子宫内膜异位症患者腹腔液对子宫内膜间质细胞增殖及侵袭能力的影响

目的:探讨子宫内膜异位症(EMs)患者腹腔液对人子宫内膜间质细胞(ESC)增殖及侵袭能力的影响,为EMs发病机制研究提供依据。方法:收集非EMs患者健康内膜、EMs患者在位内膜组织和腹腔液,体外分离内膜组织、培养获得子宫内膜间质细胞;应用非EMs患者及EMs患者腹腔液分别处理健康、在位和异位ESC,采用BrdU标记法检测ESC增殖能力,Transwell细胞侵袭实验检测ESC侵袭能力。结果:EMs患者腹腔液可促进ESC增殖(P<0.05)和促进ESC侵袭能力(P<0.05)。结论:EMs患者腹腔液上调ESC增殖及侵袭能力,为EMs病灶的形成和发展机制研究提供新的依据。     

CD44v6与MMP-7在子宫内膜异位症r—AFs分期中表达的相关性研究

目的通过检测CD44v6和基质金属蛋白酶-7（MMP-7）在子宫内膜异位症（EMs）美国生育学会修订的EMs分期标准（r—Ms）不同分期中在位内膜及异位内膜、非EMs患者子宫在位内膜中的表达水平,分析它们在各r—AFs分期中的相关性。探讨CD44v6和MMP-7与EMs侵袭、种植的关系。方法采用免疫组织化学法检测EMs异位内膜（60例）、在位内膜（60例）及正常子宫内膜（60例）中CD44v6和MMP-7的表达情况,术中进行r—AFs分期。结果CIM4v6在EMs组异位内膜的表达高于在位内膜组和对照组,差异均有统计学意义（P〈0．05）;对照组CDd4v6的活性高于在位内膜组,差异有统计学意义（P〈0．05）。MMP-7与正常子宫内膜组织中呈现弱表达,在位内膜和异位内膜组织表达均明显升高,差异有统计学意义（P〈0．05）。CIM4v6和MMP-7在III～IV期并位内膜的表达强度均高于I—II（P〈0．05）,而在位内膜二者的表达强度在不同r—AFs分期中差异无统计学意义（P〉0．05）。CD44v6和MMP-7在EMs患者异位内膜中的表达具有显著相关性（r=0：726,P0．05）,并与r—AFs分期具有显著相关性（（r=0．615,P〈0．05）。结论CDd4v6和MMP-7在EMs异位内膜中高表达可能是EMs发生发展的重要因素并有协同作用。与EMs的侵袭、种植密切相关。     

缺氧诱导因子-1α、葡萄糖转运蛋白-1在子宫内膜异位症患者异位组织中的表达及意义

目的:检测缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)与葡萄糖转运蛋白-1(GLUT-1)在子宫内膜异位症(EMs)患者异位组织中的表达,探讨异位组织的缺氧现象及缺氧对EMs发生的影响.方法:运用免疫组化S-P法,检测EMs患者异位内膜组织24例、在位内膜组织10例及正常子宫内膜组织10例中HIF-1α与GLUT-1的表达.结果:HIF-1α、GLUT-1在异位内膜组织中均呈高表达,与在位内膜及正常子宫内膜组织的表达比较有显著差异(P＜0.01),且表达强度与病变部位无关,与病变程度有关.结论:子宫内膜异位症患者异位组织中存在缺氧现象,HIF-1α与GLUT-1可能共同促进了EMs的发生.     

Survivin 和Bcl-2在子宫内膜异位症中的表达及其意义

目的：通过研究凋亡抑制蛋白Survivin和Bcl-2在子宫内膜异位症（EMs）的表达及相关性,进一步探讨细胞凋亡在EMs发病机制中的作用。方法：用免疫组化EnVision法检测Survivin和Bcl-2蛋白在40例EMs异位内膜、28例EMs在位内膜及30例正常子宫内膜组织中的表达,并用TUNEL法检测其中8例EMs异位内膜、6例EMs在位内膜和8例正常子宫内膜组织中的细胞凋亡指数。结果：Survivin蛋白在EMs异位内膜、在位内膜和正常子宫内膜组织中阳性表达率分别为75．00％,50．00％和3．33％,Bcl-2蛋白在3组内膜组织中阳性表达率分别为80．00％、57．14％和23．33％,畀位内膜和在位内膜组织中Survivin蛋白和Bcl2蛋白的阳性表达率均高于对照组（P〈0．05）。Survivin和Bcl-2蛋白在EMs异位内膜和在位内膜组织中的表达呈正相关（P〈0．01）。EMs异位内膜、在位内膜组织中的细胞凋亡指数分别为（5．13&#177;1．73）％、（22．00&#177;3．85）%,均小于对照组内膜组织中凋亡指数（51．37&#177;21．14）％,P〈0．05。结论：Survivin和Bcl-2蛋白通过抑制细胞凋亡促成了子宫内膜异位症的发生、发展,并且两者在子宫内膜异位症的发生、发展中可能具有协同作用。     

MMP-3、TNF-α及VEGF在子宫内膜异位症中的表达及其意义

目的探讨基质金属蛋白酶-3(MMP-3)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和血管内皮生长因子(VEGF)在子宫内膜异位症(EMs)发生、发展中的作用。方法通过免疫组化方法分别检测MMP-3、TNF-α及VEGF在子宫内膜异位症患者在位内膜、异位内膜和正常子宫内膜中的表达。结果异位内膜MMP-3表达明显高于正常内膜(P<0.05),且高于在位内膜(P<0.05);异位内膜及在位内膜TNF-α表达高于正常内膜(P<0.05),且异位内膜高于在位内膜(P<0.05);异位内膜VEGF表达明显高于正常内膜(P<0.05),且高于在位内膜(P<0.05)。结论子宫内膜异位症异位内膜、在位内膜中MMP-3、TNF-α及VEGF的高表达在子宫内膜异位症的发生发展中起重要作用。     

凋亡相关蛋白Caspase8在子宫内膜异位症改变中的意义

目的研究在位及异位子宫内膜的Caspase8表达,探讨Caspase8在子宫内膜异位症(EMs)发生、发展中的作用。方法应用免疫组化法检测EMs组及非EMs组在位子宫及异位子宫内膜Caspase8表达,比较两组结果。结果两组标本均有Caspase8表达,EMs组在位与异位内膜的表达值均低于对照,其中异位内膜的表达值最低,差异有统计学意义(P<0.01);Caspase8在对照组子宫内膜和EMs在位内膜的分泌期表达值高于增生期,其差异有统计学意义(P<0.01);异位内膜的表达值,增生期与分泌期相比,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 Caspase8在EMs在位及异位内膜低水平表达,介导细胞凋亡失调可能是影响EMs形成和发展的重要因素之一。     

子宫内膜异位症组织IL-17和FoxP-3的表达及意义

目的 探讨子宫内膜异位症（E Ms）病人子宫内膜组织中白细胞介素17（I L-17）和转录因子Fox P-3表达及与其发病的关系。方法 应用免疫组化法检测35例EMs病人的异位内膜、20例EMs病人的在位内膜和15例正常子宫内膜组织中I L-17和Fo x P-3的表达。结果 异位内膜、在位内膜及正常内膜组织I L-17的阳性表达率分别为85 7.1%（30/35）、20.00%（4/20）和6.67%（1/15）,FoxP-3的阳性表达率分别为82.86%（29/35）、30.00%（6/20）和46.67%（7/15）。异位内膜组织I L-17和Fox P-3的阳性表达率均显著高于在位内膜及正常内膜组织,在位内膜组织I L-17的阳性表达率显著高于正常内膜组织（V2=36.32、16.23,P〈0.05）,而在位内膜组织Fo x P-3的阳性表达率与正常内膜组织比较差异无统计学意义（P〉0.05）。结论 IL-17和FoxP-3的过表达可能参与了EMs的发生发展。     

PAI-1蛋白在子宫内膜异位症组织的表达及意义

目的：探讨PAI-1蛋白在异位内膜、在位内膜厦对照组内膜的表达及意义。方法：应用免疫组化方法检测PAI-1蛋白在40例内异症组异位内膜及在位内膜，30例对照组子宫内膜的表达。结果：①PAI-1蛋白表达于异位内膜、在位内膜、对照组内膜的腺上皮细胞及间质细胞胞浆；②PAI-1蛋白在异位内膜厦对照组内膜间质细胞表达均高于腺上皮细胞（P〈0．05），而于在位内膜腺上皮细胞与间质细胞表达比较无统计学意义（P〉0．05）；③PAI-1蛋白在间质细胞表达异位内膜高于在位内膜及对照组内膜（P〈0．05），而在腺上皮细胞表达异住内膜、在位内膜、对照组内膜三者之间比较无统计学意义（P〉0．05）；④PAI-1蛋白在血管内皮细胞呈阳性表达。结论：PAI-1蛋白在异位内膜间质细胞高表达可能促使其转移、黏附、侵袭、生长，导致子宫内膜异住症的发生发展。     

Livin、PTEN蛋白在EMs组织中的表达及其意义

【目的】探讨Livin蛋白、PTEN蛋白在子宫内膜异位症(EMs)组织中的表达及其意义。【方法】选取2016年1月至2018年5月在本院病理科获取的术后EMs子宫内膜组织80例(EMs组)和因子宫肌瘤手术获得正常子宫内膜组织80例作为对照组,采用免疫组化法检测并比较两组标本中的Livin、PTEN蛋白表达水平,并分析其临床意义。【结果】EMs组的PTEN蛋白阳性表达率显著低于对照组(P<0.05);Livin蛋白阳性表达率显著高于对照组(P<0.05);AFS分期Ⅲ?Ⅳ期的EMs组患者Livin蛋白、PTE N蛋白阳性表达率与Ⅰ~Ⅱ期比较差异无统计学意义(P>0.05);EMs患者在位内膜的PTEN蛋白阳性表达率高于异位内膜(P<0.05),在位内膜的Livin蛋白阳性表达率低于异位内膜(P<0.05):【结论】EMs子宫内膜组织中Livin蛋白高表达、PTEN蛋白低表达,可能与EMs的发生有关。     

尿激酶型纤溶酶原激活物在子宫内膜异位症中的作用

目的探讨尿激酶型纤溶酶原激活物（urokinaseplasminogenactivator,uPA）在子宫内膜异位症发病机制中的作用。方法应用免疫组织化学方法检测40例子宫内膜异位症患者异位内膜及在位内膜、30例正常子宫内膜组织（对照组）中uPA蛋白表达水平。结果uPA蛋白主要定位于细胞质,异位内膜、在位内膜、对照组腺上皮细胞及间质细胞均表达uPA蛋白,且在血管内皮细胞呈阳性表达;异位内膜间质细胞uPA阳性表达率为85．0％,高于异位内膜腺上皮细胞（60．0％）（P〈0．05）,在位内膜间质细胞（57．5％）（P〈0．05）及正常内膜间质细胞（40．0％）（P〈0．05）;uPA蛋白在异位内膜I～Ⅱ期与Ⅲ～Ⅳ期的表达差异无统计学意义（P〉0．05）。结论uPA在异位内膜间质细胞的高表达促使其转移、黏附、侵袭、生长,导致子宫内膜异位症的发生、发展。     

程序性细胞死亡因子5在卵巢子宫内膜异位症组织中的表达及意义

目的探讨程序性细胞死亡因子5（PDCD5）在卵巢子宫内膜异位症组织中的表达及PDCD5对异位内膜间质细胞生物学行为的影响。 方法应用免疫组织化学法、实时定量逆转录酶链式反应法检测PDCD5在正常内膜、卵巢子宫内膜异位症患者异位内膜及在位内膜中的蛋白和mRNA表达水平。进一步分离培养异位内膜间质细胞,采用小干扰RNA敲降PDCD5,分别通过CCK-8法和TUNEL法检测在不同浓度亮丙瑞林作用下异位内膜细胞的增殖和凋亡情况。采用χ²检验比较异位、在位和正常内膜的PDCD5蛋白阳性表达率的差异,异位、在位及正常内膜组织中PDCD5 mRNA相对表达量的两两比较及不同浓度下PDCD5敲降组和对照组的不同时间的活细胞计数、不同浓度亮丙瑞林作用下细胞增殖抑制率以及凋亡率的比较采用t检验。 结果异位内膜、在位内膜及正常内膜组织中PDCD5蛋白的阳性表达率分别为30%、29%及75%,异位内膜和在位内膜的PDCD5蛋白表达均低于正常内膜,差异均具有统计学意义（χ²=8.120、7.201;P=0.004、0.007））,异位内膜和在位内膜的PDCD5蛋白表达比较,差异无统计学意义（P=0.928）。异位内膜、在位内膜及正常内膜组织中PDCD5 mRNA相对表达量分别为0.24±0.02,0.27±0.03及1.00±0.04,异位内膜和在位内膜的PDCD5 mRNA表达均明显低于正常内膜,差异具有统计学意义（t=-32.098,P<0.001;t=-28.659,P<0.001）,异位内膜和在位内膜的PDCD5 mRNA表达比较,差异无统计学意义（t=-1.617,P=0.181）。PDCD5 mRNA表达与蛋白表达水平一致。体外单纯敲降PDCD5对异位内膜间质细胞形态及增殖无明显影响。CCK-8法结果表明,随着亮丙瑞林浓度增加,PDCD5敲降组和对照组的细胞增殖抑制率均逐渐增加,不同浓度下PDCD5敲降组的细胞增殖抑制率明显低于对照组,差异均具有统计学意义（P<0.05）。TUNEL法结果表明,在0.1 μg/ml亮丙瑞林作用下,PDCD5敲降组的细胞凋亡率（0.06±0.01）低于对照组（0.13±0.02）,差异具有统计学意义（t=-5.972,P<0.001）。 结论PDCD5敲降能够减弱异位内膜间质细胞对亮丙瑞林的敏感性,使细胞凋亡减少,增殖增加。PDCD5在卵巢子宫内膜异位症组织中表达下调可能促进了子宫内膜异位症的发生发展。     

基质金属蛋白酶-2及组织金属蛋白酶抑制物-2在子宫内膜异位症中的表达及其临床意义

目的观察MMP-2和TIMP-2在子宫内膜异位症中的表达及意义。方法应用免疫组化（S-P）法检测20例正常子宫内膜、20例子宫内膜异位症的在位内膜及45例异位内膜组织中MMP-2和TIMP-2蛋白的表达。结果：MMP-2在内异症在位内膜组织、异位内膜组织阳性表达率分别与正常内膜组织比较均有显著性差异（P〈0．01）；异位内膜阳性率高于在位内膜，但在统计学上无显著性差异（P〉0．05）。TIMP-2在异位内膜组织的阳性表达率与正常内膜组织、EM在位内膜组织相比均有显著性差异（P〈0．05）；在位内膜组织的阳性表达率低于正常内膜组织，但在统计学上无显著性差异（P〉0．05）。结论：在子宫内膜异位症中MMP-2的高表达，TIMP-2蛋白的低表达，在子宫内膜异位症的发生、发展过程中具有重要作用。     

CircKRT17与miR-485-5p互作调控Wnt/β-catenin通路影响胃癌发生发展的机制研究

目的探讨circ KRT17在胃癌中的表达水平,并对circ KRT17在胃癌中的临床意义、生物学功能及内在机制进行评价。方法 2013年5月至2018年3月获得67例临床胃癌样本和对应的癌旁正常组织标本,并采用qRTPCR检测circ KRT17在胃癌组织和不同胃癌细胞株中的表达情况;分析circ KRT17的表达与胃癌患者临床病理学特征之间的关系;CKK-8法和平板克隆实验检测circ KRT17对胃癌细胞增殖能力的影响;Transwell实验检测circ KRT17对胃癌细胞迁移和侵袭能力的影响;裸鼠成瘤实验检测circ KRT17对胃癌细胞肿瘤异种移植的影响;荧光素酶报告基因检测circ KRT17与miR-485-5p以及miR-485-5p与Wnt3a之间的相互作用。结果 circ KRT17在胃癌组织中表达上调,与肿瘤分期、转移及患者预后不良密切相关。此外,降低circ KRT17表达显著抑制了胃癌细胞的增殖、迁移和侵袭,诱导了细胞凋亡。体内实验显示,敲低circ KRT17表达抑制肿瘤生长。机制上,研究发现circ KRT17作为miR-485-5p的海绵,增加Wnt3a的表达,从而激活Wnt/β-catenin信号。结论 circ KRT17/miR-485-5p/Wnt3a/β-catenin信号对胃癌的发生、发展至关重要。     

MiR-101在乳腺癌中的表达及其意义

目的:探讨miR-101在乳腺癌组织中的表达变化。方法:收集乳腺癌组织及对应的癌旁组织,以qRT-PCR方法测定miR-101在乳腺癌组织中的表达变化。在乳腺癌细胞中转染miR-101 mimics、mimics control,以qRT-PCR方法检测上调效果,MTT方法测定细胞增殖变化,流式细胞术测定细胞凋亡变化,Transwell小室测定细胞迁移和侵袭数目变化,蛋白质印迹法测定细胞中cleaved caspase-3和MMP-2蛋白表达变化。结果:miR-101在乳腺癌组织中的表达水平明显低于癌旁组织(P<0.05)。与miR-NC比较,miR-101细胞中miR-101表达水平升高,细胞增殖能力降低,细胞凋亡率升高,细胞侵袭和迁移数目下降,细胞内的cleaved caspase-3蛋白水平表达升高,MMP-2蛋白表达水平减少(P<0.05)。结论:MiR-101在乳腺癌组织中表达下调,上调miR-101抑制乳腺癌细胞增殖、侵袭和迁移并诱导细胞凋亡。     

MiR-139-5p通过靶向NFAT抑制卵巢癌SKOV3细胞的生长、集落形成、侵袭和迁移

目的:探究miR-139-5p对卵巢癌SKOV3细胞的生长、集落形成、侵袭能力以及迁移能力的影响及其机制。方法:采用qRT-PCR检测卵巢癌患者癌组织和卵巢癌细胞SKOV3中miR-139-5p表达情况。MiR-139-5p mimic转染SKOV3细胞,WST比色实验、集落形成实验和Transwell实验分别检测细胞的活性、集落形成、侵袭和迁移能力。采用TargetScan在线软件筛选miR-139-5p的潜在靶基因NFAT,并进一步验证。结果:MiR-139-5p在卵巢癌组织和SKOV3细胞中表达异常降低。MiR-139-5p过表达显著抑制SKOV3细胞的生长、集落形成、迁移及侵袭能力。NFAT是miR-139-5p的靶基因。过表达NFAT能逆转miR-139-5p过表达对SKOV3细胞集落形成、侵袭能力以及迁移能力与侵袭的抑制作用。结论:MiR-139-5p通过抑制靶基因NFAT来抑制卵巢癌SKOV3细胞的生长、集落形成、侵袭和迁移能力。     

荧光定量PCR检测子宫内膜异位症病人基质金属蛋白酶基因的方法

目的:探讨基质金属蛋白酶-2、3(matrix metalloproteinase-2、3)、金属蛋白酶组织抑制物-2(tissueinhibitor of metalloproteinase-2)TIMP-2的mRNA的定量检测方法,以及它们的检测对研究子宫内膜异位症的发生的意义.方法:使用实时荧光PCR( real-time PCR)法在正常妇女子宫内膜、子宫内膜异位症妇女正位内膜及异位内膜进行MMP-2、MMP-3、TIMP-2的mRNA的定量分析.结果:实时荧光定量PCR法可以较准确地检测出正位内膜及子宫内膜异位症妇女的宫内膜囊肿的MMP-2、MMP-3、TIMP-2 mRNA的相对含量.子宫内膜异位症妇女异位内膜的MMP-2、MMP-3、TIMP-2 mRNA含量均高于正常对照(P＜0.05).结论:实时定量PCR方法是一种较准确地检测基因含量的方法,检测MMPs、TIMPs的mRNA表达具有灵敏度高、相对定量方法简便易行的优点,可以为子宫内膜异位症的发病机制的研究、治疗方法的评估、新药的研制及筛选提供更准确的基因水平信息,有望成为临床应用的检测手段.     

MIF和VEGF在子宫内膜异位症组织中的表达及临床意义

目的探讨巨噬细胞移动抑制因子(MIF)和血管内皮生长因子(VEGF)在子宫内膜异位症(Ems)组织中的表达情况及其两者的相关性。方法应用免疫组织化学技术对50例EMs组织中的MIF和VEGF蛋白的表达情况进行研究。结果 MIF在Ems中异位内膜的表达明显高于在位内膜(P0.05),在位内膜中的表达明显高于正常对照内膜(P0.05);VEGF在Ems中异位内膜的表达同样明显高于在位内膜(P0.05),在位内膜中的表达高于正常对照内膜(P0.05);MIF和VEGF表达呈正相关。结论 MIF和VEGF在异位内膜中的表达呈明显的正相关,提示MIF与VEGF协同促进异位内膜的生长。