固相放射免疫分析法在ABO血型微量测定中的应用

本文报道一个经过改良的简单、快速、灵敏和准确的固相放射免疫分析法（ＳｏｌｉｄＰｈａｓｅＲａｄｉｏｉｍ－ｍｕｎｏａｓｓａｙ，ＳＰＲＩＡ），对其方法学、灵敏度和准确度进行了测定，并对其在检测法医物证几种生物检材血型物质应用方面进行了研究探讨。本方法批内变异系数为５．６％，批间变异系数为１０．１５％。新鲜血的稀释度达１：２５６０时，仍可用此法有效测出其中所含ＡＢＯ血型抗原。用该法分别检测人体微量血痕、毛囊组织和唾液斑的ＡＢＯ血型，获得满意结果。然后盲测５０例样本血型，以样本计数值大于８００次／ｍｉｎ判为阳性孔，小于８００次／ｍｉｎ判为阴性孔进行判型，结果全部正确。由于本法适用于各种微量生物材料血型物质的测定，因此在法医学领域内将会有较好的应用前景。     

人血清肿瘤碱性蛋白质单克隆抗体ELISA检测方法的研究

利用自制的肿瘤碱性蛋白质（ＴｕｍｏｕｒＢａｓｉｃＰｒｏｔｅｉｎ，ＴＢＰ）单克隆抗体，建立了血清碱性蛋白质（ｓｅｒｕｍＢａｓｉｃＰｒｏｔｅｉｎ，ＳＢＰ）酶联免疫测定法（ＥＬＩＳＡ）。该方法与ＩｇＧ、ＩｇＡ、ＩｇＭ及白蛋白质没有交叉反应，其回收率为９７．１％，批内变异系数ＣＶ＝５．５％，批间ＣＶ＝１１．７％，检测下限为０．１３μｇ／ｍｌ。     

人唾液中A型血型物质的分离纯化及理化性质研究

目的：阐明唾液中ＡＢＯ血型物质的理化性质。方法：应用凝胶过滤、阴离子高速液相色谱及ＰＨＡ亲合层析法，从人唾液中分离纯化血型物质。结果：从Ａ型分泌型人唾液中分离纯化了具有Ａ型活性的唾液血型物质（ＳａｌｉｖａＢｌｏｏｄＧｒｏｕｐＳｕｂｓｔａｎｃｅｓ－Ａ，ＳＢＧＳ－Ａ）。理化分析结果表明：ＳＢＧＳ—Ａ为表现单—Ａ型活性的糖蛋白，分子量约为２００～３００ｋｄ，等电点在３．５５～６．５５之间，蛋白质为２４．６％，由１６种氨基酸组成，糖为７２．３％。其化学组成提示可能具有一定的器官特异性。结论：对于建立检测混合斑中唾液ＡＢＯ型的方法具有重要的法医学意义。     

一种检测初乳SIgA的新方法

目的：建立一种新的检测初乳ＳＩｇＡ的方法。方法：以辣根过氧化酶（ＨＲＰ）标记红桂木凝集素（ＡｒｔｏｃａｒｐｕｓＬｉｎｇｎａｎｅｎ－ｓｉｓＬｅｃｔｉｎ，ＡＬＬ），并经ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－２００纯化，采用ＡＬＬ－ＳＩｇＡ－ＡＬＬ－ＨＲＰ夹心酶联法检测初乳ＳＩｇＡ，进行检出限、精密度、重现性等实验并制备标准曲线，初步应用于产妇初乳中ＳＩｇＡ的测试。结果：以初乳中红桂木凝集素结合蛋白为标准品制备标准曲线，检测ＳＩｇＡ的线性范围是４．０６～１３０．０ｍｇ／Ｌ。本法测定４２例产后２～８ｄ产妇初乳ＳＩｇＡ含量为（２８８２．７±１８７４．５）ｍｇ／Ｌ，其中８例批内变异为７．５１％，批间变异为９．６２％。结论：本法简便、准确、便于推广应用     

脑脊液铁蛋白检测方法的改进（微量酶联免疫吸附法）

利用血清铁蛋白酶免疫分析（ＥＩＡ）试剂盒加以改进，建立了脑脊液铁蛋白（ＣＳＦＦ）的微量酶联免疫吸附法（ＥＬＩＳＡ）。检测２４例正常人和２８例中枢神经系统疾病患者脑脊液铁蛋白；其检测范围为：１．２５～３２０ｎｇ／ｍｌ，批内变异系数为３．５％，批间变异系数为６．５％，平均回收率为１００．５％，结果表明：结核性脑膜炎、隐球菌脑膜炎、脑肿瘤组均显著高于对照组（Ｐ＜０．００１），病毒性胞炎轻度增高（Ｐ＜０．０５），而多发性神经根炎则无差异（Ｐ＞０．０５），对诊断中枢神经系统感染性疾病有一定价值，本法快速、敏感、简易适用于临床推广应用。     

固相生物素－亲和素ELISA检测HIV抗体方法的建立与应用

采用生物素化ＨＩＶ合成肽抗原与预吸附在ＥＩＡ反应板上的亲和素结合，建立检测ＨＩＶ抗体的固相生物素－亲和素ＥＬＩＳＡ方法。经ＨＩＶ（１＋２）抗体参考血清Ｐａｎｅｌ检定，其灵敏度（１３／１３）１００％，特异性（２８／２８）１００％，批内变异系数＜７％，批间变异系数＜１０％。１０５６８例确认血清标本验证，阳性检出率１００％，阴性总符合率９９．８％，假阳性率０．２％。与常规间接ＥＬＩＳＡ法比较，本法操作简便，试验所需时间短，灵敏度、特异性和稳定性提高明显     

承德市高校无偿献血学生五项血液指标分析

对１９９９年１－６月份承德市高校１６０５名无偿献血大学生的乙肝表面抗原（ＨＢｓＡｇ）丙肝抗体（ＨＣＶ）,血清转氨酶（ＡＬＴ）,爱滋病（ＡＩＤＳ）,梅毒,血比重,血型等七项血液指标中主要指标的检测结果进行了统计学分析。结果：ＨＢｓＡｇ阳性率为４．１％（１．５％－５．１％）,ＡＬＴ阳性率为８．２％（３．７％－１１．１％）,发现４例ＨＣＶ阳性者,ＡＬＴ（＋）合并ＨＢｓＡｇ（＋）者１０例。未发现ＡＩＤＳ,     

放射免疫测定前列腺特异抗原的技术探讨

目的对前列腺特异性抗原（ＰＳＡ）作方法学鉴定，并对检测的若干影响因素进行探讨。方法采用放射免疫法作ＰＳＡ定值质检血清的检测并在不同实验条件下对结果的影响进行观察。结果本法灵敏度为０．２２ｎｇ％，回收率９７．３％～１０２．６％，平均回收率９９．８％，非特异性结合率（ＮＳＢ）平均为３．６％，批内平均变异系数ＣＶ５．４％，批间平均变异系数ＣＶ８．２％，健全性实验结果良好。新鲜血清分离后应当日内检测，因故可置－２０℃保持。ＰＡＳ的碘标记抗原溶液务必分装冻存，避免反复冻融，实验表明其使用期至少在３０～４０天。结论系列实验的结果充分表明这不仅有利于实验条件的控制，更重要的是提高了检验质量的保证。     

反复自然流产的免疫流行病学研究

目的分析反复自然流产（ＲＳＡ）的免疫病因组成。方法用间接血凝法检测ＡＢＯ血型抗体,用ＢＡ－ＥＬＩＳＡ法检测透明带抗体,用ＥＬＩＳＡ法检测磷脂抗体,以单向混合淋巴细胞反应封闭试验检测封闭效率,通过补体依赖性细胞毒试验测定细胞毒指数,通过单向混合淋巴细胞反应封闭抑制试验分析封闭抗体的抗独特型抗体,利用流式细胞仪分析封闭抗体对ＣＤ抗原的作用。以正常生育组为对照,回顾性分析了１２９例原发性ＲＳＡ及１６例继发性ＲＳＡ的免疫病因构成。结果在ＲＳＡ病因组成中,封闭抗体缺乏占３１．７％,透明带自身抗体占２０．４％,磷脂抗体占１２．５％,ＡＢＯ血型抗体占１１．５％;在原发性流产病因组成中,封闭抗体缺乏占３１．４％,透明带自身抗体占２０．４％,磷脂抗体占８．５％,ＡＢＯ血型抗体占８．４％;在继发性流产中,封闭抗体独特型－抗独特型网络失调占３９．４％,磷脂抗体占３１．４％,ＡＢＯ血型抗体占２２．４％。结论根据ＲＳＡ免疫流行病学分析,ＲＳＡ的病因可以分类为：母－胎免疫识别低下型、母－胎免疫识别过度型及母－胎免疫识别紊乱型。     

自身免疫性甲状腺疾病患者血中TSAb及TSBAb的观察

为了解自身免疫性甲状腺疾病患者体内刺激型及阻断型抗体共存情况，检测了４２７例Ｇｒａｖｅｓ病（Ｇｒａｖｅｓ′ｄｉｓｅａｓｅ，ＧＤ）及１０６例桥本甲状腺炎（Ｈａｓｈｉｍｏｔｏ′ｓｔｈｙｒｏｄｉｔｉｓ，ＨＴ）患者血中甲状腺刺激抗体（ＴＳＡｂ）及甲状腺刺激阻断抗体（ＴＳＢＡｂ），结果：ＧＤ组及ＨＴ组ＴＳＡｂ，ＴＳＢＡｂ的阳性率分别为９１．６％，７．７％及１４．２％，３７．７％，ＧＤ患者ＴＳＡｂ及ＴＳＢＡｂ     

蛋清粘附热解离法检验毛发ABO血型

本实验改良了毛发的ＡＢＯ血型检验方法——热解离试验（ｅｌｕｔｉｏｎｔｅｓｔ）［１］，利用蛋清盐水粘附毛发碎屑并镀膜于载玻片上，对７４份已知ＡＢＯ血型毛发进行检测，准确率为１００％。最小检材用量为一根０．２５ｃｍ长的毛干。测定了１６份烫发、染发的毛发血型，结果表明烫发对血型检测结果无干扰。以玫玉或海灵草染发液染过的毛发，除检测出毛发本身的血型物质外，均检出Ｂ型血型物质。     

反复自然流产的免疫流行病学研究(摘要)

分析反复自然流产（ＲＳＡ）的免疫病因组成。方法用间接血凝法检测ＡＢＯ血型抗体,用ＢＡ－ＥＬＩＳＡ法检测透明带抗体,用ＥＬＩＳＡ法检测磷脂抗体,以单向混合淋巴细胞反应封闭试验检测封闭效率,通过补体依赖性细胞毒试验测定细胞毒指数,通过单向混合淋巴细胞反应封闭抑制试验分析封闭抗体的抗独特型抗体,利用流式细胞仪分析封闭抗体对ＣＤ抗原的作用。以正常生育组为对照,回顾性分析了１２９例原发性ＲＳＡ及１６例继发性ＲＳＡ的免疫病因构成。结果在ＲＳＡ病因组成中,封闭抗体缺乏占３１．７％,透明带自身抗体占２０．４％,磷脂抗体占１２．５％,ＡＢＯ血型抗体占１１．５％;在原发性流产病因组成中,封闭抗体缺乏占３１．４％,透明带自身抗体占２０．４％,磷脂抗体占８．５％,ＡＢＯ血型抗体占８．４％;在继发性流产中,封闭抗体独特型－抗独型网络失调占３９．４％,磷脂抗体占３１．４％,ＡＢＯ血型抗体占２２．４％。结论根据ＲＳＡ免疫流行病学分析,ＲＳＡ的病因可以分类为：母－胎免疫识别低下型、母－胎免疫识别过度型及母－胎免疫识别紊乱型。     

非类固醇抗炎药与幽门螺杆菌相互作用诱发消化性溃疡出血的研究

为了评估非类固醇抗炎药（ＮＳＡＩＤｓ）和幽门螺旋杆菌（Ｈｐ）在消化性溃疡出血中相互作用，对１０６例溃疡病出血患者进行了临床观察，Ｈｐ检测和病理学研究，结果表明：４１例（３８．７％）溃疡病出血前有ＮＳＡＩＤｓ用药史，其中３６例Ｈｐ阳性，６５例（６１．３％）无ＮＳＡＩＤｓ用药史，其中４２例Ｈｐ阳性，两者比较显著使用ＮＳＡＩＤｓ者的Ｈｐ阳性的ＮＳＡＩＤｓ用药者主要表现为严重的慢性活动性胃炎，并常见胃粘膜     

二种方法四种试剂检测血清HBsAg的对比研究

本文选用反向被动血凝法和酶免疫法四种试剂检测ＨＢｓＡｇ进行对比研究，共检测临床血清２００份，沪产冻干血球ＨＢｓＡｇ阳性学为１２．５％，宁产液体血球为２７％，沪产ＥＬＩＳＡ试剂为４２％，宁产ＥＬＩＳＡ试剂阳性率为４０％，同时还进行试剂的重复性试验，ＲＰＨＡ及ＥＬＩＳＡ中和试验。结果表明：１．所有方法稳定性均较好，但酶联法敏感性明显高于血凝法。２．血凝法中液体血球检测敏感性优于冻干血球．３．酶联法中两种试剂阳性率结果无明显差异，宁产试剂阳性结果易于判定推测．４．无论是酶联法还是血凝法其结果不一致时，均经中和试验证实其特异性是好的，只是血凝法敏感性较低。因此我们建议用酶联法检测ＨＢｓＡｇ的单位均可淘汰血凝法。     

Tamm－Horsfall糖蛋白ABC－ELISA测定法的建立

人尿Ｔａｍｍ－Ｈｏｒｓｆａｌｌ糖蛋白（ＴＨＰ）经盐析、ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－１００层析获得ＳＤＳ－ＰＡＧＥ均一的蛋白质纯品。后者与福氏完全佐剂充分混合免疫家兔得到抗ＴＨＰ抗体。将纯化了的该抗体与生物素连结，建立了生物素－抗生素系统的ＥＬＩＳＡ（ＡＢＣ－ＥＬＩＳＡ）测定法。该法最低检测限为２ｎｇ，回收率９７％，变异系数４．７的。测定５１名正常人血清中ＴＨＰ水平为２２６．９４±１４５．９０ｎｇ／ｍｌ。并测定了５０名各类肾脏病人血中的ＴＨＰ值。     

乙型肝炎病毒细胞培养模型中人白蛋白的研究

本文建立了用ＥＬＩＳＡ法测定ＨｅｐＧ２ ２２１５细胞培养液中人白蛋白的方法，其线性测定为０．１６～４０ｎｇ／ｍｌ，各种阴性对照Ｐ／Ｎ值均小于２．１。批内变异系数为３．４％，批间变系数为８．５％。本实验结果说明，在利用Ｈｅｐｇ２ ２２１５细胞系研究抗乙肝病毒药物和免疫因子的作用时，应注意这些药物或因对细胞代谢有无毒性作用，细胞培养液中人白蛋白的测定可作为检测细胞毒性的一项指标。     

用快速斑点免疫金渗滤法检测抗双链DNA抗体

目的为了提供一种简便、快速、可靠的检测抗双链ＤＮＡ（ｄｓ－ＤＮＡ）抗体的新方法。方法将生物素化的质粒ｄｓ－ＤＮＡ结合于包被了亲和素的硝酸纤维素（ＮＣ）膜上，以胶体金标记的葡萄球菌蛋白Ａ（ＳＰＡ）作为显示剂，建立了一种检测抗ｄｓ－ＤＮＡ抗体的快速斑点免疫金渗滤法（ＤＩＧＦＡ）。结果ＤＩＧＦＡ对未经选择的系统性红斑狼疮（ＳＬＥ）和活动性ＳＬＥ的阳性率分别为６７．２％和９５．９％；对非ＳＬＥ的自身免疫病患者的阳性率仅为２．９％；正常人未见假阳性。与短膜虫免疫荧光法（ＣＬ．ＩＦＡ）、放射免疫法（Ｆａｒ）、酶联免疫吸附法（ＥＬＩＳＡ）和斑点免疫结合法（ＤＩＢＡ）四种方法比较，ＤＩＧＦＡ的敏感性优于ＣＬ．ＩＦＡ、ＥＬＩＳＡ和ＤＩＢＡ，特异性优于Ｆａｒ和ＥＬＩＳＡ。结论ＤＩＧＦＡ快速、简便，整个检测过程只需２分钟，不需特殊设备，是一种值得推广的检测抗ｄｓ－ＤＮＡ抗体的常规方法。     

强直性脊柱炎临床诊断分析

该文报告６２例强直性脊柱炎（ＡｎｋｙｌｏｓｉｎｇＳｐｏｕｄｙｌｉｔｉｓ，ＡＳ），３０岁以下发病率占该组病例９５．２％，误诊率高达５８．１％，致残率为１６．１％。为提高ＡＳ早期诊断，早期治疗，减少致残率，作者认为，需提高对ＡＳ的认识，对３０岁以下男性患者，凡有腰骶部疼痛，不对称的下肢关节炎，都进行骨盆正位片检查、骶髂关节ＣＴ扫描及血ＨＬＡ－Ｂ２７等检测     

肿瘤标志物联合检测在肝细胞癌诊断中的临床意义

目的探讨肿瘤标志物联合检测在肝细胞癌诊断中的临床意义。方法应用酶联免疫吸附法（ＥＬＩＳＡ），参考Ｔｒｏｏｓｔ法和分光光度法分别对３０例肝细胞癌患者、３０例肝硬化患者及３０例正常人（对照组），进行血清甲胎蛋白（ＡＦＰ）、α－Ｌ－岩藻糖苷酶（ＡＦＵ）和唾液酸（ＳＡ）测定。结果肝癌患者上述各项肿瘤标志物水平均明显高于肝硬化组和对照组（Ｐ＜０．０１），肝癌患者血清中ＡＦＰ、ＡＦＵ和ＳＡ的阳性率分别为７０．０％，７６．２％和７０．０％。将上述３项肿瘤标志物进行联合检测，以任２项阳性为诊断标准，则联合检测对肝癌诊断的敏感性为８６．７％，特异性为９８．３％，准确性为９４．４％，阳性预示值为９３．７％，阴性预示值为９６．３％。结论血清ＡＦＰ、ＡＦＵ和ＳＡ联合检测对肝癌诊断具有实用价值。     

链酶亲和素—生物素ELISA检测人心肌肌钙蛋白T

目的 建立人心肌肌钙蛋白Ｔ（ｃＴｎＴ）链酶亲和素－生物素（ＳＡＢ）双抗体夹心酶联免疫分析（ＥＬＩＳＡ）方法。诊断急性心肌损伤性疾病。方法 以固相化单抗３Ｆ７捕捉样品中ｃＴｎＴ,生物素化３１１１２单抗为检测抗体,加入ＳＡ－ＨＲＰ,显色。根据已知不同浓度标准ｃＴｎＴ显色后Ｄ（λ）值的标准曲线,检测待测样品ｃＴｎＴ含量。结果 ｃＴｎＴ的最低检测值为０．１５ｎｇ／ｍｌ,批内变异系数为３．８％,批间变异系数