TUSC3在宫颈癌组织中的表达及其对宫颈癌细胞上皮间质转化、迁移和侵袭的影响

目的 探讨TUSC3在宫颈癌组织中的表达及其对宫颈癌细胞上皮间质转化、迁移和侵袭的影响。方法 采用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）检测宫颈癌组织中的TUSC3表达水平,分析其表达与宫颈癌临床病理特征的关系。构建TUSC3过表达的慢病毒载体（LV11-TUSC3）及对照载体（LV11-NC）,选取过表达TUSC3的SiHa细胞作为LV11-TUSC3组,感染对照载体的SiHa细胞作为LV11-NC组,未感染慢病毒的SiHa细胞作为Con组。采用qRT-PCR检测各组细胞中TUSC3的mRNA表达水平,蛋白质免疫印迹法检测TUSC3、E-cadherin、N-cadherin、GRP78、ATF6的蛋白表达水平,MTT实验检测细胞增殖情况,划痕实验检测细胞迁移能力,Transwell实验检测细胞侵袭能力。结果 宫颈癌组织中TUSC3 mRNA表达水平显著低于癌旁组织（P<0.05）。TUSC3表达水平与宫颈癌患者的年龄、肿瘤体积、宫颈浸润深度无关（P>0.05）,而与FIGO分期、淋巴结转移有关（P<0.05）。与Con组和LV11-NC组相比较,LV11-TUSC3组细胞TUSC3 mRNA和蛋白表达水平升高,E-cadherin表达上调,N-cadherin表达下调,细胞增殖、迁移和侵袭能力降低,内质网应激水平降低,差异均有统计学意义（P<0.05）。结论 TUSC3在宫颈癌组织中表达下调,上调其表达可抑制人宫颈癌SiHa细胞的增殖、上皮间质转化、迁移和侵袭、内质网应激。TUSC3可能成为宫颈癌治疗的潜在靶点。     

异土木香内酯对宫颈癌细胞迁移、侵袭和上皮间质转化的影响

目的 研究异土木香内酯对宫颈癌细胞的迁移、侵袭的影响及其机制。方法 体外培养人宫颈癌HeLa细胞株,随机分为对照组、低剂量实验组、中剂量实验组、高剂量实验组和AG490组。低、中、高剂量实验组分别用10,40和80μmol·L^-1异土木香内酯处理细胞,AG490组用25μmol·L^-1的AG490处理细胞,对照组加入等体积二甲基亚砜。通过划痕实验检测细胞的迁移能力;用侵袭实验（Transwell）检测细胞的侵袭能力;用蛋白质印迹（Western blot）法检测蛋白表达。结果 对照组和低、中、高剂量实验组细胞的迁移率分别为（47.62±4.81）%,（42.53±4.22）%,（36.88±3.70）%和（12.45±1.25）%;细胞侵袭数目分别为（98.34±9.85）,（92.33±9.24）,（71.64±7.22）和（36.51±3.62）个;N-cadherin蛋白的相对表达水平分别为1.05±0.11,0.97±0.09,0.77±0.08和0.59±0.06;Vimentin蛋白的相对表达水平分别为1.03±0.10,0.92...     

CircPARD3调控miR-326/CXCL3轴对口腔鳞状细胞癌细胞迁移、侵袭及上皮间质转化的影响

目的 探究环状RNA PARD3(circPARD3)靶向微小RNA-326(miR-326)/趋化因子配体3(CXCL3)轴对口腔鳞状细胞癌(OSCC)细胞迁移、侵袭及上皮间质转化(EMT)的影响。方法 qRT-PCR法分析OSCC组织及细胞中circPARD3和miR-326表达水平。双荧光素酶实验验证circPARD3和miR-326、CXCL3和miR-326的靶向关系。在OSCC细胞CAL-27中转染si-NC、si-circPARD3、si-circPARD3+anti-NC、si-circPARD3+anti-miR-326、miR-NC、miR-326 mimics,将未转染的CAL-27细胞设为对照组。平板克隆实验检测细胞增殖;细胞划痕实验检测细胞迁移;Transwell实验检测细胞侵袭能力。Western blot法检测上皮细胞钙粘蛋白(E-cadherin)、神经性钙黏附蛋白(N-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)的蛋白表达。小鼠移植瘤实验验证circPARD3对OSCC肿瘤生长及miR-326/CXCL3的影响。结果 在OSCC组织与细胞中,cir...     

白花丹素通过抑制上皮间质转化对卵巢癌细胞SKOV3侵袭和迁移能力的影响

目的探究白花丹素通过对上皮间质转化的抑制从而调控卵巢癌细胞SKOV3的侵袭和迁移能力的作用和机制。方法将卵巢癌细胞株SKOV3随机分组为对照组和低、中、高剂量实验组。对照组给予不含白花丹素的DMEM培养基培养;低、中、高剂量实验组分别给予含1,2和5μmol·L^-1白花丹素的DMEM培养基进行培养。干预7 d后,用划痕实验检测细胞迁移能力,用Transwell法检测细胞侵袭能力,用Western blot检测相关蛋白的表达水平。结果低、中、高剂量实验组和对照组的划痕愈合率分别为(82. 15±5. 84)%,(78. 15±6. 01)%,(62. 39±5. 99)%和(95. 38±4. 32)%,侵袭细胞数量分别为(197. 15±14. 26),(171. 22±13. 18),(132. 49±15. 22)和(223. 59±12. 18)个,上皮钙黏蛋白表达水平分别为(1. 25±0. 24),(1. 62±0. 21),(1. 89±0. 26)和(1. 02±0. 09),紧密连接蛋白表达水平分别为(1. 22±0. 20),(1. 51±0. ...     

miRNA-183-5p在乳腺癌患者的表达及对乳腺细胞上皮间质转化、迁移和侵袭的影响

目的 研究miRNA-183-5p在乳腺癌患者体内的表达情况及对乳腺细胞上皮间质转化的影响.方法 采用Real-timePCR检测93例乳腺癌患者的乳腺癌组织和癌旁组织以及乳腺癌细胞MDA-MB-231和正常乳腺细胞MCF-10A中miRNA-183-5p的表达水平.将MDA-MB-231分为3组:未做处理的对照组,转...     

TESTIN在鼻咽癌中的表达及对鼻咽癌细胞系增殖、上皮-间质转化和侵袭转移的影响

目的 观察TESTIN在鼻咽癌组织和细胞中的表达,分析TESTIN过表达对鼻咽癌细胞增殖、上皮-间质转化(EMT)和侵袭转移的影响.方法 采用免疫组化、Real time-PCR、Western-blot检测TESTIN在鼻咽癌组织和细胞系的表达状况.利用脂质体LipofectamineTM2000转染鼻咽癌5-8F细胞,Real time-PCR、Western-blot验证转染效率.MTT、细胞划痕实验、细胞侵袭实验检测TESTIN过表达对5-8F细胞增殖、EMT和侵袭转移的影响.Western-blot检测TESTIN过表达对侵袭转移相关基因表达的影响.结果 TESTIN在鼻咽癌组织的阳性表达率和表达水平明显低于正常鼻咽部组织,差异有统计学意义(P<0.05).与人正常永生化鼻咽上皮细胞系NP69比较,鼻咽癌细胞系CNE1、CNE2、C666-1、5-8F、6-10B中TESTIN表达水平显著降低,差异有统计学意义(P<0.05).转染pcDNA3.1/TESTIN的5-8F细胞中TESTIN表达显著上调(P<0.05).TESTIN过表达显著抑制5-8F细胞增殖、EMT和侵袭转移,同时上调E-cadherin表达,下调N-cadherin、Vimentin、MMP-2、MMP-9表达(P<0.05).结论 鼻咽癌组织和细胞系中TESTIN表达显著降低,TESTIN过表达可抑制鼻咽癌5-8F细胞增殖、EMT和侵袭转移.     

裸花紫珠对结肠癌细胞上皮间质转化、增殖及迁移的影响

目的 研究海南五指山裸花紫珠对结肠癌细胞上皮间质转化、增殖及迁移的影响.方法 常规培养人结肠癌细胞株SW480.将实验分为阴性对照组、空白组及低、中、高剂量组(50,100,200 mg·L-1裸花紫珠溶液).给药48 h后,用蛋白质印迹(Western blot)和实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-qPCR)分别...     

吡咯喹啉醌对人卵巢癌细胞SKOV-3上皮间质转化的影响

目的 观察吡咯喹啉醌(PQQ)对人卵巢癌细胞SKOV-3上皮间质转化(EMT)的影响,并探讨可能机制。方法 取对数期SKOV-3细胞,随机分为Control组、PQQ组、PQQ+LiCl[Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)通路激活剂]组。Control组不处理,PQQ组加入PQQ 16μmol·L^-1培养24 h, PQQ+LiCl组加入PQQ 16μmol·L^-1培养24 h后再加入LiCl 60 mmol·L^-1培养24 h。以Transwell实验检测细胞侵袭能力;以划痕实验检测细胞迁移能力;以蛋白质印迹法检测细胞β-catenin、反式激活活性蛋白(c-myc)、糖原合成酶激酶3β(GSK-3β)蛋白表达量。结果 Control组、PQQ组、PQQ+LiCl组每个视野细胞数分别为(95.20±11.39),(29.40±4.25)和(46.00±5.97)个,迁移率分别为(99.58±1.24)%,(18.19±2.36)%和(62.67±7.50)%;这3组细胞β-catenin蛋白表达量分别为1.10...     

去泛素化酶Machado-joseph家族蛋白在疾病中的功能研究进展

去泛素化酶在维持蛋白的稳定性和功能中发挥重要作用,因此是调控多种重要生命活动过程的关键因素,Machado-josep（MJD）家族作为6个去泛素化酶家族之一,其蛋白包括Ataxin-3、ATAN3L、JOSD1和JOSD2,在人体各个器官部位较为广泛地表达,其中,Ataxin-3与神经退行性疾病MJD疾病也密切相关。近年来,针对MJD家族蛋白在生物学、相关疾病方面的研究日益增多,本文将对近年来MJD家族蛋白的相关研究进展进行综述。     

Raptor通过上皮-间质转化促进乳腺癌的侵袭与转移

目的探讨Raptor在乳腺癌侵袭与转移过程中的作用。方法采用Western blot检测乳腺癌细胞MCF-7和MDA-MB-231(MDA231)中Raptor蛋白的表达情况。应用小干扰RNA技术下调乳腺癌细胞MDA231中Raptor的表达量,同时将过表达质粒转入乳腺癌细胞MCF-7中,应用Western blot法检测转染后各组细胞中上皮性钙黏着蛋白(E-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)的表达;应用Transwell体外侵袭实验检测转染后各组细胞的侵袭能力;应用细胞核质分离实验检测转染后各组细胞中Snail蛋白的转核情况。结果MCF-7细胞中Raptor蛋白的表达量明显低于MDA231细胞中的表达量;转染后,与对照组Scr/MDA231相比,siRaptor/MDA231组中Raptor蛋白的表达量明显降低,Vimentin蛋白表达量降低,而E-cadherin蛋白表达量升高;与对照组MCF-7/Con相比,MCF-7/Raptor组中Raptor蛋白的表达量明显升高,并伴有Vimentin蛋白表达量升高,而Ecadherin蛋白表达量降低。siRaptor/MDA231细胞组中穿过Matrigel小室的细胞数量明显减少(P<0.05);MCF-7/Raptor细胞组中穿过Matrigel小室的细胞数量明显升高(P<0.05)。细胞核质分离实验结果显示,siRaptor/MDA231组中Snail蛋白表达量较Scr/MDA231组中明显降低;MCF-7/Raptor组中Snail蛋白表达量较MCF-7/Con组中明显升高。结论 Raptor能够促进乳腺癌EMT的发生,对乳腺癌的侵袭与转移有重要作用。     

半乳糖凝集素3在乳腺癌患者中的表达及与上皮间质转化的关系

目的探讨半乳糖凝集素3(Gal-3)在乳腺癌患者中的表达水平及其与上皮间质转化(EMT)的关系。方法选择86例女性浸润性乳腺癌患者的癌组织和癌旁组织作为研究对象,其中发生肝转移者32例。采用免疫组化法检测Gal-3、波形蛋白(Vim)、E-钙黏附蛋白(E-cad)表达,采用Western blot法检测Gal-3的表达,分析Gal-3的表达与临床病理参数的关系。构建siRNA-Gal-3-vector和lentivirus-Gal-3-vector,转染SKBR-3细胞,用Western bolt法检测转染后细胞中Gal-3、E-cad及Vim的表达,并观察细胞的迁移及侵袭情况。结果86例患者癌旁组织Gal-3和Vim阳性表达率为0,E-cad表达阳性率为100%;86例患者乳腺癌组织Gal-3、Vim、E-cad阳性表达率分别为81%、57%和26%,与癌旁组织均有非常显著差异(均P<0.01)。发生肝转移者乳腺癌组织Gal-3、E-cad、Vim阳性表达率与未发生肝转移者有非常显著差异(分别为100%vs.70%,47%vs.13%,69%vs.48%,P<0.01)。Gal-3的阳性表达与TNM分期、腋窝淋巴结的转移及肝转移存在显著的相关性(P<0.05)。lentivirus-Gal-3-vector组乳腺癌细胞中Gal-3的表达显著增加,乳腺癌细胞的迁移与侵袭能力显著增加(P<0.01);EMT标志分子E-cad表达显著降低、Vim表达显著增加(P<0.01)。结论Gal-3在浸润性乳腺癌患者中呈现高表达,可能通过调控EMT促进乳腺癌细胞的浸润与转移。     

肿瘤蛋白翻译控制 1的反义 RNA 1在肺癌中的表达及其对肺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响

目的探讨肿瘤蛋白翻译控制 1的反义 RNA 1(TPT1-AS1)在肺癌中的表达及其对肺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响和作用机制。方法收集于 2017年1月至 2018年12月在信阳市中心医院心胸外科行手术治疗的 46例肺癌组织和对应的癌旁组织,实时荧光定量 PCR(RT-qPCR)检测组织中 TPT1-AS1和微小 RNA-671-5p(miR-671-5p)表达, Pearson相关性分析肺癌组织中 TPT1-AS1和miR671-5p表达的相关性。同时,于2019年5月至 2020年4月期间,通过体外培养肺癌细胞 A549,双荧光素酶报告基因实验验证了细胞中 TPT1-AS1和 miR-671-5p调控关系。另将 A549细胞分为对照组、小干扰 RNA阴性序列(si-NC)组、 TPT1-AS1小干扰 RNA(si-TPT1AS1)组、 si-TPT1-AS1+抑制剂阴性序列(anti-miR-NC)组和 si-TPT1-AS1+miR-671-5p抑制剂(anti-miR-671-5p)组,甲基噻唑蓝染色法(MTT)检测细胞增殖, Transwell检测细胞迁移和侵袭,蛋白质印迹实验检测细胞周期蛋白 D1(CyclinD1)基质金属蛋白酶(MMP)-2和 MMP-9蛋白表达。结果肺癌组织中 TPT1-AS1表达量较癌旁组织显著升高［(1.88±0.12)(1.01±0.08)、P<0.05］,miR-671-5p表达量较癌旁组织显著降低［(0.45±0.04)(1.01±0.06)P<0.05］。Pearson相关性分析显示,肺癌组比织中TPT1-A,S1和 miR-671-5p呈负相(r= 0.63,P<0.05)。TPT1-AS1在A5比49细胞中负调,控 miR-671-5p表达。 si-TPT1-AS1组 A549细胞存活率、迁移数和侵袭数分别为(关53.24±2.81)%、(63.11±6.51)个和( 33.78±3.23)个,均低于 si-NC组［分别为( 98.78±2.57)%、(147.44±11.08)个和(101.67±9.95)个,均P<0.05］。CyclinD1、MMP-2和MMP-9蛋白在 si-TPT1-AS1组的表达量分别为(0.43±0.05)(0.21±0.03)(0.43±0.04),较si-NC组均降低［分别为(0.86±0.04)(0.55±0.05)(0.48±0.07)均P<0.05］。si-TPT1-AS1+anti-miR-671-、5p组A549细、胞存活率、迁移数和侵袭数及 CyclinD1、MMP-2和M、MP-9蛋白表、达分别为(8,5.43±2.94)%、(125.78±10.59)个、(88.78±7.19)个、(0.75±0.03)、(0.48±0.03)、(0.43±0.04),较 si-TPT1-AS1+anti-miR-NC组均升高［分别为(54.36±2.95)%、(63.78±6.48)个、(33.56±3.54)个、(0.41±0.03)、(0.22±0.03)、(0.21±0.04),均P<0.05］。对照组与 si-NC组、 si-TPT1-AS1组与 si-TPT1-AS1+anti-miR-NC组各检测指标比较均差异无统计学意义(P>0.05)。结论肺癌组织中 TPT1-AS1表达升高, miR-671-5p表达降低,且两者呈负相关。 TPT1-AS1可能通过靶向下调 miR-671-5p的表达促进肺癌细胞增殖、迁移和侵袭。     

Involvement of twist in NNK exposure-promoted lung cancer cell migration and invasion

Nicotine-derived nitrosamine ketone (NNK), one of the potent carcinogens in cigarette smoke, has been reported to facilitate lung cancer cell migration and invasion. Twist plays an important role in regulating migration and invasion of lung cancer cells. However, it is unclear whether Twist is implicated in NNK-induced migration and invasion of lung cancer cells. Lung cancer cells were exposed to various doses of NNK for four weeks. The expression levels of protein and mRNA were detected by western blot and quantitative real-time polymerase chain reaction (qRT-PCR), respectively. Small interfering RNA (siRNA) was applied to knock down the expression of Twist. The ability of cell migration and invasion was evaluated by wound-healing assay and Transwell invasion assay. NNK exposure increased the levels of Twist protein and mRNA expression in lung cancer cells compared to solvent control. Lung cancer cells exposed to NNK exhibited higher ability of migration and invasion than those with solvent control did. Twist silencing could block NNK-promoted migration and invasion of lung cancer cells. NNK exposure increased the expression levels of N-cadherin mRNA and decreased the expression levels of E-cadherin mRNA in lung cancer cells, which could be modulated by Twist silencing. In conclusion, Twist was involved in NNK-induced migration and invasion of lung cancer cells.     

转录因子叉头框蛋白O3a对前列腺癌细胞上皮间质转化的影响

目的 探讨转录因子叉头框蛋白O3a(FOXO3a)对前列腺癌细胞上皮间质转化(EMT)的影响及其作用机制.方法 采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测正常前列腺上皮细胞RWPE-1和前列腺癌细胞LNCaP、DUl45、PC-3中FOXO3a表达水平,选择FOXO3a表达最低的前列腺癌细胞系转染pcDNA-FOXO...     

Inhibition of cell proliferation, invasion and migration by ursolic acid in human lung cancer cell lines

Ursolic acid (UA) is a pentacyclic triterpene naturally occurring in many plant foods. Apoptotic, anti-invasive and anti-migratory effects of UA at 2, 4, 8, or 16 μmol/L in human non-small cell lung cancer A549, H3255 and Calu-6 cell lines were examined. The impact of this compound upon associated biomarkers such as vascular endothelial growth factor (VEGF), intercellular adhesion molecule-1 (ICAM-1) and matrix metalloproteinase (MMP) was also evaluated. UA treatments concentration-dependently decreased cell viability, and lowered Na⁺-K⁺-ATPase activity (P < 0.05). This compound at 4–16 μmol/L concentration-dependently increased DNA fragmentation, and reduced VEGF and transforming growth factor beta1 levels in test cancer cells (P < 0.05). UA concentration-dependently suppressed ICAM-1 expression (P < 0.05). This compound significantly declined fibronectin expression (P < 0.05), but concentration-dependent effect was shown in H3255 cells only (P < 0.05). UA treatments significantly suppressed the expression of MMP-9 and MMP-2 (P < 0.05), and inhibited protein kinase C activity in test cell lines (P < 0.05). UA treatments also concentration-dependently reduced cell invasion (P < 0.05); however, this compound at 4–16 μmol/L significantly decreased cell migration (P < 0.05), and concentration-dependent effect was shown in A549 and Calu-6 cells (P < 0.05). These findings suggested that this triterpene was a potent anti-lung cancer agent, and it might be able to retard invasion and metastasis of lung cancer cells.     

泛素特异性蛋白酶2、微RNA-432-5p在食管癌组织中表达及临床意义

目的 探讨食管癌组织泛素特异性蛋白酶2(USP2)、微RNA-432-5p(miR-432-5p)的表达及临床意义。方法 选取2014年6月至2016年6月在辽宁省肿瘤医院接受外科手术治疗的93例食管癌病人作为研究对象,取手术切除的食管癌组织及其癌旁组织,采用免疫组织化学法检测USP2的表达情况,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测组织中USP2 mRNA、miR-432-5p表达水平,以食管癌组织中miR-432-5p表达水平平均数分为miR-432-5p低表达组和miR-432-5p高表达组,分析食管癌组织USP2、miR-432-5p表达与食管癌病人临床病理特征的关系;使用生物信息学Targetscan网站搜索USP2、miR-432-5p是否存在结合位点,进一步分析食管癌组织USP2、miR-432-5p的相关性;采用Kaplan-Meier法分析USP2、miR-432-5p表达与食管癌病人预后的关系。结果 食管癌组织中USP2 mRNA表达水平(2.53±0.71比1.05±0.36)、USP2阳性率(55.91%比6.45%)明显高于癌旁组织(P<0.05...