丹酚酸B对慢性血清病肾炎大鼠影响作用的研究

摘要：目的 探讨丹酚酸B对慢性血清病肾炎大鼠模型的影响作用及保护机制。方法 通过改良后的免疫学方法制备慢性血清病肾炎大鼠模型,造模成功后给予丹酚酸B连续灌胃4周,评价丹酚酸B对慢性血清病肾炎大鼠肾脏指数、24h尿蛋白、血清肌酐（Scr）、尿素氮（BUN）、白蛋白（ALB）、总蛋白（TP）、总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、丙二醛（MDA）、总超氧化物歧化酶（SOD）、白细胞介素1α（IL-1α）、白细胞介素10（IL-10）的含量的影响。结果 与模型组相比,丹酚酸B高、低剂量组可以降低慢性血清病肾炎大鼠肾脏指数（P<0.01）;降低24h尿蛋白排泄量（P<0.05）;降低Scr、BUN的含量（（P<0.01或P<0.05）;降低血清中TC、TG（P<0.01或P<0.05）的含量,升高血清中ALB、TP的含量（P<0.01或P<0.05）;降低血清中MDA的含量（P<0.01或P<0.05）,升高血清中SOD的含量（P<0.01或P<0.05）;降低血清中IL-1α、IL-10的含量（P<0.01或P<0.05）。结论 丹酚酸B可以改善慢性血清病肾炎大鼠肾功能,调节异常血脂状态,其机制可能是抗脂质过氧化及调节细胞因子平衡有关。     

丹酚酸B对大鼠心肌缺血保护作用及其机制研究

目的 探讨丹酚酸B(SalB)对大鼠心肌缺血损伤的保护作用及其机制.方法 将大鼠随机分成4组:假手术组(Sham),假手术给药组(Sham+ SalB,丹酚酸B,10 mg·kg-1),手术组(AMI),丹酚酸B组(AMI+ SalB,丹酚酸B,10 mg·kg-1).建立大鼠心肌缺血模型,24 h后,考察各组大鼠在体血流动力学变化;处死,取心脏,进行2,3,5氯化三苯基四氮唑(TTC)染色及病理组织切片观察,对心脏组织中金属蛋白酶9(MMP-9)的活性进行考察.结果 与手术组比较,丹酚酸B组能使改善血流动力情况,尤其+ dP/dtmax、-dP/dtmax有显著增加(P＜0.01);降低心脏染色面积百分比(P＜0.001);病理组织切片中可见心肌细胞排列稀疏,横纹清晰,心肌间质轻度水肿,无炎症细胞浸润;MMP-9的含量明显降低(P＜0.05).结论 丹酚酸B对心肌缺血损伤有保护作用及其机制可能与调节MMP-9的活性有关.     

丹酚酸B对脓毒症大鼠心肌损伤的保护作用

目的:探讨丹酚酸B(salvianolic acid B,Sal-B)对脓毒症大鼠心肌损伤的作用及机制。方法:将50只雄性SD大鼠随机分为假手术组,模型组(行盲肠结扎穿孔术复制脓毒症动物模型),Sal-B组低、中、高剂量组(在模型基础上,经尾静脉注射Sal-B 6,12,24 mg·kg~(-1))。采用酶联免疫吸附测定(ELISA)检测心肌坏死标志物和炎症因子,包括血清肌钙蛋白T(Tn T),肌酸激酶同工酶(CK-MB),心肌肌钙蛋白I(c Tn I)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素(IL)-1β,IL-6水平;比色法检测心肌中超氧化物歧化酶(SOD)的活性和丙二醛(MDA)的含量;采用苏木素-伊红(HE)染色观察各组心肌组织病理变化;采用原位末端标记法(TUNEL)检测心肌细胞凋亡情况;采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测心肌组织中凋亡相关蛋白半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3),B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2),Bcl-2相关X蛋白(Bax)和自噬微管相关蛋白轻链3(LC3),Beclin-1表达水平。结果:与假手术组比较,模型组Tn T,CK-MB和c Tn I水平显著升高(P 0. 01);心肌组织TNF-α,IL-1β,IL-6水平显著升高(P 0. 01);心肌组织MDA含量显著升高(P 0. 01),SOD的活力显著降低(P 0. 01),TUNEL阳性心肌细胞比率显著升高(P 0. 01),Bax和Caspase-3蛋白表达水平升高,而Bcl-2表达显著降低(P 0. 01),自噬相关蛋白LC3,Beclin-1表达水平显著升高(P 0. 01);与模型组比较,Sal-B中、高剂量组Tn T,CK-MB和c Tn I水平均显著降低(P 0. 01),心肌组织TNF-α,IL-1β,IL-6水平显著降低(P 0. 01),心肌组织MDA含量明显降低(P 0. 05,P 0. 01),同时,心肌组织SOD的活性明显升高(P 0. 05,P 0. 01); TUNEL阳性心肌细胞比率明显降低(P 0. 05),Bax和Caspase-3蛋白表达下降,Bcl-2表达明显升高(P 0. 05,P 0. 01);同时增强自噬反应,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ增加,Beclin-1表达水平明显上调(P 0. 05,P 0. 01)。结论:Sal-B通过影响自噬蛋白,降低脓毒症大鼠心肌炎症反应和氧化应激,抑制心肌细胞凋亡,从而减轻脓毒症大鼠心肌的损伤。     

丹酚酸B对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用机制研究

目的探讨丹酚酸B(Salvianolic acid B,SalB)对大鼠心肌缺血再灌注损伤(myocardial ischemia reperfusion injury,MIRI)的保护作用机制。方法大鼠心肌缺血60min后再灌注60min造成大鼠心肌缺血再灌注损伤模型,测定给药后心肌组织匀浆、血浆中内皮素(ET)、血清中一氧化氮(NO)和一氧化氮合酶(NOS)的变化,并通过病理组织学检查,观察SalB对MIRI模型的治疗作用。结果SalB中、高剂量组均能减少心肌组织和血浆中ET的含量,提高NOS的活性,增加NO的释放(P<0.05或P<0.01)。结论SalB减轻MIRI可能是通过调节ET/NO系统的平衡,维持冠脉血管张力,改善心肌能量代谢障碍而实现的。     

丹酚酸A与丹酚酸B改善大鼠心肌缺血作用比较

目的观察丹酚酸A与丹酚酸B对大鼠心肌缺血的作用。方法通过结扎大鼠冠脉以及静脉注射脑垂体后叶素两种方法,观察舌下注射丹酚酸A 10、5、2.5mg/kg及丹酚酸B 10mg/kg对大鼠不同时间点心电图、血清肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)及心肌梗死面积的影响。结果丹酚酸A 10、5、2.5mg/kg及丹酚酸B 10mg/kg对结扎大鼠冠脉导致的急性心肌梗死模型有降低心电图ST段抬高程度、减少梗死面积及降低血清CPK、LDH的作用,其中丹酚酸A 10、5mg/kg的效价明显高于丹酚酸B,2.5mg/kg丹酚酸A的作用相当于10mg/kg丹酚酸B;对静脉注射脑垂体后叶素导致的大鼠急性心肌梗死模型有降低心电图ST段抬高程度作用,其中丹酚酸A10、5mg/kg的作用明显强于丹酚酸B,2.5mg/kg丹酚酸A的作用与10mg/kg丹酚酸B无显著差异。结论10、5mg/kg丹酚酸A改善大鼠心肌缺血作用明显强于10mg/kg丹酚酸B,2.5mg/kg丹酚酸A改善大鼠心肌缺血作用相当于10mg/kg丹酚酸B。     

丹酚酸B对大鼠肾缺血再灌注损伤的保护作用

目的研究丹酚酸B对大鼠肾缺血再灌注损伤的保护作用,并探讨可能的作用机制。方法通过夹闭双侧肾动脉50 min后再灌注,建立大鼠肾缺血再灌注损伤模型,腹腔给药,观察各指标的变化。结果与模型组相比,丹酚酸B能显著降低血清中肌肝、尿素氮、丙二醛、白介素-6、白介素-8、肿瘤坏死因子-α以及尿液中尿蛋白的量,增强血清中超氧化物歧化酶的活性,并且对肾缺血再灌注后肾小球和肾小管的损伤有明显的保护作用。结论丹酚酸B对大鼠肾脏缺血再灌注损伤具有较好的保护作用,这种保护作用可能是通过减轻氧自由基损伤以及缓解炎症反应来实现的。     

丹酚酸B对大鼠心肌缺血/再灌注损伤的保护作用

 目的观察丹酚酸B静脉注射给药对大鼠心肌缺血/再灌注损伤的影响。方法结扎冠状动脉左前降支，制成急性缺血/再灌注模型。缺血同时静脉缓慢注射给予丹酚酸B，测定在急性缺血/再灌注状态下血清肌酸磷酸激酶(CPK)活性和心肌梗死范围。结果丹酚酸B10，15mg·kg^-1，静脉注射给药能明显降低血清CPK活性和缩小梗死区范围，丹酚酸B3mg·kg^-1静脉给药对CPK活性、心肌梗死范围没有显著影响。结论丹酚酸B静脉注射给药对心肌缺血/再灌注损伤有保护作用。     

丹酚酸A/丹酚酸B不同配比对大鼠心肌缺血再灌注性损伤的保护作用

目的:研究丹酚酸A/丹酚酸B不同配比对大鼠心肌缺血再灌注性损伤的保护作用。方法:采用大鼠心肌缺血再灌注模型,测定定量组织学指标和SOD值和MDA值。结果:丹酚酸A/丹酚酸B各配比均能显著减少大鼠的心肌梗死范围,升高大鼠血清SOD、降低缺血心肌组织中脂质过氧化产物MDA含量,与模型组比较差异有显著性,且单独使用丹酚酸A或者丹酚酸B效果不如二者配伍组明显,各配比组中以2∶1效果最显著。结论:丹酚酸A/丹酚酸B配伍对大鼠心肌缺血再灌注性损伤具有一定的保护作用。     

丹酚酸B对糖尿病血糖波动模型大鼠胰岛细胞的保护作用

目的观察丹酚酸B对糖尿病血糖波动模型大鼠胰岛细胞的保护作用,并探讨其可能的作用机制。方法采用高糖高脂饮食合并ip链脲佐菌素(STZ)的方法建立大鼠糖尿病模型,并在此基础上通过错时给予胰岛素或葡萄糖建立糖尿病血糖波动模型,丹酚酸B各组分别给予丹酚B 160、80 mg/kg。血糖波动6周后,检测大鼠空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FINS)和糖化血红蛋白(GHb)水平,并检测大鼠血清和胰腺组织总抗氧化能力(TAC)、超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)水平,HE染色法观察大鼠胰岛组织病理学改变,TUNEL染色法检测大鼠胰岛细胞凋亡情况,Western blotting法检测胰腺组织胰十二指肠同源盒-1(PDX-1)蛋白表达水平。结果糖尿病大鼠FBG、GHb及血清和胰腺组织MDA水平较对照组明显升高,而FINS水平及血清和胰腺组织TAC、SOD活性显著下降(P0.01)。同时,糖尿病大鼠胰岛数量减少,胰岛体积缩小,胰岛细胞凋亡明显增多(P0.01),胰腺组织PDX-1蛋白表达水平显著下降(P0.01)。给予丹酚酸B 6周后,大鼠FINS水平,血清及胰腺组织中TAC、SOD活性均明显升高,而FBG、GHb、血清及胰腺组织中MDA水平明显下降(P0.05、0.01)。丹酚酸B明显改善大鼠胰岛病理学改变,减少胰岛细胞凋亡,增加PDX-1蛋白表达水平(P0.05、0.01)。结论丹酚酸B可明显减轻糖尿病血糖波动模型大鼠胰岛病变,改善胰岛功能,其作用机制可能与改善氧化应激、上调PDX-1蛋白表达水平,进而抑制胰岛细胞凋亡有关。     

丹酚酸B对原发性高血压大鼠的降压作用机制研究

目的 观察丹酚酸B对原发性高血压大鼠(SHR)的降压作用,并探讨其可能的降压机制。方法 将64只雄性SHR大鼠随机分为4组:模型组,阳性药组(依那普利组),丹酚酸B(SalB)高、低剂量组,另设正常对照组(16只健康大鼠),分别给予相应药物或蒸馏水。给药前分别测基础血压1次,给药后每2周测血压1次,给药10周后取一半大鼠检测各组大鼠血压,血浆肾素(PRA)、血管紧张素II(Ang-Ⅱ)、内皮素(ET)、心钠素(ANF)含量,血清一氧化氮(NO)、胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、超氧化物歧化酶(SOD)及丙二醛(MDA)含量。其余大鼠停药2周后再测上述指标。结果 与正常对照组比较,模型组大鼠血压、TG、NO、PRA、Ang-Ⅱ及MDA含量均明显升高(P < 0.01);与模型组比较,丹酚酸B有明显降血压作用(P < 0.01),丹酚酸B能够降低SHR的PRA、Ang-Ⅱ含量,升高ANF含量(P < 0.05),能够降低血清TG含量(P < 0.05),对血清ET、NO及TC含量无明显影响(P > 0.05),能够降低血清MDA含量(P < 0.05),但对血清SOD含量无明显影响(P > 0.05)。结论 丹酚酸B对SHR具有一定的降压作用,其机制可能与调节肾素-血管紧张素-醛固酮系统(RAAS)、血清ANF、TG水平及抗氧化作用有关。     

丹酚酸B干预慢性马兜铃酸肾病大鼠疗效研究

目的:建立慢性AAN大鼠模型及观察SalB的干预作用。方法:将雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、治疗组,正常组灌服生理盐水,实验组按马兜铃酸5mg/kg.d灌服马兜铃酸单体,建立慢性AAN动物模型,治疗组按SalB10mg/kg.d灌胃治疗。各组分别在第2、4、6、8周留取24h尿液,在第4、8周取血,分离血清,检测肾功能指标,第8周留取肾组织,观察病理变化。结果:随着饲养时间的延长,马兜铃酸模型组尿β2-MG、尿NAG水平明显升高,肾小管间质病理损害明显,而SalB治疗组尿β2-MG、尿NAG水平及肾小管间质病理损害较模型组明显减轻。结论:初步建立了慢性AAN动物模型及SalB对马兜铃酸肾小管间质损害有一定的保护作用,能有效的降低尿β2-MG、尿NAG水平,明显改善肾小管间质病理损害,改善肾功能。     

丹酚酸B对大鼠离体心脏缺血再灌注损伤的保护作用

目的:研究丹酚酸B对大鼠离体心脏缺血再灌注损伤的作用及其作用机制。方法:SD大鼠48只,随机分为6组,分别是空白对照组、阳性给药组(维拉帕米150μg.L-1)、丹酚酸B高、中、低剂量组(10,5,2.5 mg.L-1),每组8只。采用Langendorff法灌流离体大鼠心脏,停灌25 min后再灌30 min,造成心肌缺血再灌注损伤模型。于大鼠左心房插入水囊导管,记录丹酚酸B对血流动力学指标的影响,测定不同时间点冠脉流出液中天门冬氨酸氨基转移酶(AST),乳酸脱氢酶(LDH)的活性及心肌组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性,丙二醛(MDA)的含量。结果:丹酚酸B不同剂量组(10,5,2.5 mg.L-1),可显著改善缺血再灌注所致大鼠的心功能损伤,减少AST,LDH释放和MDA的产生,增加SOD的活性。结论:丹酚酸B对心肌缺血再灌注损伤具有保护作用,其机制可能与改善心肌舒缩功能,清除氧自由基,减少脂质过氧化反应有关。     

丹酚酸B预适应对心脏微血管内皮细胞保护作用的研究

[目的]研究丹酚酸B预适应的心脏细胞保护作用及机制。[方法]基于缺氧预适应(HPC)机制，通过心脏微血管内皮细胞(CMBC)体外培养技术，建立缺O2／复O2损伤的细胞模型，以细胞活力、乳酸脱氢酶(LDH)、一氧化氮(NO)、超氧化物歧化酶(SOD)、内皮素(ET)等生化指标作为评价标准。[结果]在正常培养条件下，丹酚酸B可明显提高CMEC和心肌细胞的细胞存活率和SOD活性、降低LDH活性，有降低CMEC的ET分泌和NO释放趋势。缺O2／复O2损伤情况下，丹酚酸B不仅能提高CMEC存活率和SOD活性，降低LDH活性，而且能明显降低其因缺O2／复O2导致的ET和NO水平升高。缺O2预适应可增强CMEC对随后较长时间缺O2／复O2损伤的耐受性，表现为可提高CMEC存活率和SOD活性，降低LDH活性，降低ET和NO分泌。[结论]丹酚酸B预适应具有缺O2预适应样作用，从而激发了CMEC的内源性保护机制。     

肾炎康复片对糖尿病肾病大鼠肾脏保护作用机制研究

目的 通过观察肾炎康复片对糖尿病肾损伤大鼠肾脏病理及足细胞相关蛋白表达的影响,探讨其肾脏保护机制.方法 用高脂高糖饲料加小剂量链脲佐菌素诱导糖尿病肾病（DN）大鼠模型,随机分为治疗组、对照组、模型组及正常组.治疗组给予肾炎康复片、对照组给予盐酸贝那普利,模型组与正常组均给予生理盐水灌胃.第8周末对各组大鼠进行尿蛋白定量、血液生化、肾脏病理、足细胞相关蛋白的免疫组化比较.结果 各项结果显示,DN大鼠中,肾炎康复片组肾脏病变最轻.结论 肾炎康复片可有效减轻糖尿病造成的肾病损害,其发生机制可能为不完全依赖于降低血糖的足细胞保护作用.     

丹酚酸B通过Akt-eNOS通路对大鼠心肌缺血/再灌注损伤保护作用的研究

目的:观察丹酚酸B(Salvianolic acid B,Sal B)对心肌缺血/再灌注(myocardia1ischemia/reperfusion,MI/R)损伤大鼠的保护作用,并进一步探讨Akt-eNOS通路在其中的关键作用。方法:通过结扎冠状动脉制备大鼠MI/R损伤模型,将动物随机分为假手术组、模型组、Sal B低及高剂量组。除假手术组和模型组动物于再灌注时给予生理盐水外,Sal B低、高剂量组动物于再灌注时给予Sal B溶液(20,60mg/kg)。再灌注结束后,伊文思蓝(EvansBlue,EB)、2,3,5-氯化三苯基四氮唑蓝(Tetrazolium chloride,TTC)双染法测定心肌梗死面积,酶联免疫吸附试验(Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)试剂盒检测血清中肌酸激酶同工酶(creatine kinase-MB,CK-MB)和乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)的水平,免疫印迹(Western blot)法检测心肌组织中Akt、p-Akt和eNOS、p-eNOS蛋白的表达。结果:与模型组相比,Sal B低、高剂量组大鼠心肌梗死面积明显减少(P<0.05),血清中CK-MB、LDH活性明显下降(P<0.05),并且Sal B低、高剂量组p-Akt/Akt及p-eNOS/eNOS相对灰度值均明显高于模型组(P<0.01)。结论:Sal B对大鼠MI/R损伤有一定的保护作用,其机制可能与激活Akt-eNOS信号通路相关。     

双氢丹酚酸B对大鼠急性心肌缺血的治疗作用

目的观察双氢丹酚酸B对大鼠急性心肌缺血的治疗作用。方法采用大鼠冠脉结扎心肌梗死模型,测定心梗范围及血清心肌酶活性。结果双氢丹酚酸B可明显减小心肌梗死区范围,显著抑制血清肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)的升高,显著降低增高的脂质过氧化物丙二醛(MDA)水平,升高降低的超氧化物歧化酶(SOD)活性。结论双氢丹酚酸B有明显的心肌保护作用,其保护缺血引起的心肌组织损伤机制可能与其抗氧化、清除氧自由基作用有关。     

肾病灵对大鼠血清病型肾炎的治疗作用

肾病灵由黄芪、党参、山萸肉、狗脊、地龙、丹参、白茅根、益母草、石苇、白花蛇舌草、甘草等组成。有健脾补肾、活血通络,利水消肿之功效。实验观察了本品对小牛血清所致的大鼠急性血清病型肾炎的治疗作用。结果表明，本品具有显著降低尿蛋白指数，消除尿蛋白，升高血清蛋白的作用。     

丹酚酸B预处理的心脏微血管内皮细胞延迟保护作用研究

目的：探讨丹酚酸B通过保护心脏微血管内皮细胞（CMEC）抗心肌缺氧损伤作用机制。方法：基于缺血预适应延迟保护机制。通过缺氧／复氧的CMEC损伤模型，观察丹酚酸B预处理的CMEC保护作用。结果：丹酚酸B预处理与缺氧预处理作用相似，均可提高细胞存活率和SOD活性，降低LDH、NO水平。结论：丹酚酸B预处理可激活CMEC内源性延迟保护机制。发挥了拮抗心肌缺血缺氧损伤效应。     

丹酚酸B预处理的心脏微血管内皮细胞延迟保护作用研究

目的探讨丹酚酸B通过保护心脏微血管内皮细胞(CMEC)抗心肌缺氧损伤作用机制.方法基于缺血预适应延迟保护机制,通过缺氧/复氧的CMEC损伤模型,观察丹酚酸B预处理的CMEC保护作用.结果丹酚酸B预处理与缺氧预处理作用相似,均可提高细胞存活率和SOD活性,降低LDH、NO水平.结论丹酚酸B预处理可激活CMEC内源性延迟保护机制,发挥了拮抗心肌缺血缺氧损伤效应.     

丹酚酸B对脑缺血再灌注损伤小鼠血管保护作用

目的:探讨丹酚酸B对脑缺血再灌注损伤小鼠血管保护作用。方法:复制小鼠脑缺血再灌注模型,测定再灌注12 h后脑含水量和脑指数、血浆TXB2和6-keto-PGF1α含量,观察脑皮质病理学的改变及内皮P-选择素和ICAM-1的表达。结果:丹酚酸B可降低脑含水量和脑指数、血浆TXB2含量和TXB2/6-keto-PGF1α比值以及脑皮质血管内皮P-选择素和ICAM-1的表达,缓减了神经元水肿。结论:丹酚酸B对脑缺血再灌注损伤的保护作用机制,可能与其维持血管活性物质TXB2/6-keto-PGF1α平衡及降低血管内皮细胞黏附分子的表达,从而改善损伤组织局部血管功能有关。