化疗药物建立小鼠无精子症模型的实验研究

目的制作小鼠无精子症模型,观察其对支持细胞的影响,为进一步的精原干细胞移植提供受体。方法将4~5周龄ICR小鼠分为4组:环磷酰胺组注射环磷酰胺(200 mg/kg)、白消安组注射白消安(40 mg/kg)、复合组注射环磷酰胺(120 mg/kg)和白消安(20 mg/kg)以及对照组注射0.9%生理盐水。注射后第35天、45天和60天取双侧附睾制作精子悬液,涂片后固定计数,制作并观察睾丸组织学切片(HE)。结果与对照组比较,各给药精子数量显著减少(P<0.05);HE染色:各给药组生精小管内细胞排列疏松,细胞层数减少,各生精小管间隙扩大,间质细胞减少,其中白消安组与复合组于给药后第35天、45天睾丸生精小管内精子及精子细胞消失,第60天时部分生精小管内可偶见精子细胞及精子。结论利用化疗药物采用腹腔内单次注射可以建立小鼠无精子症模型,且操作简捷、周期短、费用低、效果好,可以做精原干细胞移植受体。     

白消安诱导小鼠无精子症模型

目的 采用白消安诱导建立小鼠无精子症模型。方法 采用腹腔内单次注射白消安(40mg／kg)，对白消安的毒性、模型的形态学变化，小鼠的生育能力以及免疫功能进行了观察。结果 白消安单次注射可造成半数的小鼠死亡，用药后4周，睾丸曲细精管呈唯支持细胞样表现，3个月有20％的曲细精管恢复生精，存活小鼠中半数小鼠的生育力正常，模型小鼠的免疫学功能正常。结论 该小鼠无精症模型用作生精干细胞移植的受体模型是可行的。     

秋水仙碱复制雄性大鼠睾丸生精功能减退动物模型的初步研究

目的:通过用秋水仙碱给大鼠灌胃复制雄性大鼠生精功能减退模型.方法:20只雄性性成熟大鼠随机分对照组、环磷酰胺组、秋水仙碱低剂量组和秋水仙碱高剂量组,秋水仙碱片以蒸馏水溶解,低剂量组按1.6 mg/kg、高剂量组按3.2 mg/kg灌胃,每日1次,连续5周;环磷酰胺粉剂则以生理盐水溶解配成20 mg/mL浓度,用时按50 mg/kg腹腔注射,每周2次,连续5周.对照组方法同上,腹腔注射等量生理盐水(2.5 mL/kg).结果:与对照组比较,秋水仙碱高剂量和低剂量组大鼠睾丸有不同程度的生精小管萎缩,生精细胞减少,排列松散,生精小管间腔隙扩大,管腔内精子细胞数量减少.结论:用秋水仙碱灌胃可复制雄性大鼠睾丸生精功能减退模型.     

精原干细胞移植受体鼠模型的建立

目的通过对4周龄昆明白小鼠腹腔内单次注射白消安来制作精原干细胞移植受体鼠模型。方法将实验动物分为4组,A、B、C组注射白消安的剂量分别是30 mg/kg4、0 mg/kg5、0 mg/kg体重,D组为对照组。注射后每天记录小鼠的存活情况,注射白消安后的20 d3、0 d4、0 d称量睾丸重量、测定血常规、制作并观察睾丸组织学切片、统计曲细精管的中空率。结果A、B、C、D组的死亡率分别是25.00%3、1.58%、80.00%、0.00%,注射白消安后30 d各组小鼠曲细精管中空率分别是45.25%、75.25%、1.50%、0.00%,白细胞、红细胞、血小板数量等血常规指标均恢复正常。结论腹腔内单次注射30 mg/kg或40 mg/kg剂量的白消安,死亡率较低(25.00%、31.58%),30 d后曲细精管中空率较高(45.25%7、5.25%)、血常规指标恢复正常,适合做精原干细胞移植受体。     

精灵口服液对腺嘌呤致大鼠精核蛋白异常的影响

目的：探讨精灵口服液治疗男性不育症的作用机制和环节.方法：Wistar系大鼠40只,分正常组10只,用腺嘌呤灌胃法复制睾丸功能损害的大鼠肾阳虚模型30只,随机分模型组、治疗Ⅰ组、治疗Ⅱ组各10只.治疗Ⅰ、Ⅱ组分别灌胃精灵口服液3.6g/kg、1.8g/kg,观察大鼠睾丸和附睾精子的精核蛋白（RP）及精-组蛋白的构成比的变化.结果：精灵口服液可提高大鼠睾丸、附睾内精子精核蛋白和过渡型蛋白1（TP1）的含量,降低总组蛋白与精核蛋白（TH/RP＋TP1、TH/RP）的比值,改善大鼠睾丸、附睾内精子细胞的核蛋白构成.结论：精灵口服液能促进精核蛋白的生物合成,纠正蛋白-精核蛋白取代反应（HPRR）阻滞,给精子核以适当“包装”,使其在生理状态下具备生殖能力.     

人参皂甙Rg1对镉诱导的大鼠睾丸损伤的保护作用

目的:探讨人参皂甙Rg1对镉诱导的大鼠睾丸损伤的保护作用及作用机制.方法:30只雄性wistar大鼠随机分为对照组、氯化镉组和Rg1 氯化镉组.氯化镉组大鼠按0.5mg/(kg·d)氯化镉腹腔染毒,Rg1 氯化镉组大鼠在0.5mg/(kg·d)氯化镉腹腔染毒2h前进行按100mg/(kg·d)Rg1灌胃处理,连续14天后将动物处死,分离附睾,测定精子数量和质量.分离睾丸,测定金属硫蛋白(MT)含量,TUNEL法检测睾丸切片凋亡情况.结果:氯化镉引起附睾中精子数量减少,质量降低,金属硫蛋白表达增加,睾丸中精细胞凋亡指数增加,而Rg1可以改善附睾中精子质量和数量,减少精细胞凋亡指数,并进一步上调金属硫蛋白表达.结论:人参皂甙Rg1对镉诱导的大鼠睾丸损伤具有保护作用,机制可能与上调金属硫蛋白表达有关.     

益精方对环磷酰胺小鼠少弱精症模型精子凋亡的干预作用

目的 探讨补肾益精、补血活血中药方剂益精方对环磷酰胺小鼠少弱精模型精子凋亡的影响.方法 将40只雄性昆明小鼠随机分为对照组、模型组、小剂量治疗组和大剂量治疗组.按60 mg/kg给对照组小鼠腹腔注射生理盐水,60 mg/kg给模型组、小剂量治疗组、大剂量治疗组小鼠腹腔注射环磷酰胺,每天1次,连续5 d.第6天开始按体重...     

海洋活性物质2,3-吲哚醌对雄性大鼠生殖系统的作用研究

目的探讨2,3-吲哚醌对环磷酰胺诱导的大鼠少弱精症的作用。方法模型组与低中高治疗组连续腹腔注射环磷酰胺(30 mg/kgd)5天,建立大鼠少弱精模型后,正常对照组每天生理盐水灌胃,模型组每天1.25%西黄耆胶水溶液灌胃,低、中、高剂量组分别给予2,3-吲哚醌30 mg/kg、150 mg/kg、300 mg/kg,持续35天。普通光学显微镜观察附睾精子数目、精子活力;放射免疫法检测血清中睾酮(T)、促黄体激素浓度(LH)、促卵泡激素(FSH)含量;HE染色观察生精小管层数;测定睾丸、胸腺、肝、脾重量。结果各剂量治疗组与模型组比较,精子数目增加(P<0.05),a级、a+b级精子比率上升(P<0.05),血清促卵泡刺激素(FSH)下降(P<0.05),生精小管层数增加(P<0.05)。结论 2,3-吲哚醌治疗对环磷酰胺诱导的大鼠少弱精症具有改善作用。     

益智仁提取物对小鼠生精能力的影响实验研究

目的 探讨益智仁提取物对环磷酰胺致生精障碍小鼠的治疗作用.方法 水提法获得益智仁提取物.50只Balb/c小鼠随机分为对照组、模型组、益智仁提取物低剂量组、中剂量组和高剂量组(0.2g/kg、0.4g/kg、0.8g/kg)共5组.除对照组外,其余各组每天注射环磷酰胺75 mg/kg,连续5d,制备生精障碍小鼠模型.末次给药后,益智仁提取物低剂量组、中剂量组、高剂量组分别给予相应剂量灌胃,对照组和模型组给予等体积生理盐水灌胃,每天1次,连续30 d.末次灌胃后24h,取小鼠睾丸和附睾组织.检测各组小鼠精子密度、活率及精子畸形率,HE染色观察睾丸组织形态.结果 与模型组相比,益智仁提取物各剂量组均可提高精子密度、精子活率,降低精子畸形率,组织学观察,益智仁提取物各剂量组小鼠睾丸组织病理性损害均得到改善.结论 益智仁提取物对环磷酰胺所致小鼠生精障碍具有明显的治疗作用.     

环磷酰胺诱导建立少精/无精症大鼠模型所致睾丸、附睾IGF-I和bFGF的变化

目的 探讨环磷酰胺(CP)对大鼠附睾的组织中胰岛素样生长因子Ⅰ(IGF-Ⅰ)和碱性成纤维细胞因子(b-FGF)表达的影响.方法 96只8周龄成年雄性SD大鼠,分为6组,每组16只.第1～5组分别给予CP 10、20、40、80、100mg/kg·d,第6组为对照组,给予生理盐水2ml.胃管给药2周和4周后,处死大鼠,采用ELISA法对附睾组织洗脱液IGF-Ⅰ和bFGF进行定量检测;同时采用SP免疫组化法检测睾丸组织IGF-Ⅰ和bFGF的表达.结果 随着CP处理时间的延长和剂量的增加,IGF-Ⅰ和bFGF在大鼠附睾中的浓度逐渐下降,大鼠睾组织睾中IGF-Ⅰ和bFGF的表达也降低.结论 CP在引起大鼠少精子/无精子症的同时,可以显著降低大鼠附睾、睾丸IGF-Ⅰ和bFGF的含量和表达水平.IGF-Ⅰ和bFGF的降低与CP降低大鼠生精功能明显相关.     

高效液相色谱法测定5种品牌克拉霉素片的含量比较

目的考察国内外5个厂家的克拉霉素片的含量。方法采用高相液相色谱法,色谱柱:C8(5μm,4.6mm×150mm);流动相:0.067mol/L磷酸二氢钾—乙腈(60∶40);流速:1.0ml/min;检测波长:210nm;柱温:45℃;结果5个厂家的克拉霉素片含量没有明显差异,均符合2005版药典的要求,但各药的日均服药费用有很大差异。结论建议临床应选用安全、有效、经济的药物。     

卒中后遗症期中医药治疗进展

随着中医学的发展,治疗本病的方法日臻完善,目前较为一致的观点认为其发病机理为"本虚标实"."本虚"是指气血虚少,脾虚、肝虚、肾虚;"标实"是指风、火、痰、瘀等实邪的存在,通过中药单方、复方、针灸、磁疗等治疗手段予益气、活血、健脾、化痰、滋肝、补肾等法,从而达到中医药治疗的目的.     

200例肿瘤CT诊断与病理诊断对比分析

将２００例ＣＴ诊断为肿瘤的患者手术后进行病理组织学诊断，两者的诊断符合率为９０．５％，ＣＴ误诊率为９．５％。对误诊的原因进行了分析，强调在肿瘤诊断中ＣＴ与病理诊断互补性的重要意义。     

酶促萘普生酯的选择性水解拆分

柱状假丝酵母脂肪酶可以选择性催化S－萘普生甲酯、乙酯和乙氧基乙基酯发生水解,从而对化学合成的混旋萘普生进行拆分,制备具有高光学纯度的S－对映体。利用中等极性大孔吸附树脂HZ－806作为固定化载体,可在酶分子周围营造一个有利于反应的微环境,有效地提高酶的催化活力及解决酶的回收。在中等极性大孔吸附树脂固定化酶填充床反应器中,混旋乙氧基乙基萘普生酯可被连续水解拆分,当流量为72mL/h时,酯的水解率为17％,光学纯度为89．1％。     

异紫杉脂素的酶法糖基化

目的 以异紫杉脂素为例，探索酶法糖基化的可行性，为其他具有重要生理活性的天然化合物提供可行的生物转化方法。方法 利用半乳糖苷酶转糖基活性对异紫杉脂素进行了糖基化修饰。结果 通过薄层层析，质谱，红外光谱，^1HNMR,^13CNMR数据显示产物即是异紫杉脂素半乳糖苷。结论 E.coli和脆壁酵母来源的β-半乳糖苷酶可以对异紫杉脂素进行糖基化修饰。     

布鲁氏菌病实验室初筛阳性而确认实验阴性标本的分析

目的了解平顶山市2011-2013年布鲁氏菌病(简称布病)高危人群血清学筛查中初筛假阳性的现状,指导今后布病实验室检测工作。方法采用虎红平板凝集试验(Rose Bengal Plane Test,RBPT)进行初筛,阳性标本再进行试管凝集试验(Standard Tube Agglutination Test,SAT)确诊。结果 33份标本为RBPT初筛阳性SAT确认阴性,假阳性比例为40.24%。各年度间和不同人群间的假阳性比例差异均无统计学意义(χ2年度=0.89,P=0.64;χ2性别=0.46,P=0.50;χ2年龄=0.94,P=0.63;χ2职业=2.52,P=0.47;χ2民族=1.71,P=0.19)。对其中21份低滴度进行回顾性SAT检测,有2份转阳。结论要对RBPT阳性而SAT阴性的标本进行回顾性检测,进一步规范布病实验室检测,减少漏诊。     

通过辅助生育技术出生的婴儿数目增加12％

全世界每年有超过200000名婴儿通过辅助生育技术（ART）出生。 一项报告估计,2002年有2190130～246000名ART婴儿出生,相较于2000年的数据（由911000～1025000个周期估算出）增长12％（Human Reproduction 2009 May 27,doi：10.1093／humrep／dep098）。     

胶质瘤RNA致敏的人脐血树突状细胞诱导细胞毒T淋巴细胞对肿瘤细胞的杀伤作用

目的:制备人脐血来源的树突状细胞(DCs),用胶质瘤RNA诱导其成熟,并观察DCs诱导细胞毒T淋巴细胞(CTL)体外杀伤肿瘤细胞的活性.方法:以rhGM-CSF、IL-4诱导人脐血单个核细胞向DCs分化并鉴定.提取胶质瘤RNA与DCs混合,使DCs致敏,未致敏的DCs为对照组.观察细胞形态并检测致敏前后DCs的表型.将DCs与外周血T细胞共培养,以胶质瘤细胞为靶细胞,采用MTT比色法检测T细胞抗肿瘤活性差异.结果:人脐血单个核细胞于诱导第5 d呈现典型的DCs形态;经rhGM-CSF、IL-4诱导培养后,CD86、CD11c、CD54、MHC-Ⅰ、MHC-Ⅱ类分子表达与培养前比较均明显增高(P＜0.01).负载抗原后,MHC-Ⅰ和CD54表达与负载抗原前相比进一步增高(P＜0.05).以DCs诱导活化的T细胞与胶质瘤细胞共培养可使胶质瘤细胞的生长受到抑制,并最终导致其死亡;杀伤率与未负载抗原的对照组相比差异有统计学意义(P＜0.01).结论:人脐血单个核细胞在细胞因子的诱导下扩增并分化为DCs.经抗原致敏后,能增强淋巴细胞对相应肿瘤细胞的体外杀伤效应.