黄芩苷对溃疡性结肠炎模型大鼠NF-κB表达的影响

目的?观察黄芩苷对溃疡性结肠炎模型大鼠核因子-κB（Nuclear factor-κB,NF-κB）表达及下游炎症细胞因子的影响。方法?采用TNBS法制备大鼠溃疡性结肠炎模型,随机分为正常组、模型组、黄芩苷（Baicalin）高中低剂量组、阳性对照组（柳氮磺胺吡啶,SASP组）。给药10d后,留取结肠组织标本,观察结肠大体形态变化,采用ELISA法观察UC模型大鼠结肠组织中肿瘤坏死因子（TNF-α）、白介素-8（IL-8）和白介素-1（IL-1）的含量,采用Western blot法检测NF-κB的表达水平。结果?与模型组相比,黄芩苷100mg/kg组能显著改善结肠大体形态,黄芩苷（25、50、100mg/kg）干预后能剂量依赖性的抑制各炎症因子的分泌,黄芩苷高剂量组能降低IL-1、IL-8和TNF-α表达水平,但与SASP组比较无明显差异。黄芩苷高剂量组能降低NF-κB的水平,促进IκBα水平（P<0.05）。结论?黄芩苷能够抑制NF-κB的活化,从而发挥其在溃疡性结肠炎中的抗炎效应。      

幼年大鼠惊厥持续状态后海马CA1区Caspase-3和IL-1β的表达

目的：观察幼年大鼠惊厥持续状态（Status convulsion，SC）后海马Caspase-3和白细胞介素-1β（IL—1β）表达的变化及神经元损伤情况，探讨幼年大鼠惊厥性脑损伤的可能机制。方法：出生后21dSD雄性大鼠，随机分成A组（正常对照组）20只、B组（SC组）26只。两组又随机分为两亚组（即B1、B2，A1、A2组）。采用氯化锂-匹罗卡品法制作SC模型，并选择合格致痫模型。B组分别于惊厥后24h、72h处死；A组也于相应时间点处死。采用免疫组化法检测海马组织Caspase-3、IL-1β的表达变化；电镜观察大脑海马区组织超微结构改变。结果：大鼠SC后Caspase-3表达的IOD值随时间的延长显著升高，IL-1β于SC后24h迅速升高，72h下降。SC后24h大鼠海马CA1 IL-1β和Caspase-3的IOD值之间呈正相关（r=0．54，P〈0．01，n=8）。电镜观察结果显示SC后24h海马CA1区出现早期细胞凋亡改变，72h部分神经元出现特征性的凋亡改变。结论：SC后Caspase-3参与了幼年大鼠惊厥性脑损伤的发生发展过程，IL-1β可能参与了惊厥性脑损伤的启动过程。     

幼鼠惊厥持续状态脑损伤时依达拉奉的神经保护作用

目的 观察幼年大鼠惊厥持续状态后海马CA1区神经细胞损伤的情况,探讨依达拉奉对惊厥性脑损伤是否具有保护作用。方法 采用随机数字表法将195只幼年大鼠分为3组,依达拉奉组、惊厥持续状态组和对照组,每组65只,各组再按处死时间点不同分为4、12、24、48和72h5个亚组,每个亚组13只。采用氯化锂-匹罗卡品法制作惊厥持续状态模型,使用依达拉奉进行干预,并观察各组幼年大鼠出现惊厥发作的行为学表现;利用HE染色观察幼年大鼠脑神经元病理形态,电镜观察海马CA1区超微结构变化,原位末端标记（TUNEL）法观察神经元凋亡情况。结果两组大鼠5级惊厥率和平均惊厥潜伏期比较差异有统计学意义（P＜0.05）;与对照组相比,惊厥持续状态组和依达拉奉组12、24、48和72h海马CA1区TUNEL阳性细胞数差异均有统计学意义（P＜0.01）;在惊厥持续状态后,依达拉奉组12、24、48和72h海马CA1区TUNEL阳性细胞数均较惊厥持续状态组下降（P＜0.01）,但在4h,两组比较差异无统计学意义（P＞0.05）。结论惊厥持续状态可导致幼年大鼠海马神经元损伤,依达拉奉预处理能减轻幼年大鼠惊厥持续状态后海马神经元损伤程度,提示依达拉奉对幼年大鼠惊厥持续状态后脑损伤具有一定的保护作用。     

黄芩苷对动脉粥样硬化模型大鼠 NF-κB TAFI 及 ACE2表达水平影响

目的：观察黄芩苷对动脉粥样硬化模型大鼠的主动脉壁细胞内核因子(NF-κB)、纤溶抑制物(TAFI)及血管紧张素转换酶2(ACE2)表达水平影响,探讨黄芩苷防治动脉粥样硬化机制。方法选取健康雄性 Wistar 大鼠作为实验研究对象,分为4组,每组10只,为假手术组、模型组、黄芩苷高剂量组(黄芩苷150 mg·kg-1·d-1)、黄芩苷低剂量组(黄芩苷100 mg·kg-1· d-1)),发色底物法测定血浆 TAFI 的活性,免疫组织化学法测定主动脉壁细胞内核因子 NF-κB,ACE2表达水平。结果与假手术组相比,其余组大鼠 TAFI、ACE2活性升高,NF-κB 灰度值降低(P <0.05);黄芩苷高、低剂量组 TAFI、ACE2明显低于模型组, NF-κB 高于模型组(P <0.05)。结论黄芩苷可能通过下调 TAFI 水平,NF-κB 表达,上调 ACE2表达,发挥其抗动脉粥样硬化作用。     

黄芩苷下调NF-κB表达抑制高糖环境下肾小球系膜细胞增殖的作用

目的研究黄芩苷对高糖环境下肾小球系膜细胞（GMC）增殖的抑制作用及对NF-κB表达的影响。方法将体外培养的大鼠GMC分为六组：低糖组,高糖组,黄芩苷低、中、高剂量组、氯沙坦组,培养24、48、72 h。实验结束后根据MTT法检测结果,收集细胞并提取核蛋白,用Western blot方法检测各组NF-κB表达情况。结果高糖组在24、48、72 h时间段的吸光值均较低糖组增高,且随培养时间延长而增高明显（P〈0.05）;黄芩苷低、中、高剂量组,氯沙坦组在24 h时间段吸光值均较高糖组高,48、72 h时间段较高糖组低（P〈0.05）。Western blot结果显示,高糖组NF-κB表达量较低糖组增加。而用黄芩苷干预后,GMC中NF-κB表达量较高糖组减少,且随着浓度增加,表达量逐渐减少。结论高糖环境下体外培养的GMC存在异常增殖现象,黄芩苷能抑制高糖诱导的GMC异常增殖,且呈时间、剂量依赖关系,其机制可能与黄芩苷下调NF-κB表达有关。     

PDTC 对惊厥持续状态大鼠海马细胞凋亡及 TLR4、caspase-3表达的影响

目的观察大鼠惊厥持续状态后海马中 Toll 样受体 4（TLR4）、NF-κB 和半胱氨酸蛋白酶 -3（caspase-3）的动态表 达及神经细胞凋亡的变化,探讨吡咯烷二硫代氨基甲酸盐（PDTC）对惊厥后脑损伤的可能保护机制。 方法 将 106 只 SD 大鼠随机 分为 0.9%氯化钠组（A 组）、SC 组（B 组）和 PDTC 组（C 组）,B 组根据大鼠惊厥后处死时间（4、24、48 和 72h）,分为 B1~B4 组,B 组和 C 组大鼠惊厥持续状态模型的制作采用氯化锂 - 匹罗卡品法,C 组在大鼠制模成功后,每天腹腔注射 PDTC（100mg/kg）1 次,连用 3d,于惊厥后 72h 处死。电镜观察海马超微结构改变;免疫组化法测定大鼠海马 NF-κB/p65 的表达;RT-PCR 法检测海马 TLR4、 caspase-3 mRNA 表达的动态变化;TUNEL 法检测神经细胞凋亡数的变化。 结果 B 组大鼠海马神经元超微结构损伤存在动态变 化,72h 内病变进行性加重;C 组大鼠病理改变较 B4 组减轻。B1~B4 组海马神经元胞核内有不同程度 NF-кB/p65 的表达,且较 A 组 明显升高（P＜0.05 或 0.01）。C 组较 B4 组 NF-κB/p65 表达明显下降（P＜0.01）。B1~B4 组 TLR4、caspase-3 mRNA 的表达量均高 于 A 组 （P＜0.05 或 0.01）,且随时间延长逐渐升高,72h 达到高峰;C 组 TLR4、caspase-3 mRNA 的表达较 B4 组明显降低 （P＜ 0.05）。B 组在惊厥 24h 后海马 CA1 区 TUNEL 阳性细胞数已明显高于 A 组（P＜0.01）,72h 达高峰,而 C 组 TUNEL 阳性细胞数较 B4 组明显下降（P＜0.01）。 结论 惊厥持续状态后大鼠海马 TLR4、NF-κB/p65 和 caspase-3 的表达增强。NF-κB 抑制剂 PDTC 可 以下调 TLR4 和 caspase-3 的表达,并使神经细胞凋亡减轻;提示 TLR4/NF-κB 信号通路在惊厥后海马细胞凋亡的发生、发展过程 中起促进作用。     

甲基苯丙胺对大鼠海马5-HT、IL-6及NF-κB表达的影响

目的 研究甲基苯丙胺 (methamphetamine, METH) 对大鼠海马5-羟色胺 (5-Hydroxytryptophan、5-HT) 、白介素-6 (interleukin-6, IL-6) 及核因子-κB (nuclear factor kappa B, NF-κB) 的影响.方法 将30只SD大鼠随机分为正常对照组、METH 1 d组、METH 3 d组、METH 5 d组、METH 7 d组、每组6只.分别在每天9:00和21:00腹腔注射METH[15 mg/ (kg·次) ];每次腹腔注射METH后, 结合刻板行为观察, 对各组进行评分;建立1 d、3 d、5 d、7 d组METH急性中毒大鼠模型.于末次给药24 h后分离海马组织, 应用酶联免疫吸附试验 (enzyme linked immunoorbent assay, ELISA) 检测实验大鼠海马5-HT、IL-6的含量;Western blot检测大鼠海马NF-κBp65的含量.结果 与正常对照组比较, METH 1 d、3 d、5 d、7 d组大鼠海马5-HT含量均逐渐减少, 其中5 d组 (P<0.05) 和7 d组 (P<0.01) 差异具有统计学意义.与正常组对照组比较, METH 1 d、3 d、5d、7 d组大鼠海马IL-6的表达含量逐渐升高, 且5 d组 (P<0.01) 、7 d组 (P<0.01) 差异有统计学意义.NF-κB表达含量亦逐渐升高, 与正常组比较, 7 d组差异具有统计学意义 (P<0.01) .结论 METH可使大鼠海马5-HT含量下降、IL-6和NF-κB蛋白表达明显增加.     

利多卡因对脑缺血再灌注损伤大鼠海马组织细胞间NF-κB表达的影响

目的观察利多卡因对大鼠脑缺血再灌注损伤后海马组织细胞间NF-κB基因表达的影响,探讨利多卡因脑保护作用的机制。方法雄性SD大鼠32只,随机分为假手术组(A组)、缺血再灌注组(B组)、利多卡因大剂量组(C组)和利多卡因小剂量组(D组),缺血前10min腹腔注射。脑缺血10min再灌注24h时,断头处死大鼠。用RT-PCR技术检测海马组织NF-κB的表达,用免疫组织化学、蛋白印记(westernblot)方法检测NF-κB蛋白表达情况。结果脑缺血再灌注后海马组织NF-κBmRNA及蛋白表达水平增高,利多卡因可下调NF-κB表达,缺血再灌注后,海马区神经元细胞出现明显坏死,利多卡因可减轻海马区神经元损伤。结论利多卡因可能通过抑制NF-κB基因表达而对脑缺血再灌注损伤起到一定的保护作用。     

针刺督脉穴位对癫痫大鼠海马NF-κB表达的影响

目的探讨核因子-κB(NF-κB)在癫痫大鼠海马中的表达以及针刺督脉穴位治疗癫痫的机制。方法建立氯化锂-匹罗卡品癫痫大鼠模型,运用免疫组织化学方法观察大鼠海马中NF-κB的表达。结果空白组大鼠NF-κB免疫反应阳性细胞在细胞浆中分布较多,在细胞核内分布较少;模型组癫痫大鼠NF-κB免疫反应阳性细胞在细胞核中分布多;模型组癫痫大鼠与空白组大鼠的NF-κB比较差异有统计学意义(P<0.05);针刺组与模型组癫痫大鼠海马NF-κB比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论癫痫发作后NF-κB被激活后转移至细胞核内,其表达明显增加。针刺督脉穴位可明显抑制癫痫大鼠海马NF-κB的表达,其机理可能是使刺激冲动传入中枢神经系统,适度抑制NF-κB表达,减轻其介导的炎症反应,抑制细胞过度凋亡,降低神经元兴奋性,达到抑制癫痫目的。     

益气活血方对关节炎大鼠滑膜组织IL-8、NF-κB的影响

目的观察益气活血方对佐剂型关节炎大鼠滑膜组织IL-8、NF-κB的影响。方法随机将60只Wistar大鼠分为空白组、模型组、益气活血方高剂量组(高剂量组)、益气活血方中剂量组(中剂量组)、益气活血方低剂量组(低剂量组)、雷公藤组。除空白组外,其余大鼠通过弗氏完全佐剂诱导建立佐剂型关节炎模型。造模两周后给药,高、中、低剂量组分别给予浓度为2、1、0.5g/mL益气活血方汤剂,雷公藤组给予0.94mg/mL雷公藤多苷片水溶液,空白组和模型组给予蒸馏水10mL/kg,每日1次,持续3周。检测大鼠关节炎症指数、大鼠滑膜组织病理组织学改变及大鼠滑膜组织中IL-8、NF-κB的表达水平。结果灌胃3周后,各给药组在以上各检测指标上较模型组均有显著改变(P0.01),益气活血方高剂量组的治疗作用优于低剂量组与雷公藤组(P0.05)。结论益气活血方能改善佐剂型关节炎大鼠的关节炎症表现,其作用机制可能与抑制滑膜组织中IL-8、NF-ΚB的表达有关。     

黄芩苷通过NF-κB信号对气道上皮黏液调节因子MUC5AC和CFTR表达的影响

目的 基于核因子κB(nuclear factor kappa B,NF-κB)信号探讨黄芩苷调控气道上皮黏蛋白5AC(mucin 5AC,MUC5AC)和囊性纤维化跨膜传导调节因子(cystic fibrosis transmembrane conductance regulator,CFTR)的表达以改善病理性气道...     

过表达NF-κB对血管平滑肌细胞增殖与凋亡的影响

目的 为了明确过表达NF-κB对血管平滑肌细胞增殖和凋亡中的作用。方法 将血管平滑肌细胞HA-VSMC分为正常对照组、NF-κB过表达组和空载组。通过构建NF-κB过表达载体,转染HA-VSMC细胞后,通过MTT检测各组HA-VSMC细胞的增殖情况,流式细胞仪检测HA-VSMC细胞凋亡情况,WB 检测各组HA-VSMC细胞NF-κB相对表达情况。结果 通过酶切验证证明NF-κB过表达载体构建正确;成功转染HA-VSMC细胞后,MTT检测结果显示NF-κB被激活可以抑制HA-VSMC细胞增殖;流式检测细胞凋亡结果也证实NF-κB激活可以促进细胞凋亡。结论 NF-κB表达升高会抑制血管平滑肌细胞的增殖并促进血管平滑肌细胞的凋亡。     

尼莫地平对惊厥持续状态幼年大鼠海马GRP78、CHOP表达及细胞凋亡的影响

目的观察尼莫地平对惊厥持续状态（statusconvulsion,SC）幼年大鼠海马葡萄糖调节蛋白78／免疫球蛋白重链结合蛋白Bip（GRP78／Bip）、前凋亡因子（CHOP／GADD153）表达及神经元凋亡的影响。方法雄性幼年SD大鼠117只,随机分为正常对照组（NC组）、惊厥持续状态组（SC组）、尼莫地平预处理组（NM组）三大组;分别予生理盐水、氯化锂-匹罗卡品、尼莫地平和氯化锂-匹罗卡品进行处理,各组又均随机分为3个亚组,分别于4、24、48h处死。采用氯化锂-匹罗卡品法制作SC模型;RT—PCR技术检测海马GRP78／Bip和CHOP／GADD153mRNA表达的动态变化。原位末端标记（TUNEL）检测海马CA1区中神经细胞的凋亡。结果SC组各时间点海马CA1区TUNEL阳性细胞表达均明显高于NC组（均P〈005或001oNM组各时间点TUNEL阳性细胞较SC组低,但高于NC组（P〈0．05或0．01）。与NC组相比,SC组各时间点海马GRP78／BipmRNA和CHoP／GADD153mRNA表达均升高。NM组GRP78／BipmRNA、CHOP／GADD153mRNA表达情况与SC组表达规律类似,但表达水平有差别。结论NM预处理可以影响CHOP／GADD153和GRP78／Bip的表达,缓解内质网应激,减轻惊厥后海马神经元细胞凋亡程度。     

缬沙坦对糖尿病大鼠视网膜组织NF-κB表达影响

目的 探讨缬沙坦对糖尿病大鼠视网膜组织核因子-κB(NF-κB)表达的影响.方法 将20只Wistar大鼠随机分为正常对照组、高糖诱导视网膜病变模型组、缬沙坦处理组和缓冲液处理组,每组5只大鼠.正常对照组和模型组不做处理,缬沙坦组给予缬沙坦40 mg/kg灌胃, 缓冲液组给予相同体积缓冲液灌胃,用免疫组织化学法检测视网膜组织中NF-κB的表达水平.结果 正常对照组大鼠视网膜组织NF-κB无阳性表达,模型组、缬沙坦组、缓冲液组NF-κB表达水平均明显高于正常对照组(F=262.00,q=18.06～34.59,P<0.01);缬沙坦组NF-κB表达水平较模型组明显降低(q=15.29,P<0.01).结论 缬沙坦能降低大鼠视网膜组织中NF-κB表达水平,对糖尿病大鼠视网膜病变具有保护作用.     

糖心康对糖尿病大鼠心肌NF-κB表达的影响

目的探讨糖心康对糖尿病性心肌病的治疗作用及其作用机制。方法通过腹腔小剂量多次注射链脲佐菌素(STZ)加高热量饮食建立糖尿病大鼠心肌损伤模型,采用全自动生化分析仪测定空腹血糖、糖化血红蛋白,放免法测定胰岛素含量观察糖心康对糖尿病大鼠糖代谢及胰岛素水平的影响;采用免疫组织化学法观察糖心康对糖尿病大鼠心肌NF-κB表达的影响。结果糖心康有明显降低血糖、糖化血红蛋白及提高胰岛素水平的作用(P<0.05);糖心康对糖尿病大鼠心肌NF-κB的过度表达有显著抑制作用(P<0.01)。结论糖心康对糖尿病性心肌病有显著治疗作用,其作用机制之一是通过抑制心肌NF-κB过度表达实现的。     

芍药苷对胆红素诱导海马神经元凋亡及核因子-κB活性的影响

目的:探讨芍药苷(Paeoniflorin,PF)对胆红素诱导原代培养大鼠海马神经元凋亡和核因子-κB(Nuclear factor-κB,NF-κB)活性的影响.方法:取胎龄17～19 d胎鼠的海马神经元进行细胞培养,于原代培养第7天加入不同浓度(1、2.5、5μg/ml)PF预处理24h后,加入胆红素(10 μg/ml).经MTT法测定海马神经元细胞活力,筛选出PF预处理的适当剂量;进而采用Annexin V-FITC/PI双染色法观察此剂量PF(2.5 μg/ml)对胆红素诱导神经元凋亡形态和凋亡率的影响,并采用免疫细胞化学法检测胆红素作用后不同时间(3、6、12、24 h)神经元内NF-κB蛋白表达的变化.结果:与胆红素组比较,PF(2.5μg/ml)预处理可显著降低海马神经元凋亡率(P＜0.05);胆红素诱导海马神经元NF-κB活化(P＜0.05),3～6 h达高峰(P＜0.05);2.5 μg/ml PF可抑制胆红素作用3～6 h引起的NF-κB活化(P＜0.05).结论:采用2.5 μg/ml PF预干预24h可抑制胆红素诱导的海马神经元凋亡,可能与抑制胆红素诱导的神经元NF-κB早期(3～6 h)活化有关.     

辛伐他汀对丙烯醛暴露大鼠NF-κB表达的影响

目的通过检测辛伐他汀对大鼠肺组织中NF活性的影响,了解其对减少丙烯醛引起的气道黏液高分泌的可能机制。方法大鼠雾化吸入丙烯醛建立气道黏液高分泌模型。干预组在雾化吸入丙烯醛同时用不同浓度辛伐他汀灌胃。蛋白印迹（western blot）检测MUC5AC蛋白的表达,凝胶阻滞迁移分析方法（EMSA）检测NF-κB的活性。结果丙烯醛吸入刺激后12天,与正常对照组相比,MUC5AC蛋白、NF-κB活性增加。辛伐他汀干预后,与丙烯醛组相比,MUC5AC蛋白、NF-κB活性降低,应用甲羟戊酸后可以部分抵消辛伐他汀的作用,使MUC5AC蛋白产生、NF-κB活性增加。结论辛伐他汀可抑制丙烯醛所致气道粘液高分泌,其部分机制可能通过甲羟戊酸途径抑制NF-κB活性。     

白血病细胞中NF-κB的活化状态及其对细胞凋亡的影响

目的探讨白血病细胞株中核转录因子NF-κB的活化状态及其对白血病细胞凋亡的影响。方法流式细胞术检测白血病细胞及对照组细胞PBMC凋亡率;双荧光素酶报告基因检测各组细胞NF-κB相对活性;NF-κB抑制剂PDTC作用12h后检测各组白血病细胞NF-κB相对活性及细胞凋亡率的变化。此外,qPCR及Western Blot分别检测各组细胞凋亡相关蛋白Bax及Bcl-2的mRNA及蛋白水平的改变。结果与PBMC比较,各组白血病细胞凋亡率明显下降(P<0.05);双荧光素酶报告基因结果显示各组白血病细胞的NF-κB活性显著高于PBMC(P<0.05);PDTC作用后各组白血病细胞NF-κB活性明显下降,细胞凋亡率明显升高(P<0.05);同时,各组白血病细胞Bax的mRNA及蛋白表达水平均明显增高(P<0.05),而Bcl-2的表达水平明显降低(P<0.05)。结论白血病细胞中存在NF-κB的持续性激活,其激活可导致白血病细胞凋亡受阻。     

戊四氮点燃癫痫大鼠海马核转录因子-κB的动态表达

目的 通过研究戊四氮点燃癫痫大鼠海马核转录因子-κB(nuclear factor-kappaB,NF-κB)表达的变化,以探讨癫痫的发病机制.方法64只大鼠随机分为癫痫持续状态组(SE组,56只)和对照组(8只)戊四氮腹腔注射诱导大鼠癫痫持续状态(status epilepticus,SE),观察大鼠行为学改变,分别选取1、6、24、72 h 4个时间点(每组4只)运用免疫组化和反转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法 检测SE大鼠和对照组海马NF-κB 的表达.结果 N F-κB P65阳性细胞数各组依次为(7.3±2.9)、(12.3±3.9)、(17.9±7.1)、(43.1±6.2)、(33.3.±7.60);NF-κB mRNA表达对照组和SE 1～72 h组依次为(0.17±0.07)、(0.15±0.04)、(0.23±0.16)、(0.34±0.16)、(0.20±0.06).SE1 h组N F-κB P65 阳性表达细胞和NF-κB mRNA 的表达与对照组比较差异有统计学意义(P＞0.05),余SE组与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),SE24 h组与SE其他组比较差异有统计学意义(P<0.05).结论 NF-κB核移位即海马神经元活化是戊四氮点燃大鼠癫痫形成的重要机制,参与癫痫发病.