系统性红斑狼疮患者糖皮质激素联合免疫抑制剂治疗前后外 周血NK细胞和受体表达变化及其治疗作用机制 

目的:探讨经糖皮质激素联合免疫抑制剂干扰素γ（IFN-γ）治疗前后系统性红斑狼疮（SLE）患者外周血中自然杀伤细胞（CD3－CD56+NK细胞）及其
激活性、抑制性受体表达的变化,阐明其治疗SLE的作用机制。方法：选取26例SLE患者和16例健康对照者,采用流式细胞术检测2组受试者治疗前、治疗4和12周后外周血CD3－CD56+NK细胞比率及其激活性受体和抑制性受体表达率。结果：与健康对照组比较,治疗前SLE患者CD3－CD56+NK细胞比率明显降低（P<0.05）,其激活性受体NKG2C+、NKP30+和NKP46+ 的表达率均明显增高（P<0.05）,抑制性受体KIR2DL3+、 KIR3DL1+和NKG2A+的表达率均明
显降低（P<0.05）,IFN-γ+ CD3－CD56+NK细胞比率明显增高（P<0.001）。与治疗前比较,治疗4和12周后SLE患者CD3－CD56+NK细胞比率均明显增高（P<0.05）;治疗4周后SLE患者CD3－CD56+NK细胞激活性受体NKG2C+、NKP30+和NKP46+ 的表达率均明显降低（P<0.05）,治疗12周后上述受体表达率均进一步降低（P<0.05）。治疗4周后SLE患者CD3－CD56+NK细胞抑制性受体KIR2DL3+、KIR3DL1+和NKG2A+的表达率较治疗前均明显增高（P<
0.05）,治疗12周后CD3－CD56+NK细胞 KIR3DL1+、CD158a+、CD158b+和NKG2A+的表达率较治疗前均明显增高（P<0.05）。与治疗前比较,治疗4和12周后SLE患者IFN-γ+CD3－CD56+NK　细胞比率均明显降低（P<0.001）。结论：NK细胞及其受体的变化可能与SLE的发病有关,糖皮质激素联合免疫抑制剂可能通过调节NK细胞及其受体的变化发挥治疗作用。
     

自然杀伤细胞联合他莫昔芬对乳腺癌细胞的杀伤作用及其机制

目的：通过体外实验观察自然杀伤细胞（NK细胞）联合他莫昔芬（TAM）对乳腺癌细胞（BCC）的协同杀伤作用,初步探讨其作用机制。方法：选用3种受体表达程度不同的BCC,设置空白对照组及TAM各浓度/时间梯度实验组,MTT法检测各组细胞增殖抑制率,并确定最终实验浓度为5 μmol·L^-1。设自然释放组、最大释放组、TAM组、NK细胞组和联合实验组（BCC+NK细胞+TAM）,钙黄绿素-AM释放法观察不同效靶比下两者的联合杀伤作用。设空白对照组（NK细胞）、NK细胞+TAM组、NK细胞+BCC组和联合实验组,ELISA法检测各组NK细胞中TNF-α和IFN-γ水平。设空白对照组（NK细胞）、NK细胞+TAM组、NK细胞+BCC组和联合实验组,流式分析法分别检测NK活化性受体（NKp46）、NK抑制性受体（CD158a、CD158b、CD158b2和CD158e）表达水平。设空白对照组（BCC）、BCC+TAM组、BCC+NK细胞组和联合实验组,流式细胞术检测各组细胞中活化性配体（MICA、ULBP1和ULBP2）的表达水平。结果：MTT法检测,TAM对3种BCC的增殖抑制率具有明显的时间和浓度依赖性（P<0.05）。钙黄绿素-AM释放法检测,随着效靶比的增加,与NK细胞组比较TAM组BCC杀伤率明显升高（P<0.01）,且联合组杀伤率明显高于NK细胞组和TAM组（P<0.05）。ELISA法检测,与空白对照组比较,各实验组无论有无BCC存在,NK细胞中分泌TFN-α和IFN-γ水平均升高（P<0.05或P<0.01）,且与TAM联合后TFN-α和IFN-γ水平明显升高（P<0.05）。流式细胞术检测,与空白对照组比较,各实验组NK细胞中NKp46表达水平均升高（P<0.05）;各实验组NK细胞中CD158a、CD158b、CD158b2和CD158e表达水平均明显下降（P<0.05）;各实验组BCC中MICA、ULBP1和ULBP2表达水平均明显升高（P<0.05）。结论：NK细胞与TAM联合体外杀伤BCC具有协同作用,其协同作用机制可能为TAM能够通过促进NK细胞分泌 TNF-α和IFN-γ而增强其杀伤能力;通过增加NK细胞活化性受体和活化性配体表达水平、降低NK细胞抑制性受体表达水平,进而增加NK细胞的杀伤能力。     

重型再生障碍性贫血患者外周血自然杀伤细胞亚群百分比及功能变化

目的 分析重型再生障碍性贫血(SAA)患者免疫抑制治疗(IST)前、后外周血自然杀伤(NK)细胞亚群占淋巴细胞百分比、功能变化及其与造血功能相关性,探讨NK细胞在SAA发病机制中的作用.方法 用流式细胞术检测2010年4月至2010年12月天津医科大学总医院收治的12例初治(初治组)、30例IST后恢复(恢复组)的SAA患者的外周血NK细胞(CD3-CD56+/CD16+)及其亚群[CD3-CD56brightCD16-(CD56bright)、CD3-CD56dimCD16+(CD56dim)、CD3-CD56-CD16+]占淋巴细胞百分比、活化性受体(NKG2D和NKp46)、穿孔素、颗粒酶β表达,并与13名健康对照(对照组)比较;分析上述变化与外周血中性粒细胞比例(ANC%)、淋巴细胞比例、网织红细胞计数及骨髓造血功能(增生程度、粒系百分比、红系百分比、巨核细胞数量、淋系百分比)的相关性.结果 (1)初治组NK细胞、CD56bright细胞百分比(10.30%±6.08%、0.11%)均显著低于恢复组(16.47%±8.29%、0.68%,P＜0.05)和对照组(19.45%±6.88%、0.53%,均P＜0.05);初治组CD56dim细胞百分比(9.62%±6.04%)明显低于对照组(18.21%±7.16%,P＜0.05);恢复组CD3-CD56-CD16+细胞百分比(0.79%)显著高于初治组及对照组(0.37%、0.41%,均P＜0.05).(2)初治组与恢复组NK细胞NKp46、穿孔素表达[初治组(88.23%、64.97%±21.61%),恢复组(82.97%、66.14%±20.73%)]显著高于对照组(40.99%、42.11%±27.25%,均P＜0.05).(3)NK、CD56bright及CD3-CD56-CD16+细胞的百分比与SAA患者ANC%呈正相关(r分别为0.423、0.609、0.468,均P＜0.05),与骨髓粒系百分比呈正相关(r分别为0.357、0.517、0.434,均P＜0.05);NK、CD56bright、CD56dim和CD3-CD56-CD16+细胞的百分比与SAA患者骨髓增生程度呈正相关(r分别为0.455、0.412、0.404、0.451,均P＜0.05),与骨髓淋系百分比呈负相关(r分别为-0.522、-0.435、-0.411、-0.547,均P＜0.05);NK细胞NKG2D、NKp46、穿孔素、颗粒酶β表达与各造血指标无相关性(均P＞0.05).结论 SAA患者外周血NK细胞、CD56bright、CD56dim亚群占淋巴细胞百分比降低及穿孔素途径增强可能引起免疫耐受被破坏、T细胞功能亢进而导致造血功能衰竭.

Abstract：

Objective To analyze the percentage and functional changes of natural killer(NK)cell subsets in peripheral blood of severe aplastic anemia(SAA)patients before and after immunosuppressive therapy(IST)so as to evaluate the relationships between these changes and hematopoietic functions and explore the role of NK cells in the pathogenesis of SAA.Methods By flow cytometry,the percentages of NK cells(CD3-CD56+/CD16+)and its subsets[CD3-CD56brightCD16-(CD56bright),CD3-CD56dimCD16+(CD56dim),CD3-CD56-CD16+]in peripheral blood lymphocytes were detected in 12 untreated patients,30 recovered patients and 13 normal controls respectively from April 2010 to December 2010 in our hospital.NK cells activating receptors(NKG2D and NKp46),pofforin and granzyme-β of patients and normal controls were also detected.The correlation between these changes and hematopoietic functions,including the percentages of neutrophil granulocyte(ANC%),lymphocyte and reticulocyte absolute value in peripheral blood,and hyperplasia degree,percentage of granulocytes,erythrocytes,lymphocytes and megakaryocytes absolute value in bone marrow were evaluated.Results (1)The percentages of NK cells (10.30% ± 6.08%)and CD56 bright cells(0.11%)in untreated patients were significantly lower than those of recovered patients(16.47% ± 8.29%,0.68%,both P ＜0.05)or normal controls(19.45% ±6.88%,0.53%,both P ＜0.05).The percentage of CD56dim cells in untreated patients was significantly lower than that of normal controls(9.62% ±6.04% vs 18.21% ±7.16%,P ＜0.05).The percentage of CD3 CD56 CD16 + cells was significantly higher in recovered patients than that of untreated patients or normal controls(0.79% vs 0.37%,0.41%,both P＜0.05).(2)The expression of NKp46 and pefforin of NK cells in untreated(88.23%,64.97% ± 21.61%)and recovered patients(82.97%,66.14% ±20.73%)were significantly higher than those of healthy controls(40.99%,42.11% ±27.25%,all P ＜0.05).(3)The percentage of NK CD56bright and CD3-CD56-CD16+ cells of patients was positively correlated with ANC%(r=0.423,0.609,0.468 respectively,all P＜0.05)and the percentage of granulocytes in bone marrow(r=0.357,0.517,0.434 respectively,all P＜0.05).The percentages of NK,CD56bight,CD56dim and CD3-CD56-CD16+ cells were positively correlated with the hyperplasic degree of bone marrow(r=0.455,0.412,0.404,0.451 respectively,all P＜0.05),but they were negatively correlated with the percentage of lymphocytes in bone marrow(r =-0.522,-0.435,-0.411,-0.547 respectively,all P ＜0.05).The expression of NKG2D,NKp46,pefforin and granzyme-β of NK cells had no correlation with hematopoiesis(all P＞0.05).Conclusion The lowered percentage of NK CD56bright,CD56dim cells and a higher expression of pefforin may cause the over-function of T lymphocytes and thus lead to hematopoietic failure in SAA.     

利用饲养细胞体外扩增高纯度的效应NK细胞

目的 比较两类饲养细胞（FC）体外扩增自然杀伤（NK）细胞的效果,鉴定出特定的NK细胞群并进行功能性分析,从而确定最优的FC。方法 构建两类FC,分别是第1代FC（FC-000,K562-41BBL）和第2代FC（FC-002,K562-41BBL-mbIL15-mbIL21）,分别与人外周血单核细胞（peripheral blood mononuclear cells, PBMCs）共培养14d,收获细胞,流式细胞术鉴定NK细胞表型,利用实时无标记细胞分析仪检测两类NK细胞对A549肿瘤细胞的杀伤能力。结果 培养14d后,FC-002扩增的NK细胞纯度（93.5%）高于FC-000扩增的NK细胞（70.2%）（P<0.05）;FC-002扩增的NK细胞增殖倍数（3325）高于FC-000扩增的NK细胞增殖倍数（10）（P<0.05）。两者均促进了具有NKG2D、NKp44、CD69功能性受体的NK细胞群增殖,且FC-002扩增的NK细胞具有更高的肿瘤杀伤能力及干扰素-γ表达能力（P<0.05）。结论 利用FC能够在体外有效地扩增高纯度的NK细胞,并能够选择性扩增具有NKG2D、NKp44、CD69功能性受体的NK细胞群,且第2代FC所扩增的NK细胞对于肿瘤细胞具有更强的杀伤能力,并在NK细胞增殖倍数、纯度上均优于第1代FC。     

食管鳞癌上皮细胞间质转化对NK细胞活化及其生物学作用的研究

目的 探讨食管鳞癌上皮细胞间质化（EMT）对自然杀伤（NK）细胞生物学活性的影响。方法 通过Western blot检测EMT化相关蛋白E-cadherin和Vimentin表达,从6株细胞系中筛选出 EMT化和非EMT化食管鳞癌细胞株;收集10例正常人外周血,负性分选NK细胞;根据共培养不同的条件培养基分为RPMI 1640正常培养基刺激-NK组（NC组）、EC9706细胞上清液刺激-NK组（EC9706组）与KYSE150细胞上清液刺激-NK组（KYSE150组）,将不同的条件培养基加入NK细胞共培养72 h,流式细胞术检测NK细胞表面/胞内分子的表达。10 ng/mL 转化生长因子-β（TGF-β）处理KYSE150细胞株7 d诱导EMT化后,收集KYSE150 EMT和KYSE150上清液,分别与NK细胞共培养,72 h后以流式细胞术检测NK细胞表面/胞内分子的表达、CD107a脱颗粒能力、靶细胞K562杀伤效应、NK细胞增殖及凋亡。结果 6株细胞系中筛选出2株EMT化和4株非EMT化的食管鳞癌细胞株,从中各选出一株（EC9706和KYSE150）用于后续实验;NK细胞负性筛选达到90%以上的纯度,T细胞<1%。不同的食管鳞癌细胞上清液刺激后,3组NK细胞表面活化型、抑制型受体,效应分子结果显示:与NC组和KYSE150组比较,EC9706组活化型受体NKP30、NKG2D、NKP44表达,颗粒酶释放均降低（ P<0.05）;抑制型受体NKG2A和CD158b表达增加（ P<0.05）;NKP46、CD226、CD16表达和穿孔素释放在3组间差异无统计学意义。与KYSE150上清刺激比较,KYSE150 EMT上清刺激后,NK细胞活化型受体NKP30、NKG2D、NKP44表达,穿孔素释放均降低;CD107a脱颗粒作用、靶细胞K562杀伤效应均减弱,NK细胞Ki67增殖指数下降（ P<0.05）;抑制型受体NKG2A和CD158b表达增加（ P<0.05）;NKP46、CD226、CD16表达,颗粒酶释放及NK细胞凋亡在两组间差异无统计学意义。结论 食管鳞癌细胞EMT化可能通过抑制NK细胞活化、减少NK细胞杀伤效应分子的分泌来降低NK细胞杀伤效应,从机体免疫监视中逃逸。     

慢性乙肝患者外周血NK细胞NKp46和NKG2A的表达

目的检测免疫清除期和免疫耐受期慢性乙肝患者外周血中NK细胞频率和NK受体NKp46和NKG2A表达情况。方法分离患者和建康对照者外周血单个核细胞,流式细胞仪检测各组NK细胞频率和受体表达。结果慢性乙肝免疫清除期患者外周血NK细胞占淋巴细胞比例（10．91％±3．93％,n=21）较免疫耐受期患者（15．65％±5．58％,n=15,P=0．024）和健康者（14．23％±7．37％,n=25,P=0．011）下降,免疫清除期患者NK细胞的NKp46表达f45．45％±14．00％,n=19）较免疫耐受期患者（23．35％±6．56％,n=8,P〈0．001）和健康者（31．69％±13．07％,n=20,P=0．001）明显上升,NKG2A表达（35．62％±13．20％,n=19）较免疫耐受期患者（25．57％±5．56％,n=8,P=0．038）和健康者（26．80％±10．49％,n=20。P=0．0471上升。结论慢性乙肝患者外周血NK细胞频率下降,NKp46和NKG2A表达上调,这些改变与免疫清除病毒有关。     

NK细胞受体与相关配体

NK细胞表面表达非抗原特异性的受体。按分子结构分类,NK细胞受体可分为Ig超家族和C型凝集素超家族。按其介导的功能,可分为NK细胞激活性受体(NKAR)与NK细胞抑制性受体(NKIR)。NKAR包括介导ADCC的CD16,介导自然杀伤的NKR-P1、与DAP12相偶联的KAR,以及协同刺激受体等。它们多依赖胞浆内ITAM模体传递激活信号。NKIR主要包括KIR与CD94/NKG2复合体,其特异性配体为MHC-I类分子,与NK细胞识别自体细胞密切相关。NKIR需要与NKAR共聚,借助胞浆内的ITIM模体来抑制激活性受体的活化及NK细胞的细胞毒作用。     

晚期NSCLC患者外周血CD8+T细胞表面NK相关受体表达变化及与预后的相关性分析

[摘要]：目的 探讨晚期非小细胞肺癌（NSCLC）患者外周血CD8+T细胞表面NK相关受体表达变化及与预后的相关性。方法 选取2017年10月至2019年9月我院收治的94例晚期NSCLC患者，设为病例组，另按照2:1的比例选择与病例组性别、年龄信息匹配的47例体检者为对照组；检测并比较两组外周血CD8+T细胞表面NK活化性受体（NKG2D+CD8+）及抑制性受体（NKG2A+CD8+）细胞比率；并分析NKG2D、NKG2A与晚期NSCLC患者临床病理特征及预后的关系。结果 病例组外周血NKG2D+CD8+比率低于对照组，NKG2A+CD8+比率高于对照组（P＜0.05）。与东部肿瘤协作组（ECOG）0~1分、TNM III期者相比，晚期NSCLC患者ECOG 2~3分、TNM IV期者NKG2D+CD8+比率较低，NKG2A+CD8+比率较高（P＜0.05）。经Kaplan-Meier生存分析，NKG2D高水平与低水平患者累积生存率分别为71.0%、40.4%，平均生存时间分别为（23.97±1.65）、（31.17±1.31）个月，且NKG2D高水平患者总生存时间较低水平患者延长（Logrank 2=9.763，P=0.002）；NKG2A低水平与高水平患者累积生存率分别为66.2%、45.1%，平均生存时间分别为（30.41±1.25）、（24.80±1.73）个月，且NKG2A低水平患者总生存时间较高水平患者延长（Logrank 2=5.353，P=0.021）；COX多因素分析显示，N1~N3分期[HR(95%CI)=1.780(1.135~4.786)]、TNM IV期[HR(95%CI)=4.224(2.005~12.394)]、NKG2D低水平[HR(95%CI)=3.954(1.856~10.039)]、NKG2A高水平[HR(95%CI)=3.600(1.732~9.587)]均是影响晚期NSCLC患者总生存期的独立危险因素（P＜0.05）。结论 晚期NSCLC患者外周血中CD8+T细胞表面NKG2D低表达、NKG2A高表达，二者表达情况与患者身体机能、临床分期及预后有关，可作为评估晚期NSCLC患者预后的可靠参考指标。     

扩增的NK细胞对胃癌细胞的杀伤作用及其机制

目的：探讨扩增的自然杀伤（NK）细胞对胃癌细胞的杀伤作用,阐明其作用机制。方法：提取和分离15例胃癌患者外周血单个核细胞（PBMCs）。观察扩增前后NK细胞形态表现,检测扩增前后NK细胞百分比,计算扩增后NK细胞扩增倍数,检测扩增前后NK细胞对胃癌细胞的杀伤作用,流式细胞术检测NK细胞表面活化性受体NKG2D和DNAM-1以及抑制性受体KIR2DL1和KIR3DL1的表达百分比。结果：扩增前NK细胞呈圆形,细胞体积比较小,细胞呈散在分布,扩增后NK细胞体积明显增大,细胞呈不规则形态。扩增后NK细胞百分比明显高于扩增前（P<0.01）,扩增后NK细胞数是扩增前的（596±152）倍。在效靶比为5∶1时,扩增后NK细胞对胃癌细胞的杀伤活性明显强于扩增前（P<0.01）。扩增后NK细胞表面活化性受体NKG2D和DNAM-1表达百分比明显高于扩增前（P<0.01）。扩增后NK细胞表面抑制性受体KIR2DL1和KIR3DL1表达百分比明显低于扩增前（P<0.05）。结论：扩增后NK细胞对胃癌细胞杀伤作用明显强于扩增前,其机制可能与扩增后NK细胞表面活化性受体表达升高和抑制性受体表达降低有关联。     

体外扩增人NK细胞及其对白血病细胞杀伤作用的研究

目的通过体外扩增人NK细胞的方法,探讨扩增后NK细胞对K562和HL60白血病细胞株的体外杀伤作用及机制。方法抽取5例健康志愿者外周血,分离单个核细胞（PBMC）,与基因修饰K562细胞共同培养,采用流式细胞仪检测NK细胞的表型,铬51释放法测定NK细胞对白血病细胞的杀伤率。结果基因修饰K562细胞在体外刺激NK细胞扩增202倍;扩增后NK细胞对白血病细胞K562、HL60的杀伤率分别为77.1%、61.2%（效/靶比为8∶1）,扩增前NK细胞对K562、HL60杀伤率分别为39.0%、35.4%;扩增后NK细胞表面活化受体NKG2D、NKp30和NKp44表达增强;这些活化受体特异抗体能部分抑制扩增后NK细胞的抗白血病作用。结论基因修饰K562细胞刺激NK细胞有效扩增,扩增后NK细胞杀伤白血病细胞作用明显增强,扩增后NK细胞表面部分活化受体上调可能为扩增后NK细胞抑制白血病作用增强的分子机制,NK细胞治疗在白血病中有潜在的应用前景。     

Increased early activation of CD56dimCD16dim/- natural killer cells in immunological non-responders correlates with CD4+ T-cell recovery

BackgroundNatural killer (NK) cells play a critical role in suppressing human immunodeficiency virus-1 (HIV-1) infection, but knowledge on whether and how NK cells affect immune reconstitution in HIV-1-infected individuals who receive antiretroviral therapy (ART) is limited.MethodsWe performed a case-control study with 35 healthy individuals and 66 HIV-1-infected patients including 32 immunological non-responders (INRs) with poor CD4⁺ T-cell recovery (<500 cells/μL after 4 years of ART) and 34 immunological responders (IRs) with improved CD4⁺ T-cell recovery (>500 cells/μL after 4 years of ART). NK cell phenotype, receptor repertoire, and early activation in INRs and IRs were investigated by flow cytometry.ResultsA significantly higher proportion of CD56^dimCD16^dim/- NK cells was observed in INRs than IRs before ART and after 4 years of ART. The number of CD56^dimCD16^dim/- NK cells was inversely correlated with CD4⁺ T-cell counts in INRs before ART (r = –0.344, P = 0.050). The more CD69-expressing NK cells there were, the lower the CD4⁺ T-cell counts and ΔCD4, and these correlations were observed in INRs after ART (r = –0.416, P = 0.019; r = –0.509, P = 0.003, respectively). Additionally, CD69-expressing CD56^dimCD16^dim/- NK cells were more abundant in INRs than those in IRs (P = 0.018) after ART, both of which had an inverse association trend towards significance with CD4⁺ T-cell counts. The expression of the activating receptors NKG2C, NKG2D, and NKp46 on CD56^dimCD16^dim/- NK cell subsets were higher in IRs than that in INRs after 4 years of ART (all P < 0.01). Strong inverse correlations were observed between CD69 expression and NKG2C, NKG2A^-NKG2C⁺, NKG2D, and NKp46 expression on CD56^dimCD16^dim/- NK cells in INRs after ART (NKG2C: r = –0.491, P = 0.004; NKG2A^-NKG2C⁺: r = –0.434, P = 0.013; NKG2D: r = –0.405, P = 0.021; NKp46: r = –0.457, P = 0.008, respectively).ConclusionsINRs had a larger number of CD56^dimCD16^dim/- NK cells characterized by higher activation levels than did IRs after ART. The increase in the CD56^dimCD16^dim/- NK cell subset may play an adverse role in immune reconstitution. Further functional studies of CD56^dimCD16^dim/- NK cells in INRs are urgently needed to inform targeted interventions to optimize immune recovery.     

培美曲塞联合顺铂一线化疗在老年ⅢB／Ⅳ期非小细胞肺癌中的治疗效果

目的观察培美曲塞联合顺铂一线化疗对老年ⅢB／Ⅳ期非小细胞肺癌的治疗效果,并评价此化疗方案所产生的不良反应。方法随机抽取2009年11月～2012年11月我院呼吸内科确诊为ⅢB期和Ⅳ期非小细胞肺癌的老年患者共80例,所有患者接受的化疗方案均为培美曲塞联合顺铂一线化疗。分别统计治疗后鳞癌和非鳞癌的临床疗效和各自的无进展生存时间,对治疗后患者所发生的不良反应进行分级,评价培美曲塞联合顺铂一线化疗对于老年ⅢB／Ⅳ期非小细胞肺癌的治疗效果。结果①所有患者治疗后均未达到完全缓解,非鳞状细胞癌患者的部分缓解率和稳定率高于鳞状细胞癌患者,前者疾病进展率低于后者,但差异不具有统计学意义（P＞0．05）。②非鳞状细胞癌患者治疗的有效率和疾病控制率高于鳞状细胞癌患者,但差异无显著性（P＞0．05）。非鳞癌治疗后无进展生存时间明显长于鳞癌（P＜0．05）。③治疗后患者所发生的不良反应较少,主要表现为骨髓抑制和胃肠道反应,经及时对症治疗后均不影响化疗方案的进一步实施。结论培美曲塞联合顺铂一线化疗治疗老年ⅢB／Ⅳ期非小细胞肺癌临床疗效较好,所发生的不良反应较少,尤其是针对非鳞状细胞癌效果更佳,建议临床推广应用。     

T细胞亚群、中性淋巴比值与肺癌病理分型及非小细胞肺癌临床分期的相关性分析

目的 分析外周血T细胞亚群、中性淋巴比值(NLR)与肺癌病理分型及非小细胞肺癌临床分期之间的关系.方法 采用流式细胞术测定60例肺癌患者T细胞亚群比例,血样分析测定NLR.结果 肺腺癌、肺鳞癌、小细胞肺癌患者的CD4+T淋巴细胞比例、CD8+T淋巴细胞比例、CD4+/CD8+、NLR差异无统计学意义.晚期组(Ⅲ~Ⅳ期)非小细胞肺癌患者的CD4+T淋巴细胞比例和CD4+/CD8+较早期组(Ⅰ~Ⅱ期)低,差异有统计学意义(P<0.05).晚期组(Ⅲ~Ⅳ期)非小细胞肺癌患者的CD8+T淋巴细胞比例、NLR较早期组(Ⅰ~Ⅱ期)高,差异有统计学意义(P<0.05).结论 非小细胞肺癌患者的外周血T细胞亚群、NLR与非小细胞肺癌的临床分期具有一定相关性,可作为临床分期的参考指标.     

复方皂矾丸减轻晚期非小细胞肺癌化疗副反应临床观察

目的观察复方皂矾丸减轻晚期非小细胞肺癌化疗副反应的疗效。方法94例晚期非小细胞肺癌患者随机分为两组,治疗组48例给予TP方案化疗联合复方皂矾丸;对照组46例仅单纯TP方案化疗。观察两组毒副反应、体重变化、KPS评分变化。结果治疗组Ⅲ-Ⅳ度骨髓抑制发生率低于对照组（P〈0．05）。对照组治秀后体重下降及KPS下降发生率与治疗组比较有统计学显著性差异（P〈0．05）。结论复方皂矾丸联合TP方案化疗能减轻晚期非小细胞肺癌患者毒副反应,改善体重及生活质量。     

喉癌患者外周血细胞免疫水平与预后的关系

目的：探讨喉癌患者外周血细胞免疫水平与预后的关系。方法采用流式细胞术检测41例喉癌患者（其中Ⅰ～Ⅱ期17例,Ⅲ～Ⅳ期24例;无淋巴结转移28例,有淋巴结转移13例;术后复发转移11例,无复发转移30例）手术前后外周血淋巴细胞（ CD3＋、CD4＋、CD8＋、CD19＋）及自然杀伤细胞（ NK）水平。结果手术后41例患者NK水平升高, CD19＋细胞水平下降（ P＜0．05）, CD3＋、CD4＋、CD8＋水平手术前后比较差异无统计学意义（ P＞0．05）;与Ⅲ～Ⅳ期患者比较,Ⅰ～Ⅱ期患者血CD4＋细胞水平显著降低,CD19＋细胞水平显著升高（P＜0．05）;有淋巴结转移喉癌患者外周血CD4＋细胞水平显著下降,NK细胞水平显著升高（P＜0．05）;术后随访1年,复发或转移组外周血CD4＋细胞水平显著下降,NK、CD19＋细胞水平显著升高（P＜0．05）。结论喉癌患者外周血细胞免疫水平对转移及预后判断有一定的临床参考价值。