一氧化氮合成酶在支气管哮喘中作用的实验研究

为探讨一氧化氮合成酶（ｎｉｔｒｉｃｏｘｉｄｅｓｙｎｔｈａｓｅ，ＮＯＳ）在实验性大鼠支气管哮喘中的作用，采用３Ｈ－Ｌ－精氨酸转化实验检测鼠肺组织ＮＯＳ活性［１］及还原型辅酶Ⅱ黄递酶（ＮＡＤＰＨ－ｄ）组化染色［２］。结果表明，哮喘组的诱生型ＮＯＳ（ｉＮＯＳ）活性增加１５２．３９％～２４９．４０％，而原生型ＮＯＳ（ｃＮＯＳ）活性则降低６１．８１％～６４．８４％（Ｐ＜０．０５）；致敏组ｉＮＯＳ活性较对照组增加６７．８１％（Ｐ＜０．０５），ｃＮＯＳ活性则无甚改变。ＮＡＤＰＨ－ｄ组化染色显示，哮喘组的气管、细支气管上皮均有整片深着色。哮喘时ｉＮＯＳ活性常呈上调，而ｃＮＯＳ则下调，且ｉＮＯＳ的上调作用尤早于ｃＮＯＳ的下调。提示哮喘时的气道炎症性改变，发生于气道平滑肌收缩及内皮损伤之前。     

烧伤大鼠胃组织一氧化氮及一氧化氮合酶的变化

目的研究烧伤后胃组织中一氧化氮（ＮＯ）及两型一氧化氮合酶（ＮＯＳ）的变化规律．方法采用３０％ＴＢＳＡ（ｔｏｔａｌｂｏｄｙｓｕｒｆａｃｅａｒｅａ，ＴＢＳＡ）Ⅲ度烧伤大鼠模型（ｎ＝６４），分别检测伤后１，３，６，１２，２４，４８，７２ｈ胃组织中ＮＯ含量及原生型ＮＯＳ（ｃＮＯＳ）和诱导型ＮＯＳ（ｉＮＯＳ）的活性，并分析ＮＯ含量与两型ＮＯＳ活性之间的关系．结果烧伤后胃组织中ｉＮＯＳ活性与ＮＯ含量的变化趋势一致，伤后３ｈ即显著高于伤前，伤后１２ｈ达峰值，后有所下降但至伤后７２ｈ仍明显高于伤前，二者呈显著正相关（ｒ＝０９４，Ｐ＜００１）．而ｃＮＯＳ活性呈下降趋势，于伤后６ｈ达最低值，后渐回升于伤后７２ｈ基本恢复正常，ｃＮＯＳ与ＮＯ相关不显著（ｒ＝－０５４，Ｐ＞００５）．结论烧伤后胃组织中ＮＯ的变化主要受ｉＮＯＳ活性影响，而ｉＮＯＳ活性上升，ｃＮＯＳ活性下降可能与烧伤后胃的某些病理变化密切相关．     

急性心肌梗塞患者红细胞左旋精氨酸-一氧化氮途径的变化

目的：探讨急性心肌梗塞患者红细胞在旋精氨酸—一氧化氮（Ｌ－Ａｒｇ－ＮＯ）途径变化及临床意义。 方法：１４例急性心肌梗塞患者为急性心肌梗塞组,１０例健康成人为正常对照组,取静脉抗凝血,分离并提纯红细胞,同位素标记法测定~３Ｈ标记左旋精氨酸（~３Ｈ－Ｌ－Ａｒｇ）的转运动力学;分离统化一氧化氮合酶（ＮＯＳ）后测定其含量及活性,放射免疫法测定红细胞环磷酸鸟苷（ｃＧＭＰ）含量。 结果：急性心肌梗塞组患者红细胞①Ｌ－Ａｒｇ的总转运及Ｙ~＋载体的最大转运速率（Ｖｍａｘ）分别较正常对照组降低１４％（Ｐ＜０．０５）及 １８％（Ｐ＜０．０１）,米氏常数（Ｋｍ）分别增加３２％及 ４６％（Ｐ＜０．０１）;Ｙ＋Ｌ载体无改变。②ＮＯＳ含量及活性分别较正常对照组降低１３％（Ｐ＜０．０５）及４４％（Ｐ＜０．０１）。③ＣＧＭＰ含量较正常对照组下降２７％（Ｐ＜０．０５）。 结论：急性心肌梗塞患者红细胞Ｌ－Ａｒｇ－ＮＯ途径存在多环节功能障碍,导致一氧化氮（ＮＯ）生成减少,可能会促进急性心肌梗塞的进展。     

一氧化氮在高脂饲养兔胸主动脉的变化和意义

观察高脂饲养兔胸主动脉血管环对去甲肾上腺素（ＮＥ）的反应性及环磷酸鸟苷（ｃＧＭＰ）含量的变化。结果表明其对ＮＥ的反应性降低，组织ｃＧＭＰ的含量减少。左旋精氨酸（Ｌ－Ａｒｇ）和硝普钠（ＳＮＰ）可恢复此反应性，而一氧化氮合成酶（ＮＯＳ）阻滞剂Ｌ－硝基精氨酸（Ｌ－ＮＮＡ）却加重其降低的反应性。提示高脂饲养兔血管环中的一氧化氮（ＮＯ）减少，Ｌ－Ａｒｇ及ＳＮＰ可以逆转之，暗示Ｌ－Ａｒｇ／ＮＯ通路障碍可能是动脉粥样硬化的又一机理。     

同型半胱氨酸对正常人血小板L-精氨酸/一氧化氮途径的影响

目的通过观察同型半胱氨酸（Ｈｃｙ）对血小板Ｌ精氨酸（ＬＡｒｇ）／一氧化氮（ＮＯ）系统的影响,探讨Ｈｃｙ对血小板损伤的机制。方法健康成人６例,平均年龄（３３±７）岁。晨取静脉血,将每例血样分为对照组及加Ｈｃｙ组,分别测定血小板ＬＡｒｇ转运功能;同时将上述两组分别设立加乙酰胆碱（Ａｃｈ）与不加Ａｃｈ组,测定血小板ＮＯ合酶（ＮＯＳ）活性、ＮＯ生成量和ｃＧＭＰ含量。结果（１）在不同浓度的Ｌ－Ａｒｇ时,Ｈｃｙ组ＬＡｒｇ转运速率均低于对照组（Ｐ＜００１）。（２）在Ａｃｈ刺激下,ＮＯＳ活性明显提高,但Ｈｃｙ组提高的程度明显低于对照组（Ｐ＜００１）。（３）在Ａｃｈ刺激下,ＮＯ生成及ｃＧＭＰ含量明显提高（Ｐ＜００１）,但Ｈｃｙ组仍明显低于对照组（Ｐ＜００５）。结论Ｈｃｙ影响血小板功能可能与ＬＡｒｇ／ＮＯ系统改变有关。     

一氧化氮对实验性肾炎中肾小球花生四烯酸产物的影响

目的：探讨一氧化氮（ＮＯ）在实验性肾小球肾为中对肾小球花生四烯酸（ＡＡ）产物合成的调节作用。方法：制备大鼠加速性肾毒性肾炎（ＮＳＮ）模型,应用市郊和液相层析及放免法测定肾小球合成的前列腺素（ＰＧ）Ｅ２、６－酮－ＰＧＦ１α、血栓素（ＴＸ）Ｂ２、白三烯（ＬＴ）Ｂ４、ＬＴＣ４、５－羟二十碳四烯酸（５－ＨＥＴＥ）、１２－ＨＥＴＥ、１５－ＨＥＴＥ。对ＮＳＮ大鼠应用诱生型ＮＯ合成酶（ｉＮＯＳ）抑制剂Ｌ－ＮＩＬ     

诱生型一氧化氮合酶在原发性肝细胞癌中表达及其意义

一氧化氮（ＮＯ）产生过程的限速酶为一氧化氮合酶（ＮＯＳ）。根据功能不同可将其分为两型：原生型（ｃＮＯＳ）和诱生型（ｉＮＯＳ）。我们用免疫组化的方法检测ｉＮＯＳ在原发性肝细胞癌（ＨＣＣ）及癌旁组织（ＰＣＨＴ）中的表达，间接对ＮＯ在慢性乙型肝炎发展为肝...     

L-arg对高胆固醇血症兔血管反应性的影响

本研究观察ＮＯ前体物Ｌ－ａｒｇ的抗动脉粥样硬化作用机理。将１６只雄性新西兰白兔按体重随机分为３组：正常对照组（Ｄ组,ｎ＝５）,单纯胆固醇组（Ｃ组,ｎ＝６）和复合组（Ｌ组,ｎ＝５）。实验开始前及实验第５周和第１０周抽血检测血浆总胆固醇,第１０周处死动物,检测血浆和胸主动脉组织中内皮素－１（ＥＴ－１）、环－磷酸鸟苷（ｃＧＭＰ）含量,并测试了胸主动脉环对去甲肾上腺素（ＮＥ）的反应性。结果发现Ｌ－精氨酸对血浆总胆固醇无明显影响,但可使血浆及组织中ＥＴ－１含量显著下降,ｃＧＭＰ含量上升,补充ＮＯ前体物可改善胸主动脉环对缩血管物质去甲肾上腺素的反应性。由此可见,补充Ｌ－ａｒｇ可纠正高胆固醇引起的ＥＴ－１／ｃＧＭＰ失衡,具有一定的抗动脉粥样硬化作用。     

血管平滑肌细胞的一氧化氮活性及精氨酸加压素对其调节与高血压发病关系的研究

以培养的自发性高血压大鼠（ＳＨＲ）和正常对照大鼠（ＷＫＹ）血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）为模型，动态观察了精氨酸加压素（ＡＶＰ）对动脉ＶＳＭＣ的一氧化氮合酶（ＮＯＳ）活性、一氧化氮（ＮＯ）合成的影响。结果表明：ＳＨＲ动脉ＶＳＭＣ的ＮＯＳ活性、ＮＯ含量明显低于ＷＫＹ（Ｐ＜０．０５）；ＡＶＰ对ＳＨＲ动脉ＶＳＭＣ的ＮＯＳ活性、ＮＯ合成具有显著促进效应；同一浓度ＡＶＰ作用于ＳＨＲ及ＷＫＹ动脉ＶＳＭＣ，ＷＫＹ的ＮＯＳ活性及ＮＯ含量显著高于ＳＨＲ（Ｐ＜０．０１）；ＡＶＰ作用后，动脉ＶＳＭＣ的ＮＯＳ活性与ＮＯ含量呈显著正相关。提示ＳＨＲ动脉ＶＳＭＣ的ＮＯＳ－ＮＯ系统可能功能不良；ＡＶＰ可能通过ＮＯＳ－ＮＯ途径参与高血压病的发生和发展。     

高血压病患者动脉平滑肌细胞NO的变化及其与发病的关系

为探讨高血压病（ＥＨ）患者一氧化氮（ＮＯ）浓度变化特点与高血压病发病的特点，本研究以复合胶元酶法分离培养ＥＨ患者和血压正常者（ＮＴ）离体动脉平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）检测细胞培养液的ＮＯ含量和ＶＳＭＣ的一氧化氮含量（ＮＯＳ）的活性，观察ＥＨ患者动脉ＶＳＭＣ分泌ＮＯ的特点，结果显示：（１）ＥＨ组ＶＳＭＣ的ＮＯ含量和ＮＯＳ活性均显著于低于ＮＴ组（Ｐ〈０．０１）；（２）ＥＨ患者和ＮＴＶＳＭＣ的ＮＯ含量和ＮＳ     

高血压病患者动脉血管平滑肌细胞NO含量及作用

目的：探讨在基础状态下高血压病患者（ＥＨ）动脉血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）的一氧化氮合酶（ＮＯＳ）和一氧化氮（ＮＯ）的变化特点及其ＶＳＭＣ增殖的影响。方法：采用血压正常者（ＮＴ）及ＥＨ患者的肠纱膜动脉进行分离培养,对比观察ＮＴ和ＥＨ组的动脉ＶＳＭＣ的ＮＯＳ活性、ＮＯ含量、细胞计数和细胞周期的变化,研究ＥＨ患者动脉ＶＳＭＣ的ＮＯＳ－ＮＯ系统的变化与细胞增殖的关系。结果：（１）在基础状态下,Ｅ组动脉ＶＳ     

肝硬化患者血中一氧化氮水平及其产生机制研究

肝硬化普遍存在着高动力循环状态，一些血管扩张物质参与了这种异常状态的发生。为探讨扩血管物质一氧化氮在肝硬化时的水平及其产生机制，测定了３８例肝硬化患者及１５例正常对照者血浆中一氧化氮代谢产物ＮＯ２－／ＮＯ３－及内毒素、肿瘤坏死因子α（ＴＮＦα）、环磷酸鸟苷（ｃＧＭＰ）含量。结果发现，ＮＯ２－／ＮＯ３－水平较正常对照显著升高，与增多的内毒素、ＴＮＦα水平呈正相关，血中ＮＯ２－／ＮＯ３－水平随肝功能Ｃｈｉｌｄ－Ｐｕｇｈ分级增加而升高。提示肝硬化时，一氧化氮合成增加，且与内毒素、ＴＮＦα诱导有关，前者可能是肝硬化血液动力学紊乱等产生的重要原因。     

胰岛素抵抗高血压大鼠血小板L—精氨酸／一氧化氮系统的改变

目的 观察胰岛素抵抗高血压大鼠血小板Ｌ－精氨酸／一氧化氮系统的改变。方法 自发性高血压大鼠（ＳＨＲ）自第５周至第１０周喂信果糖,制备胰岛素抵抗高血压大鼠（ＩＲ）模型。在此模型上,检测血小板一氧化氮合酶（ＮＯＳ）活性、一氧化氮（ＮＯ）产生量及Ｌ－精氨酸（Ｌ－Ａｒｇ）转运特征,同时观察了血浆Ｌ－Ａｒｇ水平、心纳素（ＮＡＰ）、ＮＯ水平及ｃＧＭＰ水平。结果 ＳＨＲ大鼠收缩压（ＳＢＰ）（Ｐ〈０．０１）,血浆     

高血压病患者动脉血管平滑肌细胞NO含量及作用

目的: 探讨在基础状态下高血压病患者（ＥＨ）动脉血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）的一氧化氮合酶（ＮＯＳ）和一氧化氮（ＮＯ）的变化特点及其对ＶＳＭＣ增殖的影响。方法: 采用血压正常者（ＮＴ）及ＥＨ 患者的肠系膜动脉进行分离培养,对比观察ＮＴ组和ＥＨ 组的动脉ＶＳＭＣ的ＮＯＳ活性、ＮＯ含量、细胞计数和细胞周期的变化,研究ＥＨ 患者动脉ＶＳＭＣ的ＮＯＳ－ＮＯ系统的变化与细胞增殖的关系。结果:①在基础状态下,ＥＨ组动脉ＶＳＭＣ的ＮＯＳ活性和ＮＯ含量较ＮＴ组明显降低（Ｐ＜ ０．０５）。②ＥＨ组动脉ＶＳＭＣ的细胞数量明显高于ＮＴ组（Ｐ＜ ０．０５）。③ＥＨ组Ｓ期百分率和细胞增殖指数（ＰＩ）明显高于ＮＴ组（Ｐ＜ ０．０５）,ＥＨ组Ｇ０／Ｇ１ 期百分率较ＮＴ组明显降低（Ｐ＜ ０．０５）。④ＮＴ组和ＥＨ组的ＮＯＳ活性和ＮＯ含量与ＰＩ均呈负相关。结论:ＥＨ患者动脉ＶＳＭＣ存在着ＮＯＳ－ＮＯ系统功能低下;ＮＯ具有抑制ＶＳＭＣ增殖的作用     

高血压病患者动脉平滑肌细胞NO的变化及其与发病的关系

为探讨高血压病（ＥＨ）患者一氧化氮（ＮＯ）浓度变化特点与高血压病发病的关系，本研究以复合胶元酶法分离培养ＥＨ患者和血压正常者（ＮＴ）离体动脉平滑肌细胞（ＶＳＭＣ），检测细胞培养液的ＮＯ含量和ＶＳＭＣ的一氧化氮合酶（ＮＯＳ）活性，观察ＥＨ患者动脉ＶＳＭＣ分泌ＮＯ的特点。结果显示:①ＥＨ组ＶＳＭＣ的ＮＯ含量和ＮＯＳ活性均显著低于ＮＴ组（Ｐ＜０．０１）；②ＥＨ患者和ＮＴＶＳＭＣ的ＮＯ含量和ＮＯＳ活性随培养时间延长均显著地增加（Ｐ＜０．０１）；③ＥＨ患者和ＮＴ的ＮＯ含量随ＮＯＳ活性增强而增加，并呈显著的正相关（Ｐ＜０．０１）。表明ＥＨ患者ＶＳＭＣ的ＮＯＳ－ＮＯ系统可能存在功能或结构的异常，并参与高血压病的发生和发展     

静滴L—精氨酸对原发性高血压影响的研究

从血流动力学及神经内分泌学两方面探讨左旋精氨酸（Ｌ－Ａｒｇ）－一氧化氮（ｎｉｔｒｉｃｏｘｉｄｅ，ＮＯ）通路对原发性高血压的影响。方法２６例高血压病人分为两组，一组静滴Ｌ－Ａｒｇ，一组静滴生理盐水，观察其血压、心率及心功能的变化，同时检测血中ＮＯ、ｃＧＭＰ、肾上腺素（Ｅ）、去甲肾上腺素（ＮＥ）以探讨其降压机理。结果在Ｌ－Ａｒｇ静注期间，病人血压下降，心率增快，心输出量（ＣＯ）、每搏输出量（ＳＶ）、射血分数（ＥＦ）增加，总外周阻力（ＴＰＲ）降低，ＮＯ的标志物ｃＧＭＰ升高。而在滴注６０＇时，随着ｃＧＭＰ浓度的降低，ＣＯ、ＳＶ、ＥＦ也随之降低，而ＴＰＲ复又回升。Ｅ、ＮＥ、Ｎｉｔｒｉｔｅ及Ｎｉｔｒａｔｅ在静滴前后无显著性改变。结论Ｌ－Ａｒｇ通过使ｃＧＭＰ浓度升高，引起明显的血流动力学改变；Ｌ－Ａｒｇ可能抑制血压过低所致的反应性Ｅ及ＮＥ的升高作用。     

c-myc反义寡核苷酸对缺氧内皮细胞条件培养液刺激的肺血管平滑肌细胞增殖的影响

目的探讨ｃ－ｍｙｃ反义寡核苷酸（ＯＤＮｓ）对缺氧内皮细胞条件培养液（ＨＥＣＣＭ）刺激的肺血管平滑肌细胞（ＳＭＣ）增殖的影响。方法制备ＨＥＣＣＭ，用其刺激肺动脉ＳＭＣ后，Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交分析ｃ－ｍｙｃ基因表达，３Ｈ－胸腺嘧啶核苷（３Ｈ－ＴｄＲ）掺入试验及细胞生长计数分析ＳＭＣ增殖情况。结果ＨＥＣＣＭ显著刺激ＳＭＣ增殖及ｃ－ｍｙｃ基因表达增强，反义ＯＤＮｓ显著下调ＨＥＣＣＭ刺激的ｃ－ｍｙｃ表达，显著抑制ＨＥＣＣＭ刺激的ＳＭＣ增殖。同义ＯＤＮｓ无上述作用。结论ＨＥＣＣＭ可能通过刺激ＳＭＣ之ｃ－ｍｙｃ表达而使ＳＭＣ增殖，反义ＯＤＮｓ通过下调ｃ－ｍｙｃｍＲＮＡ表达而抑制ＨＥＣ－ＣＭ刺激的ＳＭＣ增殖。     

一氧化氮和自由基对大鼠急性肝损伤的作用

目的用硫代乙酰胺（ＴＡＡ）诱发大鼠急性肝损伤,观察肝损伤过程中一氧化氮与自由基的变化．方法实验Ⅰ：大鼠２４只分为４组,一组为正常组,其余３组为损伤组．ＴＡＡ６００ｍｇ／ｋｇｓｃ２４,４８,７２ｈ测定内毒素及ＮＯ３－／ＮＯ２－,ＡＬＴ,ＡＳＴ含量．取肝组织匀浆,测定蛋白含量．脂质过氧化物歧化酶（ＳＯＤ）及谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＳＨＰＸ）活性,并观察肝组织学变化．实验Ⅱ：大鼠３２只分为４组,Ａ组为正常组,Ｂ,Ｃ,Ｄ组ＴＡＡ６００ｍｇ／ｋｇｓｃ;同时给予Ｂ组生理盐水０４ｍＬ／ｋｇ,Ｃ组７５％ＬＡｒｇ３００ｍｇ／ｋｇ,Ｄ组２５％ＬＮＮＡ１０ｍｇ／ｋｇ．２４ｈ后重复注射１次．２４ｈ后按实验Ⅰ取血、肝组织,测定有关指标．结果大鼠注射ＬＡｒｇ后,ＮＯ的合成增多,转氨酶及肝组织损伤程度明显降低,注射ＬＮＮＡ组大鼠肝损伤程度加重,肝组织自由基的测定表明,抑制肝损伤大鼠ＮＯ合成,肝组织ＬＰＯ含量增高而ＳＯＤ,ＧＳＰＨＸ活性降低,ＳＯＤ,ＧＳＨＰＸ协同作用可清除体内自由基．结论抑制ＮＯ的生物合成,自由基水平增高,从而加重了肝损伤     

肝硬化大鼠内脏血管壁NOS分布的免疫组化研究

目的：观察肝硬化门静脉高压大鼠内脏动、静脉血管壁一氧化氮合酶（ＮＯＳ）的分布及染色强度变化,探讨ＮＯ在门静脉高压形成机制中的作用。方法：采用免疫组化染色法,应用两种ＮＯＳ特异性抗体,分别观察内皮型（ｅＮＯＳ）和诱生型（ｉＮＯＳ）ＮＯＳ的变化特点,并结合计算机图象分析系统对染色强度进行量化处理。结果：肝硬化大鼠肠系膜上动脉（ＳＭＡ）ｉＮＯＳ和ｅＮＯＳ染色强度与对照组相比均显著增加（Ｐ＜０．０１）,其中以ｅＮＯＳ增加更为明显。而两组门静脉（ＰＶ）ＮＯＳ染色强度则无明显差异（Ｐ＞０．０５）。肝硬化组ＳＭＡ的ＮＯＳ染色强度明显高于ＰＶ（Ｐ＜０．０５）。结论：ＮＯＳ在内脏血管表达增多,以及在ＳＭＡ的表达高于ＰＶ,提示ＮＯ可能主要通过扩张内脏动脉、增加内脏血流量而参与门静脉高压的形成。     

白细胞介素—1β及其受体拮抗剂对系膜细胞增殖及产？…

目的：探讨白细胞介素１β（ＩＬ－１β）及其受体拮抗剂（ＩＬ－１ｒａ）对系膜细胞增殖及产生１ＮＯ的影响。方法 培养 的第１０￣１２代ＳＤ大鼠肾小球系膜细胞（ＧＭＣ）用于实验,分别加入ＩＬ－１β或ＩＬ－１β加ＩＬ－１ｒａ,１２ｈ后用化学方法测定培养上清中亚硝酸盐的含量,用＾３Ｈ－ＴＤＲ掺入率测定ＧＭＣ的增殖,狭缝和Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交测定细胞ｉＮＳ ｍＲＮＡ表达。结果：ＩＬ－１β组ＧＭＣ出现ｉＮＯＳｍ