PC12细胞建立氧化损伤模型,随机分为空白对照组、模型组(400μmol·L~(-1) H_2O_2)、阳性对照(20μmol·L~(-1)N-乙酰半胱氨酸)组和不同浓度根皮苷(16、32、64μmol·L~(-1))预处理组。采用MTT法检测细胞活力,显微镜观察细胞形态,ELISA检测细胞活性氧(ROS)和丙二醛(MDA)的含量及超氧化物歧化酶(SOD)活力,Western blot检测NF-E2相关因子2(Nrf2)和血红素加氧酶-1(HO-1)蛋白表达。结果模型组细胞活力较空白对照组显著降低,ROS和MDA含量增加,SOD活力下降,Nrf2和HO-1蛋白表达下降(均P<0.05)。根皮苷低、中、高浓度(16、32、64μmol·L~(-1))组较模型组细胞存活率均显著提高,ROS和MDA含量降低,SOD活力升高,Nrf2和HO-1蛋白表达上调(均P<0.05)。结论根皮苷能够抑制H_2O_2对PC12细胞的氧化损伤,其保护作用可能与抑制氧化应激引起的细胞死亡并调控Nrf2信号通路有关。     

落葵多糖体外抗氧化活性

目的探讨落葵多糖体外抗氧化活性作用。方法采用AP-TEMED体系和邻二氮菲-Fe~(2+)比色法测定落葵多糖对超氧阴离子自由基(O_2~-·)和羟自由基(·OH)的清除能力;采用比色法和TBA法测定落葵多糖生物活性对过氧化氢(H_2O_2)诱导红细胞溶血的抑制效应以及对小鼠肝组织自发性氧化的影响。结果落葵多糖具有显著清除O_2~-·和·OH作用,能抑制H_2O_2诱导的小鼠红细胞溶血,减少小鼠肝脏脂质过氧化产物丙二醛的产生(均P<0.01)。结论落葵多糖具有较强的抗氧化活性。     

鲤鱼精巢DNA对细胞膜和线粒体的保护作用

目的　研究鲤鱼精巢DNA对细胞膜和线粒体的保护作用。方法　用H2 O2 致红细胞溶血 ,采用分光光度法检测溶血程度 ;用氧自由基损伤红细胞膜 ,采用Bialsche试剂直接比色法测定膜上的唾液酸含量 ;大鼠服用鲤鱼精巢DNA后 ,用荧光分光光度法检测其红细胞膜的流动性 ;用自由基发生体系损伤线粒体 ,采用分光光度法检测线粒体的膨胀度。结果　鲤鱼精巢DNA对H2 O2 致红细胞溶血有明显的对抗作用 ;鲤鱼精巢DNA可明显提高老化损伤红细胞膜上的唾液酸含量 ;大鼠服用鲤鱼精巢DNA后 ,其红细胞膜流动性明显增大 ;鲤鱼精巢DNA对Fe2 +-VitC体系所致的线粒体膨胀有明显的抑制作用。结论　鲤鱼精巢DNA可明显保护细胞膜和线粒体免受活性氧自由基的氧化损伤。     

Ebselen拮抗H_2O_2对HL-60细胞的毒性及DNA损伤作用(英文)

目的:以H_2O_2造成人白血病HL-60细胞的氧化损伤,研究含硒化合物Ebselen(Ebs)对氧化性损伤的影响。方法:MTT比色法测定细胞增殖,TBA法检测膜脂过氧化水平,单细胞电泳法确定DNA损伤程度,并用荧光探针DCFH-DA检测细胞内活性氧自由基(ROS)水平的变化。结果:H_2O_2(100μmol·L~(-1)~)可显著抑制HL-60细胞增殖,引起膜脂过氧化水平升高,Ebs对此表现出浓度依赖性的抑制效应,Ebs20μmol·L~(-1)对H_2O_2 100μmol·L~(-1)引起的膜脂过氧化水平抑制率达56.4％;同样,Ebs对H_2O_2 100μmol·L~(-1)造成的DNA损伤和细胞内活性氧水平的升高均有拮抗效应,也呈明显量效关系。结论:含硒化合物Ebs对由活性氧诱发的细胞毒性和DNA损伤有强的防护效应。     

鲨鱼肝活性肽S-8300的降血糖作用机制初探

目的：探讨鲨肝活性肽S-8300的降血糖作用机制。方法：观察S-8300对四氧嘧啶糖尿病小鼠的血浆总胆固醇（CHOL）,血浆甘油三酯（TG）,血浆游离脂肪酸（NEFA）,肝、肾组织中超氧化物歧化酶（SOD）活力,肝、肾组织中丙二醛（MDA）含量,心肌ATP酶活力的影响及红细胞在体外所发生的自氧化溶血和H2O2在体外对红细胞膜的损伤的影响。结果：S-8300显著降低四氧嘧啶糖尿病小鼠的血浆CHOL、TG、NEFA水平及肝、肾组织中MDA含量,提高肝、肾组织中SOD活力和心肌ATP酶活力,显著抵抗红细胞在体外所发生的自氧化溶血及H2O2在体外对红细胞膜的损伤。结论：降低糖尿病小鼠血浆中脂质,减轻自由基的氧化损伤可能是S-8300降血糖作用的机制之一。     

一种源于水生生物的天然类胡萝卜素调脂及抗氧化活性的动物实验研究

目的探讨虾青素对脂质代谢的调节作用,观察其对高脂诱发的主动脉及肝脏脂质过氧化损伤的影响。方法 50只鹌鹑随机分为5组,对照组给予普通饲料,其余4组给予高脂饲料;喂养同时虾青素低、高2剂量组分别以5、10mg/kg给予灌胃虾青素,凯-辛联用组按10mg/kg凯西莱,1mg/kg辛伐他汀灌胃。实验结束时取空腹血测定血清总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)及丙二醛(MDA)含量、血清超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)及诱导型一氧化氮合酶(iNOS)活性;检测肝脏中TC、TG及SOD、GSH-Px及诱导型iNOS活性、MDA及还原型谷胱甘肽(GSH)含量;HE染色观察主动脉血管病理变化。结果与高脂模型组比较,虾青素低、高2剂量组及凯-辛联用组血清TG、TC、LDL-C含量及肝中TG及TC含量明显降低(P<0.05或<0.01),而血清HDL-C含量明显增高(P<0.01);血清SOD活性、GSH-Px活性及GSH含量明显提高(P<0.05或<0.01),而血清iNOS活性、MDA含量降低(P<0.05或<0.01)。结论虾青素具有良好的降脂功效,并对高脂诱发的主动脉及肝脏脂质过氧化损伤有明显抑制作用,高剂量虾青素改善效果更理想。     

海洋生物面膜对中波紫外线氧化损伤的HeLa细胞的保护作用

目的 :探讨中波紫外线 (UVB)照射下天然生物膜对HeLa上皮细胞氧化损伤的保护作用。方法 :建立UVB(辐照强度为 7.15× 10 - 5J/cm2 )对HeLa上皮细胞氧化损伤模型。MTT法测定细胞活性 ;流式细胞仪测定细胞的凋亡和死亡率 ;酶法测定抗氧化酶 (GSH Px、CAT、SOD)活性和MDA含量及总抗氧化能力。结果 :离体条件下生物膜能①显著增加Hela细胞的活性 ;②提高细胞上清液中GSH Px、CAT、SOD的活性 ,降低MDA含量 ,且呈量效关系。结论 :生物膜在体外有抗UVB氧化损伤的作用。其作用机制可能是通过提高抗氧化酶含量、清除自由基等 ,减轻细胞损伤而发挥其保护作用的     

虾青素促进丙烯酰胺所致大鼠海马神经细胞损伤的恢复

目的从细胞水平上研究虾青素对丙烯酰胺所致海马神经细胞损伤恢复的影响。方法通过B27无血清培养法进行SD乳鼠的大脑海马神经细胞的分离、培养及其鉴定;MTT法检测细胞存活率,比色法测定细胞内抗氧化酶SOD、CAT、GSH-Px的活性,线粒体的MDA及NO的含量。结果虾青素能提高丙烯酰胺损伤过的海马神经细胞的存活率,提高了丙烯酰胺损伤后细胞SOD、CAT活性、GSH-Px的活力,并降低了细胞线粒体中的MDA和NO的含量。结论虾青素对丙烯酰胺造成的高海马神经细胞损伤有促进恢复的作用。     

20(S)-人参皂苷Rg_3对脑缺血大鼠脑线粒体损伤的保护作用

目的研究20(S)-人参皂苷Rg3对脑缺血所致大鼠脑线粒体损伤的保护作用,探讨20(S)-人参皂苷Rg3抗缺血性脑中风的机制。方法用栓线法制作大鼠大脑中动脉缺血(MCAO)模型,测定线粒体肿胀度、膜流动性、膜磷脂含量、呼吸功能、线粒体呼吸酶、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、Ca2+等。结果大鼠MCAO后24 h,脑线粒体损伤明显,表现为肿胀、膜流动性降低,膜磷脂降解、呼吸功能衰减,呼吸酶、SOD活性降低,Ca2+、MDA含量升高;静脉注射20(S)-人参皂苷Rg3(5,10 mg.kg-1)能明显抑制缺血脑线粒体膜流动性的降低,膜磷脂降解,减少脑缺血引起的线粒体肿胀,抑制NADH脱氢酶、琥珀酸脱氢酶和细胞色素C氧化酶活性的降低,改善线粒体呼吸功能;同时20(S)-人参皂苷Rg3能明显降低脑缺血大鼠脑神经细胞线粒体MDA含量、升高SOD活性、抑制Ca2+过多摄入。结论20(S)-人参皂苷Rg3对缺血脑神经细胞线粒体的损伤有明显的保护作用,该作用可能与清除氧自由基、抑制脂质过氧化、拮抗Ca2+有关。     

异莲心碱对氧化损伤红细胞的保护作用

目的研究异莲心碱(IL)对氧化损伤红细胞的保护作用。方法利用自氧化、H2O2及·OH激活氧化的方法诱导红细胞产生溶血，观察IL对溶血度及其产物丙二醛(MDA)的影响。结果IL能显著抑制自氧化、H2O2及·OH激活氧化所致的红细胞溶血作用，并降低自氧化产物MDA的含量。结论IL对氧化损伤红细胞有保护作用。     

麦冬皂苷D通过上调CYP2J3/EET减轻H_2O_2诱导的H9c2细胞氧化应激损伤（英文）

目的探讨麦冬皂苷D(OP-D)对H_2O_2诱导的H9c2细胞氧化应激损伤的保护作用及机制。方法通过H_2O_2诱导建立H9c2细胞氧化损伤模型,细胞分为正常对照组(予以无血清培养基培养28 h)、H_2O_2损伤模型组(H_2O_2400μmol·L~(-1)处理3 h)、OP-D 5,10和20μmol·L~(-1)预处理组(OP-D预处理24 h后+H_2O_2400μmol·L~(-1)处理3 h)、花生四烯酸CYP环氧酶活性抑制剂6-(2-炔丙基羟苯基)己酸(PPOH)干预组(OP-D20μmol·L~(-1)+PPOH 10μmol·L~(-1),PPOH于OP-D处理前1 h加入细胞)。MTT法测定细胞活性,酶联免疫吸附法(ELISA)检测环氧-二十碳-三烯酸(11,12-DHET和14,15-DHET)含量,ELISA法检测细胞内丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)含量及乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)活性,流式细胞术(FCM)检测活性氧(ROS)水平及细胞凋亡水平、Western印迹法检测细胞色素P450 2J3(CYP2J3)、磷酸化Akt(p-Akt)蛋白和磷酸化内皮型一氧化氮合酶(p-e NOS)蛋白在细胞中的表达,利用PPOH进一步验证OP-D减轻细胞氧化应激的可能内在机制。结果 H_2O_2400μmol·L~(-1)明显抑制H9c2细胞存活率(P<0.01),OP-D可明显增加H_2O_2损伤后细胞存活率(P<0.01);不同浓度OP-D增加11,12-DHET和14,15-DHET含量(P<0.05,P<0.01);OP-D增加H_2O_2损伤后细胞NO含量(P<0.05,P<0.01)、增强SOD活性(P<0.05)及降低MDA、LDH含量(P<0.05,P<0.01);OP-D显著降低H_2O_2损伤后细胞氧化应激及凋亡水平(P<0.05,P<0.01);OP-D预处理上调H_2O_2损伤后细胞CYP2J3蛋白和m RNA表达(P<0.05,P<0.01)、激活PI3K/Akt-e NOS通路的磷酸化水平(P<0.05,P<0.01);提前给予PPOH后,OP-D保护效应被抑制(P<0.05,P<0.01)。结论 OP-D能减轻H_2O_2所致的H9c2细胞损伤,可能是通过诱导CYP2J3表达及增加11,12-DHET和14,15-DHET含量,激活PI3K通路促进其下游因子Akt和e NOS磷酸化发挥作用。     

铜、锌超氧化物歧化酶的实验研究

用碘标记超氧化物歧化酶(~(125)I-SOD)示踪研究牛SOD对RBC膜和实验性小鼠胃溃疡的保护效应。Iodogen固相法~(125)I标记SOD示踪结果表明,~(125)I-SOD经胃肠道能很快被吸收入血,分布于多种脏器,以肾放射性居首位.RBC放射性占全血18.2％(峰值相),血浆结合型放射性仅占12.5％,大部分~(125)I-SOD被解离脱~(125)I。RBC经外源O_2~-自由基的作用证明,SOD有明显抑制O_2~-对RBC膜的氧化损伤作用,并随SOD量增加,其抑制效应亦趋显著.SOD对IM-HCI诱发小鼠胃溃疡的影响,也表现有抑制和保护作用。接受SOD治疗组,粘膜脂质过氧化受抑制,病理变化减轻。     

人参皂苷Rb3 对脑缺血大鼠脑线粒体损伤的保护作用

目的研究人参皂苷Rb3对脑缺血大鼠脑线粒体损伤的保护作用,探讨人参皂苷Rb3抗缺血性脑中风的机制.方法用栓线法制作大鼠大脑中动脉缺血(MCAO)模型,测定线粒体肿胀度、膜流动性、膜磷脂含量、呼吸功能、线粒体呼吸酶、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和Ca2+等.结果大鼠MCAO后24 h,脑线粒体损伤明显,表现为肿胀、膜流动性降低,膜磷脂降解、呼吸功能衰减,呼吸酶和SOD活性降低,Ca2+和MDA含量升高;静脉注射人参皂苷Rb3(5,10 mg·kg-1)能明显抑制缺血脑线粒体膜流动性的降低和膜磷脂的降解,减少脑缺血引起的线粒体肿胀,抑制NADH脱氢酶、琥珀酸脱氢酶和细胞色素C氧化酶活性的降低,改善线粒体呼吸功能;明显降低脑缺血大鼠脑神经细胞线粒体MDA含量,升高SOD活性,抑制Ca2+过多摄入.结论人参皂苷Rb3对缺血脑神经细胞线粒体的损伤有明显的保护作用,该作用可能与清除氧自由基、抑制脂质过氧化、拮抗Ca2+有关.