重组人IL-6对NOD小鼠IDDM发病的影响及机制研究

目的　探讨重组人白细胞介素 6(rhIL 6)对NOD小鼠自发性和环磷酰胺 (CY)诱发性Ⅰ型糖尿病 (IDDM)的影响及相关机制。方法　通过观察NOD小鼠用药后血糖和尿糖水平、胰腺组织病理学特征 ,及血清抗CD3抗体、LPS诱导的炎症因子IFN γ、TNF α水平的变化 ,以及CY诱导ID DM发生率 ,确定rhIL 6的抗IDDM作用。结果　 4wk龄♀NOD小鼠连续注射rhIL 6 1 6wk后 ,胰岛炎即胰腺淋巴细胞、单核细胞浸润明显减少 ,糖尿病的发病率明显降低(33 % )。与空白对照组相比 ,血清中炎症因子IFN γ、TNF α水平也呈显著的下降趋势。 1 2wk龄NOD小鼠连续 8wk应用rhIL 6 ,糖尿病发生率则无明显变化 ,且实验中未观察到rhIL 6对CY诱发IDDM的保护作用。结论　rhIL 6早期预防用药可降低NOD小鼠自发性IDDM的发生 ,该保护作用可能与其降低炎症因子TNF α、IFN γ分泌有关     

白芷提取物对大鼠脾淋巴细胞免疫抑制作用初探

目的探讨白芷提取物对地塞米松致大鼠脾淋巴细胞免疫抑制作用的影响。方法建立地塞米松致大鼠免疫抑制模型,考察白芷提取物对大鼠脾淋巴细胞的增殖活性、自然杀伤细胞（NK细胞）活性的影响。结果白芷提取物（5．0g/kg）对刀豆蛋白A（ConA）诱导脾淋巴T细胞增殖能力有升高作用,但对脂多糖（LPS）诱导脾淋巴B细胞增殖能力未见明显影响,对脾淋巴细胞的NK细胞活性也有增强作用。结论白芷提取物（5．0g／kg）曲能提高大鼠脾淋巴T细胞和NK细胞的增殖活性。     

螺旋藻多糖硫酸酯化修饰前后抗肿瘤及免疫活性的研究

比较螺旋藻多糖硫酸酯化修饰前后体内外抗肿瘤及免疫活性.采用MTT比色法研究药物在体外对人肿瘤细胞株的抑制作用,促进正常小鼠脾淋巴细胞的增殖活性以及对荷瘤小鼠NK和CTL细胞活性的影响.采用移植性肿瘤实验方法考察了药物对小鼠S180肉瘤的抑制作用.结果显示,螺旋藻多糖（NPSP）对肿瘤细胞株几乎无细胞毒作用,硫酸酯化螺旋藻多糖（SNPSP）对肿瘤细胞株具有显著的细胞毒作用,其中对SMMC-7721人肝癌细胞株抑制率最高达50%.NPSP50 mg/kg对小鼠S180肉瘤无抑制,相同剂量的SNPSP对小鼠S180肉瘤的抑制率达35.42%.NPSP具有促进脾淋巴细胞增殖作用,但对ConA和LPS诱导的脾淋巴细胞增殖反应无促进作用,SNPSP促进脾淋巴细胞增殖作用较NPSP增强,同时对ConA和LPS诱导的脾淋巴细胞增殖反应也具有明显的促进作用.NPSP和SNPSP均能促进荷瘤小鼠NK细胞和CTL细胞活性,其中SNPSP促进CTL细胞活性较NPSP增强.     

FTY720对免疫性肝损伤保护作用的研究

目的　应用免疫性肝损伤模型研究FTY72 0对肝脏的保护作用并对其作用机制进行初步探讨。方法　分别以BCG +LPS和ConA诱导两种免疫性肝损伤模型并通过测定血清中ALT和AST水平的变化检测FTY72 0对两种肝损伤的保护作用。以ELISA方法测定血清中细胞因子IFN γ及IL 4水平的变化并应用淋巴细胞增殖实验检测FTY72 0对淋巴细胞增殖能力的影响。结果　FTY72 0可以使两种肝损伤模型中升高的血清ALT和AST水平下降 ,并可以降低肝损伤时血清中IFN γ及IL 4的水平 ,实验还证明FTY72 0可以抑制淋巴细胞的增殖。结论　FTY72 0预防应用对免疫性肝损伤有保护作用 ,其保肝作用机制可能和抑制淋巴细胞的增殖 ,进一步抑制细胞因子的产生有关     

青藤碱治疗类风湿性关节炎免疫作用和机制

目的研究青藤碱(sinomenine,SIN)对动物免疫功能和细胞凋亡的影响及对人滑膜细胞增殖影响。方法 MTT法测定脾淋巴细胞增殖反应及滑膜细胞增殖反应。采用流式细胞术测定脾T淋巴细胞亚型。流式细胞仪和DNA Ladder测定脾淋巴细胞凋亡。结果SIN在体给药抑制LPS及PMA诱导的小鼠脾淋巴细胞增殖。SIN离体给药可抑制ConA，LPS和anti-CD3 mAb诱导小鼠脾淋巴细胞增殖；SIN可使AA大鼠升高的CD4⁺/CD8⁺比值降低。SIN体外使小鼠脾淋巴细胞早期凋亡百分比显著增加。SIN对人类风湿关节炎滑膜细胞增殖也有抑制作用。结论 SIN对小鼠和类风湿关节炎大鼠脾淋巴细胞免疫功能具有抑制作用，诱导细胞凋亡可能是SIN免疫抑制作用的机理之一。     

8-姜酚对小鼠脾淋巴细胞增殖和脾巨噬细胞吞噬作用的影响

目的研究8-姜酚处理小鼠脾淋巴细胞和脾巨噬细胞等免疫细胞的影响。方法分离并培养小鼠脾淋巴细胞和脾巨噬细胞,用MTT比色法测定8-姜酚对小鼠脾淋巴细胞及经革兰氏阴性菌细胞壁脂多糖(LPS)和刀豆蛋白A(ConA)诱导的脾淋巴细胞增殖能力的影响;用巨噬细胞吞噬中性红试验考察8-姜酚对脾巨噬细胞及经LPS和ConA活化的脾巨噬细胞吞噬功能的影响。结果 8-姜酚(终浓度3.125、6.25、12.5、25、50和100μg/ml)对检测小鼠脾淋巴细胞增殖能力和脾巨噬细胞吞噬功能均有抑制作用,其半数抑制浓度(IC50)分别为3.795和0.185 mg/ml;对LPS和ConA诱导的脾淋巴细胞增殖能力和脾巨噬细胞的吞噬功能有显著的抑制作用(P0.05)。结论在该试验条件下,8-姜酚对小鼠脾淋巴细胞和巨噬细胞及其经LPS和ConA活化后的增殖与吞噬作用均有抑制作用。     

褪黑素对淋巴细胞功能的影响

本文采用~3H-TdR掺入法和ConA活化脾细胞检测IL-2的方法观察了松果腺褪黑素(MT)对ConA和LPS诱导小鼠脾T_1,B淋巴细胞增殖反应及ConA诱导大鼠脾淋巴细胞产生IL-2的影响。结果表明,MT0.01～1μmol/L和0.01～10μmol/L分别促进ConA和LPS诱导小鼠脾淋巴细胞增殖反应,ATl～10μmol/L对ConA诱导大鼠脾淋巴细胞产生IL-2亦有促进作用,但MT对未经ConA或LPS活化的淋巴细胞功能则无明显影响,提示丝裂原活化的淋巴细胞可能是MT作用的靶细胞之     

依托泊苷对实验性银屑病的治疗作用

目的观察依托泊苷对银屑病的治疗作用并初步探讨其作用机制。方法采用雌激素周期小鼠阴道上皮细胞有丝分裂模型及小鼠尾鳞片表皮模型,分别观察依托泊苷对小鼠阴道上皮细胞有丝分裂和尾鳞片表皮颗粒层形成的影响;酶联免疫吸附实验测定血清中白细胞介素2(IL-2)含量,放射免疫法测定血清肿瘤坏死因子α(TNFα-)和IL-10含量。结果依托泊苷5,10和20 m.gkg-1可显著促进小鼠尾鳞片表皮颗粒层形成,有颗粒细胞层的鳞片数从对照组(7.2±1.8)%分别升至(13.9±2.4)%,(15.7±2.1)%及(18.2±2.6)%;明显抑制小鼠阴道上皮细胞有丝分裂,有丝分裂指数从模型组(23.7±2.4)%分别降至(18.9±1.3)%,(15.6±2.0)%及(11.4±1.4)%。依托泊苷10和20 m.gkg-1可明显降低雌激素周期小鼠血清TNFα-水平,对IL-10水平无明显影响;依托泊苷5,10和20 m.gkg-1可降低尾鳞片表皮模型小鼠血清IL-2水平。结论依托泊苷对实验性银屑病具有治疗作用,该作用可能与其促进颗粒层细胞分化、抑制表皮细胞增殖并降低血清TNFα-和IL-2水平有关。     

白芍总苷对卡介苗加脂多糖引起的小鼠免疫性肝损伤的保护作用

目的　研究白芍总苷对小鼠免疫性肝损伤的保护作用。方法　在建立BCG +LPS诱导免疫性肝损伤小鼠模型的基础上 ,分光光度法检测血清中ALT、AST、NO水平和肝匀浆MDA、GSH Px、SOD含量 ;放免法检测TNF α的生物学活性 ;细胞增殖法测定脾淋巴增殖反应。结果　白芍总苷 (6 0、12 0、2 4 0mg·kg-1)ig给药可明显降低免疫性肝损伤小鼠增高的血清ALT、AST活性 ,同时能减少肝匀浆MDA含量 ,使降低的肝匀浆GSH Px、SOD活性升高 ,进一步研究发现白芍总苷可明显抑制免疫性肝损伤小鼠血清NO和TNF α的产生。白芍总苷还可抑制小鼠腹腔巨噬细胞TNF α的产生 ,对ConA诱导的脾淋巴增殖反应具有恢复作用 ,而对LPS诱导的脾淋巴增殖反应无明显影响。结论　白芍总苷对免疫性肝损伤具有保护作用。     

人工蛹虫草子实体对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响

目的：观察人工蛹虫草子实体及其不同提取物对正常小鼠脾淋巴细胞增殖的影响，分析其影响免疫功能的有效提取部位。方法：以不同浓度提取物与脾细胞共孵育72h，采用MTT法测定淋巴细胞的增殖，观察提取物对淋巴细胞增殖的影响。另以10mg·kg^-1，30mg·kg^-1剂量人工蛹虫草子实体的水提取物及微粉化原药水溶液小鼠ig给药11d，制备脾淋巴细胞悬液，培养72h后测定细胞增殖。结果：在体外。水提取物有显著增强脾淋巴细胞增殖效应，且与ConA和LPS有协同促增殖效应，水提醇沉提取物可促进正常淋巴细胞增殖，而对ConA、LPS活化后的增殖无明显影响；甲醇提取物对淋巴细胞增殖有抑制作用。体内给予水提物和子实体微粉水溶液两个剂量也均显示促进淋巴细胞的自然增殖作用（P〈0．05），但对ConA或LPS活化后的淋巴细胞无协同作用。结论：人工蛹虫草子实体含有免疫促进和免疫抑制的成分。其水溶性和中等浓度的醇溶性成分有免疫促进作用。甲醇提取物抑制淋巴细胞增殖。     

海洋生物酸性多糖的抗银屑病作用及对免疫功能的影响

利用鼠阴道上皮模型及鼠尾鳞片表皮模型研究了酸性多糖类海洋药物ＨＡＩ－０９１３抗银屑病的作用，并进一步研究了对机体细胞免疫功能的影响。结果表明，ＨＡＩ－０９１３２５、５０、１００ｍｇ·ｋｇ－１可明显抑制雌激素期小鼠和大鼠阴道上皮细胞有丝分裂指数（Ｐ＜０．０１），显著提高小鼠尾鳞片颗粒层形成数（Ｐ＜０．０５），与阳性对照药氨甲喋呤（１ｍｇ·ｋｇ－１，ｉｐ）比较均无显著性差异。ＨＡＩ－０９１３２５、５０、１００ｍｇ·ｋｇ－１还可显著提高小鼠脾脏Ｔ淋巴细胞增殖活性（Ｐ＜０．０１）。结果提示ＨＡＩ－０９１３可能具有抑制银屑病患者表皮细胞增生，提高颗粒层形成及改善患者免疫功能低下状态的作用。     

重组人白介素-10对大鼠血管平滑肌细胞增殖和细胞周期的影响

目的　观察重组人白介素 10 (rhIL 10 )分别对肿瘤坏死因子 (TNF α)和血小板源性生长因子 (PDGF BB)刺激下离体大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞增殖和细胞周期的影响。方法　体外培养大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞 ,采用MTS/PES法确定血管平滑肌细胞的增殖状态 ,应用流式细胞术测定细胞周期。结果　与对照组相比 ,肿瘤坏死因子和血小板源性生长因子均对血管平滑肌细胞增殖具有明显的刺激作用 (P <0 0 5 )。rhIL 10单独应用对血管平滑肌细胞生长没有影响 (P >0 0 5 )。在TNF α和血小板源性生长因子分别刺激下 ,rhIL 10均可抑制血管平滑肌细胞的生长(P <0 0 5 )。流式细胞术测定的结果显示rhIL 10分别可以使TNF α和PDGF BB作用下的VSMCs大部分处于G0 /G1期 ,与对照组相比差异有显著性 (P <0 0 1)。结论　重组人白介素 10可抑制细胞因子和生长因子诱导的血管平滑肌细胞增殖     

吡硫翁锌乳膏对银屑病样模型小鼠的药效学研究

目的：研究吡硫翁锌乳膏抗银屑病的作用。方法：采用小鼠雌激素期的阴道上皮模型和鼠尾鳞片表皮银屑病样皮损模型,观察吡硫翁锌乳膏抗银屑病的作用。在小鼠雌激素期的阴道上皮模型中,吡硫翁锌乳膏经小鼠阴道给药,连续给药14 d,观察小鼠阴道上皮分裂指数的变化。在鼠尾磷片表皮银屑病样皮损模型中,吡硫翁锌乳膏被涂抹于小鼠尾部,连续给药14 d,观察鼠尾含有颗粒层的鳞片数目的变化,及对小鼠上皮细胞有丝分裂及表皮细胞分化的影响。结果：经吡硫翁锌乳膏处理后,小鼠阴道上皮分裂指数明显降低,鼠尾含有颗粒层的鳞片数目明显增加。结论：吡硫翁锌乳膏能明显抑制阴道上皮细胞分裂,促进尾鳞片表皮颗粒层形成,具有潜在的抗银屑病样的作用。     

白细胞介素-10对大鼠佐剂性关节炎的治疗作用

目的　研究白细胞介素 10 (IL 10 )对大鼠佐剂性关节炎 (AA)的治疗作用及免疫机制。方法　测量非致炎侧足肿胀度、体重、脏器系数 ,采用淋巴细胞增殖法和滑膜成纤维细胞 (SFCs)增殖法测定细胞增殖能力和IL 1产生 ,应用酶联免疫吸附测定法 (ELISA)检测IL 4水平。结果　IL 10(每鼠 2 ,10 μg·d-1× 9d ,ip)能缓解AA病情 ,使足肿胀度降低 ,体重、胸腺和脾脏系数及脾细胞增殖能力得到改善 ,腹腔巨噬细胞 (PMΦ)和滑膜组织细胞 (SMCs)产生IL 1水平下降 ,抑制SFCs和引流淋巴结细胞 (LNCs)过度增殖 ,使LNCs和SMCs产生IL 4水平提高。结论　IL 10能用于大鼠AA的治疗 ,其治疗机制与IL 10、IL 4和某些其它细胞因子介导的免疫调节相关     

木瓜苷对小鼠胶原性关节炎的预防作用及初步机制

目的　研究木瓜苷 (GCS)预防用药对小鼠胶原性关节炎 (collagen inducedarthritis,CIA)的影响 ,并探讨其初步机制。方法　昆明种小鼠随机分为 6组 :正常对照组、模型组、木瓜苷三个剂量组和青藤碱组 (SIN) ;鸡Ⅱ型胶原免疫小鼠诱导继发性关节炎 ;足爪容积测定法、关节炎评分法和跖曲踝关节疼痛评分法观察关节炎的发生情况 ;观察胸腺指数、脾脏指数变化 ;3 H TdR参入法检测T、B细胞增殖反应 ;IL 1、IL 2活性的检测采用小鼠淋巴细胞增殖法 ;ELISA法检测血清中抗Ⅱ型胶原抗体水平 ;分光光度法测定局部踝关节PGE水平。结果　小鼠免疫后d 2 4 ,足爪出现红肿 ,继发性炎症高峰期在d 36 ,4 0后炎症逐渐减轻。GCS(6 0、12 0、2 4 0mg·kg-1)和SIN(10 0mg·kg-1)ig对CIA小鼠继发性关节炎有明显的抑制作用 ,降低CIA小鼠踝关节中增高的PGE ;CIA小鼠脾脏指数增加 ,而胸腺指数未见明显的改变 ,GCS能降低增加的CIA小鼠脾脏指数 ,对胸腺指数无明显影响 ;GCS(6 0、12 0、2 4 0mg·kg-1)和SIN (10 0mg·kg-1)使CIA小鼠增高的ConA和LPS诱导的T细胞和B细胞增殖反应降低 ;使T细胞和PMΦ分别产生的高水平IL 2和IL 1降至正常范围 ;并降低CIA小鼠血清中升高的抗CⅡ抗体。结论　GCS和SIN具有明显的抗炎作用 ,此作用可能是通过抑制     

Effects of interleukin-6 on cytochrome P450-dependent mixed-function oxidases in the rat.

Intravenous treatment of male rats with recombinant human interleukin-6 (rhIL6) at 50, 100 and 200 micrograms/kg (corresponding to 4, 8 and 16 x 10(4) U/animal, respectively) reduced the activities of hepatic microsomal cytochrome P450-dependent monoxygenases to varying degrees. Ethylmorphine-N-demethylase activity fell to 53% of control values, an effect similar to that induced by 2.5 mg/kg Escherichia coli lipopolysaccharide (LPS). Ethoxycoumarin-O-deethylase activity was also sensitive to inhibition, whereas IL6 had little effect on the activities of other P450-dependent enzymes, including ethoxyresorufin-O-deethylase. Pentoxyresorufin dealkylase activity, which is representative of the cytochrome P450 IIB 1/2 subfamily, was unaffected by IL6 whereas LPS reduced it to 33.7% of control values. Another hepatocyte-related parameter, serum concentration of alpha 1-acid glycoprotein (AGP), was increased by up to 3.5-fold over baseline by IL6 and 10-fold by LPS. Recombinant human interleukin-1 beta (rhIL1 beta) (10 micrograms/kg, corresponding to 5 x 10(4) U/rat) and recombinant human tumor necrosis factor alpha (rhTNF) (150 micrograms/kg corresponding to 24 x 10(4) U/rat) were both as potent as LPS (2.5 mg/kg) in increasing serum AGP levels and reducing hepatic microsomal monoxygenase activities. IL6 did not potentiate the effects of rhIL1 beta. Hepatic microsomal glucuronyltransferase activities were little affected by LPS and unaffected by rhIL6. Finally, rhIL6 was more potent after i.p. injection than after i.v. or s.c. injection. These results suggest that the effects of LPS, TNF and IL1 on the mixed-function oxidase system in vivo may be due partly to an induction of IL6 in vivo. The different sensitivities of the enzymes to IL6 but not to IL1 or TNF may be due to the involvement of two distinct mechanisms.     

Cyanidin‐3‐glucoside inhibits inflammatory activities in human fibroblast‐like synoviocytes and in mice with collagen‐induced arthritis

Rheumatoid arthritis (RA) is a chronic autoimmune disease characterized by joint tissue inflammation. Cyanidin‐3‐glucoside (C3G) is a major component in the flavonoid family and has shown anti‐inflammatory, anti‐oxidant and anti‐tumour activity. In this study, we investigated the effects of C3G on lipopolysaccharides (LPS)‐induced inflammation on human rheumatoid fibroblast‐like synoviocytes (FLS) and on collagen‐induced arthritis (CIA) mice model. We treated FLS with C3G followed by LPS induction, the expressions of tumour necrosis factor alpha (TNF‐α), interleukin 1 beta (IL‐1β) and IL‐6 and the activation of nuclear factor kappa‐light‐chain‐enhancer of activated B cells (NF‐κB) and mitogen‐activated protein kinase (MAPK) signalling pathway were analyzed. CIA was induced in mice and the arthritic mice were treated with C3G for 3 weeks. The disease severity was compared between control and C3G treated mice. The serum levels of TNF‐α, IL‐1β and IL‐6 were analyzed by ELISA. C3G inhibited LPS‐induced TNF‐α, IL‐1β and IL‐6 expression in FLS. Moreover, C3G inhibited LPS‐induced p65 production and IκBa, p38, ERK and JNK phosphorylation. Administration of C3G significantly attenuated disease in mice with CIA and decreased the serum level of TNF‐α, IL‐1β and IL‐6. C3G inhibited LPS‐induced inflammation in human FLS by inhibiting activation of NF‐κB and MAPK signalling pathway. C3G exhibited therapeutic effects in mice with CIA.     

白芍总苷对小鼠系统性红斑狼疮样改变的保护作用

目的　观察白芍总苷 (TGP)对空肠弯曲菌CJ S13 1诱导的小鼠SLE样改变的保护作用。方法　采用空肠弯曲菌CJ S13 1和CFA混合免疫动物 ,诱导小鼠SLE样改变。结果　TGP 5 0 ,10 0 ,2 0 0mg·kg-1·d-1× 2 8d ,ig能部分或完全拮抗血清IgG型自身抗体水平的升高 ,抑制ConA及LPS诱导的淋巴细胞增殖反应的增强和IL 1生成的增多。结论　一定剂量的TGP对小鼠SLE样改变具有一定的保护作用     

银屑1号对银屑病样动物模型细胞因子网络及其信号通路的调控

目的 研究中药复方银屑1号对银屑病样动物模型细胞因子网络及其信号通路的影响。方法建立小鼠阴道上皮模型和鼠尾鳞片表皮模型,设生理盐水组、银屑1号小、中、大剂量组和雷公藤多甙片治疗组共五组,观察各组对小鼠阴道上皮细胞有丝分裂的影响和促进小鼠尾部鳞片颗粒层形成的能力;并比较各组中六个细胞因子IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、TNF-α,IFN-γ荧光强度的变化及“JAKs—STATS”信号通路中STAT3,P—STAT3,STAT5,P—STAT5的变化。结果银屑1号的小、中、大剂量组均可以显著抑制雌激素期小鼠阴道上皮有丝分裂（P〈0．01）。银屑1号中、大剂量组均可以显著提高小鼠尾部鳞片颗粒层形成数（P〈0．01）。银屑1号的中、大剂量组均可降低IFN-γ的水平（P〈0．05）银屑1号的大剂量组可升高IL-4的水平（P〈0．05）。各组STAT3、P—STAT3、STAT5、P—STAT5比较均无统计学意义（P〉0．05）。结论银屑1号具有抑制表皮细胞的过度增生和改善表皮角化不全的作用,可能通过抑制IFN-γ的合成及促进IL-4的合成,调节细胞因子网络平衡,参与抗炎与免疫调节过程而发挥治疗作用。