3种解表方法抗流感病毒甲1型作用的实验研究

目的:比较辛温解表、辛凉解表、祛湿解表3种治法在体外、体内抗流感病毒甲1型鼠肺适应FM1株的作用。方法:选择桂枝麻黄各半汤、银翘散、新加香薷饮分别代表辛温解表、辛凉解表、祛湿解表等3种治法,并设病毒唑为阳性对照。观察其体外抗病毒作用及对小鼠流感病毒性肺炎的影响,对小鼠感染流感病毒的死亡保护作用和延长小鼠生命的作用。结果:3种解表法在体外流感病毒FM1株均无明显的抑制作用。3种解表法对小鼠流感病毒性肺炎均有抑制作用,与模型对照组比较,差异有显著性意义(P<0.05)。与病毒唑组比较,差异无显著性意义(P>0.05)。3种解表方法对感染小鼠死亡的保护作用均不明显。结论:3种治法并不一定直接杀灭流感病毒,但可能通过调节机体免疫力等途径达到治疗流感的目的。     

辛温解表三方体内抗甲1(H1N1)亚型流感病毒的实验研究

目的探讨《伤寒论》治疗太阳病的辛温解表三方桂枝汤、麻黄汤、桂枝麻黄各半汤在体内抗甲1亚型流感病毒的作用。方法用甲1亚型流感病毒FM1株建立小鼠流感动物模型。实验小鼠随机分为正常对照组、模型对照组、病毒唑组、桂枝汤组、麻黄汤组、桂枝麻黄各半汤组,分别观察上述三方对小鼠病毒性肺炎及其生存的影响。结果以肺指数为评价指标,桂枝汤组、麻黄汤组、桂枝麻黄各半汤组分别与模型对照组相比有显著性差异(P<0.01);三方各组之间比较以及三方各组和病毒唑组比较无显著性差异。不同处理组间死亡数和存活时间除麻黄汤组与病毒唑组比较有显著性差异外(P<0.05),其余各组间无显著性差异。结论三方在体内均有抗甲1亚型流感病毒小鼠肺炎的作用,但三方的疗效并无差异性。麻黄汤与病毒唑的疗效相比有显著性差异。三方对小鼠感染甲1亚型流感病毒FM1株的死亡保护作用和延长生命作用均不明显。     

3种解表方对甲1、甲3型流感小鼠白介素2和T淋巴细胞亚群的影响

目的:观察桂枝麻黄各半汤、银翘散、新加香薷饮对甲1、甲3型流感小鼠白细胞介素2(IL-2)、T淋巴细胞亚群的影响。方法:选取SPF级NIH小鼠,毒种流水冲浸融化,小鼠经乙醚吸入麻醉后,病毒滴鼻每只约0.05mL。在病毒攻击前1d开始给药,以3种解表方中药组分别按最适合有效剂量(0.4mL·d-1)ig给药5d。至造模后第4d,球后取血,测IL-2和T淋巴细胞亚群CD3+,CD4+,CD8+。结果:感染甲1、甲3型流感病毒后,外周血IL-2的浓度明显降低,与正常组比较,差异有统计学意义(P0.05)。银翘散对甲3型流感感染小鼠IL-2升高无统计学意义,病毒唑组及3种解表方法均能提高病毒感染小鼠外周血IL-2水平,且在甲1型实验中,中药治疗各组均高于正常对照组水平,差异有统计学意义(P0.05)。感染甲1型流感病毒后,小鼠外周血中T淋巴细胞CD3+,CD4+降低,与正常对照组比较,差异有统计学意义(P0.05),尤其CD4+降低明显,致CD4+/CD8+比例下降,与正常对照组比较,差异有统计学意义(P0.05),提示细胞免疫功能下降失调。而3种解表方法中药均能提高CD3+,CD4+总数,与模型对照组比较差异有显著性意义(P0.05),3治疗组CD8+也较正常组高(P0.05),但3组的CD4+/CD8+比值较模型对照组高(P0.05),已较接近正常水平。结论:3种解表方(桂枝麻黄各半汤、银翘散和新加香薷饮)均能不同程度地提高机体细胞免疫功能,达到抗流感病毒的效果。     

抗病毒口服液防治甲型流感病毒感染的药效学研究

目的:观察抗病毒口服液对体内外感染甲型H1N1流感病毒模型的防治作用.方法:体内实验采用甲型H1N1流感病毒FM1及PR8株经滴鼻感染的70只ICR小鼠来制备肺炎模型,随机分为正常组,模型组,利巴韦林组,双黄连组,抗病毒口服液2倍量、1倍量、1/2倍量组,每组10只.经预防给药后,计算各组小鼠肺指数;经治疗给药后计算各组小鼠死亡率和平均存活时间.体外采用甲型H1N1流感病毒及H3N2病毒感染MDCK细胞致细胞病变CPE模型,经治疗给药后,计算半数抑制浓度(median inhibition concentration,IC50)及治疗指数(therapeutic index,TI).结果:体内实验中,抗病毒口服液各剂量组与模型组、正常组比较,能明显降低流感病毒感染后小鼠肺指数,降低死亡率,延长平均存活时间(P<0.05).体外感染实验中,抗病毒口服液给药后可明显降低病毒感染后细胞的病变情况.结论:抗病毒口服液对甲型H1N1流感病毒体内外感染有较好的治疗和预防作用.     

七味清咽喷雾剂防治流感的药理作用

目的:观察七味清咽喷雾剂对H1N1流感病毒的防治作用及与达菲联合应用的效果。方法:体外试验采用组织细胞培养法,观察不同浓度药物对流感病毒FM1病毒株致细胞病变(CPE)的作用;体内试验采用甲型H1N1流感病毒FM1株滴鼻感染小鼠造成肺炎模型,观察药物的疗效;达菲与七味清咽喷雾剂(剂量均降低50%)联合应用,观察中药的增效减毒作用。结果:①七味清咽喷雾剂对Hela和Hep-2细胞的最大无毒浓度(TC0)为0.192 g.L-1,该浓度有一定缓解流感病毒的致细胞病变作用,但作用较弱;②七味清咽喷雾剂高剂量经7 d连续给药,可明显降低H1N1流感病毒感染肺炎模型小鼠血清中TNF-α含量,提高IL-2水平;③七味清咽喷雾剂中剂量与达菲(较单独应用剂量降低50%)联合应用可降低感染小鼠肺脏指数,肺脏组织病变程度明显减轻;④二者联合应用降低感染动物血中神经氨酸酶(NA)活性的作用强于单用达菲组。结论:七味清咽喷雾剂通过影响小鼠免疫功能,改善流感病毒引起的小鼠肺炎症状,降低H1N1感染小鼠的肺指数;与达菲联合应用具有增效减毒作用。     

小儿清肺饮防治小鼠流感病毒性肺炎的实验研究

目的 :研究小儿清肺饮体内对流感病毒肺炎的防治作用。方法 :用流感病毒鼠肺适应株A/FM/1/47(H1N1) ,感染的小鼠肺炎模型 ,研究小儿清肺饮对流感病毒肺炎小鼠的死亡保护作用及对小鼠流感病毒肺炎的防治作用。结果 :死亡保护作用实验显示 ,3个剂量组的小儿清肺饮对流感病毒感染导致的小鼠死亡有很好的保护作用 (P <0 0 5 ) ;3个剂量组的小儿清肺饮均能明显延长流感病毒感染小鼠的平均存活时间 (P <0 0 5 )。小儿清肺饮防治流感病毒性肺炎实验显示 ,3个剂量的小儿清肺饮均能直接杀灭小鼠肺内的流感病毒 ,降低肺内流感病毒的血凝滴度和感染力。结论 :小儿清肺饮是一种有实用价值 ,确实有效的治疗流感病毒肺炎的中药复方制剂。     

银葛双解剂抗甲型H1N1流感病毒的作用机制

目的:研究银葛双解剂体内外抗甲型H1N1流感病毒作用机制。方法:体外实验以利巴韦林为阳性对照药物,采用流式细胞术检测银葛双解剂对甲型H1N1流感病毒所致狗肾细胞凋亡的抑制作用;体内试验以SPF级小鼠滴鼻建立肺炎模型,随机分为6组,正常对照组、模型对照组、利巴韦林组、银葛双解剂高剂量组、银葛双解剂低剂量组、银葛双解剂预防+治疗组,用流式细胞术检测各组小鼠全血中T细胞亚群分类、放射免疫法测定小鼠血清中白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达水平。结果:在体外试验中,银葛双解剂可抑制甲型H1N1流感病毒诱导的MDCK细胞凋亡,药物浓度越高,细胞凋亡抑制率越大,银葛双解剂浓度越高,抑制作用越强;体内实验中,银葛双解剂可通过下调甲型H1N1流感病毒感染小鼠血清中炎性细胞因子TNF-α、IL-6的表达水平,升高甲型H1N1流感病毒感染小鼠全血中CD3+、CD4+T细胞的表达百分比,降低CD8+T细胞的表达,上调CD4+/CD8+比值。结论:银葛双解剂具有良好的抗甲型H1N1流感病毒的作用。     

三种解表方法对甲1型流感病毒FM1株抑制作用研究

目的 通过实验研究观察辛温解表、辛凉解表以及温凉化湿合用三法对小鼠感染甲1型流感病毒FM1株的抑制作用和对小鼠的保护作用.方法 分别以荆防败毒散、银翘散、羌银解热汤作为辛温解表、辛凉解表、以及温凉化湿合用三法的代表方剂,利用甲1型流感病毒FM1株感染NIH小鼠为动物模型,以肺指数与肺指数抑制率和死亡率为评价指标,观察三种解表方法在小鼠体内的抗流感病毒作用.结果 荆防败毒散、银翘散、羌银解热汤组均可以有效抑制病毒引起的小鼠肺部病变、降低肺指数(P＜0.05),其中以羌银解热汤的作用最为明显,与银翘散和荆防败毒散比较,均有显著性差异(P＜0.05);而银翘散组和荆防败毒散组之间无统计学差异(P＞0.05).羌银解热汤及银翘散均可以明显提高对感染流感病毒小鼠的死亡保护率,与病毒对照组相比,均有显著的统计学差异(P＜0.05),而羌银解热汤组的效果与银翘散组之间无显著性差异.结论 本实验结果表明以辛温、辛凉、化湿兼顾所组成的羌银解热汤具有良好的体内抗流感病毒感染作用.     

喘可治注射液对甲型H1N1流感病毒FM1株感染免疫低下小鼠肺炎的影响

目的:观察喘可治注射液对甲型H1N1流感病毒感染免疫低下小鼠肺炎模型的预防和治疗作用。方法:采用腹腔注射环磷酰胺联合甲型H1N1流感病毒FM1株滴鼻感染ICR小鼠造成免疫低下小鼠肺炎模型,分别经治疗性给药4 d和预防性给药5 d后,取各组小鼠肺组织称重,计算肺指数、肺指数抑制率, RT-PCR法检测各组小鼠肺组织中相对病毒载量。结果:采用甲型H1N1流感病毒FM1株感染免疫低下小鼠后,肺指数明显增高,脾、胸腺指数降低,三者与环磷酰胺对照组比较差异有显著统计学意义(P0.01)。治疗性给予喘可治注射液4d后,小鼠肺指数有所降低,与模型对照组比较差异无统计学意义(P0.05);脾指数和胸腺指数均升高,其中脾指数与模型对照组比较,差异有统计学意义(P0.05)。预防性给予喘可治注射液5 d,肺指数明显降低,与模型对照组比较差异有显著统计学意义(P0.01);小鼠肺组织中FM1株流感病毒病毒载量也明显降低,与模型对照组比较差异有统计学意义(P0.05),病毒载量抑制率可达58.68%。结论:喘可治注射液对流感病毒感染免疫低下小鼠肺炎模型有较好的防治作用。     

清营解表合剂防治流感免疫调节机制的研究

目的:探讨清营解表合剂对流感病毒A/PR/8/H1N1感染小鼠免疫保护的作用机制。方法:以亚洲甲型鼠肺适应株A/PR/8/H1N1流感病毒小鼠滴鼻,建立感染模型。分别给予病毒唑、清营解表合剂,计算死亡保护率、延长生命率;测定小鼠胸腺指数和脾脏指数;流式细胞术检测小鼠外周血特异性细胞因子Th1(γ-干扰素,IFN-γ)/Th2(白介素-10,IL-10)表达水平。结果:清营解表合剂组小鼠死亡保护率和生命延长率分别为52.94%和37.64%,小鼠脾脏指数和胸腺指数明显提高。感染后小鼠外周血细胞的Th1型反应弱势表达,Th2细胞因子优势表达,Th1(IFN-γ)/Th2(IL-10)比值明显降低,Th1/Th2表达向Th2偏移。清营解表合剂组Th1细胞因子水平显著升高,且向空白组正常水平方向漂移。结论:清营解表合剂对感染小鼠具有明显的死亡保护作用,能够逆转流感病毒感染小鼠外周血因子Th1向Th2漂移的作用,通过免疫调节作用防治流行性感冒。     

热必宁颗粒剂解热及抗菌,抗病毒作用研究

热必宁颗粒剂为治疗外感高热药.实验研究表明,热必宁对肺炎双球菌所致家兔体温升高有显著的抑制作用,对大肠杆菌内毒素所致家兔体温升高有抑制作用.给药2小时后体温开始下降,维持时间4小时以上,热必宁3种不同剂量均能明显降低感染肺炎双球菌豚鼠的死亡率,对肺炎双球菌有良好的抗菌作用;体外抗菌作用试验表明各剂量组及阳性组大白鼠血清抑菌作用明显增强,其中尤以对肺炎双球菌和金黄色葡萄球菌作用最强;热必宁能明显降低H_3N_2感染小白鼠的死亡率,对小白鼠流感病毒性肺炎有显著的治疗作用;体外抗病毒实验,表明其对流感病毒和RSV有较强的抑制作用.     

栀子提取物抗病毒试验研究

目的：观察栀子提取物ZG对小鼠流感病毒性肺炎模型的影响和体外对多种病毒致细胞病变作用的影响。方法：小鼠经滴鼻感染流感病毒造成肺炎模型,观察肺部炎症、死亡率和生命延长率,体外抗病毒试验采用CPE法,按Reed-Muench方法计算TC_O,TC_5O,IC_5O,TI。结果：栀子提取物ZG对流感病毒致小鼠肺部炎症有明显抑制作用,可明显降低流感病毒感染后小鼠的死亡率、延长存活时间,同时降低小鼠血清中NO含量；在体外对流感病毒等6种病毒引起的细胞病变有明显抑制作用。结论：栀子提取物ZG对流感病毒等6种病毒有明显抑制作用,其对小鼠流感病毒性肺炎的抑制作用与降低血清中NO含量有关。     

桂枝汤的药理学研究 五、加味、减味桂枝汤和桂枝汤的药理作用比较

比较了桂枝汤和桂枝去芍药汤、桂枝加桂汤、桂枝加芍药汤的实验药理作用差别,发现四方均能抑制流感病毒性肺炎、提高感染小鼠的网状内皮系统廓清能力,抑制皮肤迟发性超敏反应,作用均以桂枝汤最强,其次为桂枝加桂汤。桂枝汤、桂枝加桂和桂枝加芍药汤具有镇静作用,以桂枝加桂汤最强。桂枝加芍药汤、桂枝加桂汤和桂枝汤依次有镇痛作用。四方对正常肠蠕动功能无明显有规律的影响,但均能使亢进的肠蠕动抑制。实验结果与《伤寒论》对四方所述解表、调和营卫,治胸满、脉促,奔豚气和腹满时痛的主证大体吻合。     

黄连香薷饮抗流感病毒作用的拆方研究

目的：对古方黄连香薷饮进行拆方研究,筛选出抗甲型H1N1流感病毒作用的有效中药组合。方法：以甲型H1N1流感病毒滴鼻感染小鼠,建立小鼠病毒性肺炎模型,并以黄连香薷饮全方及拆方组合进行给药治疗,同时设立阳性对照组和正常对照组,计算各组小鼠的肺指数及肺指数抑制率,并观察小鼠肺组织病理变化。结果：与模型组比较,阳性对照组、香薷组、黄连-厚朴组及黄连香薷饮全方组小鼠的肺指数均显著降低,肺指数抑制率分别为31.43%、47.74%、47.74%和41.74%,且肺部病变明显减轻。结论：香薷单味药、黄连-厚朴药对和黄连香薷饮全方均具有显著的抗甲型H1N1流感病毒的作用。     

蒿芩清胆汤及其拆方对湿热型流感病毒性肺炎及NF-κB水平的作用研究

目的:通过观察蒿芩清胆汤及其拆方对湿热型流感病毒性肺炎及NF-κB的干预作用,以期探讨其治疗机制。方法:通过气候仓、肥甘饮食加流感病毒滴鼻感染造模成功后,蒿芩清胆汤及其拆方组以相应中药干预,比较各组肺指数、光镜下病变程度半定量、肺组织NF-κB mRNA表达水平。结果:蒿芩清胆汤及其拆方均能不同程度降低肺指数、肺部病理改变及NF-κB mRNA表达水平,其中全方效果最佳。结论:蒿芩清胆汤具有抗湿热型流感病毒性肺炎的作用,其机制可能与抑制NF-κB活化从而减少其下游炎性细胞因子分泌,截断"炎症瀑布"效应有关。     

清解汤对流感病毒(FM1)株感染小鼠死亡保护作用的研究

目的:研究清解汤对感染流感病毒(FM1)株小鼠死亡的保护作用。方法:利用流感病毒(FM1)株感染小鼠为动物模型,以死亡保护率及对小鼠行为的影响为评价指标,观察清解汤不同剂量组在小鼠体内的抗流感病毒作用。结果:与感染模型组比较,清解汤高剂量组能降低流感病毒FM1株引起的小鼠死亡,延长小鼠存活时间,差异有非常显著性意义(P<0.01);清解汤中剂量组亦能明显降低小鼠死亡率(P<0.05)。与板蓝根颗粒对照组比较,清解汤高剂量组亦能明显降低小鼠死亡率,两组有显著差异(P<0.05)。与病毒唑对照组比较,清解汤低剂量组、中剂量组、高剂量组差异无统计学意义(P>0.05)。清解汤浓度与疗效有一定相关关系,但3组间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:清解汤具有良好的体内抗流感病毒感染作用,能降低流感病毒(FM1)株感染小鼠的死亡率,提示其对流感病毒感染小鼠有保护作用。     

滨蒿总黄酮提取物的抗流感病毒作用

目的:观察滨蒿总黄酮提取物(滨蒿总黄酮)在体内外的抗流感病毒作用。方法:体外抗病毒实验观察样品对狗肾传代细胞(MDCK)的毒性,观察病毒致细胞病变(CPE)法测定样品在体外抑制甲、乙型流感病毒的半数抑制浓度(IC50),并计算选择指数(SI)。体内抗病毒实验用流感病毒鼠肺适应株(PR8)滴鼻感染小鼠建立流感病毒性肺炎模型,以死亡保护率、生命延长率和肺指数等为指标,评价样品的保护作用。结果:滨蒿总黄酮对甲、乙型流感病毒致细胞病变的IC50分别为74.6μg/mL、98.5μg/mL,SI分别为16.8、12.7;滨蒿总黄酮以200、400mg/kg剂量灌胃给药对小鼠流感病毒性肺炎模型有明显的保护作用,其死亡保护率分别为36.4%、54.5%;生命延长率分别为29.0%、38.2%;滨蒿总黄酮400mg/kg剂量对流感病毒性肺炎小鼠肺指数有明显的抑制作用,抑制率为25.9%。结论:滨蒿总黄酮在体内外均有明显的抗病毒作用。     

连翘体外、体内抗甲型流感病毒的实验研究

目的:观察连翘体外、体内抗甲型流感病毒的作用。方法:采用血凝实验方法,将不同浓度流感病毒接种鸡胚尿囊腔制造甲型流感病毒感染鸡胚模型,观察不同浓度连翘提取物对造模后鸡胚的预防和治疗作用。采用鼻腔接种甲型流感病毒FM1株诱导幼龄昆明种小鼠肺炎,将不同浓度连翘提取物以灌胃给药途径治疗小鼠流感病毒性肺炎,观察各组小鼠一般状态、肺指数、肺组织形态学及对IV RNA表达的影响。结果:中药连翘可预防流感病毒在鸡胚内增殖,其预防作用随药物浓度降低而减弱,但各浓度之间差异无统计学意义(P0.05)。中药连翘对感染IV鸡胚具有治疗作用,其治疗作用随浓度降低而减弱,但各浓度间差异无统计学意义(P0.05)。中药连翘可改善流感病毒肺炎小鼠一般状态,可减轻流感病毒肺炎小鼠肺组织病变,并抑制流感病毒在小鼠肺组织中复制。结论:中药连翘提取物具有体外抗流感病毒作用及对流感病毒肺炎小鼠的治疗作用。     

四君子汤、六味地黄汤对环磷酰胺致小鼠免疫抑制的拮抗作用实验研究

目的:探讨四君子汤、六味地黄汤对环磷酰胺致小鼠免疫抑制的拮抗作用机理。方法:采用体重20g左右的ICR纯种小鼠32只,随机分成正常组、环磷酰胺组、四君子汤和六味地黄汤两个用药组,连续给药10天后,进行脾指数、脾细胞凋亡率和胸腺细胞周期测定。结果:环磷酰胺能明显降低小鼠脾指数,抑制胸腺细胞增殖,诱导脾细胞凋亡,而四君子汤和六味地黄汤能显著提高脾指数,促进胸腺细胞增殖及抑制脾细胞凋亡。结论:四君子汤和六味地黄汤能拮抗环磷酰胺的免疫抑制作用,提高机体的免疫功能。     

麻杏石甘汤对A型流感病毒感染小鼠IL-2、IL-4蛋白表达水平的影响

目的:观察麻杏石甘汤对A型流感病毒感染小鼠IL-2、IL-4蛋白表达水平的影响。方法:采用鼻腔接种法建立A型流感病毒小鼠肺适应株动物感染模型。实验设正常对照组、模型对照组、抗病毒颗粒组、利巴韦林组和麻杏石甘汤(MSXGD)临床等效剂量组、2倍临床等效剂量组。经灌胃给药或给生理盐水7天后,用ELISA法检测小鼠血清中IL-2、IL-4的含量水平,用免疫组织化学法定位与半定量检测小鼠肺组织中IL-2、IL-4的蛋白表达水平。结果:流感病毒感染小鼠后,IL-2、IL-4的血清含量水平和肺组织蛋白表达水平降低,与正常对照组比较,差异显著(P<0.01)。MXSGD临床等效剂量组、2倍临床等效剂量组小鼠IL-2、IL-4的血清含量水平和肺组织蛋白表达水平升高,与模型对照组比较,差异显著(P<0.01或P<0.05)。结论:麻杏石甘汤通过调节一些IL-2、IL-4的蛋白表达水平,对机体抗感染免疫发挥一定调节作用。