一种新的荧光扫描法定量检测CK同工酶

介绍一种用不连续缓冲液电泳分离ＣＫ同工酶的方法，并以光密度计荧光扫描确定每种同工酶的相对含量，结果显示其测定敏感度和特异性与ＭＯＰＳ电泳系统结果一致，且二法有良好的相关性，而成本明显低于单用ＭＯＰＳ电泳法。     

血清磷酸肌酸激酶同功酶M2,刀豆蛋白A结合寡糖蛋白检测对胃 …

目的：评价血清磷酸肌酸激酶同功酶Ｍ２（ＣＫ－Ｍ２）、刀豆蛋白Ａ结合寡糖蛋白（ＣＯＰ）对胃癌的诊断价值。方法：血清ＣＫ－Ｍ２测定采用琼脂糖电泳和吩嗪二甲酯硫酸盐显色法；ＣＯＰ测定先用高氯酸、盐酸胍沉淀，最后按酶免疫竞争抑制法作检测。检测血样６９例，其中胃癌患者血清２８例，献血员４１例。凡ＣＫ－Ｍ２出现明显区带，ＣＯＰ小于正常人ＯＤ平均值减去２ＳＤ者判为阳性。结果：４１例献血员ＣＫ－Ｍ２均阴性，胃癌患     

大鼠肝脏单胺氧化酶及其同工酶活性的增龄变化

用荧光分光光度法检测了３月龄、１２月龄和１８月龄ＳＤ大鼠肝脏单胺氧化酶（ＭＡＯ）及其同工酶（ＭＡＯ─Ａ．ＭＡＯ─Ｂ）的活性。结果表明ＭＡＯ及其两种同工酶的活性均随增龄而升高，成年鼠的酶活性升高尤为显著（Ｐ＜０．０１），升高幅度达幼年鼠６７％以上，老年鼠与成年鼠基本持平，只有ＭＡＯ─Ａ略有升高。     

Amy同工酶免疫抑制法与电泳法相关比较

人淀粉酶主要以胰腺淀粉酶（Ｐ－Ａｍｙ）和睡液腺淀粉酶（Ｓ－Ａｍｙ）两种同工酶形式存在。血、尿中淀粉酶同工酶的测定对于急性胰腺病变和唾液腺疾患的检查以及肿瘤产生的淀粉酶,其他脏器疾患引起的高淀粉酶等的诊断是一个有用的指标。淀粉酶同工酶分析法常用的有电泳法和免疫抑制法。本文对两种方法求出的Ｐ型Ａｍｙ活性值及Ｐ／Ｓ比值的相关性进行了探讨。材料和方法选取总Ａｍｙ活力大于２００Ｕ／Ｌ的患者血浆标本,分别用电泳法和免疫抑制法进行分析。同工酶电泳使用ｈｅｌｅｎａｌａｂｏ－ｒａｔｏｒｉｅｓ的试剂盒,ｔｉｔａｎｌ…     

补骨脂素和8-甲氧基补骨脂素对涎腺粘液表皮样癌高转移细胞表型的影响

目的：研究补骨脂素（ＰＳＯ）和８－甲摒在补骨脂素（８－ＭＯＰ）对涎 粘液表皮样癌高转移细胞克隆Ｍｃ３恶性表型的影响。方法用ＭＴＴ法、细胞记数法、软琼脂克隆形成法、流式细胞术、癌细胞静脉注射法（每只鼠１０＾６个细胞）等研究ＰＳＯ和８－ＭＯＰ对Ｍｃ３细胞增殖以及转移力的抑制作用。结果ＰＳＯ和８－ＭＯＰ对Ｍｃ３细胞具有浓度依赖性生长抑制作用,ＩＣ３０（ｍｇ．Ｌ＾－１）分别为３２．４和２５．１,ＩＣ５０（     

慢性粒细胞白血病反义核酸基因治疗的实验研究

目的单独应用ｂｃｒ－ａｂｌ反义硫代磷酸寡聚脱氧核糖核酸（ＡＳＰＯ）或ｃ－ｍｙｂＡＳＰＯ作用于慢性粒细胞白血病（ＣＭＬ）细胞的研究已有报道，但抑制的不彻底性是个主要问题。由于ＣＭＬ的发生是多癌基因协同作用及相互影响的结果，为进一步提高ＡＳ－ＰＯ对ＣＭＬ细胞的作用效果，用互补于两种类型（ｂ２ａ２及ｂ３ａ２）的ｂｃｒ－ａｂｌ基因融合位点两侧各１３个核苷酸的ＡＳＰＯ（ｂ２ＡＳＰＯ和ｂ３ＡＳＰＯ）及ｃ－ｍｙｂ基因起始密码子２－７互补的ＡＳＰＯ（ｍＡＳＰＯ）联合作用于Ｋ５６２细胞株和原代ＣＭＬ细胞。方法硫代磷酸寡核基酸（ＰＳ－ＯＤＮ）的合成由３９２－０５型ＤＮＡ－ＲＮＡ合成仪自动合成，经ＯＰＣ柱纯化；细胞与ＰＳ－ＯＤＮ共培养后２４，４８，９６，１２０ｈ倒置显微镜下活体观察，０．４％台盼蓝拒染法进行死活细胞计数；ＣＦＵ－Ｋ５６２、ＣＦＵ－ＧＭ、ＣＦＵ－ＧＥＭＭ采用０．８％甲基纤维素半固体培养法；采用两对引物ＲＴ－ＰＣＲ半定量法检测细胞ｂｃｒ－ａｂｌｍＲＮＡ表达；通过流式细胞仪检测及电镜观察细胞凋亡情况。结果（１）ＡＳＰＯ能够特异性抑制ｂｃｒ－ａｂｌ基因表达；经ＲＴ－ＰＣＲ的检测发现１０μｍｏｌＡＳＰＯ作用４８ｈ，两种反义     

压力支持通气和同步间歇指令通气的临床应用比较

目的比较压力支持通气（ＰＳＶ）和同步间歇指令通气（ＳＩＭＶ）的临床应用。方法对２２例需要辅助通气的危重患者予ＰＳＶ和ＳＩＭＶ、观察分钟通气量（ＭＶ）、潮气量（ＶＴ）、呼吸频率（ｆ）、气道峰值压力（ＰＩＰ）、动脉血氧分压（ＰａＯ２）、二氧化碳分压（ＰａＣＯ２）及动脉血氧饱和度（ＳａＯ２）、心率（ＨＲ）、平均动脉压（ＭＡＰ）、人机对抗情况。结果ＭＶ、ＶＴ、ｆ、Ｐａ－ＣＯ２、ＰａＯ２、ＨＲ、ＳａＯ２，ＭＡＰ在两者无明显差异（Ｐ＞０．０５），但ＰＳＶ时ＰＩＰ明显降低，人机对抗少（Ｐ＜０．０１）。结论ＰＳＶ优于ＳＩＭＶ。     

慢性阻塞性肺病急性期IL－1活性变化

通过支气管肺泡灌洗术（ＥＡＬ）获取肺泡巨噬细胞（ＰＡＭ）．用大肠杆菌脂多糖（ＬＰＳ）诱导及胸腺细胞增殖反应法，检测２８例慢性阻塞性肺病（ＣＯＰＤ）患者ＰＡＭ释放白细胞介素１（ＩＬ－１）活性，并与１２例健康非吸烟者对照。结果，经ＬＰＳ刺激和未经刺激ＣＯＰＤ组的ＰＡＭ产生ＩＬ－１活性均明显高于对照组，ＣＯＰＤ组中，经ＬＰＳ刺激后ＰＡＭ产生ＩＬ－１活性，肺心病组＞肺气肿组＞慢支组。提示，ＩＬ－１在ＣＯＰＤ的发生和发展中起重要作用。     

三种甲替溶解剂在MTT比色法中的应用

研究ＭＴＴ比色法中三种甲　溶解剂，异丙醇（ＩＳＯＰ）、１０％曲拉通—５０％异丙醇（ＴＲＩ－ＴＯＮ－ＩＳＯＰ）和２０％ＳＤＳ（均加入１０ｍｍｏｌ／ＬＨＣｌ酸化）的应用效果。结果发现，在测定不同浓度的外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）时，ＴＲＩＴＯＮ—ＩＳＯＰ与ＳＤＳ效果相当，而在测定不同浓度的Ｈｅｌａ细胞时，前者优于后者，而ＴＲＩＴＯＮ—ＩＳＯＰ和ＳＤＳ均优于ＩＳＯＰ。     

Zmu-1:DHP豚鼠乳酸脱氢酶和超氧化物歧化酶同工酶的研究

采用聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳法，分析了Ｚｍｕ１：ＤＨＰ豚鼠心、肝、脾、肺、肾、骨骼肌、红细胞和血清的ＬＤＨ及ＳＯＤ同工酶，对ＬＤＨ同工酶谱作了光密度扫描，计算出各同工酶组分的相对活力及不同组织和血清ＬＤＨ中Ａ、Ｂ亚基的含量。Ｚｍｕ１：ＤＨＰ豚鼠肝中缺乏ＤＨＰ豚鼠和其他实验动物肝中普遍存在的ＬＤＨ５组分，多数组织中ＬＤＨＢ亚基含量呈不同程度提高。Ｚｍｕ１：ＤＨＰ豚鼠各组织和血清的ＳＯＤ同工酶呈多带分布。ＳＯＤ１和ＳＯＤ２为共有酶带。     

白细胞分类与肌酸磷酸激酶同工酶检测结合对急性心肌梗死的早期诊断价值

目的　观察白细胞分类与肌酸磷酸激酶同工酶 (CK MB)检测相结合对急性心肌梗死的早期诊断价值。方法　前瞻性研究因胸痛而就诊的病例 6 2 5例 ,观测心电图变化及血液肌酸磷酸激酶及其同工酶 ,白细胞总数及分类 ,肌钙蛋白T等的变化 ,最后统计并比较各指标尤其是白细胞分类并肌酸磷酸激酶同工酶对急性心肌梗死的早期诊断价值。结果　急性心肌梗死胸痛发生后 1 2h内相对淋巴细胞减少的敏感性最高 (6 1 3% ) ;肌酸磷酸激酶同工酶并白细胞分类对急性心肌梗死诊断的特异性和诊断有效性 ,与心电图有诊断意义的ST段抬高相近 ,而敏感性明显高于后者 (4 6 8%vs 38 7% ,P <0 0 5 )。结论　肌酸磷酸激酶同工酶与白细胞分类两个指标相结合 ,敏感性和特异性均较高 ,对急性心肌梗死的早期诊断有较大的临床价值     

膀胱癌尿脱落细胞中细胞角蛋白20的表达及临床意义

目的 :以逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)检测尿中膀胱移行癌细胞 ,研究尿脱落细胞中细胞角蛋白 2 0 (CK2 0 )的表达及其临床意义 .方法 :应用RT PCR方法检测 4 5例膀胱癌患者以及 18例非肿瘤患者的尿脱落细胞CK2 0 .结果 :4 5例膀胱癌 39例CK2 0表达阳性 ,非肿瘤组 18例中 1例CK2 0表达阳性 ,RT PCR方法检测膀胱癌尿脱落细胞中CK2 0敏感度 86 .7% ,特异度 94 .4 % .G1,G2 及G3 膀胱癌阳性率分别为82 .8% (2 4 /2 9) ,91.7% (11/12 ) ,10 0 .0 % (4 /4) ,各级间无显著差异 (P >0 .0 5 ) .CK2 0的表达同肿瘤的分期、分级无关 .结论 :CK2 0是一种较为理想的膀胱肿瘤标记物 ,RT PCR方法检测膀胱癌尿液中CK2 0可用于膀胱癌的诊断     

新生儿缺氧缺血性脑病血LDH、CK及其脑型同工酶分析

目的探讨不同程度新生儿缺氧缺血性脑病（HIE）患儿血清乳酸脱氢酶（LDH）、肌酸激酶（CK）及其脑同工酶活性的变化。方法 100例HIE患儿和50例正常儿均于生后24h进行血清LDH及同工酶LDH3,CK及同工酶CKBB活性检测。结果 HIE中度和重度组血清LDH、CK、LDH3和CK-BB活性明显高于正常组（P〈0.05）。结论血清LDH、CK,尤其LDH3、CKBB活性,可以作为评价新生儿HIE患儿脑损伤程度的指标。     

超声联合Galectin-3、CK19诊断甲状腺乳头状癌的准确性

目的 探讨超声联合Galectin-3、CK19诊断甲状腺乳头状癌（papillary thyroid carcinoma,PTC）的准确性。方法 收集甲状腺结节病例150例,其中PTC 66例分为PTC组,结节性甲状腺肿（nodular goiter,NG）84例分为NG组。对两组的超声特征进行比较;以病理组织的检测为标准,分析以FNAC的标本检测CK19和Galectin-3的表达情况的敏感度、特异性和准确性;应用ROC曲线统计分析患者结节的TI-RADS分类、CK19和Galectin-3的表达分级的情况,比较超声、CK19、Galectin-3单独或联合诊断PTC的ROC曲线下面积（area under curve,AUC）,分析约登指数最高时的敏感度和特异性。结果 PTC组出现边界不清、内部回声低、微钙化以及血流达3级的超声特征均较NG组显著,差异有统计学意义（P<0.05）;FNAC检测CK19、Galectin-3表达的的敏感度、特异性、准确性分别为90.16%、87.50%、89.51%和87.85%、87.270%、87.65%。单独超声、CK19或Galectin-3诊断NG、PTC的AUC分别为0.846、0.829、0.785,三者诊断效能均为中等水平;而联合超声、CK19和Galectin-3诊断NG和PTC的AUC为0.904,诊断效能较高,其敏感度为83.3%、特异性为79.6%时约登指数可达0.629。结论 术前对超声引导穿刺的标本进行CK19和Galectin-3表达强度的检测结合超声检查结果有助于提高对于PTC和NG的鉴别和诊断。     

Electrophoresis of creatine kinase isoforms: a highly sensitive fluorescence scanning method

ＯｂｊｅｃｔｉｖｅＴｏｄｅｖｅｌｏｐａｎａｇａｒｏｓｅｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｔｉｃｍｅｔｈｏｄｆｏｒｃｒｅａｔｉｎｅｋｉｎａｓｅ（ＣＫ）ｉｓｏｆｏｒｍｓ,ｕｓｉｎｇｈｉｇｈｌｙｓｅｎｓｉｔｉｖｅｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅｓｃａｎｎｉｎｇ．Ｍｅｔｈｏｄ...     

3种肿瘤标志物联合检测对胆管癌诊断的临床意义

目的探讨胆管癌患者糖类抗原19-9(CA19-9)、糖类抗原125(CA125)和细胞角蛋白19(CK19)的血清学变化及临床意义。方法采用电化学发光免疫分析法(ECLIA)检测54例胆管癌患者(观察组)和42例健康体检者(对照组)CA19-9、CA125及CK19的血清学水平,并计算3种标志物单项以及联合检测在胆管癌诊断中的敏感性、特异性及准确性。结果血清CA19-9和CK19水平诊断胆管癌的敏感性较好(分别为81.48%和92.59%),血清CA125的特异度(61.29%)最好,3种标志物联合检测的准确性为92.07%,特异性为92.59%,敏感性为87.04%。结论肿瘤标志物联合检测对胆管癌的临床诊断有协同和优势互补的作用,可使准确性增加,误诊率降低。     

不稳定型心绞痛早期诊断指标的临床研究

目的研究早期诊断不稳定型心绞痛的高敏感性和高特异性的血清标记物。方法将200例诊断为不稳定型心绞痛患者分成两组,分别对他们采取血液进行肌钙蛋白T（TNT）、CK、CK—MB、Mb、MLC-1（肌球蛋白轻链-1）水平的定量检测,分析其阳性率、敏感性和特异性。结果阳性率：TNT为92．9％,CK为25．4％,CK—MB为34．3％,Mb为23．1％,MLC-1为18.3％;敏感性：TNT为100．0％,CK为35．2％,CK—MB为50．1％,Mb为26．3％,MLC-1为17．2％;特异性：TNT为92．9％,CK为25．4％,CK—MB为34．3％,Mb为23．1％,MLC-1为18．3％。结论TNT阳性结果对不稳定型心绞痛患者发生心肌梗死具有高度的预见性,因此TNT可以作为一种排除不稳定型心绞痛患者发生心肌梗死的标记物。     

心肌肌钙蛋白Ⅰ在AMI诊断中的应用

目的:比较心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTnI)与常用的急性心肌梗死(AMI)诊断标志物肌酸激酶同工酶(CK-MB)肌酸激酶(CK)的临床应用价值。采用27例AMI病人的血标本,同时检测cTnI和CK、CK-MB,然后两者进行比较。结果:cTnI对AMI诊断的敏感性和特异性高于CK、CK-MB,其敏感性分别为96.0%、85.2%、88.9%,P>0.05,特异性分别为100%、78.3%、86.0%,P<0.05。结论:cTnI对于AMI诊断具有较高的敏感性和特异性,是一种心肌损伤的特异性标志物,具有较好的临床使用价值。