两种兔耳草对四氯化碳致肝损伤小鼠保护作用的比较研究

目的比较短管兔耳草和短穗兔耳草对四氯化碳(CCl_4)所致肝损伤小鼠的保护作用。方法采用腹腔注射含0.2%CCl_4的花生油溶液造成小鼠急性肝损伤模型,连续给药7d,末次给药1h后取血、取肝脏,检测血清中丙氨酸氨基转氨酶(ALT)、天门冬氨酸转移酶(AST)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量;检测肝组织匀浆中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)的含量;部分肝脏甲醛固定、HE染色后显微镜下观察肝组织形态学变化。结果与模型组比较,短穗兔耳草2.0,4.0,8.0 g·kg~(-1)均能显著降低肝损伤小鼠血清ALT、AST和TNF-α的水平,同时显著升高小鼠肝匀浆中SOD和GSH的含量,并降低肝匀浆中MDA含量,差异均有统计学意义(P0.05,P0.01);短管兔耳草8.0 g·kg~(-1)可显著降低肝损伤小鼠血清ALT、AST和TNF-α的水平(P0.05,P0.01),短管兔耳草2.0,4.0,8.0 g·kg~(-1)均可显著升高小鼠肝匀浆中SOD和GSH的含量(P0.01),但MDA含量无显著变化(P0.05)。病理切片显示短穗兔耳草各剂量组和短管兔耳草8.0 g·kg~(-1)给药组能显著改善肝组织的病理变化。结论短管兔耳草与短穗兔耳草均对CCl_4所致小鼠肝损伤有保护作用,短穗兔耳草效果较优。     

短穗兔耳草和短管兔耳草抗急性酒精肝损伤小鼠作用机制的研究

目的研究短穗兔耳草和短管兔耳草对急性酒精肝损伤的保护作用及其作用机制。方法将小鼠随机分为9组,每组10只,分别为正常组,模型组,联苯双酯组(150 mg·kg~(-1)),短穗兔耳草低、中、高剂量组(1.0,2.0,4.0 g·kg~(-1)),短管兔耳草低、中、高剂量组(1.0,2.0,4.0 g·kg~(-1))。采用灌胃50%乙醇的方法制备急性酒精肝损伤模型,连续灌胃给药7 d,于造模后16 h各组取血、取肝脏,测定血清中丙氨酸氨基转氨酶(ALT)、天门冬氨酸转移酶(AST)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、核转录因子kappa B(NF-κB)各项指标,测定肝组织匀浆中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、还原性谷胱甘肽(GSH)的含量,PCR检测肝组织中TNF-α相对表达量。结果与模型组比较,短穗兔耳草和短管兔耳草高剂量组可显著降低血清中ALT、AST、TC、TG含量可显著升高肝匀浆中SOD、GSH含量,并降低MDA含量,差异均有统计学意义(P0.05,P0.01);短穗兔耳草各剂量组和短管兔耳草高剂量组可显著降低TNF-α、NF-κB的含量,差异有统计学意义(P0.05,P0.01);短穗兔耳草和短管兔耳草高、中剂量组小鼠肝组织中TNF-α mRNA的相对表达量均显著降低,差异有统计学意义(P0.01)。结论短穗兔耳草和短管兔耳草均具有抗急性酒精肝损伤作用,其作用与氧化应激及对炎症因子的调控相关。     

短穗兔耳草和短管兔耳草抗急性酒精肝损伤及其作用机制

目的 研究短穗兔耳草和短管兔耳草对急性酒精肝损伤的保护作用及其作用机制。方法 将小鼠随机分为9组,每组10只,分别为正常组、模型组、联苯双酯组（阳性对照组）、短穗兔耳草低、中、高剂量组、短管兔耳草低、中、高剂量组。采用灌胃50%乙醇的方法制备急性酒精肝损伤模型,连续灌胃给药7d,于造模后16h各组取血、取肝脏,测定血清中ALT、AST、TC、TG、TNF-α、NF-κB各项指标,测定肝组织匀浆中SOD、MDA、GSH、蛋白的含量,PCR检测肝组织中TNF-α相对表达量。结果 与模型组比较,短穗兔耳草和短管兔耳草高剂量组可显著降低血清中ALT、AST、TC、TG含量（P＜0.01或P＜0.05）,短穗兔耳草和短管兔耳草高剂量组可显著升高肝匀浆中SOD、GSH含量,降低MDA含量,具有统计学意义（P＜0.01或P＜0.05）。短穗兔耳草各剂量组和短管兔耳草高剂量组可显著降低TNF-α、NF-κB的含量,具有统计学意义（P＜0.01或P＜0.05）。短穗兔耳草提取物和短管兔耳草提取物给药组小鼠肝组织中TNF-α mRNA的相对表达量均显著降低（P＜0.01）。结论 短穗兔耳草和短管兔耳草乙醇提取物均具有抗急性酒精肝损伤作用,其作用与氧化应激及对炎症因子的调控相关。     

洪连对ANIT所致肝损伤小鼠的保护作用

目的:研究洪连对α-异硫氰酸萘酯(ANIT)所致黄疸型肝损伤小鼠的保护作用,并探讨其作用机制。方法:采用灌胃ANIT(100 mg·kg-1)花生油溶液造成小鼠急性肝损伤模型,连续给药7 d,末次给药1 h后取血、肝脏,检测血清中谷氨酸-丙酮酸转氨酶(ALT),天门冬氨酸转氨酶(AST),总胆汁酸(TBA),总胆红素(TBIL)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量;检测肝组织匀浆中超氧化物歧化酶(SOD),丙二醛(MDA),谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的含量,PCR检测肝组织中TNF-αmRNA的表达量,苏木素-伊红(HE)染色观察肝组织病理变化。结果:与模型组比较,洪连(1.0,2.0,4.0 g·kg-1)可显著降低肝损伤小鼠血清ALT,AST,TBIL和TNF-α的水平和肝匀浆中MDA含量,同时显著升高小鼠肝匀浆中GSH-Px的含量,洪连(2.0,4.0 g·kg-1)可显著降低肝损伤小鼠血清TBA的水平和显著升高肝匀浆中SOD含量(P0.01),洪连(1.0 g·kg-1)组TBA,SOD含量与模型组比较无统计学差异。洪连提取物各剂量组均可显著降低肝组织中TNF-αmRNA相对表达量(P0.01)。病理切片显示洪连(2.0,4.0 g·kg-1)组能显著改善肝组织的病理变化。结论:洪连对ANIT所致小鼠黄疸型肝损伤有保护作用。     

禾叶风毛菊醇提物对ANIT所致小鼠肝损伤的保护作用

目的观察禾叶风毛菊醇提物对α-异硫氰酸萘酯(ANIT)所致肝损伤小鼠的保护作用。方法将60只小鼠随机分为6组,分别为正常组、联苯双酯组、模型组、禾叶风毛菊醇提物低、中、高剂量组(1.0,2.0,4.0 g·kg-1)。采用灌胃ANIT花生油溶液的方式复制肝损伤模型,造模48h后眼静脉丛取血,测其血清中的丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、胆汁酸(TBA)、总胆红素(TBIL)、肿瘤坏死因子(TNF-α)的含量;剖取3份肝脏分别用于检测肝组织匀浆中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的含量,分析对TNF-αmRNA表达的影响,观察肝组织病理形态学变化。结果与模型组相比,禾叶风毛菊醇提物各剂量组均可显著降低肝损伤小鼠血清中ALT、AST、TBA、TBIL的含量(P0.05,P0.01);禾叶风毛菊醇提物中、高剂量组可显著降低肝损伤小鼠血清中TNF-α的含量(P0.05,P0.01)。禾叶风毛菊醇提物低、高剂量组可使肝损伤小鼠肝匀浆中SOD水平显著升高,MDA水平显著下降(P0.01);中剂量组仅对MDA水平有显著影响(P0.01);各剂量组对GSH-Px水平无显著影响。中、高剂量组均能影响肝损伤小鼠TNF-αmRNA的表达。病理切片结果显示禾叶风毛菊醇提物各剂量组对肝组织的病理变化均有改善作用。结论禾叶风毛菊醇提物对ANIT所致小鼠肝损伤有一定的保护作用,其保护作用可能与提高清除氧自由基能力,降低脂质过氧化程度以及减轻炎症反应有关。     

苗药结石草总生物碱对α-异硫氰酸萘酯所致肝损伤小鼠的保护作用及机制研究

目的研究苗药结石草总提物及总生物碱部位对α-异硫氰酸萘酯(ANIT)所致黄疸型肝损伤小鼠的保护作用,并探讨其作用机制。方法采用灌胃ANIT(60 mg·kg-1)橄榄油溶液造成小鼠急性肝损伤模型,连续给药5 d,末次给药1 h后取血、肝脏,检测血清中谷氨酸-丙酮酸转氨酶(ALT),天门冬氨酸转氨酶(AST),碱性磷酸酶(ALP),总胆汁酸(TBA),总胆红素(TBIL)和游离胆红素(DBIL)的含量;检测肝组织匀浆中超氧化物歧化酶(SOD),丙二醛(MDA),谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的含量,RT-PCR检测肝组织中FXR,CYP7A1,BSEP,MRP2 mRNA的表达量,苏木素-伊红(HE)染色观察肝组织病理变化。结果与模型组比较,结石草总提物及总生物碱各组均可显著降低肝损伤小鼠血清ALT,AST,ALP,TBIL,DBIL和TBA的水平和肝匀浆中MDA含量,且能显著升高小鼠肝匀浆中SOD和GSH-Px的含量,各组均能显著升高肝组织中FXR,MRP2 mRNA相对表达量,且高剂量组可显著升高BSEP mRNA相对表达量,并能显著降低CYP7A1的mRNA相对表达量。病理切片显示结石草总提物和总生物碱各组能显著改善肝组织的病理变化。结论结石草总提取物及总生物碱对ANIT所致小鼠黄疸型肝损伤有保护作用,生物碱部位为其抗肝损伤活性部位。     

滇结香花不同提取部位对四氯化碳诱导小鼠肝损伤的影响

目的评价滇结香花不同提取部位对四氯化碳诱导小鼠肝损伤的影响。方法取昆明种小鼠110只,随机分为空白对照组,模型组,联苯双酯组(阳性对照组,0.15 g·kg~(-1))以及滇结香花石油醚提取部位、30%乙醇提取部位、60%乙醇提取部位、90%乙醇提取部位的低、高剂量组(给药量分别为0.1,0.3 g·kg~(-1)),各剂量组连续给药7 d,腹腔注射0.2%四氯化碳花生油溶液(10 mL·kg~(-1))建立急性肝损伤小鼠模型,眼眶取血,测定血清中ALT、AST、TBIL、TBA的含量变化;小鼠肝脏处理,测定肝组织匀浆GSH、MDA、SOD含量,观察四氯化碳诱导急性肝损伤小鼠肝组织病理学变化。结果滇结香花不同提取部位不同剂量组中,除石油醚部位低剂量组、90%乙醇提取部位低剂量组外,其他剂量组均可显著降低血清中ALT、AST、TBIL水平(P0.01);除石油醚低、高剂量组外,其他剂量组均可降低血清TBA水平(P0.05,P0.01)。测定肝组织匀浆中各项指标,石油醚高剂量组和30%及60%乙醇提取部位低、高剂量组中,MDA水平明显降低,GSH、SOD水平显著升高(P0.05,P0.01);小鼠肝组织病理学变化,除石油醚低剂量组、30%乙醇提取部位低剂量组及90%乙醇提取部位低、高剂量组外,其他剂量组损伤均有明显缓解。结论滇结香花30%乙醇提取部位高剂量组及60%乙醇提取部位低、高剂量组具有保护肝组织的作用,缓解四氯化碳造成的肝损伤,并且60%乙醇提取部位其作用效果明显优于阳性对照组。其机制可能是通过阻断脂质过氧化反应,清除体内过量的自由基,保护细胞的正常代谢,维持细胞的稳定性,该研究为一种新的用药资源提供了一定的理论依据。     

痰热清注射液对ANIT诱导大鼠急性肝损伤的防护作用

目的 探讨痰热清注射液对ANIT诱导大鼠急性肝损伤的影响.方法 采用α-异硫氰酸萘酯(ANIT)灌胃诱导大鼠急性肝损伤,检测大鼠血清ALT、AST、TBA、TBIL、DBIL和IBIL水平,HE染色观察肝组织病理变化.结果 痰热清注射液各剂量组均可明显降低ALT、AST、TBIL、DBIL和IBIL水平;痰热清注射液中、低剂鼍组均可明显降低TBA水平;痰热清注射液各剂量组能明显改善肝细胞组织坏死损伤.结论 痰热清注射液对ANIT诱导的大鼠急性肝损伤具有保护作用.     

藏药长毛风毛菊对CCl_4致小鼠急性肝损伤的保护作用与机制研究

目的:研究藏药"杂赤"基原植物长毛风毛菊醇提物对四氯化碳(CCl_4)致肝损伤小鼠的保护作用与机制。方法:应用CCl4诱导小鼠急性肝损伤模型,采用全自动生化分析仪检测血清中ALT、AST的酶活性;应用ELISA试剂盒方法检测血清中TNF-α和IL-6含量;采用紫外分光光度法检测肝组织匀浆中SOD、MDA、GSH的活性;利用半定量RT-PCR技术分析肝损伤小鼠血清中TNF-α mRNA和IL-6 mRNA表达;应用石蜡包埋、HE染色技术观察肝组织形态变化。结果:与模型组相比,长毛风毛菊醇提物低、中、高剂量组可显著降低肝损伤小鼠血清中ALT、AST的水平(P0.05,P0.01),可显著降低肝损伤小鼠血清中TNF-α与IL-6的水平(P0.01,P0.05),使肝损伤小鼠的肝匀浆中SOD、GSH水平显著升高(P0.05,P0.01),高剂量组可显著降低MDA水平(P0.01)。各给药剂量组能显著下调肝损伤小鼠TNF-α和IL-6的m RNA表达(P0.01,P0.05),对肝组织的病理变化有较好的改善作用。结论:长毛风毛菊对四氯化碳所致小鼠肝损伤有较好的保护作用,其机制可能与清除自由基,下调炎症表达因子的m RNA表达相关。     

栀子苷对正常和黄疸模型大鼠的亚急性肝、肾毒性

目的:开展栀子苷对正常及黄疸模型大鼠的亚急性肝、肾毒性对比研究,为栀子临床安全用药提供科学依据。方法:SD大鼠80只,随机分为8组,空白组、栀子苷低、中、高剂量(60,180,360 mg·kg~(-1))组,黄疸模型组和α-萘异硫氰酸酯(ANIT)+栀子苷低、中、高剂量(60,180,360 mg·kg~(-1))组。黄疸模型采用ANIT造模,24 h后灌胃(ig)栀子苷。分别于给药后第7,14天,检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT),天门冬氨酸氨基转移酶(AST),总胆红素(TBIL),尿素氮(BUN),血肌酐(SCr)活性,取大鼠肝、肾组织进行病理检测。结果:与空白组比较,第7,14天栀子苷中、高剂量组TBIL,SCr明显升高(P0.05,P0.01);黄疸模型组大鼠ALT,AST,TBIL均明显升高(P0.05,P0.01)。与黄疸模型组比,第7,14天ANIT+栀子苷低、中剂量组AST显著升高(P0.01),ANIT+栀子苷中剂量组TBIL,BUN明显升高(P0.05)。ANIT+栀子苷高剂量组ig 7 d后陆续全部死亡。病理切片显示,栀子苷给药后肝肾组织出现极轻度炎细胞浸润和肾小管嗜碱性变;模型组和ANIT+栀子苷各剂量组动物均出现胆管上皮细胞增生,纤维组织增生,并且有随剂量增大病变程度加重的趋势。结论:栀子苷剂量超过180 mg·kg~(-1)(约折合栀子生药量55 g·d~(-1))连续ig给药14 d可对正常及黄疸模型大鼠造成肝、肾损伤;且剂量超过60 mg·kg~(-1)时即会加重黄疸模型大鼠已有的肝损伤,随剂量增加病变程度加重。     

短管兔耳草提取物对对乙酰氨基酚诱导小鼠药物性肝损伤的保护作用与机制

目的 以对乙酰氨基酚(APAP)诱导小鼠药物性肝损伤模型,研究短管兔耳草提取物通过Toll样受体4/核转录因子-κB(TLR4/NF-κB)信号通路对药物性肝损伤的保护作用及机制。方法 60只昆明种小鼠随机分为正常组、模型组、阳性药物组(200 mg/kg乙酰半胱氨酸)及短管兔耳草提取物低、中、高剂量组(1、2、4 g/kg),每组10只。各给药组给予相应剂量药物,正常组和模型组给予等量0.5%羧甲基纤维素钠,连续给药7 d。末次给药1 h后,除正常组外,其余各组小鼠腹腔注射250 mg/kg APAP建立急性肝损伤模型,4 h后采集血样。试剂盒检测血清中天门冬氨酸氨基转移酶(ALT)、丙氨酸氨基转移酶(AST)活性及肝组织中丙二醛(MDA)水平、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和超氧化物歧化酶(SOD)活性,酶联免疫吸附法(ELISA)检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及白细胞介素-1β(IL-1β)水平,苏木素-伊红(HE)染色观察肝组织病理变化,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测肝组织TLR4、NF-κB p65蛋白表达。结果 与模型组比较,短管兔耳草提取物高剂量组...     

四氯化碳诱导的小鼠急性肝损伤药理作用研究

目的探讨白藜芦醇对四氯化碳(CCl₄)引起的小鼠急性肝损伤的药理作用。方法购买SPF级健康昆明种雄性小鼠50只,体质量18～22 g,随机分为5组,通过腹腔注射CCl₄致使小鼠肝急性炎症损伤,不同剂量的白藜芦醇给予治疗,2周后,收集小鼠静脉血检测丙氨酸氨基转移酶(ALT)、总胆红素(TBIL)及门冬氨酸氨基转移酶(AST)的表达量;适量肝组织匀浆后,ELISA试剂盒检测各组小鼠肝内炎症因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-6和IL-1β的表达差异。肝匀浆后对丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性进行检测,观察白藜芦醇对急性肝损伤的保护作用。结果 CCl₄能够成功诱导小鼠急性肝损伤,白藜芦醇降低肝损伤小鼠血清中ALT、TBIL和AST活性,降低肝内MDA含量,提高肝内SOD、CAT活性,逆转血清中IL-6、IL-1β和TNF-α的表达,各项指标呈剂量依赖性地受到改变。结论白藜芦醇对CCl₄诱导的肝损伤小鼠具有抗炎和抗氧化作用,降低MDA的活性,提高了...     

白芍总苷及其所含主要成分芍药苷和芍药内酯苷对四氯化碳致小鼠急性肝损伤的保护作用

目的研究白芍总苷及其所含主要成分芍药苷+芍药内酯苷对四氯化碳致小鼠急性肝损伤的保护作用。方法将ICR小鼠随机分成9组,分别为正常组,模型组,联苯双酯阳性对照组(100 mg·kg~(-1)),白芍总苷低(100 mg·kg~(-1))、中(200 mg·kg~(-1))、高(400 mg·kg~(-1))剂量组,芍药苷+芍药内酯苷(8∶3)低(66 mg·kg~(-1))、中(132 mg·kg~(-1))、高(264 mg·kg~(-1))剂量组。各组按0.01 mL·g~(-1)灌胃给药,1次/d,7 d后,除正常组外其余各组腹腔注射0.15%CCl_(4 )(0.01 mL·g~(-1))建立急性肝损伤模型。17 h后取血,取材。测定血清中ALT,AST,TBIL,ALP,γ-GT,TBA水平及肝组织中SOD,MDA,GSH-Px水平;HE染色观察肝组织病理变化。结果与模型组相比,白芍总苷给药组和芍药苷+芍药内酯苷给药组均可明显改善肝脏病理变化,可降低肝损伤小鼠血清中ALT,AST,TBIL,ALP,γ-GT,TBA水平,升高肝脏组织匀浆上清中SOD,GSH-Px水平,降低MDA水平。结论白芍总苷及其所含主要成分芍药苷+芍药内酯苷对四氯化碳所致小鼠急性肝损伤有明显的保护作用。     

白花蛇舌草对肝内胆汁淤积模型大鼠的保护作用

目的:研究白花蛇舌草对α-异硫氰酸萘酯(ANIT)诱导肝内胆汁淤积模型大鼠保护作用。方法:采用灌服ANIT法建立肝内胆汁淤积大鼠模型,大鼠随机分为正常对照组、模型组、白花蛇舌草组、熊去氧胆酸阳性对照组。连续给药5 d后,测定大鼠胆管胆汁排泄量、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、门冬氨酸氨基转移酶(AST)、总胆汁酸(TBA)、胆红素(TB)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素1β(IL-1β)、肝组织病理学变化及其胆盐输出泵(BSEP)和多药耐药相关蛋白2(MRP2)表达等指标,研究白花蛇舌草对肝内胆汁淤积大鼠肝功能、胆汁酸排泄、炎症因子及肝组织病理学变化的影响。结果:与模型组比较,白花蛇舌草能显著促进胆汁排泄,降低大鼠血清中ALT、AST、TBA、TB、TNF-α、IL-1β水平(P0.01),诱导肝内BSEP、MRP2蛋白表达,改善大鼠肝组织病理学。结论:白花蛇舌草具有保护ANIT诱导肝内胆汁淤积模型大鼠肝损伤的作用。     

裸茎金腰逆转ANIT致小鼠IC型肝损伤有效部位的筛选探究

目的筛选特色裸茎金腰Chrysosplenium nudicaule Bunge(亚吉玛)逆转ANIT致小鼠肝内胆汁淤积(IC)型肝损伤的有效部位。方法灌胃ANIT的橄榄油溶液诱导小鼠急性IC,测定小鼠血清中生化指标谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、总胆汁酸(TBA)、直接胆红素(DBIL)和总胆红素(TBIL)的水平;RT-PCR法测定各极性部位对小鼠肝组织中小异源二聚体伴侣(SHP)、Na~+-牛磺胆酸转运体(NTCP)mRNA的表达的影响。结果与模型组比较,乙酸乙酯部位(EAP)和正丁醇部位(BAP)高剂量组(4.0 g/kg)能降低小鼠血清中ALT、AST、ALP、TBA、DBIL、TBIL水平(P0.05,P0.01),且能上调小鼠肝组织SHP、NTCP mRNA的表达(P0.05,P0.01)。结论乙酸乙酯和正丁醇萃取部位为裸茎金腰逆转小鼠急性IC的活性部位。     

基于TLR2/MyD88/NF-κB和NALP3信号通路探讨藏族药短穗兔耳草提取物抗慢性酒精性肝损伤大鼠的作用机制

目的:通过酒精灌胃8周建立大鼠慢性酒精性肝损伤模型,研究藏族药短穗兔耳草提取物对Toll样受体(TLR2/髓样分化因子88(MyD88)/核转录因子-κB(NF-κB)和NOD样受体蛋白3(NALP3)信号通路的影响,探讨其提取物抗慢性酒精性肝损伤的作用机制。方法:60只SD雄性大鼠随机分成正常组、模型组、联苯双酯组(0.1 g·kg^-1)及短穗兔耳草低、中、高剂量组(0.5,1,2 g·kg^-1),每日上午各给药组按10 m L·kg^-1给予相应的药物,下午梯度乙醇灌胃法给予56度白酒灌胃,连续8周后,取血,测定各组大鼠血清中天门冬氨酸氨基转移酶(AST),丙氨酸氨基转移酶(ALT),甘油三酯(TC),总胆固醇(TG)及肝脏谷胱甘肽(GSH)水平;酶联免疫吸附测定(ELISA)检测大鼠血清中白细胞介素-1β(IL-1β)水平;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测肝脏中TLR2,MyD88,NF-κB和NALP3蛋白的表达;苏木素-伊红(HE)染色观察肝脏病理学形态改变。结果:与正常组比较,模型组血清中AST,ALT,TC,TG,IL-1β水平均明显升高(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,藏族药短穗兔耳草各剂量组能降低血清AST,ALT,TC,TG,IL-1β水平,其中高剂量组的效果尤为显著(P<0.05,P<0.01)。与正常组比较,模型组肝匀浆中GSH水平下降;模型组肝组织中TLR2,MyD88,NF-κB和NALP3蛋白水平明显升高(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,藏族药短穗兔耳草各剂量组能降低肝脏中GSH水平以及TLR2,MyD88,NF-κB和NALP3的蛋白表达(P<0.05,P<0.01);肝脏病理切片表明,藏族药短穗兔耳草能改善大鼠肝组织病理变化。结论:藏族药短穗兔耳草对酒精诱导的慢性酒精性肝损伤大鼠具有一定的保护作用,其机制可能与TLR/MyD88/NF-κB和NALP3信号通路有关。     

剑叶耳草对ConA诱导的小鼠免疫性肝损伤的保护作用

目的:建立小鼠免疫性肝损伤模型,研究剑叶耳草水提物对小鼠免疫性肝损伤的保护作用。方法:采用刀豆蛋白A(Con A)尾静脉注射建立小鼠免疫性肝损伤模型,用比色分析法测定小鼠血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、总胆红素(TBIL)的活性;测定小鼠肝匀浆丙二醛(MDA)、还原型谷胱甘肽(GSH)的含量及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化物歧化酶(SOD)的活性;HE染色观察各组小鼠肝细胞损伤程度。结果:8g/kg和4g/kg剑叶耳草水提物能显著降低因Con A所致免疫性肝损伤小鼠血清异常升高的ALT、AST、ALP和TBIL;对免疫性肝损伤小鼠肝匀浆中MDA的含量明显降低,GSH含量明显升高及GSH-Px、SOD的活性有明显的升高作用。结论:剑叶耳草水提物对ConA诱导的免疫性肝损伤小鼠具有一定的保护作用,其机制可能与其抗氧自由基损伤、抑制脂质过氧化作用有关。     

二至丸煎剂及配方颗粒对小鼠急性肝损伤的保护作用

目的研究二至丸传统煎剂及配方颗粒对CCl4致小鼠急性肝损伤的保护作用。方法 90只昆明小鼠随机分成9组:正常组,模型组,联苯双酯组(150 mg·kg~(-1)),二至丸高、中、低剂量组(14.796,7.398,3.699 g·kg~(-1)),墨旱莲配方颗粒组(1.850 g·kg~(-1)),女贞子配方颗粒组(1.850 g·kg~(-1)),二至丸配方颗粒组(3.699 g·kg~(-1))。采用小鼠腹腔注射0.1%CCl_4(0.02 m L·g~(-1))油溶液复制急性肝损伤模型;检测小鼠血清中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)的含量;检测肝组织匀浆中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px),超氧化物歧化酶(SOD)的活力及丙二醛(MDA)的含量;提取肝组织中线粒体,检测线粒体中三磷酸腺苷(ATP)的含量和活性氧(ROS)水平;Western Blot法检测肝组织内氧化应激相关蛋白Sirt1、NF-κB、TNF-α的蛋白表达;q PCR法检测Sirt1、NF-κB、TNF-α基因的表达水平;通过苏木素-伊红(HE)染色观察各组小鼠肝脏病理组织学变化。结果与模型组比较,二至丸传统煎剂及配方颗粒、墨旱莲及女贞子配方颗粒均可以明显降低小鼠血清中ALT、AST及肝组织中氧化应激产物MDA的含量(P0.01),显著增强肝组织匀浆中GSH-Px、SOD的活力(P0.01),增加线粒体内ATP的含量(P0.05,P0.01)和降低线粒体内ROS水平,可以明显降低NF-κB、TNF-α的蛋白及基因表达(P0.01),同时升高Sirt1的蛋白及基因表达(P0.01);病理检查结果显示,二至丸传统煎剂、配方颗粒及女贞子、墨旱莲配方颗粒能明显减轻肝组织炎性病变。结论二至丸传统煎剂、配方颗粒及墨旱莲、女贞子配方颗粒对CCl4引起的小鼠急性肝损伤有较好的抑制效果,其机制可能与其抗氧化作用有关。     

雷公藤多苷片抗炎作用及伴随肝毒性研究

目的 研究雷公藤多苷片发挥抗炎作用剂量下伴随的肝毒性作用,为其“药效-毒性”相关性研究提供实验依据。方法 取昆明种小鼠50只,随机分为5组,即正常对照组,雷公藤多苷片高、中、低剂量组（54.6,27.3,13.7 mg·kg-1）,美洛昔康片组（3.9 mg·kg-1）,每组10只。以巴豆油混合致炎液建立小鼠耳肿胀模型,计算小鼠的耳肿胀度和肿胀抑制率,末次给药后检测血清中前列腺素E2（PGE2）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-2（IL-2）、前白蛋白（PA）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、总胆汁酸（TBA）和总胆红素（TBIL）等生化指标含量和活性的变化,并计算心、肝、脾、肾等脏器指数,进行肝组织病理学检查。结果 雷公藤多苷片在13.7~54.6 mg·kg-1范围内,可明显抑制巴豆油混合致炎液致小鼠耳肿胀,小鼠血清中PGE2、TNF-α和IL-2含量降低,血清ALT、AST、TBA、TBIL活性升高,PA含量降低,肝指数变大。组织病理学检查显示,雷公藤多苷片可引起肝细胞水肿和浸润。结论 雷公藤多苷片在13.7~54.6 mg·kg-1范围内既有明显的药效作用,又有一定的肝损伤作用,均呈现明显的“量—效—毒”关系,其抗炎机制与减少PGE2炎性介质和血TNF-α、IL-2的产生和释放有关。     

刺五加多糖调控炎性因子对小鼠免疫性肝损伤的保护作用

探讨刺五加多糖(ASPs)对刀豆蛋白A(Con A)造成的小鼠免疫性肝损伤模型的保护作用和机制。将BALB/c小鼠随机分成7组,对照组,模型组,ASPs低、中、高剂量组(36. 25,72. 5,145 mg·kg~(-1)),联苯双酯滴丸(阳性药,200 mg·kg~(-1))组,吡咯烷二硫代氨基甲酸盐(PDTC,NF-κB抑制剂,200 mg·kg~(-1))组。ASPs,联苯双酯滴丸组每天灌胃给药1次,连续7 d;对照组、模型组和PDTC组每天以10 m L·kg~(-1)生理盐水灌胃给药。于末次灌胃后,PDTC组灌胃PDTC,再于0. 5 h后,除对照组外均尾静脉注射20 mg·kg~(-1)Con A诱导肝损伤。8 h后处死动物取材,对肝脏组织进行组织病理学检查,试剂盒法检测肝组织匀浆中一氧化氮(NO)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、还原性谷胱甘肽(GSH-PX)、白细胞介素-1β(IL-1β)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,采用Western blot法检测肝组织中TNF-α,ICAM-1,i NOS和NF-κB蛋白的表达水平,探讨刺五加多糖对治疗免疫性肝损伤对肝的保护作用和机制。与模型组比较,炎性细胞浸润减轻,肝细胞胞浆疏松肿胀、核固缩浓染得以改善,ASPs显著降低肝组织匀浆中MDA,NO,IL-1β,TNF-α的含量;升高GSH-PX和SOD的含量;降低肝组织中TNF-α,ICAM-1,i NOS和NF-κB蛋白水平表达。ASPs降低炎性细胞因子和黏附因子的活性、减少炎性细胞因子的分泌和表达,对免疫性肝损伤有一定保护作用。