67kDa层粘连蛋白受体与肿瘤

1　前　言层粘连蛋白 (laminin,L n)是细胞外基质中的一种重要的糖蛋白 ,它与肿瘤细胞的相互作用是影响肿瘤转移的一个重要因素。细胞可以通过不同的受体与层粘连蛋白结合 ,这些受体按结构可分为整合素家族与非整合素家族两大类 ,其中整合素家族是由 α和 β两个亚基通过非共价键结合起来的异二聚体 ,至今为止已发现至少有八种整合素能与层粘连蛋白结合 ,包括 α1 β1 、α2 β1 、α3β1 、α6 β1 、α7β1 、α6 β4 、α β2 、α β3,而非整合素家族有九种 ,其中发现最早、研究最多是 6 7k Da层粘连蛋白受体。1983年三个实验室分别通…     

层粘连蛋白受体理化性质的进一步研究

从Lewis肺癌纯化的层粘连蛋白受体(Laminin Receptor,LN-R)SDS-PAGE鉴定分子量为70000的单条区带。其用高碘酸-希夫氏试剂显色阳性,说明是一种糖蛋白。等电点为4.93,属酸性蛋白质。氯仿-甲醇提取物TLC分析,提示LN-R伴有磷脂。HPTLC分析表明它伴有中性糖脂未见酸性糖脂。LN-R与LN的结合依赖于Ca~(2+),Mg~(2+)的存在。LN-R可与肌动蛋白结合。     

Ⅳ型胶原、层粘连蛋白、纤维粘连蛋白在胃癌中表达的意义

目的 探讨胃癌浸润转移的病变机制。方法 采用免疫组化ＬＳＡＢ法检测２０例正常胃组织及９６例胃癌标本中ＣｏｌⅣ、ＬＮ、ＦＮ的表达。结果 ＣｏⅣ、ＬＮ、ＦＮ免疫反应物呈标色均匀分布在胃腺体周围形成线状基底膜样结构。在增生的纤维组织中则呈不规则条纹状表达。２０例正常胃组织的腺体周围基底膜结构均匀、完整,基本无间增生。在９６例胃癌组织中,腺体周围基底膜结构遭到明显的破坏,呈现断线状、条索状、甚至碎片状表达     

层粘连蛋白受体的研究进展

层粘连蛋白受体的研究进展苏玲，周柔丽层粘连蛋白受体（ｌａｍｉｎｉｎｒｅｃｅｐｔｏｒ，ＬＮ－Ｒ）是存在于细胞表面的跨膜糖蛋白，它广泛存在于肿瘤细胞及某些附着于基膜的正常细胞表面。由于ＬＮ－Ｒ与基膜中的层粘连蛋白（ｌａｍｉｎｉｎ，ＬＮ）的相互作用与恶性肿...     

层粘连蛋白对人胃癌细胞内游离钙及钙调蛋白和核DNA含…

本文研究外源性层粘连蛋白与人胃癌细胞膜上其受体介导细胞内Ｃａ＾２＋浓度及钙调蛋白（ＣａＭ）和ＤＮＡ发生的变化。结果表明，层粘连蛋白可引起细胞内Ｃａ＾２＋浓度升高和钙调蛋白含量显著升高。同时伴有核ＤＮＡ含量增加。提示外源性层粘连蛋白与质膜上的层粘连蛋白受体结合后可能通过细胞内Ｃａ＾２＋影响核内ＣａＭ，进而促进ＤＮＡ的合成。该信息通路在层粘连蛋白促进肿瘤细胞粘着，铺展，增殖等生物学效应中可能起重要调节     

人喉鳞癌细胞67-KD层粘连蛋白受体的表达

目的　观察67-KD层粘连蛋白受体(67-KD laminin receptor,67-KDLN-R)在人喉鳞癌细胞中的表达情况,并分析其表达与临床病理特征间的关系。方法　采用免疫组化SP方法　检测30例喉鳞癌原发灶和其中的3例颈淋巴结转移灶石蜡标本中67-KDLN-R的表达。结果　 67-KDLN-R在喉鳞癌原发灶中的阳性率为56．7％(17／30)。转移淋巴结的免疫反应结果　与原发部位的免疫反应结果　相一致。67-KD LN-R的表达与肿瘤的分化程度密切相关,分化差者其表达水平更高(P<0．05)。与无颈淋巴结转移的喉鳞癌细胞相比,有颈淋巴结转移喉鳞癌细胞67-KDLN-R的表达水平更高(P<0．05)。结论　 67-KDLN-R在喉鳞癌分化、增殖、浸润及转移中起重要作用。     

人喉鳞癌细胞67-KD层粘连蛋白受体的表达

目的：观察６７－ＫＤ层粘连蛋白受体（６７－ＫＤｌａｍｉｎｉｎ ｒｅｃｅｐｔｏｒ,６７－ＫＤＬＮ－Ｒ）在人喉鳞癌细胞中的表达情况,并分析其表达与临床病理特征间的关系。方法采用免疫组化ＳＰ方法检测３０例喉鳞癌原发灶和其中的３例颈淋巴结转移灶石蜡标本中６７－ＫＤＬＮ－Ｒ的表达。结果６７－ＫＤＬＮ－Ｒ在喉鳞癌原发灶中的阳性率为５６．７％（１７／３０）。转移淋巴结的免疫反应结果与原发部位的免疫反应结果相一致     

人胎盘绒毛层粘连蛋白及其受体的定位与定量研究

目的：研究层粘连蛋白（ｌａｍｉｎｉｎ，ＬＮ）及其受体（ｌａｍｉｎｉｎｒｅｃｅｐｔｏｒ，ＬＮＲ）在早、中、晚期人胎盘绒毛的定位及其相对含量变化。方法：取早期、中期和晚期胎盘绒毛，常规制作石蜡组织切片，采用免疫组织化学ＡＢＣ法和图像分析技术进行ＬＮ及ＬＮＲ定位和定量测定。结果：ＬＮ阳性反应主要位于绒毛上皮基膜和绒毛血管内皮基膜；ＬＮＲ的阳性反应位于绒毛上皮合体滋养层表面及合体滋养层和细胞滋养层的细胞质内，细胞核呈阴性。ＬＮ及ＬＮＲ的含量以早期胎盘绒毛中最高，中期及晚期含量明显降低。结论：人胎盘绒毛含有ＬＮ及ＬＮＲ，随着胎盘周龄的增加，二者的含量均降低     

双嘧达莫对胃癌多药耐药的逆转实验研究

目的 研究双嘧达莫对胃癌细胞多耐药的逆转作用。方法 逐渐递增长春新碱浓度诱导胃癌细胞株ＳＧＣ７９０１产生多药耐性（ＳＧＣ７９０１ｒ）。以双嘧达莫为逆转剂，ＭＴＴ法测定抗癌药对肿瘤药对肿瘤细胞的杀伤作用；激光全聚焦镜测定肿瘤细胞内柔红霉素和钙离子荧光强度。结果 胃癌ＸＧＣ７９０１ｒ细胞对长春新碱、柔红霉素、丝裂霉素及顺铂的耐药性分别的ＳＧＣ７９０１ｒ细胞的４．４６倍、１４．９５倍、２１．２０倍和１６     

P-糖蛋白、多药耐药相关蛋白在胃癌的表达与化疗敏感性的相关性研究

目的：探讨胃癌组织中P-糖蛋白（P-glycoprotein,P-gP）、多药耐药相关蛋白（muhidrug resistance-associated protein,MRP）的表达及对胃癌原代细胞培养体外化疗药物敏感性的影响。方法：应用免疫组化法检测P-gP及MRP在48例胃癌及癌旁组织的表达,同时通过胃癌原代细胞培养MTT药敏试验,检测胃癌对7种临床常用化疗药物的敏感性及耐药性,进一步分析药敏试验结果与P-gp、MRP表达的相关性。结果：在48例胃癌中,P-gP及MRP阳性率分别为41．7％、29．2％,共同表达率为25．0％。癌旁组织与癌组织的P-gP、MRP阳性表达率无显著差异。在顺铂（DDP）、丝裂霉素（MMC）、阿霉素（ADM）、鬼臼乙叉甙（VP-16）、5-氟尿嘧啶（5-FU）、羟基喜树碱（HCVF）、甲氨蝶呤（MTX）中,ADM、VP-16、HCVF耐药组P-gP、MRP阳性表达及共表达率较敏感组显著升高。结论：胃癌组织P-gp、MRP表达可导致胃癌原发性耐药。P-gP、MRP介导的MDR是ADM、VP-16、HCPT耐药的重要因素．     

多药耐药基因产物和激素受体在乳腺癌中的表达及意义

目的：探讨多药耐药基因产物谷胱甘肽转移酶π（ GST-π）、肺耐药相关蛋白（ LRP）和DNA拓扑异构酶Ⅱ（ TopoⅡ）和雌激素受体（ ER）、孕激素受体（ PR）在乳腺浸润性导管癌组织中的表达及临床意义,并分析多药耐药基因产物与雌、孕激素受体之间是否有关联。方法应用免疫组织化学SP二步法检测194例乳腺浸润性导管癌组织中GST-π、LRP、TopoⅡ、ER、PR的表达,且结合乳腺癌临床病理因素进行分析。结果194例乳腺浸润性导管癌组织中GST-π、LRP、TopoⅡ表达的阳性率分别为62.4％、81.4％、51.5％。 LRP和TopoⅡ在伴有淋巴结转移的乳腺浸润性导管癌患者中的表达高于无淋巴结转移者（ P＜0.05）,而与患者年龄、肿块长径、组织学分级、TNM分期等临床病理因素之间无相关性（P＞0.05）;LRP和TopoⅡ的表达与ER、PR的表达均无明显相关性（ P＞0.05）。 GST-π的表达与ER、PR的表达呈负相关（ P＜0.05）,而与其它临床病理因素之间未见相关性（ P＞0.05）。 LRP、GST-π、TopoⅡ两两之间无相关性（ P＞0.05）。结论 GST-π、LRP、TopoⅡ与乳腺浸润性导管癌的多药耐药有关,且LRP和TopoⅡ与乳腺癌的转移有一定关系,GST-π与ER、PR负性相关。联合检测可为乳腺癌的临床化疗药物选择及评估预后提供依据。     

多药耐药相关蛋白在胃癌,肾癌中的表达意义

目的：探讨多经耐药相关蛋白（ＭＲＰ）在胃癌和肾癌中表达的临床意义。方法：应用免疫组化ＬＳＡＢ法检测５２例胃癌和２０例肾癌组织中ＭＲＰ表达，结果：ＭＲＰ的胃癌中阳性表达率为３８．５％（２０／５２），肾癌为６０％（１２／２０）ＭＲＰ在肿瘤细胞膜上和胞闪内均现表达，但以胞浆（粗颗粒状）更显著。晚期胃癌和肾癌（ＩＩＩ，Ⅳ期）阳性表达率分别为６０％（１５／２５）和８８．９％（８／９），高于Ｉ，Ⅱ期患者（１８     

姜黄素逆转P—gp介导卵巢癌多药耐药机制的研究

目的探讨姜黄素对P糖蛋白（P—gP）介导的卵巢癌多药耐药的逆转作用及其可能机制。方法采用二苯基溴化四氮唑蓝（MTT）法检测人卵巢癌癌细胞株加药后的增殖,碘化丙啶（PI）染色法检测细胞凋亡率,western blot法检测P—Akt和P-gP的表达量。结果姜黄素合用顺铂处理细胞（OVCAR-3／DDP细胞株）48h,顺铂的浓度在0．05—5μg／ml时,加入姜黄素25μmol／L,耐药细胞生存率下降明显（P〈0．05）,尤以顺铂0．25μg／ml和姜黄素25μmol／L作用时耐药细胞生存率下降最明显。单用顺铂组细胞的凋亡率为（13．2±2．5）％,采用在顺铂基础上联合使用姜黄素后细胞凋亡率为（21．8±3．5）％,与单独使用顺铂相比,顺铂与姜黄素联合使用诱导细胞凋亡的作用显著增强（P〈0．05）。与单用顺铂0．25μg/ml相比,联合使用姜黄素后p-Akt和P-gP的表达量明显降低（P〈0．05）,2组间Akt的表达量差异无统计学意义（P〉0．05）。结论姜黄素不增加顺铂对OVCAR-3细胞毒性作用;对于OVCAR-3／DDP细胞株,姜黄素明显增加顺铂细胞毒性;姜黄素明显抑制了p-Akt和P—gP蛋白的表达。姜黄素可能通过抑制Akt信号通路降低P—gP的表达进而逆转多药耐药。     

突变型p53与胃癌细胞多药耐药性关系的研究

目的：研究胃癌细胞中突变型p53和MDR-1基因的表达及其与不同化疗药物敏感性的关系。方法：将突变型p53、sv40Tag（封闭p53）导入胃癌细胞株SGC-7901中，研究胃癌细胞中MDR-1基因表达的变化；用MTT法比较各组细胞对化疗药的敏感性。结果：导入突变型p53细胞株的MDR-1基因mRNA表达比导入突变型p53＋sv40Tag细胞株、对照组MDR-1基因mRNA表达强；导入突变型P53细胞株对5-氟脲嘧啶（5-Fu）耐药性与导入突变型P53＋sv40Tag细胞株和对照组比较均有显著性差异（P〈0．05），而后两者之间耐药性差异无显著性（P〉0．05）；导入突变型p53细胞株和导入突变型p53＋sv40Tag细胞株对阿霉素（ADM）耐药性与对照组比较均有显著性差异（P〈0．05），而前两者之间对ADM的耐药性差异无显著性（P〉0．05）。导入突变型p53细胞株、导入突变型p53＋sv40Tag细胞株及对照组细胞株对顺铂（CDDP）耐药性均无显著性差异（P〉0．05）。结论：突变型p53能促进MDR-1 mRNA表达，与肿瘤细胞发生多药耐药密切相关。     

层粘连蛋白及其受体在葡萄胎中表达与预后的相关研究

目的：探讨层粘连蛋白（Laminin,LN）和受体（Laminin Receptor,LN-R）的表达在葡萄胎预后中的意义.方法：应用免疫组化方法对41例葡萄胎组织（经随访13例发生恶变）和20例正常早孕绒毛组织中LN及LN-R进行检测.结果：LN在正常绒毛、葡萄胎未恶变组和恶变组中的强表达率分别为,90.0%（18/20）、71.4%（20/28）、38.5%（5/13）;LN-R分别为70.0%（14/20）、71.4%（20/28）、84.6%（11/13）.LN表达葡萄胎预后恶变组显著高于其他两组.结论：LN和LN-R在葡萄胎中的表达可能在葡萄胎恶变过程中起重要作用,有望作为判断葡萄胎预后的参考指标之一.     

榄香烯对耐药胃癌细胞的逆转实验研究

目的为寻找适合临床应用的新型MDR逆转剂,观察榄香烯乳注射液对人胃癌耐药细胞系SGC7901/VCR的影响作用.方法采用MTT法进行药敏实验,并通过流式细胞仪检测细胞周期变化、胞浆药物浓度,免疫细胞化学染色法显示耐药细胞中MRP和P-gp蛋白的分布. 结果榄香烯对SGC7901/VCR的半数抑制浓度为18.65μg/mL,并且能够逆转其对VCR、ADM的耐药性,但对5-FU、DDP的耐药性无明显影响.经榄香烯诱导后细胞内药物浓度明显增加,S期和G2 M期增加,G1期减少,MRP和P-gp的表达明显减弱.结论榄香烯能够逆转SGC7901/VCR的耐药性,其机理与促使MRP和P-gp蛋白表达减少有关,有待于进一步研究.     

斑贞1号、川芎嗪和5-氟尿嘧啶联合对人胃癌细胞肺耐药蛋白基因表达影响

目的探讨斑贞1号、川芎嗪（TMP）和5-氟尿嘧啶（5-FU）联合逆转人胃癌细胞系SGC-7901/ADR与LRP表达的相关性。方法采用半定量逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）比较人胃癌细胞SGC-7901/ADR细胞在单纯5-FU和5-FU联合斑贞1号及TMP处理组肺耐药蛋白（LRP）mRNA的表达情况。结果 5-FU组与阴性对照组比较,LRPmRNA表达差异无统计学意义（P〉0.05）;而5-FU联合斑贞1号及TMP处理组LRP mRNA表达量明显降低,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论斑贞1号、TMP和5-FU联合逆转SGC-7901/ADR细胞耐药性可能与LRP基因相关,为当前胃癌的治疗提供了新的理论依据。     

R-型维拉帕米逆转肿瘤细胞多药耐药的实验研究

目的 :检测 R-型维拉帕米 (R- Verapamil)体外逆转肿瘤细胞多药耐药的作用及动物毒性 ,探讨 R-型维拉帕米成为未来化疗增敏剂的可能性。　方法 :细胞毒性的测定用 MTT法 ,细胞内阿霉素积蓄的测定用荧光分光光度法。动物毒性试验用 BAL B/ c小鼠腹腔注射法。　结果 :1 .2 5 μm ol/ L 的 R-型维拉帕米即可显著增加耐药 KBv2 0 0细胞对长春新碱和阿霉素的敏感性 (P<0 .0 1 ) ,其效应与作用浓度有关。在增敏和增加细胞内阿霉素积蓄方面 ,R-型维拉帕米与混旋维拉帕米效果一样 ,但 R-型维拉帕米的动物毒性低于混旋维拉帕米。　结论 :1 .2 5 μm ol/ L 的R-型维拉帕米能部分逆转耐药 KBv2 0 0细胞的多药耐药性。此浓度能被人体所接受。R-型维拉帕米有望成为未来的化疗增敏剂