宫颈癌组织中miRNA-21、miRNA-127和miRNA-125a的表达变化及临床指导意义

目的评估宫颈癌组织中miRNA-21、miRNA-127和miRNA-125a的表达变化及临床指导意义。方法对2014年1月至2017年12月期间在三峡大学宜昌市第二人民医院治疗的95例宫颈癌临床资料进行回顾性分析,统计宫颈癌组织及癌旁组织中miRNA-21、miRNA-127和miRNA-125a表达量,并分析miRNA-21、miRNA-127和miRNA-125a表达与宫颈癌患者临床病理学特征之间的关系,同时分析宫颈癌组织中miRNA-21、miRNA-127和miRNA-125a表达与患者生存的关系。结果宫颈癌组织中miRNA-21表达量(25.63±6.85)明显高于癌旁组织(1.33±0.62)(P <0.001)。宫颈癌组织中miRNA-127 (5.64±1.29)和miRNA-125a (8.47±1.58)表达量明显低于癌旁组织中miRNA-127 (16.47±4.62)和miRNA-125a (23.49±5.57)表达量(P <0.001)。宫颈癌组织中的miRNA-21、miRNA-127和miRNA-125a表达与宫颈肌层浸润、组织学分化、淋巴... 更多     

乳腺肿瘤患者血清miRNA-222、miRNA-21检测的临床意义

目的 探讨血清miRNA-222、miRNA-21水平对于乳腺肿瘤患者的临床意义.方法 选择经病理确诊并分类的35例乳腺癌患者和32例乳腺良性肿瘤患者;同时选35例女性健康体检者作为对照.采用RT-PCR的方法测定所有受试者的血清miRNA-222、miRNA-21的相对表达水平,分析血清miRNA-222、miRNA...     

血清miRNA-21和miRNA-192表达与糖尿病肾病的相关性研究

［摘要］ 目的探讨血清miRNA-21和miRNA-192表达与糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)的相关性。 方法选择2型糖尿病（type 2 diabetes mellitus,T2DM）患者（DM组）38例、DN患者（DN组）27例及同期体检健康者(对照组)30例,采用实时荧光定量PCR（real time-PCR,RT-PCR）技术检测血清miRNA-21和miRNA-192表达,采用PHILIPS-IU22彩色多普勒超声诊断仪检测肾主动脉（main renalartery,MRA）收缩期的峰值速度（peak systolic velocity,PSV）及阻力指数（resistance index,RI）等血流相关参数,比较分析以上指标的变化与DN的关系。 结果DN组和DM组RI明显高于对照组,DN组RI明显高于DM组,DN组PSV明显低于DM组和对照组(P＜0.05)。DN组和DM组miRNA-21表达高于对照组,miRNA-192低于对照组,DN组miRNA-21表达高于DM组,miRNA-192低于DM组(P＜0.05)。DN组血清miRNA-21与miRNA-192表达呈负相关（r=-0.837,P＜0.05）;miRNA-21表达与RI水平呈正相关（r=0.812,P＜0.05）,与PSV水平呈负相关（r=-0.793,P＜0.05）;miRNA-192与RI水平呈负相关（r=-0.807,P＜0.05）,与PSV水平呈正相关（r=0.782,P＜0.05）。DM组血清miRNA-21与miRNA-192表达呈负相关（r=-0.816,P＜0.05）;miRNA-21与RI水平呈正相关（r=0.714,P＜0.05）;miRNA-192表达与RI水平呈负相关（r=-0.745,P＜0.05）。 结论血清miRNA-21和miRNA-192表达与DN的发生发展有相关性,检测miRNA-21和miRNA-192表达可为DN的早期发现及治疗提供基因依据。     

miRNA-194和miRNA-192在肝癌患者中的表达及临床意义

目的:探究肝细胞癌(HCC)患者癌组织中miRNA-194、miRNA-192的表达及其临床意义。方法:选取2016年3月至2017年3月自贡市精神卫生中心收治的67例肝癌患者,取手术后切除的癌组织以及其相应的癌旁正常组织。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法测定HCC组织及癌旁正常组织中miRNA-194、miRNA-192的表达情况,分析miRNA-194、miRNA-192与患者的性别、年龄、肿瘤分化程度、淋巴结转移、肿块大小等临床病理参数的关系;对所有HCC患者进行3年随访,采用Kaplan-Meier法分析miRNA-194、miRNA-192表达与HCC患者预后的关系;采用Cox回归分析影响HCC患者预后不良的危险因素。结果:HCC组织中miRNA-194、miRNA-192的表达水平显著低于癌旁组织(P<0.05);miRNA-194、miRNA-192水平与HCC患者性别、年龄、饮酒史、肝硬化、肿瘤数量无关(均P>0.05),与AJCC分期、甲胎蛋白、肿瘤大小、TNM分期、分化程度、淋巴结转移、静脉侵犯、脉管癌栓、CLIP评分有关(均P<0.05...     

乳腺癌患者血清中miRNA-21、miRNA-210、miRNA-1246 的表达及临床意义

目的 研究血清miRNA 在乳腺癌（BC）患者及正常人群血清中的表达情况及临床诊断中的价 值。方法 收集BC 患者及健康体检者血清,通过实时荧光定量PCR（qRT-PCR）检测各组miRNA-21、 miRNA-210、miRNA-1246 的表达情况。分析单个血清miRNA 及多个血清miRNA 联合检测对BC 的诊断价 值。结果 与健康体检者比较,BC 患者血清中miRNA-21、miRNA-210、miRNA-1246 表达均增加（均P = 0.000）,且3 者在BC III 期患者或有淋巴结转移的患者中高表达（P <0.05）。血清miRN-A21、miRNA-210、 miRNA-1246 诊断BC 患者的受试者工作特征曲线下面积（AUC）分别为0.936（95%CI ：0.866,0.976）、 0.980（95%CI ：0.928,0.998）、0.737（95%CI ：0.638,0.822）,特异性为0.854（95%CI ：0.722,0.939）、0.917 （95%CI ：0.857,0.995）、0.583（95%CI ：0.432,0.724）。且miRNA-210 和miRNA-1246 联合检测,miRNA-21、 miRNA-210 和miRNA-1246 联合检测的诊断效能并不优于miRNA-210 单独检测。Fisher 判别分析建立BC 的最佳诊断模型,该模型排除非患者的能力较好,而发现患者的能力相对较弱（敏感性为62.5% ;特异性为 100.0%）。结论 miRNA-21、miRNA-210、miRNA-1246 在BC 患者血清中高表达,miRNA-210 单独诊断效 能较好,血清miR-210 可能是一种理想的BC 诊断标志物。     

甲状腺功能亢进患者外周血miRNA-21和miRNA-192的表达

目的 探讨甲状腺功能亢进(甲亢)患者外周血微小RNA(miRNA)-21和miRNA-192的表达。方法 选择甲亢患者97例(甲亢组)作为研究对象;另选择健康体检者80例作为对照组。采用放射免疫分析法测定甲状腺功能指标[游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)、总三碘甲状腺原氨酸(TT3)、游离甲状腺素(FT4)、总甲状腺素(TT4)和促甲状腺素(TSH)]水平;采用qRT-PCR法测定外周血miRNA-21和miRNA-192表达。结果 甲亢组血清miRNA-21相对表达量高于对照组,而血清miRNA-192相对表达量低于对照组(P<0.05)。甲亢组FT3、TT3、FT4和TT4水平高于对照组,而TSH水平低于对照组(P<0.05)。治疗后血清miRNA-21相对表达量低于治疗前,而血清miRNA-192相对表达量高于治疗前(P<0.05)。miRNA-21对甲亢诊断敏感度和特异度分别为75.44%和70.00%;miRNA-192对甲亢诊断敏感度和特异度分别为80.00%和72.34%。miRNA-21与FT3、TT3、FT4和TT4呈线性正相关,与TSH呈线性负相关;m...     

三阴性乳腺癌患者血清中miRNA-21、miRNA-210表达及其临床意义

目的 分析三阴性乳腺癌患者血清中miRNA-21、miRNA-210表达情况及其临床意义.方法 收集2015年5月至2017年7月河南中医药大学第三附属医院收治的64例三阴性乳腺癌患者作为病例组,选择同期来医院体检的40例正常健康人作为对照组,所有对象均留取血清样本,提取RNA,采用实时荧光定量聚合酶链反应法(RT-P...     

ox-LDL对巨噬细胞表达miRNA-155和miRNA-146a／b的影响

目的：探讨氧化低密度脂蛋白（ox—LDL）刺激对巨噬细胞表达miRNA-155和miRNA-146a／b的影响。方法：培养人巨噬细胞,随机分为三组：空白对照组、ox-LDL（10μg／mL）组和OX—LDL（20μg／mL）组,刺激6h后,收集细胞,实时定量PCR方法检测miRNA-155和miRNA—146a／b的表达。结果：OX—LDL刺激可以增加巨噬细胞表达miRNA-155和miRNA-146a／b,且呈浓度依赖性。结论：miRNA-155和miRNA-146a／b可能参与ox-LDL致动脉粥样硬化过程。     

MiRNA-381 抑制肾癌侵袭能力及其分子机制

目的：研究miRNA-381对肾癌侵袭的抑制作用,并探索其机制。方法：上调miRNA-381表达后,观察 miRNA-381对肾癌细胞侵袭的抑制作用。通过miR数据库starBase研究miRNA-381靶基因,再通过双荧光素酶实验验 证。分析miRNA-381及相应靶基因在细胞和组织水平的表达丰度。结果：转染miRNA-381后,其表达增加,跨膜细胞 数目显著下降,细胞侵袭力受抑制。生物信息学分析显示miRNA-381靶基因为CREB绑定蛋白(CREB binding protein, CBP)、β-catenin和淋巴增强因子-1(lymphoid enhancer binding factor-1,LEF-1);包含野生型靶基因3'-非编码区载体组的 荧光素酶活性明显降低。实时定量PCR显示肾癌细胞中miRNA-381低表达,在高转移潜能肾癌细胞株786-OHM中表达 更低;相反,在细胞、组织水平miRNA-381靶基因CBP,β-catenin与LEF-1表达均增高。结论：MiRNA-381可抑制肾癌 细胞的侵袭能力,其机制可能是通过CBP,β-catenin和LEF-1实现的。     

miRNA-145负向调控子宫内膜异位症中OCT4的表达

  目的  探讨miRNA-145、OCT4在子宫内膜异位症（EMs）中的表达水平及临床意义。  方法  收集2018年8月至2020年8月昆明医科大学第二附属医院妇科收治的EMs患者30例（实验组）,不孕症（输卵管因素）患者30例（对照组），实验组术中取异位子宫内膜组织，对照组术中取在位子宫内膜组织，QPCR检测异位内膜组织、在位内膜组织中miRNA-145、OCT4的表达，Western印迹法检测组织中OCT4蛋白的表达。  结果  EMs患者子宫内膜异位组织中较非EMs患者在位内膜组织中miRNA-145表达增高（P < 0.01），而OCT4表达下调（P < 0.01），2者呈现负相关关系。  结论  miRNA-145有望成为子宫内膜异位症诊断的潜在标志物。miRNA-145与OCT4在子宫内膜异位症发生、发展中具有一定的作用，这一发现为EMs的发病机制及治疗提供了可能的研究方向及潜在靶点。     

MicroRNA-433在非小细胞肺癌A549细胞增殖及迁移中的作用

目的 研究microRNA-433（miR-433）对人非小细胞肺癌（NSCLC）A549细胞增殖及迁移的作用。方法 采用实时聚合酶链反应（real-time PCR）检测miR-433在A549、NCI-H1299、NCI-H358以及人肺成纤维细胞系HFL1中的表达。不同浓度miR-433?mimic转染A549细胞,选取最佳浓度进行后续实验;MTT法检测细胞增殖情况;Transwell检测细胞迁移情况;双荧光素酶报告基因法检测miR-433与p21活化激酶4（PAK4）的靶向关系;Western blotting检测PAK4、单丝氨酸蛋白激酶1（LIMK1）、磷酸化单丝氨酸蛋白激酶1（p-LIMK1）、丝切蛋白（Cofilin）和磷酸化丝切蛋白（p-Cofilin）的表达。结果 与HFL1比较,miR-433 在3种NSCLC中的表达均降低。过表达miR-433 48?h后,A549细胞增殖和迁移能力降低,差异有统计学意义（P?< 0.05）。双荧光素酶报告基因法证明PAK4为miR-433的靶向调节基因,且PAK4在3种NSCLC中的表达均上升。过表达miR-433后细胞中PAK4、p-LIMK1、p-Cofilin的表达均降低,与mimic control组比较,差异有统计学意义（P?<0.05）。结论 miR-433能通过靶向下调PAK4的表达,抑制LIMK1/cofilin信号通路,抑制A549细胞的增殖及迁移。     

miR-155与妇科恶性肿瘤关系的研究进展

微RNA(miRNAs)广泛存在于动植物体内,在转录后水平调控基因表达。miRNAs在调控细胞内基因表达过程中,通过参与细胞增殖、分化、凋亡的细胞信号转导途径发挥作用;与此同时,miRNAs的重要作用也成为分子领域研究的新热点。经国外学者初步探讨认为,miR-155在妇科恶性肿瘤的发生、发展及预后中发挥了重要作用。该文就miR-155与妇科恶性肿瘤关系的研究进展予以综述。     

MicroRNA-34a调控细胞衰老的研究

目的 探讨微RNA-34a(miRNA-34a)对细胞通过调控沉默交配型信息调节因子2同源蛋白1(SIRT1)的表达,从而引起细胞衰老的作用。 方法 构建pre-miRNA-34a表达载体,并将其和一个不针对任何基因的微小RNA-1792(miRNA-1792)表达载体(其他实验室赠送)分别转染至HEK293和HUVEC细胞内,用RT-PCR、Western blot检测各细胞组SIRT1 mRNA与蛋白表达水平,以未转染的细胞为对照;将HUVEC细胞分为转染不同质粒、未转染质粒和用SIRT1激活剂白藜芦醇(终浓度1 μmol/L,作用2 h)处理HUVEC细胞(HUVEC-Res)组,中性彗星电泳分析H₂O₂作用2 h 后4组HUVEC细胞的双链损伤情况;用阿霉素处理上述4组HUVEC细胞2 h,β-半乳糖甘酶(SA-β-gal)染色检测各细胞不同时间点的衰老情况。 结果 测序结果表明pre-miRNA-34a表达载体构建成功;RT-PCR、Western blot显示HEK293-pre-miRNA-34a和HUVEC-pre-miRNA-34a中SIRT1 mRNA和蛋白质表达的水平明显下降(P<0.001);中性彗星电泳检测发现经H₂O₂处理后,HUVEC-Res组DNA损伤最轻,而HUVEC-miRNA-34a组DNA损伤程度最为严重;SA-β-gal染色显示DNA损伤后HUVEC-miRNA-34a衰老程度较其它3组严重,而HUVEC-Res组的衰老程度最为轻微。 结论 miRNA-34a 通过抑制SIRT1表达调控细胞衰老。     

miRNA-200a调控FOXC1增敏肺癌EGFR-TKI治疗的研究

目的：探究miRNA-200a对非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer, NSCLC）靶向治疗疗效的影响及其调控机制。方法：通过RT-PCR、Western blot等方法检测NSCLC细胞中miRNA-200a、FOXC1的表达量;四甲基偶氮唑盐（MTT）实验、细胞划痕实验、Transwell实验分别检测miRNA-200a、FOXC1对肺腺癌细胞生长、迁移、侵袭等生物学行为的影响;荧光素酶报告实验分析FOXC1与miRNA-200a的靶向关系。结果：高表达miRNA-200a抑制肺腺癌细胞的生长、上皮间质转化、迁移、侵袭,并且增加肺腺癌细胞对吉非替尼的敏感性。此外,敲低FOXC1同样可以抑制细胞生长,恢复肺腺癌细胞对吉非替尼敏感性。结论：上调miRNA-200a或下调FOXC1可以增强NSCLC细胞对吉非替尼的敏感性。为克服表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂治疗的耐药性提供了一种新的有效治疗方法。     

MiRNA-106a通过作用RUNX3基因诱导胃癌细胞多药耐受

目的：探讨胃癌细胞中人类相关转录因子3（RUNX3）对miRNA‐106a（miR‐106a）表达的影响以及与多药耐药的关系。方法采用免疫印迹法及细胞凋亡检测来观察miR‐106a在两个人类胃癌细胞多药耐药细胞系上的表达情况。运用免疫印迹及多聚酶链式反应检测miR‐106a的表达来观察癌细胞对抗癌药物的敏感性。通过荧光素酶活性测定观察miR‐106a与RU NX3的关系。结果 miR‐106a在多药耐药胃癌细胞中表达增加,并抑制胃癌细胞对抗癌药物的敏感性;通过作用于RUNX3调节多药耐药。结论通过作用于RUNX3基因,miR‐106a诱导胃癌多药耐药性。