恶性黑色素瘤冷冻瘤苗激活的TIL在体外抗肿瘤活性的研究

目的 寻求提高肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)的抗肿瘤活性。方法 通过应用恶性黑色素瘤冷冻瘤苗来激活TIL，观察其抗肿瘤活性的改变。结果 经冷冻瘤苗激活的TIL在培养扩增10、20、30和40d的体外对自体恶性黑色素瘤细胞的杀伤率均有明显提高，其中以培养扩增30d时为最高。结论 经恶性黑色素瘤冷冻瘤苗激活的TIL具有更高的体外杀伤自体恶性黑色素瘤细胞的能力。     

冷冻瘤苗刺激的肿瘤浸润性淋巴细胞体外增殖及抗肿瘤活性研究

目的　研究两种不同肿瘤组织中分离的肿瘤浸润性淋巴细胞在冷冻瘤苗刺激下的增殖反应和抗肿瘤作用。方法　利用冷冻瘤苗刺激从肝癌组织、头颈恶性肿瘤组织手术标本中分离得到的TIL ,在培养 3 0天后 ,观察TIL的增殖反应及抗肿瘤活性。结果　冷冻瘤苗刺激后的TIL与未经冷冻瘤苗刺激的TIL相比 ,扩增倍数无显著差异。但抗肿瘤活性显著提高。结论　冷冻瘤苗刺激可使TIL的肿瘤杀伤活性大为增强 ,但并不能使TIL细胞更有效地扩增。     

冷冻瘤苗刺激的肿瘤浸润性淋巴细胞体外增殖及抗肿瘤活性研究

目的 研究两种不同肿瘤组织中分离的肿瘤浸润性淋巴细胞在冷冻瘤菌刺激下的增殖反应和抗肿瘤作用。方法 利用冷冻瘤苗刺激从肝癌组织、头颅恶性肿瘤组织手术标本中分离得到的ＴＩＬ,在培养３０天后,观察ＴＩＬ的增殖反应及抗肿瘤活性。结果 冷冻瘤苗刺激后的ＴＩＬ与未经冷冻瘤苗刺激的ＴＩＬ相比,扩增倍数无显著差异。但抗肿瘤活性显著提高。结论 冷冻瘤苗刺激可使ＴＩＬ的肿瘤杀伤活性大为增强,但并不能使ＴＩＬ细胞更有效地扩增。     

脐血及外周血中细胞毒性T细胞的体外诱导及杀瘤活性研究

目的　在体外研究卵巢癌细胞诱导脐血来源的CTL的扩增及其杀瘤活性。探索其用于卵巢癌过继免疫治疗的可行性。方法　从脐血中分离出单个核细胞 ,用不同剂量的SKOV 3细胞及IL -2刺激扩增 ;用FCM检测表型变化 ,MTT比色法检测其对SKOV 3及K 5 62的杀伤活性 ,并与用同样方法所得外周血来源CTL细胞相对照。结果　用 2× 10 6个 /ml的卵巢癌细胞可诱导脐血CTL细胞较高的杀伤活性为 5 3 .46%± 8.45 % ;诱导 10天后杀伤SKOV 3活性为 44 .0 9%± 6.95 % ,杀伤K 5 62的活性为41.0 3 %± 5 .79% ,CD3、CD4、CD 8及CD4/CD8值分别为 5 2 .0 0± 9.5 0、3 6.0 0± 4.80、3 8.0 0± 10 .2 0、1.10± 0 .40。结论　应用适当剂量的抗原可诱导较高活性的脐血源CTL ,对卵巢癌细胞株有较高的杀伤活性     

TIL抗肿瘤治疗的进展

肿瘤浸润性淋巴细胞（tumor infiltrating lymphocyte,TIL)增殖速度快，免疫活性强，比淋巴因子激活的杀伤细胞（lymphokine activated killer cells,LAK)具有更强的特异杀瘤活性，与化学治疗及中医中药联用疗效更好。     

肝癌瘤苗激活的TIL的临床应用研究

目的：探讨经肝癌瘤苗激活的ＴＩＬ治疗原发性肝癌的作用。方法：使用冷冻方法制成肝癌瘤苗,用于激活ＴＩＬ。对３６例原发性肝癌患者使用经肝癌瘤苗激活的ＴＩＬ治疗,并检测治疗前后其ＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ８、ＣＤ４／ＣＤ８比例和ＮＫ活性的变化,计算其１ａ、２ａ、３ａ生存率,并与对照组相比较。结果：应用经肝癌瘤苗激活的ＴＩＬ患者,其ＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ４／ＣＤ８比值和ＮＫ活性明显升高,ＣＤ８则明显下降,其３ａ生存率明显升高。结论：应用经肝癌瘤苗激活的ＴＩＬ治疗,能明显地提高原发性肝癌患者的免疫功能和远期疗效。     

肺鳞癌TIL的体外扩增、抗瘤活性及表型分析

本文对8例人原发性肺鳞癌的TIL进行分离培养并检测了TIL的抗瘤活性及细胞表型。结果表明8例TIL的平均扩增倍数为430;TIL在10．30天之间显示出高水平的非特异性杀伤活性,10-20天时对A1及Daudi的杀伤百分率分别为79．2％和43．4％,20．30天时分别为51．7%和27．9%。非特异杀伤活性在30天以后降至较低水平。     

肝癌（H22）固化瘤苗的免疫实验研究

应用高温固化结合手术切除治疗肝癌曾作介绍.随访发现高温免疫远位效应.为研究此种治疗方法与免疫的关系.应用小鼠移植性肝癌H_(22)在65℃/5min射频条件下制备成固化瘤苗.用该瘤苗免疫小鼠(BALB/C)发现能特异性主动免疫抗同源H_(22)3×10~8癌细胞的攻击,抗癌率为86.6%,未出现瘤苗促癌生长现象.与对照组鼠比较,具有显著细胞免疫效应.认为固化瘤苗的实验有临床应用研究价值.     

树突状细胞诱导的抗肿瘤免疫预防肝癌转移

目的 探讨树突状细胞（ＤＣ）体外诱导的抗肿瘤免疫在肝癌患者体内的抗转移作用。方法 直癌患者外周血ＤＣ及Ｔ淋巴细胞,ＨｅｐＧ２细胞抗原激活ＤＣ,粒／巨噬细胞集落刺激因子和白细胞介素－４联合刺激ＤＣ,ＤＣ诱导自体Ｔ淋巴细胞增殖分化为细胞毒性Ｔ细胞（ＣＴＬ）,ＤＣ及其诱导的ＣＴＬ回输肝癌患者,检测肝癌患者外周血ＡＦＰ为ｍＲＮＡ。结果 ＡＦＰ ｍＲＮＡ阳性组经ＤＣ及其诱导的ＣＴＫ,治疗２月后,治疗组９例Ａ     

多抗甲素对树突状细胞瘤苗体外抗肿瘤活性的影响

 目的 研究多抗甲素（Polyactin A,PA）对树突状细胞（Dendritic cell,DC ）瘤苗体外抗肿瘤活性的影响。 方法 用GM-CSF、IL-4、TNF-α体外诱导扩增脐血单个核细胞（CBMCs）中的DC,24h后将凋亡、坏死的HeLa、HepG2细胞分别加入CBMCs共孵育,使DC接受肿瘤细胞全抗原刺激,成为DC瘤苗,之后再加入PA刺激活化DC瘤苗,3天后以CBMCs为效应细胞（另设未加PA组为对照）,以相应的肿瘤细胞为靶细胞,用MTT法测定不同效靶比下效应细胞对HeLa、HepG2细胞的杀伤率。 结果加入PA后,CBMCs对HeLa、HepG2细胞的杀伤率显著提高,明显高于未加PA组。 结论PA可增强DC瘤苗对相应肿瘤的杀伤率。     

树突状细胞体外诱导高效而特异的抗结肠癌免疫

为达到以结肠癌患者外周血树突状细胞（ＤＣ）在体外诱导抗结肠癌免疫反应的目的，以结肠癌细胞系ＬＯＶＯ肿瘤细胞的肿瘤抗原粗提物激活并经ＧＭ－ＣＳＦ及ＩＬ－４联合刺激的结肠癌患者外周血树突状细胞（ＤＣ）体外能够诱导自体混合Ｔ淋巴细胞增殖、分化为ＣＴＬ，该ＣＴＬ及其上清液对ＬＯＶＯ肿瘤细胞均有强大的杀伤力，而对ＨｅｐＧ２肿瘤，该ＣＴＬ细胞及ＨＯＳ－８６０３肿瘤细胞仅有微弱的细胞毒作用。结果表明结肠癌患者外周血ＤＣ体外能够诱导高效而特异抗结肠癌免疫反应。提示ＤＣ作为一新概念上的肿瘤疫苗可能在肿瘤治疗及预防中发挥重要作用     

原发性肝癌放射治疗后肿瘤完全消失21例分析

原发性肝癌放射治疗后肿瘤完全消失尚未见报道，本文报道１９７９～１９９１年间我科治疗的２１例原发性肿癌患者，经放射治疗后肝内肿瘤完全消失，１年、３年、５年、１０年生存率分别为１００％（２１／２１）、７８．９％（１５／１９），５６．３％（９／１６）和３３．３％（３／９），提示放射治疗后若肝内肿瘤完全消失，有可能获得长期生存。本文尚分析了肝内肿瘤完全消失与放射剂量、肿瘤直径和综合治疗有关。     

树突状细胞诱导的抗大肠癌免疫预防裸鼠移植瘤发生并抑制其生长

目的　研究大肠癌患者外周血树突状细胞（ Ｄ Ｃ）体外诱导抗肿瘤免疫反应能否预防裸鼠移植瘤发生及抑制裸鼠移植瘤生长。方法　联合应用粒／巨噬细胞集落刺激因子（ Ｇ Ｍ Ｃ Ｓ Ｆ）及白介素４（ Ｉ Ｌ４）从大肠癌患者外周血中培养出 Ｄ Ｃ;人大肠癌细胞系 Ｌ Ｏ Ｖ Ｏ 细胞的肿瘤抗原粗提物刺激 Ｄ Ｃ; Ｄ Ｃ激活同源的 Ｔ 淋巴细胞; Ｄ Ｃ激活的 Ｔ 淋巴细胞预防性接种于裸鼠皮下,观察随后接种的人大肠癌细胞系 Ｌ Ｏ Ｖ Ｏ 移植瘤发生率;观察 Ｄ Ｃ 激活的 Ｔ 淋巴细胞抑制已接种于裸鼠的人大肠癌细胞系 Ｌ Ｏ Ｖ Ｏ 移植瘤生长。结果　 Ｄ Ｃ 体外激活的 Ｔ 淋巴细胞明显能预防裸鼠人大肠癌细胞系 Ｌ Ｏ Ｖ Ｏ 移植瘤发生（预防组 １０％ , 对照组 １００％ , Ｐ＜ ０００１）; Ｄ Ｃ 体外激活的 Ｔ 淋巴细胞抑制该移植瘤生长〔对照组、治疗组 及加强 治疗组 肿瘤 大小分 别为 ８７３ｍ ｍ ２ ±１９ｍ ｍ ２ 、５６９ｍ ｍ ２ ±１７ｍ ｍ ２ 、３６１ｍ ｍ ２ ±２６ｍ ｍ ２ , Ｐ＜ ００５ 及 Ｐ＜ ００１〕。结论　大肠癌患者外周血 Ｄ Ｃ体外诱导的抗肿瘤细胞免疫反应不仅能预防人大肠癌细胞系 Ｌ Ｏ Ｖ Ｏ 裸鼠移植瘤发生,而且能抑制该移植瘤生长     

用原位杂交对树鼩肝组织乙型肝炎病毒DNA定位及其与黄曲霉毒素B_1在肝癌发生中的作用

用生物素标记的HBV DNA探针对经83～158周实验的55只树鼩肝组织的福尔马林固定、石蜡包埋的切片进行原位分子杂交研究。在45只接种过人HBV的树鼩中,有30只在肝细胞检出HBV DNA。这55只树鼩,有41只摄入了AFB_1,其中肝细胞HBV DNA阳性的A组22只,有10只发生了HCC;19只HBVDNA阴性的B组,只发生2例HCC,两组差别显著(P<0.05)。未接触过AFB_1的14只树鼩中,肝细胞HBVDNA阳性的8只(C组),发生1例HCC;而HBV DNA阴性的6只(D组)无HCC发生。提示HBV和AFB_1在诱发树鼩HCC中起协同作用;并支持HBV感染与HCC存在病因学关系的观点。该实验HBV DNA阳性物质主要分布于癌外肝细胞胞浆内,少数位于肝细胞核。癌组织内HBV DNA阳性率低于癌外肝组织。与在人肝癌研究的结果一致。表明树鼩是研究HBV致癌分子机理的较好的模型。     

肝癌病人的氮－乙酰化酶多态性研究

代谢酶多态性决定着对致癌化学物的易感性和耐受性，是肿瘤发生的遗传先决影响因素之一。本文首报了肝癌病人中氮－乙酰化酶多态性研究。４６例肝癌病人中１９例为慢型（４１．３％）；而当地的代表人群，中学生１１４４人中２３２为慢型（２０．７％）；基因频率分别为：０．６４２７及０．４５０３，两者之间有显著差异。从中推算的乙酰化酶慢型者的肝癌的相对危险度为２．７７（１．５５－４．９６）。本调研为肝癌的病因学研究提供了新的线索。     

A STUDY ON THE TREATMENT OF GASTRIC CANCER BY CD GENE COMBINED WITH 5-FC IN VITRO AND IN VIVO

Gastric cancer is one of the most frequentlyoccurring carcinoma in China. The effect of currentmethods such as surgical, radiotherapeutic andchemotherapeutic treatment against middle stage and advanced gastric cancer is not satisfactory. The gene therapy started a new way to the treatment of malignant diseases. The enzyme/prodrug system that increases the drug sensitivity of tumor cells has emerged as an effective method of selective elimination of tumor cells. This kind of drug sensitive ge…     

端粒酶抑制剂对肿瘤细胞及其端粒酶活性的影响

目的：探讨端粒酶抑制剂作为肿瘤治疗药物的可行性。方法：选择人结肠癌细胞株ＨＣ８６９３、人肺癌细胞株Ａ５４９以及人肝癌细胞株Ｌ７４０２作为靶细胞,观察３’－叠氮－３’－脱氧胸腺核苷（ＡＺＴ）和人端粒酶模板区的硫代反义寡核苷酸（Ｓ－Ｏｌｉｇｏｓ）对上述几种肿瘤细胞株的作用,用ＭＴＴ试验测定细胞毒作用;＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入试验测定细胞增殖速度;用端粒重复序列扩增法（ＴＲＡＰ）半定量方法测定细胞增殖速度;用     

腺病毒介导IL-2基因转染的瘤苗体内抗肿瘤作用

目的 :探讨重组腺病毒介导的 IL- 2基因转染的瘤苗的体内抗肿瘤作用及其免疫学机制。方法 :应用腺病毒介导的鼠 IL- 2基因转染 CT2 6小鼠结肠癌细胞 ,灭活后用作瘤苗治疗荷瘤小鼠 ,观察皮下肿瘤生长及其存活期。采用乳酸脱氢酶释放法检测荷瘤小鼠脾细胞 CTL、L AK、NK细胞的杀伤活性。结果 :鼠 IL- 2基因转染瘤苗治疗能显著抑制荷瘤小鼠皮下肿瘤生长并明显延长其存活期 (P<0 .0 1)。体内免疫功能检测表明 ,鼠 IL- 2基因转染疫苗治疗组小鼠脾细胞 CTL 活性、L AK活性和 NK活性显著高于对照组 (P<0 .0 1)。结论 :腺病毒介导鼠 IL- 2基因转染的瘤苗体内具有较强的抗肿瘤效应 ,其机制可能是提高了荷瘤小鼠特异性和非特异性抗肿瘤免疫反应     

环磷酰胺诱导小鼠HAC肝癌细胞凋亡和抑制增殖的体内实验研究

目的 探讨环磷酰胺对荷瘤鼠ＨＡＣ肝癌细胞凋亡和增殖的影响。方法 建立小鼠ＨＡＣ肝癌荷瘤模型,用ＴＵＮＥＬ法和免疫组化法检测环磷酰胺作用下,ＨＡＣ肝癌细胞的凋亡和ＰＣＮＡ表达的变化。结果 １５ｍｇ／ｋｇ环磷酰胺的抑瘤率４３％。ＨＡＣ肝癌细胞的凋亡指数１．９３％,较荷瘤对照组１．１１％明显升高（Ｐ〈０．０５）。增殖指数３５．７５％,较荷瘤对照组５６．３８％明显下降（Ｐ〈０．０１）。结论 环磷酰胺有诱导