TDP-43介导信号通路对骨关节炎大鼠作用机制分析

目的 探讨TDP-43基因表达干预炎症因子和缺血缺氧应激依赖的JNK和p38MAPK信号通路的机制。方法 选取60只SD大鼠,分为正常对照组(正常SD大鼠,不进行任何处理)、骨关节炎(OA)模型组和TDP-43-m MSCs+OA组,每组20只。OA模型组和TDP-43-m MSCs+OA组,采用胶原酶注射建立大鼠OA模型。对TDP-43-m MSCs+OA组大鼠进行TDP-43-m MSCs移植。采用酶联免疫吸附(ELISA)法测定大鼠血清中炎症因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白介素1β(IL-1β)的水平;采用Western blot法检测各组大鼠软骨组织中TDP-43、RACK1、MTK1、MAPKKK磷酸化的表达、应激颗粒(SGs)的形成及JNK和p38 MAPK信号通路的蛋白变化。结果 OA模型组大鼠软骨组织中TDP-43的蛋白表达显著低于正常对照组,TDP-43-m MSCs+OA组显著高于正常对照组和OA模型组,TDP-43-m MSCs移植成功。与正常对照组相比,OA模型组大鼠软骨组织中胞质SGs的形成量显著降低,TDP-43-m MSCs+OA组显著高于模型组;与正常对照组相比,OA模型组大鼠软骨组织中RACK1、JNK和p38 MAPK的蛋白表达、MTK1、MAPKKK磷酸化的表达量,大鼠血清中TNF-α和IL-1β的分泌量均显著高于正常对照组,而TDP-43-m MSCs+OA组以上指标均显著低于模型组。结论 TDP-43基因的过表达,可以干预炎症因子的分泌,抑制缺血缺氧应激依赖的JNK和p38 MAPK信号通路的激活,从而逆转软骨细胞病变的分子机制。上述结论为OA的治疗提供新的理论依据。     

Myc/his-TDP-43融合蛋白对tau外显子10可变剪接的影响

目的:构建带myc/his标签的pcDNA3.1/TDP-43及其截断体质粒,探讨myc/his-TDP-43融合蛋白对tau外显子10可变剪接的影响。方法:采用PCR法扩增TDP-43基因及其各截断体,将扩增产物和载体pcDNA3.1双酶切后回收,连接载体和目的片段,获得重组质粒。在HEK-293FT细胞中转染pcDNA3.1/TDP-43·myc·his及其截断体质粒,Western印迹法检测相关蛋白的表达。TDP-43或siTDP-43和tau迷你基因SI9/SI10共转,RT-PCR检测TDP-43对tau外显子10可变剪接的影响。结果:成功构建了pcDNA3.1/TDP-43·myc·his全长及各截断体质粒,并在HEK-293FT细胞中检测到其蛋白表达。Myc/his-TDP-43融合蛋白可呈剂量依赖性促进4R-tau的表达(P0.05或0.01)。结论:Myc/his-TDP-43融合蛋白可促进4R-tau的表达,携带myc/his标签不影响TDP-43对tau外显子10可变剪接的促进作用,为后续研究奠定了基础。     

TDP-43在人胚胎肾细胞中的代谢及其产物对细胞活力的影响

目的研究TAR DNA结合蛋白43 kD(TDP-43)在人胚胎肾细胞HEK293中的代谢过程及其产物对细胞活力的影响。方法应用不同浓度十字孢碱(STS)作用于HEK293细胞,检测TDP-43含量的变化,并联合使用不同的蛋白降解通路阻滞剂研究其代谢机制,再通过转染外源性TDP-43研究其对细胞活力的影响。结果 STS对HEK293细胞中TDP-43蛋白含量影响不大,在较高浓度时(5、10μM)会诱导HEK293细胞产生35 kD片段。进一步研究发现这一35 kD片段是通过泛素-蛋白酶体通路降解的,且其过表达时会明显降低HEK293细胞的活力。结论过表达外源性TDP-43及其35 kD片段可对HEK293细胞活力产生抑制作用,可能是导致TDP-43相关疾病的原因。     

星形胶质细胞中连接蛋白43在肌萎缩侧索硬化中促发运动神经元毒性

肌萎缩侧索硬化(ALS)是一种神经退行性疾病,其特征是中枢神经系统中运动神经元的进行性丧失。星形胶质细胞在ALS的疾病进程中起重要作用。星形胶质细胞通过缝隙连接蛋白家族,如连接蛋白(Connexin,Cx)互相连接。Cx43是中枢神经系统中保持稳态的主要星形胶质细胞连接蛋白。在病理状态下,连接蛋白的表达和功能发生改变。本文发现,在ALS中Cx43异常增高是星形胶质细胞介导的毒性作用机制之一。笔者观察到,在ALS SOD1~(G93A)小鼠模型的疾病进程中,Cx43表达进行性增高。尤其是,在ALS患者的运动皮质和脊髓也能检测到Cx43增高。从SOD1~(G93A)小鼠中分离的星形胶质细胞,与人诱导多能干细胞衍生的星形胶质细胞一样,都检测到Cx43蛋白增高,且为独立于神经元共培养的内源性现象。与对照的星形胶质细胞过表达的野生型SOD1(SOD1~(WT))相比,SOD1~(G93A)星形胶质细胞中增高的Cx43表达可产生重要的功能性影响。本文发现,SOD1~(G93A)星形胶质细胞表现出缝隙连接偶联增强,半通道介导活动升高,细胞内钙离子水平上升。最后,本文检测Cx43蛋白表达升高对MN生存的影响,发现应用pan-Cx43阻滞剂和Cx43半通道阻滞剂均对与SOD1~(G93A)星形胶质细胞共培养的MNs有神经保护作用。这些新发现展示出未被认知的Cx43在ALS相关的运动神经元丢失中所起作用。     

肌萎缩侧索硬化蛋白激活小胶质细胞NLRP3炎性体

小胶质细胞NLRP3炎症小体激活正在成为神经退行性变期间神经炎症的关键因素。β-淀粉样蛋白和α-突触核蛋白等致病蛋白的聚集体可触发小胶质细胞NLRP3激活,并导致半胱氨酸天冬氨酸酶激活和白介素-1β分泌。半胱氨酸天冬氨酸酶和白介素-1β均促进肌萎缩侧索硬化(ALS)小鼠SOD1G93A模型的疾病进展,这提示小胶质细胞NLRP3在该进程中起作用。然而,先前的研究表明SOD1G93A模型小鼠的小胶质细胞并不表达NLRP3,并且SOD1G93A蛋白在小胶质细胞中产生白介素-1β不依赖于NLRP3。本研究展示了使用Nlrp3-GFP基因敲入小鼠,在SOD1G93A小鼠中小胶质细胞表达NLRP3。结果表明,聚集和可溶性SOD1G93A均以剂量和时间依赖性方式激活小鼠原代小胶质细胞中的炎性体,导致半胱氨酸天冬氨酸酶和白介素-1β裂解、ASC斑点形成和白介素-1β分泌。重要的是,SOD1G93A不能诱导缺乏Nlrp3的小胶质细胞或用特异性NLRP3抑制剂MCC950预处理的小胶质细胞分泌白介素-1β,这证实NLRP3是介导SOD1诱导的小胶质细胞白介素-1β分泌的关键炎性体复合物。在TDP-43Q331K ALS小鼠模型中也观察到小胶质细胞NLRP3上调,并且TDP-43野生型和突变蛋白也能以NLRP3依赖性方式激活小胶质细胞炎症小体。从机制上,本研究确定活性氧簇和ATP的产生是SOD1G93A介导的NLRP3激活所需的关键事件。总之,本研究的数据表明ALS小胶质细胞表达NLRP3,病理性ALS蛋白激活了小胶质细胞NLRP3炎性体。因此,抑制NLRP3可能是阻止小胶质细胞神经炎症和ALS疾病进展的潜在治疗方法。     

综合医院病人创伤后应激障碍相关因素及护理需求的调查研究

创伤后应激障碍(post traumatic stress disorder,PTSD)是指个体对异乎寻常灾难事件或遭遇事件后恐怖情绪延迟/或延续的反应.创伤为一种应激事件,可引起病人不良心理反应,这种状态可以引起机体神经、内分泌和免疫系统功能失调,损害身心健康[1,2].     

创伤性脊髓损伤患者不同心理结局及其相关性研究

正创伤性脊髓损伤(spinal cord injury, SCI)常突发,不可预测,导致脊髓结构和功能损害,引发损伤平面以下运动、感觉、自主神经功能的障碍,幸存者将长期饱受残疾相关的躯体功能缺失和心理功能失调带来的困扰。损伤多发于青壮年,对伤者及其家庭和社会影响巨大。相对其他创伤群体,脊髓损伤患者病理性心理问题罹患率高。有报道,SCI患者创伤后应激障碍(posttraumatic stress disorder, PTSD)的发     

热休克蛋白60与冠状动脉粥样硬化关系的研究进展

热休克蛋白(heat shock proteins,HSP)是物体在受热、缺血、缺氧或代谢毒物等因素刺激时于细胞内迅速增加的一组蛋白质,故又称应激蛋白(stress pro-teins,SP)。细菌或寄生物等病原体传染过程中产生的病原体衍生的热休克蛋白是一种优势抗原[1],根据其分子量大小可分为HSP110、HS     

肌萎缩侧索硬化相关的心血管自主神经 功能障碍研究进展

近年来的研究提示,肌萎缩侧索硬化(ALS)是一种多系统疾病,不仅仅累及上、下运动神经元,还可伴发认知、行为及自主神经功能的损害。本文综述了ALS患者在不同病程阶段可能出现的不同类型的心血管自主神经功能损害,为ALS患者的临床研究和规范化管理提供参考。     

创伤后应激障碍预测研究现状及思考

创伤后应激障碍(posttraumatic stress disorder,PTSD)是指由异常威胁性或灾难性心理创伤导致延迟出现和长期持续的精神障碍,主要表现为病理性重现创伤体验、持续性警觉性增高、持续性回避、对创伤性经历的选择性遗忘以及对未来失去信心等症状.     

应激性糜烂综合征

应激性糜烂综合征 (stress relative erosie syndrom e,SRES)曾称应激性溃疡、出血性胃炎、应激性胃炎、应激性糜烂、弥漫性粘膜损害、糜烂性胃炎及应激性粘膜病变等。SRES的特点为与生理性应激直接相关的多发性浅表胃粘膜损害。与消化性溃疡相比 ,该损害的典型表现为更表浅和广泛。另外 ,与常发生于十二指肠和胃窦的消化性溃疡不同 ,SRES更常发生于泌酸的胃底和胃体粘膜。SRES引起的胃肠出血病死率高 ,典型情况下 ,SRES引起的胃出血可呈自限性 ,或通过治疗基础病和针对 SRES治疗后使出血终止。1　病理生理学SRES的病理生理学与…     

护理干预在灾难心理危机干预的应用

【】灾难作为突发性事件,不仅仅是生命的丧失,更重要的是人们对事件强烈的心理应激反应和由此而引发的心理应激疾病。灾后急性应激障碍(acute stress disorder, ASD)和灾后应激性障碍(post traumatic stress disorder, PTSD)是灾害发生后常见的应激性综合症状。     

肌萎缩侧索硬化患者脑脊液中相关因子含量对脊髓运动神经元损害的意义

目的测定肌萎缩侧索硬化(ALS)患者脑脊液(CSF)中天门冬氨酸(Asp)、谷氨酸(Glu)和神经元特异性烯醇化酶(NSE)水平,并对其临床意义作初步探讨。方法采用高效液相色谱仪和酶联免疫测定法分别测定36例ALS患者脑脊液中Asp、Glu和NSE水平,并对测定结果进行统计学分析。结果36例ALS患者CSF中Asp、Glu和NSE水平与对照组比较水平明显增高。且NSE水平与Asp、Glu分别存在相关。结论Asp、Glu可能参与了ALS的发病过程,NSE可能作为脊髓运动神经元损害的指标。ALS患者CSF中NSE增高可能与Asp、Glu对脊髓运动神经元的损害有关。     

一例婴儿术后应激性胃溃疡大出血引起胃肠梗阻的护理

应激性溃疡(stress ulcer,SU)是机体在应激状况下出现的一种以胃黏膜糜烂或浅表性溃疡为特征的急性胃黏膜病变,当溃疡发展侵蚀大血管时,可引起大出血.     

母亲妊娠期间应激给予心理社会支持后对胎儿出生体重的影响

作者曾在以前的研究中证实中、重度应激(stress)对胎儿出生体重(BW)有不利的影响。本次研究是以既往的研究为基础,按照同样的关于应激的判断标准,选择86名单胎的白种人妇女。这些孕妇无内科或产科方面影响BW的危险因素。她们均在20孕周左右(18～25孕周)登记并于38孕周左右分娩。严格地随机分组,其中43名孕妇为研究组,     

干细胞移植治疗肌萎缩侧索硬化的可能机制

肌萎缩侧索硬化(ALS)是一种运动神经元病,可侵犯脊髓前角、脑干及皮质运动神经元等,而致上下运动神经元合并受损。ALS人群患病率(0.8～7.3)/106,年发病率约(0.2～2.4)/106,男女之比为(1.4～2.5):1,平均存活时间一般为31～43个月[1]。ALS主要为散发型,5%～10%为家族型,在20%的家族型患者中,有明确的SOD1基因突变。关于ALS的病因假说主要包括兴奋性氨基酸假说、遗传基因假说、自体     

肌电图对肌萎缩侧索硬化与脊髓型颈椎病的鉴别诊断价值

目的探讨胸段棘旁肌(thoraspinalmuscle,TSM)肌电图对肌萎缩侧索硬化(amyotrophiclateralsclerosis,ALS)与脊髓型颈椎病(cervicalspondyloticmyelopathy,CSM)的鉴别诊断价值。方法对12例ALS和13例CSM患者分别进行三肢肌、胸锁乳突肌(sternocleidomastoidmuscle,SCM)、TSM肌肌电图检测。结果ALS组:(1)12例中三肢肌肌电图均呈神经源性损害,阳性率为100%。(2)12例中10例SCM肌呈神经源性损害,阳性率为83%。(3)12例T9～11TSM肌安静状态均有失神经电位出现,阳性率为100%;CSM组:(1)13例均有单个以上的肢体呈神经源性损害,阳性率为100%,包括1例三肢肌、4例两肢肌(双上肢)、10例单侧上肢肌呈神经源性损害。(2)13例SCM肌肌电图均未见异常。(3)13例T9～11TSM肌肌电图安静状态均呈生理性电静息。结论TSM肌肌电图出现一定数量以上的纤颤波和正锐波能提高ALS患者亚临床检出率,增加TSM肌群神经源性损害依据,为ALS的诊断以及与CSM的鉴别诊断提供新的有价值的客观指标。     

定量肌电图运动单位电位多项参数对肌萎缩侧索硬化症患者的评估价值

目的:分析肌萎缩侧索硬化(amyotrophiclateralsclerosis,ALS)神经传导和F波的变化以及单纤维肌电图(SFEMG)的异常,探讨定量肌电图运动单位电位(motorunitpotential,MUP)多项参数对ALS患者的评估价值。方法:福建省立医院神经内科收治的ALS患者60例和体检的健康者55例对照组,对两组对象进行定量肌电图检查和常规运动及感觉神()经传导测定。结果:MUP参数对ALS诊断以面积、时限、大小指数最敏感;多相波敏感性较差;自发电位敏感性小于MUP参数。ALS运动末端潜伏期(DML)延长和复合动作电位CMAP)波幅下降,F波出现率下降与肌萎(缩有明显关系,ALS在SFEMG表现为颤抖增宽和出现阻滞,纤维密度明显增高。结论:肌电图、单纤维肌电图、神经传导、F波检查可在无明显临床症状时即发现下运动神经元损害,对ALS早期诊断、鉴别诊断和病情预后评估有重要价值。     

肌萎缩性侧索硬化症(下)

进修医生教授,请问如何诊断肌萎缩性侧索硬化症(amyotrophic lateral sclerosis,ALS)病人?ALS应该与哪些疾病进行鉴别诊断? 教授 ALS主要出现上下运动神经元损害的症状,无感觉障碍,肌电图呈神经元性损害,一般不难作出诊断.上运动神经元损害的症状有肢体腱反射活跃或亢进、强哭或强笑、腹壁反射消失以及病理反射阳性.下运动神经元损害的症状包括躯体的肌无力、肌萎缩以及肌电图所表现的纤颤和正锐波.     

定量肌电图运动单位电位多项参数对肌萎缩侧索硬化症患者的评估价值

目的：分析肌萎缩侧索硬化(amyotrophic lateral sclerosis，ALS)神经传导和F波的变化以及单纤维肌电图(SFEMG)的异常，探讨定量肌电图运动单位电位(motor unit potential，MUP)多项参数对ALS患者的评估价值。方法：福建省立医院神经内科收治的ALS患者60例和体检的健康者55例(对照组)，对两组对象进行定量肌电图检查和常规运动及感觉神经传导测定。结果：MUP参数对ALS诊断以面积、时限、大小指数最敏感；多相波敏感性较差；自发电位敏感性小于MUP参数。ALS运动末端潜伏期(DML)延长和复合动作电位(cMAP)波幅下降，F波出现率下降与肌萎缩有明显关系，ALS在SFEMG表现为颤抖增宽和出现阻滞，纤维密度明显增高。结论：肌电图、单纤维肌电图、神经传导、F波检查可在无明显临床症状时即发现下运动神经元损害，对ALS早期诊断、鉴别诊断和病情预后评估有重要价值。