青藤碱对 FLS增殖及α7nAChR、TLR2和TLR4表达的影响

摘要：目的 探讨青藤碱(sinomenine, SIN)对肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)刺激的大鼠成纤维样滑膜细胞（fibroblast-like synoviocytes , FLS）增殖及α7烟碱型乙酰胆碱受体（α7 nicotinic acetylcholine receptors, α7nAChR）、Toll样受体2(toll-like receptor 2, TLR2)和Toll样受体4(toll-like receptor 4,TLR4)表达的影响。 方法 组织块法分离培养原代FLS,流式细胞术检测FLS表面标志物CD90。FLS设对照组、TNF-α组、SIN组（剂量分别为100,200,400μmol·L-1）,SIN组给予SIN干预30min后,TNF-α组、SIN组均给予20ng·mL-1 TNF-α刺激24h,采用MTT法检测各组 FLS增殖,酶联免疫吸附（ELISA）法检测细胞上清白细胞介素-6（interleukin-6, IL-6)分泌量,RT-PCR检测α7nAChR、TLR2和TLR4 mRNA表达、Western bolt检测α7nAChR、TLR2和TLR4蛋白表达。 结果 TNF-α刺激FLS后,细胞明显增殖,分泌IL-6明显增加,α7nAChR、TLR2和TLR4 mRNA及蛋白表达增加,SIN（200,400μmol·L-1）能抑制FLS增殖,抑制IL-6分泌,并且下调α7nAChR、TLR2和TLR4 mRNA及蛋白表达。 结论 FLS增殖与α7nAChR、TLR2和TLR4表达相关,且SIN能抑制FLS增殖,并下调α7nAChR、TLR2和TLR4表达。     

青藤碱对肺癌细胞A549增殖及α7 nAChR表达的影响

目的研究青藤碱对肺癌细胞增殖的影响及与α7烟碱型乙酰胆碱受体(α7 nAChR)表达的相关性。方法体外培养人肺癌细胞系A549细胞,采用CCK-8法检测24,48h不同浓度青藤碱及4-甲基亚硝氨基-3-吡啶-1-丁酮(NNK)对细胞增殖的影响,流式细胞术检测细胞凋亡情况;RT-PCR法检测A549细胞中α7 nAChR表达。结果0.1,0.25,0.5,1,2,3,4mmol·L-1青藤碱作用于A549细胞后,细胞增殖率随青藤碱剂量增加而降低。NNK能促进细胞增殖,降低细胞早期凋亡比例,并明显增加α7 nAChR的表达;青藤碱可明显抑制NNK的促细胞增殖作用,并提高细胞早期凋亡比例,降低α7 nAChR的表达。结论青藤碱能抑制A549细胞增殖,可能与降低α7 nAChR的表达相关。     

青藤碱对类风湿关节炎患者外周血树突状细胞TLR2和TLR4表达的影响

目的:观察中药单体青藤碱对类风湿关节炎患者外周血树突状细胞toll样受体(toll like receptor,TLR)2和TLR4表达的影响。方法:分离10例类风湿关节炎患者的单核细胞,采用细胞因子刺激分化为树突状细胞。分别采用青藤碱高(5mM)、中(2mM)、低(1mM)剂量和空白对照干预。实时荧光定量PCR检测各组树突状细胞TLR2和TLR4 mRNA的表达,Western-blot检测树突状细胞TLR2和TLR4蛋白的表达。结果:与对照组相比,经青藤碱高(P<0.01)、中剂量(P<0.01)干预后的树突状细胞TLR2和TLR4 mRNA表达明显降低,青藤碱干预后的树突状细胞(DC)中TLR2、TLR4表达均有所有降低。结论:青藤碱可能通过抑制树突状细胞TLR介导的炎症信号转导,而产生治疗类风湿关节炎的作用。     

青藤碱对类风湿关节炎患者外周血单核细胞TLR4、MyD88及NF-κB表达的影响

目的:观察青藤碱(SN)对脂多糖(LPS)诱导的类风湿关节炎(RA)患者外周血单核细胞TLR4/My D88/NF-κB m RNA及蛋白表达的影响。方法:采用活动期RA患者外周血进行单核细胞的分离培养,并与健康志愿者做对照。分为健康对照组、RA对照组、RA+LPS组,SN低剂量组,SN高剂量组及TAK-242组进行观察。采用RT-PCR法及Western blot法检测各组TLR4、My D88及NF-κB m RNA及蛋白的表达。结果:RA对照组TLR4、My D88及NF-κB m RNA及蛋白表达均明显高于健康对照组(P0.01);RA+LPS组均明显高于RA对照组(P0.01);SN低剂量组、SN高剂量组均明显低于RA+LPS组(P0.01),且SN不同剂量组之间差异有统计学意义(P0.01)。结论:SN可有效抑制LPS诱导的单核细胞TLR4、My D88及NF-κBm RNA及蛋白的表达,其对RA的治疗作用可能与抑制TLR4/My D88/NF-κB信号通路介导的炎症反应有关。     

内毒素对人牙周膜细胞TLR2和TLR4表达的影响

目的：观察内毒素（LPS）于不同时点刺激人牙周膜细胞对TLR2和TLR4表达的影响,探讨TLR2和TLR4在牙周病中的免疫学作用。方法：选取于体外培养的生长良好的第4代人牙周膜细胞,观察组使用LPS分别于0h、4h、8h、12h、24h对其进行刺激,并对TLR2和TLR4在牙周膜细胞中的表达情况进行检测和免疫组化评分;以未采用LPS刺激的人牙周膜细胞作为对照组,比较两组的检测和评分情况。结果：对照组TLR2和TLR4表达呈弱阳性,而采用LPS刺激后,随着时间的延长其染色液随之增强,各时点比较均有显著性差异（P〈0．05）;同时各时点的TLR2和TLR4免疫组化评分与对照组比较均有显著性差异（P〈0．05）。结论：在内毒素刺激下,TLR2和TLR4在牙周膜细胞中的表达也随之增多,在牙周免疫反应中牙周膜细胞发挥了一定作用。     

青藤碱对人肝癌细胞HepG2增殖的抑制作用

目的:研究青藤碱对人肝癌HepG2细胞增殖的影响及其机制。方法:以不同浓度青藤碱处理体外培养的A549细胞,采用MTT法检测24h、48h、72h后HepG2细胞的增殖状态;流式细胞仪测定青藤碱处理过的细胞凋亡、细胞周期分布及凋亡率,相对定量RT-PCR测定Cox-2mRNA的表达、Western blot检测细胞凋亡相关基因Cox-2的表达。结果:青藤碱能显著抑制人肝癌HepG2细胞增殖,并具有时间和剂量依赖性。青藤碱处理组细胞早期凋亡率较对照组升高,呈时间剂量依赖性。相对RT-PCR结果显示其能下调HepG2细胞Cox-2mRNA的表达。Western blot检测Cox-2蛋白表达明显抑制。结论:青藤碱在体外能有效抑制肝癌细胞增殖。     

青藤碱对MsPGN大鼠肾脏病理及TNF-a表达的影响

目的:探讨青风藤提取物青藤碱(SIN)对实验性系膜增生性肾小球肾炎(MsPGN)的病理形态学改善及肿瘤坏死因子-a(TNF-a)表达的影响。方法:实验采用改良的慢性血清病性MsPGN模型,光镜观察肾小球系膜区情况,采用免疫组织化学法和逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR)技术检测TNF-a及TNF-amRNA的表达并进行半定量分析。结果:模型组与正常组相比,系膜细胞明显增殖,系膜基质积聚;青藤碱组与模型组相比,上述病理改变明显减轻。肾组织中TNF-a免疫组化及RT-PCR结果显示青藤碱可明显下调TNF-a及TNF-amRNA的表达,与模型组相比有显著差异(P0.01,P0.05),青藤碱组与雷公藤多苷组相比,二者无统计学意义(P0.05)。结论:青藤碱能够有效减轻肾脏病理损害,抑制肾小球分泌TNF-a及下调TNF-amRNA的表达,延缓疾病进展。     

青藤碱对脂多糖诱导的神经细胞环氧化酶-2表达的影响

目的 :了解青藤碱 (sinomenine ,Sin)对PC 12细胞增殖和表达环氧化酶-2 (COX-2 )及合成前列腺素E₂(PGE₂ )的影响 ,探讨Sin对神经细胞的作用机制。方法 :采用NGF诱导培养PC-12细胞 ,用不同浓度的Sin(0,3×10^-6,30×10^-6,150×10^-6mol·L^-1)预处理后 ,加或不加脂多糖 (LPS) ,分别用³H-TdR法、竞争ELISA、半定量逆转录 聚合酶联反应 (RT-PCR)法、细胞酶联免疫法及Western blot法 ,检测PC-12细胞的增殖活性、细胞培养上清液中PGE₂ 的水平、细胞COX-2 mRNA及蛋白表达水平。同时提取各组细胞蛋白 ,测定其核转录因子NF κB活性。结果 :Sin对LPS诱导的PC-12细胞的COX-2 mRNA、蛋白表达具有不同程度的抑制作用 ,与Sin浓度呈明显正相关性,且对LPS激活的PC-12细胞的核转录因子NF-κB活性有明显的抑制作用。实验未观察到Sin对PC-12细胞增殖的影响。结论 :Sin可显著抑制LPS诱导的PC-12细胞COX-2的表达及其产物PGE₂ 的合成 ,其作用机制可能是通过Sin抑制PC-12细胞核转录因子NF-κB活性而实现。     

青藤碱对兔膝骨关节炎模型软骨Toll样受体2、4及髓样分化因子88表达的影响

目的观察不同剂量青藤碱对兔膝骨关节炎模型关节软骨中Toll样受体(TLR)2、4和髓样分化因子88(My D88)表达的影响,探讨其相关作用机制。方法采用Hulth法建立膝骨关节炎模型。实验兔随机分为空白组、模型组和青藤碱低、中、高剂量组,空白组不予任何处理,模型组和青藤碱低、中、高剂量组膝关节腔分别注射生理盐水和0.2 mL(5 mg)、0.35 mL(8.75 mg)、0.5 mL(12.5 mg)青藤碱,共干预10次。实时荧光定量PCR和Western blot检测关节软骨TLR2、TLR4和My D88的mRNA和蛋白表达。结果模型组TLR2、TLR4、My D88的mRNA和蛋白表达较空白组均显著升高(P0.01);与模型组比较,青藤碱中、高剂量组TLR2、TLR4、My D88的mRNA和蛋白表达均显著下调(P0.05,P0.01)。结论青藤碱可通过下调TLR/My D88通路中关键分子的表达抑制兔膝骨性关节炎软骨免疫反应。     

青藤碱对糖尿病大鼠脑缺血再灌注损伤Bcl-2及Bax表达的影响

目的 探讨青藤碱对糖尿病大鼠脑缺血再灌注损伤Bcl-2及Bax蛋白表达的影响.方法 采用高脂高糖饮食加腹腔注射小剂量链脲霉素建立糖尿病大鼠模型,造模成功后将大鼠随机分为假手术组、缺血再灌注组、青藤碱低剂量治疗组和青藤碱高剂量治疗组.线栓法建立局灶性脑缺血再灌注模型.青藤碱低剂量(30mg/kg)、高剂量(60mg/kg)治疗组于术前30min分别给予大鼠腹腔注射.用免疫组化法观察缺血90min再灌注24h大鼠额顶部皮质Bcl-2和Bax蛋白表达,并进行2,3,5-三苯基氯化四氮唑(TTC)染色和HE染色观察脑梗死体积及病理形态学变化.结果 (1)糖尿病大鼠脑缺血再灌注24h,缺血再灌注组Bcl-2和Bax表达增加,Bcl-2/Bax比值下降;与缺血再灌注组比较,青藤碱高、低剂量治疗组均显著增加Bcl-2表达,减少Bax表达,上调Bcl-2/Bax比值,高、低剂量组之间差异亦具有显著性.(2)青藤碱治疗组脑梗死体积较缺血再灌注组减小,高、低剂量组之间差异亦具有显著性.青藤碱治疗组脑组织缺血损伤病理学改变明显轻于缺血再灌注组,青藤碱高剂量组缺血改变亦轻于低剂量组.结论 青藤碱对糖尿病大鼠缺血再灌注脑损伤具有保护作用,其机制可能与通过增加Bcl-2表达、减少Bax表达、上调Bcl-2/Bax比值有关.     

解毒化瘀颗粒对急性肝衰竭大鼠肝组织TLR2、TLR4和TNF-α mRNA表达的影响

目的:探讨解毒化瘀颗粒对急性肝衰竭(ALF)大鼠Toll样受体2(TLR2)、Toll样受体4(TLR4)及细胞因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)mRNA表达的影响及其拮抗肝衰竭的机制。方法:将120只Wistar大鼠随机分为空白对照组、模型对照组、中药组和阳性对照组,各30只。一次性腹腔注射D-氨基半乳糖(D-Gal)/脂多糖(LPS)构建急性肝衰竭大鼠模型。观察各组大鼠存活率,检测各组大鼠血清ALT、AST水平,RT-PCR法检测肝组织中TLR2、TLR4和TNF-αmRNA的表达。结果:(1)与模型对照组比较,中药组及阳性对照组均能提高肝衰竭大鼠48 h的存活率(均P0.05),虽然中药组48 h存活率高于阳性对照组,但差异无统计学意义(P=0.464);(2)模型对照组大鼠血清AST、ALT水平均高于空白对照组(均P=0.000),中药组和阳性对照组均低于模型对照组(均P0.000),虽中药组与阳性对照组AST、ALT比较差异无统计学意义(均P0.05);(3)RT-PCR结果显示,中药组和阳性对照组TLR2、TLR4、TNF-αmRNA表达较模型对照组明显降低(均P=0.000),与阳性对照组比较,中药组TLR2、TLR4、TNF-αmRNA表达差异无统计学意义(均P0.05)。结论:解毒化瘀颗粒可通过降低TLR2、TLR4、TNF-αmRNA的表达,从而降低促炎因子的生成、提高肝衰竭大鼠存活率和拮抗肝衰竭。     

葛根素对大鼠脑缺血再灌注损伤α7nAChR、NF-кBp65及STAT3 mRNA表达的影响

目的:从胆碱能抗炎通路探讨葛根素对脑缺血再灌注大鼠脑组织α7烟碱型乙酰胆碱受体(α7nAChR)、核转录因子-кB(NF-кBp65)及信号转导子与转录激活子3(STAT3)mRNA表达的影响。方法:60只雄性SD大鼠,随机分为5组。葛根素组、α银环蛇毒素(α-BGT)组大鼠尾静脉注射葛根素;尼古丁组尾静脉注射尼古丁,假手术组和模型组大鼠均注射等量0.9%氯化钠溶液。预给药5d后,应用线栓法建立大鼠右侧大脑中动脉闭塞模型,缺血再灌注即刻;α-BGT组尾静脉注射α-BGT。再灌注24h后,观察脑梗死面积,RT-PCR法检测脑组织α7nAChR、NF-кBp65及STAT3 mRNA的表达。结果:与模型组比较,葛根素组和尼古丁组大鼠脑梗死面积显著缩小,缺血脑组织α7nAChR、STAT3 mRNA的表达显著升高,NF-кBp65 mRNA的表达显著下降(P<0.01,P<0.05);α-BGT可阻断葛根素对上述指标的影响。结论:葛根素对脑缺血再灌注具有较好的抗炎保护作用,其机制可能与激活胆碱能抗炎通路有关。     

青藤碱合用乌头原碱对CD4~+ T细胞RANKL表达和破骨细胞生成的影响

目的:研究青藤碱和乌头原碱单独或配伍使用对活化的T淋巴细胞RANKL表达和两药合用对破骨细胞生成的影响。方法:采用anti-CD3激活小鼠CD4~+T细胞,用流式细胞仪检测青藤碱、乌头原碱对小鼠辅助性T细胞RANKL表达的影响;同时用TRAP染色法观察两药合用对RANKL诱导破骨细胞生成的影响。结果:0.25~1mmol/L青藤碱能够剂量依赖性地抑制小鼠CD4~+T细胞RANKL表达;0.25、0.5mmol/L乌头原碱也能显著地降低CD4~+T细胞RANKL表达,而另一毒性较大的活性成分苯甲酰乌头原碱只在高剂量0.5mmol/L时才能下调RANKL表达。乌头原碱与低浓度青藤碱合用后能使CD4~+T细胞RANKL表达进一步降低,而苯甲酰乌头原碱与低浓度青藤碱合用后对RANKL表达无影响。研究发现,青藤碱与乌头原碱合用后对RANKL诱导的RAW264.7细胞分化成破骨细胞的抑制作用较两药单独使用明显增强。结论:青风藤和附子活性成分均可能通过下调活化的T细胞RANKL表达间接抑制RANKL诱导的破骨细胞生成和骨吸收,改善类风湿性关节炎引起的骨破坏;附子久煎后的无毒活性成分乌头原碱与青藤碱配伍使用后对T细胞RANKL表达和RANKL相关破骨细胞生成的作用均优于单用,提示中医临床使用附子时久煎不仅能够减毒,还可能更有利于配伍其它药物治疗类风湿性关节炎骨破坏。     

青藤碱对痛风性关节炎模型大鼠TNF-α,IL-1β及COX-2的影响

目的:观察青藤碱对痛风性关节炎(GA)模型大鼠关节滑膜炎性细胞因子的影响,并进一步探讨其治疗GA的作用机制。方法:选用SD大鼠90只,随机选出10只作为正常组,其余80只采用尿酸钠诱导大鼠痛风性关节炎模型,于造模7 d后筛选出造模成功(关节炎指数大于4分)的大鼠共50只,随机分为模型组、双氯芬酸钾组、青藤碱低剂量组(25 mg/kg)、青藤碱中剂量组(50 mg/kg)、青藤碱高剂量组(100 mg/kg),每组10只;双氯芬酸钾组灌胃给予25 mg/kg双氯芬酸钾,青藤碱各剂量组分别在大鼠左后肢大腿上1/3外侧肌肉注射青藤碱注射液25,50,100 mg/kg,正常组、模型组大鼠同上述肌注方法注射1 ml/kg生理盐水,每天1次,连续给药21 d。观察GA大鼠踝关节肿胀程度,通过ELISA法测定各组大鼠滑膜悬液中TNF-α和IL-1β的含量,采用免疫组化检测大鼠滑膜组织COX-2的表达。结果:模型组大鼠踝关节肿胀程度随着时间推移逐渐增加,出现踝关节肿胀严重。与模型组比较,双氯芬酸钾组及青藤碱各剂量组关节肿胀明显抑制,差异有统计学意义(P﹤0.01)。双氯芬酸钾组及青藤碱各剂量组滑膜悬液中TNF-α、IL-1β、COX-2含量明显降低,与模型组比较,差异有统计学意义(P﹤0.01);与双氯芬酸钾组比较,青藤碱高剂量组大鼠滑膜悬液中IL-1β、TNF-α的含量有显著性差异(P﹤0.05);与双氯芬酸钾组比较,青藤碱各剂量组大鼠滑膜组织中COX-2表达略高,差异有统计学意义(P﹤0.05)。结论:青藤碱能有效降低GA大鼠滑膜中TNF-α、IL-1β及COX-2的水平,抑制炎性细胞因子的恶性循环,从而对GA起到治疗作用。     

青藤碱联合甲氨蝶呤对类风湿关节炎患者IL-1,IL-17和TNF-α表达的影响

目的研究青藤碱联合甲氨蝶呤对类风湿关节炎(RA)患者体内IL-1,IL-17和TNF-α表达的影响。方法 RA患者60例随机分为2组:对照组30例给予甲氨蝶呤治疗,治疗组30例给予甲氨蝶呤联合青藤碱治疗,观察2组治疗前后的体征和相关临床指标(如DAS28、ESR、RF、CRP)变化;采用qRT-PCR法检测治疗前后IL-1,IL-17和TNF-αmRNA的表达情况。结果治疗后2组患者的体征、相关临床指标均有明显改善,治疗后治疗组外周血淋巴细胞中IL-1,IL-17和TNF-αmRNA的表达水平较治疗前及对照组更低。结论青藤碱联合甲氨蝶呤治疗可通过调节外周血淋巴细胞的免疫功能而对RA患者起到显著治疗效果。     

电针内关穴对心肌缺血再灌注损伤大鼠心肌组织中M2AChR、α7nAChR的影响

摘要：目的：观察不同频率电针内关穴对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护效应,及对心肌组织中M2AChR、α7nAChR的影响。方法：将32只大鼠随机分为假手术组、模型组、低频电针组、高频电针组,采用结扎冠状动脉前降支(LAD)的方法制备模型,电针刺激于术前7日进行。观察心电图(ECG) ST段幅值的变化,并检测大鼠血清中CK-MB、LDH的水平,检测大鼠左室心肌组织中M2毒蕈碱M2受体(M2AChR)、α7烟碱受体(α7nAChR)的表达。结果：低频电针组结扎后30min的心电图ST段、血清CK-MB、LDH的水平均较模型组显著降低(P<0.01,或P<0.05),左室心肌组织中M2AChR、α7nAChR的表达显著增加(P<0.01,或P<0.05)。高频电针组未观察到上述效应。结论：低频电针预处理能够减轻心肌缺血再灌注损伤,并可上调心肌组织中M2AChR、α7nAChR的表达。     

青藤碱对脑缺血再灌注损伤大鼠环氧化酶-2表达和血脑屏障通透性的影响

目的 探讨青藤碱( sinomenine ,Sin)对缺血再灌注损伤大鼠脑组织保护作用及对环氧化酶-2 (cyclooxygenase-2 ,COX-2) 表达和血脑屏障通透性的影响.方法 将大鼠随机分为假手术组、缺血再灌注组、Sin低剂量治疗组和Sin高剂量治疗组,线栓法建立局灶性脑缺血再灌注模型.Sin低(Sin30 mg/kg)、高剂量(60 mg/kg)治疗组于术前30 min分别给予大鼠腹腔注射.用免疫组化法观察缺血90 min再灌注24 h大鼠额顶部皮质COX-2表达及脑含水量和伊文斯蓝(EB) 含量变化,并进行2,3,5-三苯基氯化四氮唑(TTC)染色观察脑梗塞体积变化和神经症状评分.结果 Sin高、低剂量治疗组神经功能缺失评分较缺血再灌注组降低,高、低剂量组之间差异亦具有统计学意义(P<0.05).Sin高、低剂量治疗组脑梗塞体积较缺血再灌注组减小,高、低剂量组之间差异亦具有统计学意义(P<0.05).与假手术组比较,缺血再灌注组额顶部皮质COX-2表达明显增加;与缺血再灌注组比较,Sin高、低剂量治疗组COX-2表达均显著减少(P<0.05),高、低剂量组之间差异亦具有统计学意义(P<0.05).与假手术组比较,缺血再灌注组脑含水量和EB 含量明显升高;与缺血再灌注组比较,Sin高、低剂量治疗组脑含水量和EB含量明显降低(P<0.05),高、低剂量组之间差异亦具有统计学意义(P<0.05).结论 Sin对缺血再灌注脑损伤具有保护作用,其机制可能是通过抑制再灌注损伤后COX-2表达,减轻血脑屏障通透性.     

乳奥康对乳腺癌细胞株MCF-7增殖及BCL-2表达的影响

目的:探讨乳奥康对乳腺癌细胞MCF-7增殖的影响及其对BCL-2表达的影响。方法:培养乳腺癌细胞株MCF-7,采用MTT法检测乳奥康在不同浓度和不同作用时间下对乳腺癌细胞MCF-7增殖的影响;Western blotting法检测乳奥康对乳腺癌细胞BCL-2表达的影响。结果:MTT结果显示,乳奥康具有对MCF-7细胞抑制的作用,其抑制作用和浓度、作用时间呈正相关。MCF-7细胞经乳奥康作用,BCL-2的表达逐渐降低。结论:乳奥康对乳腺癌细胞MCF-7的增殖具有抑制作用,其作用机制可能是通过抑制乳腺癌细胞BCL-2的表达,从而启动炎症抑制相关机制,使肿瘤细胞发生凋亡。     

艾灸对溃疡性结肠炎大鼠结肠TLR4和TNF-α蛋白及其mRNA表达影响的研究

目的：观察艾灸对溃疡性结肠炎大鼠结肠Toll样受体4（TLR4）和肿瘤坏死因子α（TNF-α）蛋白及其mRNA表达的影响,进一步探讨艾灸治疗溃疡性结肠炎的作用机制。方法：将40只SD大鼠随机分为正常组、模型组、隔药灸组和柳氮磺胺吡啶（Sulfasalazine,SASP）组。采用隔药灸天枢和气海穴及SASP灌胃进行干预。干预结束后,应用HE染色光镜下观察各组大鼠结肠病理学变化,分别采用Western blot法和FQ-PCR法检测大鼠结肠TLR4和TNF-α蛋白及其mRNA表达。结果：造模大鼠存在结肠组织病理学损伤,隔药灸组和SASP组大鼠结肠病理学与模型组相比均有一定的改善;与正常组比较,模型组大鼠结肠TLR4和TNF-α蛋白及其mRNA表达均显著增加（P<0.05）;经隔药灸和SASP干预后,大鼠结肠TLR4和TNF-α蛋白及其mRNA表达均显著降低（P<0.05）。结论：TLR4、TNF-α可能在溃疡性结肠炎中发挥炎症损伤作用,隔药灸能下调溃疡性结肠炎大鼠结肠TLR4和TNF-α的表达,提示其机制可能是通过下调 TLR4和TNF-α表达介导的级联反应达到艾灸治疗溃疡性结肠炎的目的。