山核桃树枝水煎剂对荷瘤小鼠抑瘤作用及对p53和PCNA表达的影响

[目的]探讨山核桃树枝水煎剂(DJM)对S180荷瘤小鼠的抑瘤作用及对p53和增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白表达的影响。[方法]采用免疫组织化学方法检测小鼠S180肿瘤组织中的p53蛋白和PCNA蛋白含量。[结果]DJM对荷瘤小鼠的抑瘤率为35.68%;DJM对小鼠肉瘤S180肿瘤组织中p53和PCNA的表达较模型组明显减少(P<0.05)。[结论]DJM对荷瘤鼠S180肿瘤组织的生长具有明显抑制作用;DJM可通过抑制肿瘤组织中突变型p53和PCNA的表达来发挥抗肿瘤的作用。     

氯化两面针碱诱导人肝癌细胞SMMC-7721凋亡及机制研究

目的:研究氯化两面针碱在体外诱导SMMC-7721细胞凋亡的作用与机制。方法:通过MTT法测定氯化两面针碱细胞毒作用,通过酶解可见光底物DEVD-pNp法测Caspase-3的活性;免疫组化技术研究氯化两面针碱对SMMC-7721细胞中p53、bax和bcl-2三种细胞凋亡相关蛋白表达的影响,透射电镜观察细胞的超微结构。结果:氯化两面针碱作用SMMC-7721细胞48h后的IC50值为3.8μg/ml;药物处理后的细胞中p53、Bax蛋白水平表达显著增强,Bcl-2蛋白水平表达减弱,与对照组比较,差异有统计学意义,典型的凋亡形态学特征表现出细胞核裂解、染色质聚集、细胞膜皱缩、有空泡形成,出现凋亡小体。结论:氯化两面针碱对SMMC-7721细胞有明显抑制作用,其机理可能与恢复p53的功能,激活Caspase-3的活性,Bcl-2/Bax的表达进行性下调,诱导细胞凋亡有关。     

珍珠梅提取物的体内抑瘤作用及其机理研究

目的：探讨珍珠梅醋酸乙酯提取物对S180荷瘤小鼠体内的肿瘤抑制作用及机理。方法：按照标准方法给36只小鼠接种S180肉瘤后，给予珍珠梅提取物10 d，观察瘤重及体重，免疫组织化学方法检测肿瘤组织中的hcl-2和p53蛋白，比色分析法检测血清SOD，GSH-Px的活性及MDA含量的变化。结果：给予珍珠梅醋酸乙酯提取物的小鼠瘤重明显小于对照组，实验组与对照组体重变化无显著性差异：对照组的bcl-2和p53蛋白的表达率明显高于实验组，实验组的SOD，GSH-Px活性高于对照组，而MDA含量低于对照组。结论：珍珠梅醋酸乙酯提取物对小鼠S180肿瘤有抑制作用，并有可能影响bcl-2和P53的表达及清除体内自由基。     

桦菌芝多糖对S180瘤组织p53蛋白表达的影响

目的:观察桦菌芝多糖对小鼠移植型肉瘤(S180)的抑制作用及对瘤组织p53蛋白表达的影响。方法:建立S180小鼠动物模型,取瘤组织称其质量,计算抑瘤率;用链霉菌抗生素蛋白-过氧化酶免疫组化法来测定瘤组织中p53蛋白含量,通过多媒体图像分析系统分析实验结果。结果:桦菌芝多糖高、中剂量组抑瘤率分别为41.84%、41.13%,桦菌芝多糖高、中剂量组S180瘤组织突变型p53蛋白表达减少,与模型组比较差异显著(P0.05)。结论:桦菌芝多糖对小鼠肉瘤S180有抑制作用,可下调小鼠S180瘤组织突变型p53基因表达。     

氯化两面针碱对人食管癌Eca109细胞抑制作用及机制研究

目的探讨氯化两面针碱对人食管癌Eca109细胞的抑制作用及其诱导凋亡的分子机制。方法采用CCK-8法检测不同浓度的氯化两面针碱不同的干预时间对Eca109细胞的增殖抑制率。依据CCK-8法的结果将实验设4组,各组氯化两面针碱的终浓度分别为0、5、10、15μmol/L,药物作用时间为48 h。以AnnexinV-FITC/PI双染法流式细胞术检测凋亡率;以实时荧光定量PCR(q RT-PCR)法检测Caspase-3、Caspase-9和Noxa的m RNA表达;采用Westernblotting法检测cleaved Caspase-3、Bcl-2、p53和Noxa的蛋白表达水平。结果氯化两面针碱对Eca109细胞具有增殖抑制作用,一定范围内呈时间和浓度依赖性。流式细胞术结果显示,5μmol/L的氯化两面针碱主要诱发早期凋亡(P0.01);10、15μmol/L的氯化两面针碱主要诱发的是晚期凋亡(P0.01)。q RT-PCR结果显示,Caspase-3、Caspase-9和Noxa的m RNA表达均随氯化两面针碱的浓度增加而升高,其中10、15μmol/L组升高比较显著。Western blotting法结果显示,cleaved Caspase-3、p53和Noxa的蛋白水平均随氯化两面针碱浓度的增加而升高(P0.01),但Noxa的升高在5μmol/L组不显著,在10、15μmol/L组升高明显(P0.01);Bcl-2蛋白的表达随着氯化两面针碱浓度的升高而降低,10、15μmol/L组较为显著(P0.05、0.01)。结论氯化两面针碱对Eca109细胞的增殖抑制作用主要是通过诱导凋亡实现的,氯化两面针碱诱导Eca109细胞的凋亡与p53和Noxa的表达升高和Bcl-2的下调以及Caspase-3的活化有关。     

塔斯品碱对小鼠S180肉瘤的抑制作用及其机制探讨

目的：研究塔斯品碱对小鼠S180肉瘤生长的抑制作用及其机制。方法：建立小鼠S180肉瘤动物模型,利用该模型观察塔斯品碱的体内抗肿瘤作用。通过免疫组织化学Elivision plus法检测肿瘤组织内微血管密度(MVD)及血管内皮细胞生长因子(VEGF),碱性成纤维细胞生长因子(bFGF),凋亡基因Bcl-2,Bax蛋白表达情况。结果：塔斯品碱对小鼠S180肉瘤具有抑制作用,瘤体血管内的VEGF,bFGF,Bcl-2,Bax蛋白表达逐渐下降,Bax/Bcl-2比值逐渐上升,存在良好的量效关系。结论：塔斯品碱能够抑制小鼠S180肉瘤的生长,其机制可能与降低瘤体组织内VEGF,bFGF,Bcl-2和Bax的蛋白表达,促进血管内皮细胞凋亡有关。     

氯化两面针碱对人肝癌HepG2裸鼠移植瘤的抑制作用

目的研究氯化两面针碱对肝癌HepG2裸小鼠移植瘤的的抗肿瘤作用及机制。方法观察氯化两面针碱对肿瘤重量、体积的影响,电镜观察肿瘤细胞超微结构改变,TUNEL法分析其对细胞凋亡的影响。结果氯化两面针碱2.5,5,10mg.kg-1剂量对肝癌HepG2的抑制率分别为12.06%,35.63%和60.91%,电镜下可见NC给药组肿瘤细胞核染色质浓缩并边缘化,核碎裂,胞浆空泡化;TUNEL染色凋亡细胞明显增多,凋亡指数为(27.5±3.6)%。结论氯化两面针碱可以抑制肝癌HepG2的生长,其机制与促进肿瘤细胞凋亡有关。     

氯化两面针碱对人鼻咽癌细胞生长和转移的抑制作用

目的:探讨氯化两面针碱(nitidine chloride,NC)对表皮生长因子受体酪氨酸激酶(EGFR-TPK)的抑制作用,并阐明其对人鼻咽癌CNE-2细胞增殖和侵袭的抑制作用机制。方法:不同浓度氯化两面针碱加入到人鼻咽癌CNE-2细胞中,利用ELISA法研究了氯化两面针碱对EGFR-TPK活性的影响,利用溴化3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑(MTT)法测定氯化两面针碱对CNE-2细胞的抑制作用,Transwell法检测氯化两面针碱对CNE-2细胞侵袭的抑制作用,采用间接荧光标记法测定细胞内活性氧(ROS)水平的变化;酶标仪法检测氯化两面针碱对细胞凋亡蛋白Caspase-3活性的影响,凝胶迁移或电泳迁移率实验测定CNE-2细胞中NF-κB活性。结果 :氯化两面针碱对EGFR-TPK IC50为(32.53±3.43μmol/L)和CNE-2细胞生长IC50为(9.65±1.13)μmol/L都具有良好的抑制能力,氯化两面针碱能够诱导肿瘤细胞侵袭能力降低;在100μmol/L浓度的氯化两面针碱引起的ROS百分率达到了(76.39±5.32)%;与空白组相比,氯化两面针碱能显著提高CNE-2细胞中凋亡蛋白Caspase 3活性;氯化两面针碱能够下调NF-κB的表达。结论:氯化两面针碱通过多靶向降低EGFR-TPK活性、下调NF-κB的表达和激活Caspase 3活性的方式,对人鼻咽癌细胞的侵袭和增殖产生抑制作用。     

桂枝茯苓丸对荷瘤鼠p53及CD44的影响

目的：研究桂枝茯苓丸（GFW）对S180荷瘤小鼠移植瘤生长和转移的抑制作用,探讨其作用机制。方法：复制S180荷瘤小鼠模型,计算抑瘤率。采用SABC免疫组化法检测肿瘤细胞中细胞周期调控基因p53及细胞黏附分子CD44表达。结果：桂枝茯苓丸有抑瘤作用,抑瘤率为33.48%。GFW与环磷酰胺（CY）合用抑瘤作用显著提高,抑瘤率为57.17%。桂枝茯苓丸可下调肿瘤细胞突变型p53蛋白的表达,与模型组比较,差异有统计学意义（P〈0.01）。且可抑制细胞黏附分子CD44的表达,与模型组比较,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论：桂枝茯苓丸具有明显抑瘤作用,且对化疗药物环磷酰胺抗S180肉瘤具有增效作用。其抑瘤机制可能是GFW影响肿瘤细胞细胞周期调控基因p53和细胞黏附分子CD44的表达,即通过影响肿瘤细胞增殖周期,降低肿瘤细胞与基质之间的黏附,从而达到抑制肿瘤细胞生长和转移的作用。     

齐墩果酸对肉瘤S-180荷瘤小鼠细胞凋亡相关基因表达的影响

目的：探讨齐墩果酸对肉瘤S-180荷瘤小鼠的抗肿瘤作用机制。方法：将接种S-180腹水瘤的小鼠随机分为模型组,环磷酰胺组,齐墩果酸组三组。采用免疫组化法检测肿瘤组织中突变型p53、Bcl-2蛋白表达水平。结果：齐墩果酸对S-180荷瘤小鼠突变型p53蛋白、Bcl-2蛋白表达水平明显降低,与模型组比较差异显著（P〈0.05）,具有抗肿瘤作用。结论：齐墩果酸能下调S-180荷瘤小鼠肿瘤细胞内突变型p53蛋白、Bcl-2蛋白的表达,诱导肿瘤细胞凋亡而发挥抗肿瘤作用。