Na~+,K~+-ATP酶和Ca~(2+),Mg~(2+)-ATP酶活性影响因素的研究进展

Na ,K -ATP酶和Ca2 ,Mg2 -ATP酶是广泛分布在机体内的生物膜酶系统,它们对维持细胞的正常生理功能起着极其重要的作用.Na ,K -ATP酶是镶嵌在细胞质膜脂质双分子层中的一种蛋白质,具有载体和酶的活性,它们催化ATP水解供能,驱动Na 和K 于细胞膜两侧的对向运输,维持着细胞膜两侧的膜电位、调节细胞渗透压,为营养物质的吸收提供动力,并在神经和肌肉细胞的冲动传导等方面起着重要作用[1].     

参芪通络注射液对缺血再灌注损伤大鼠脑组织Na~+K~+Ca~(2+)Mg~(2+)及Na~+-K~+-ATP酶的影响

目的:探讨中药参芪通络注射液对缺血再灌注损伤大鼠脑组织Na+、K+、Ca2+、Mg2+及Na+-K+-ATP酶活性的影响。方法:采用4血管法造成缺血再灌注脑损伤动物模型,分别给予不同剂量参芪通络及复方丹参注射液,观察对脑组织Na+、K+、Ca2+、Mg2+及Na+-K+-ATP酶活性的影响。结果:高剂量参芪通络注射液可显著调节脑细胞内外离子分布,提高Na+-K+-ATP酶活性,部分指标与对照药物复方丹参注射液比较存在显著性差异(P<0.05或P<0.01)。结论:参芪通络注射液具有显著调节脑细胞离子分布,提高Na+-K+-ATP酶活性作用,此可能系其脑保护作用机制之一。     

青龙衣多糖对S180小鼠红细胞膜唾液酸水平、ATP酶活性及膜电位的影响

目的考察青龙衣多糖对S180荷瘤小鼠红细胞膜唾液酸(SA)的量、Na ,K -ATP酶和Ca ,Mg -ATP酶活性,以及红细胞膜电位的影响。方法应用试剂盒测定S180荷瘤小鼠红细胞膜SA的量、红细胞膜Na ,K -ATP酶及Ca2 ,Mg2 -ATP酶的活性,利用流式细胞仪测定S180荷瘤小鼠红细胞膜电位。结果青龙衣多糖能增加S180荷瘤小鼠红细胞膜表面SA的量,3个剂量组作用显著(P<0.05);增强S180荷瘤小鼠红细胞膜Na ,K -ATP酶和Ca2 ,Mg2 -ATP酶的活性,3个剂量组作用显著(P<0.05);升高S180荷瘤小鼠红细胞膜电位,其中低剂量组作用显著(P<0.05),中、高剂量组作用非常显著(P<0.01)。结论青龙衣多糖能增强红细胞的免疫功能,这可能是青龙衣多糖抗肿瘤作用机制之一。     

二至丸对衰老模型大鼠Na~+-K~+-ATP酶、Ca~(2+)-Mg~(2+)-ATP酶影响的研究

目的:研究二至丸对D-半乳糖致衰老大鼠Na+-K+-ATPase、Ca2+-Mg2+-ATPase活性的影响,以探讨其延缓衰老的机理。方法:D-半乳糖复制大鼠衰老模型,观察肝细胞膜Na+-K+-AT-Pase、Ca2+-Mg2+-ATPase活性的变化及二至丸对其影响。结果:二至丸各治疗组均对Na+-K+-ATPase、Ca2+-Mg2+-ATPase有一定影响,表现为升高二者的含量。结论:二至丸延缓衰老作用的发挥可能是通过升高Na+-K+-ATPase、Ca2+-Mg2+-ATPase活性而实现的。其机制可能与减少自由基对细胞膜的损伤,维持细胞膜的稳定性相关。     

仙芦抗癌胶囊抗肿瘤作用及对肝癌HepG2细胞内Ca2+浓度的影响

目的观察仙芦抗癌胶囊的体内外抗肿瘤作用及对人肝癌HepG2细胞内Ca2 浓度([Ca2 ]i)的影响,从而揭示仙芦抗癌胶囊的抗肿瘤作用机制。方法通过观察仙芦抗癌胶囊对S180A荷瘤小鼠瘤质量和H22小鼠生存时间的影响,观察其体内抗肿瘤作用。通过MTT法观察含药血清对肝癌HepG2细胞的细胞毒作用。通过Fluo-3/AM标记HepG2肝癌细胞,激光共聚焦扫描显微术测定肿瘤细胞[Ca2 ]i,ATP酶试剂盒测定HepG2细胞膜Ca2 ,Mg2 -ATP酶活性。结果仙芦抗癌胶囊(1.00、0.50、0.25g/kg)对S180A小鼠的瘤体生长有显著的抑制作用,对H22小鼠的生存时间有显著的延长作用。仙芦抗癌胶囊体外对HepG2细胞有细胞毒作用;对细胞[Ca2 ]i有显著升高作用,高、中剂量(1.00、0.50g/kg)能够降低HepG2肝癌细胞膜Ca2 ,Mg2 -ATP酶活性。结论仙芦抗癌胶囊有明显的体内外抗肿瘤作用,其作用机制为抑制肿瘤细胞膜Ca2 ,Mg2 -ATP酶活性,增加细胞[Ca2 ]i,从而诱导肿瘤细胞凋亡,达到抗肿瘤作用的目的。     

白藜芦醇对大鼠脊髓损伤后受损局部Ca~(2 ),Mg~(2 )-ATP酶活性的影响

目的:探讨白藜芦醇(resveratrol,Res)对脊髓损伤(SCI)后受损部位局部Ca2 ,Mg2 -ATP酶活性的影响,分析SCI后局部微环境改变及Res的作用。方法:采用重物下落撞击法制备成年大鼠的脊髓损伤模型,于损伤后即刻腹腔注射给予Res 50 mg/kg,100 mg/kg或甲基强的松龙(MISS)100 mg/kg,并于给药后1 h,24 h,48 h时分别取受损脊髓组织,利用测磷法检测Ca2 ,Mg2 -ATP酶活性。结果:Res 100 mg/kg对Ca2 -ATP、Mg2 -ATP及Ca2 ,Mg2 -ATP酶活性在SCI后的活性抑制有明显的改善作用(P<0.05或0.003),最大改善率分别在71％、180％和120％以上,基本以1 h时影响较大,但对Mg2 -ATP酶活性的最大影响在48 h处,MPSS对SCI后1h Ca2 、Mg2 -ATP酶活性影响最大。Res的作用与MPSS相当或更强。结论:Res通过调节Ca2 ,Mg2 -ATP酶活性改善SCI后局部微环境,可能有效缓解SCI后继发性反应而产生保护作用。     

三化汤对脑缺血-再灌注老龄大鼠胃肠组织Na+-K+-ATP酶活性及Ca2+-ATP酶活性的影响

目的 观察三化汤对脑缺血-再灌注老龄大鼠胃肠组织Na+-K+-ATP酶活性、Ca2+-ATP酶活性的影响.方法 将大鼠随机分为正常对照组(空白组)、模型组、三化汤组、西药对照组(尼莫地平)、中成药对照组(血栓心脉宁).采用双侧颈总动脉结扎方法制备脑缺血模型,脑缺血1 h后,再灌注30 min.取出各组大鼠胃组织和小肠组织各5～20 mg制成匀浆,测定ATP酶(Na+-K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶)活性.结果 与空白组比,模型组胃肠组织Na+-K+-ATP酶活性、Ca2+-ATP酶活性明显降低(P<0.01);与模型组比,用药各组胃肠组织Na+-K+-ATP酶活性、Ca2+-ATP酶活性均明显升高(P<0.05);其中三化汤组胃肠组织Na+-K+-ATP酶活性明显高于尼莫地平组(P<0.05),Ca2+-ATP酶活性明显高于血栓心脉宁组(P<0.05).结论 三化汤能明显升高脑缺血-再灌注老龄大鼠胃肠组织Na+-K+-ATP酶活性、Ca2+-ATP酶活性,对脑缺血-再灌注老龄大鼠胃肠损伤有一定保护作用.     

扶元补脑冲剂对老年性痴呆鼠脑ATP酶及脂质过氧化反应的影响

目的:研究扶元补脑冲剂(红参、山楂、黄芪、淫羊藿、丹参、泽泻、石菖蒲)对老年性痴呆鼠脑ATP酶活性、自由基含量及脑系数的影响.方法:以三氯化铝痴呆模型小鼠为研究对象,探讨了扶元补脑冲剂对小鼠脑组织的MDA含量、Na -K ATP酶、Mg2 -ATP酶活性、脑系数及血清SOD活性的影响.结果:与模型组比较,扶元补脑冲剂能显著提高小鼠脑Na -K ATP酶、Mg2 -ATP酶及血清SOD的活性以及脑系数,降低脑MDA含量.结论:提示增强脑组织ATP酶的活性及机体抗脂质过氧化可能是扶元补脑冲剂防治老年性痴呆的作用机制之一.     

高良姜素对缺血性脑卒中大鼠脑线粒体代谢相关酶的影响

目的:观察高良姜素对缺血性脑卒中大鼠脑线粒体能量代谢相关ATP酶的影响,探讨高良姜素通过干预线粒体能量代谢障碍发挥缺血性脑卒中保护作用的可能机制。方法:将120只雄性SD大鼠随机分成两大组,即术前给药组和术后给药组,每大组中又分为假手术组、模型组、阳性药银杏叶提取物EGb761组(mg·kg-1)及高良姜素高、中、低剂量组(100,50,25 mg·kg-1),每组10只。大鼠行中动脉栓塞手术前15 min或者术后6 h灌胃给药或给予等量生理盐水,于手术后24 h进行神经功能学评分,制备缺血侧脑组织线粒体悬液,并对其Na+-K+ATP酶,Ca2+-ATP酶,Mg2+-ATP酶,Ca2+-Mg2+ATP酶活性进行检测。结果:高良姜素中剂量和高剂量组,Na+-K+ATP和Ca2+-Mg2+ATP酶活性均有明显提高(P<0.05),低剂量组酶活性无明显改变;相比较,Ca2+-ATP酶,Mg2+-ATP酶活性各组之间没有明显的差别。结论:高良姜素能明显提高缺血性脑卒中大鼠脑线粒体Na+-K+ATP酶和Ca2+-Mg2+ATP酶活性,缓解缺血脑细胞的能量代谢障碍,是其发挥脑缺血保护作用的可能机制之一。     

绞股蓝总苷对大鼠心、脑Na~+,K~+-ATP酶的抑制作用及其动力学分析

目的观察绞股蓝总苷对心、脑微粒体Na ,K-ATP酶活性的抑制作用及动力学分析。方法采用离心法制备大鼠心、脑组织微粒体酶,以比色法测定Na ,K-ATP酶活力,通过酶动力学研究方法分析绞股蓝总苷对心、脑微粒体Na ,K-ATP酶活性的抑制作用。结果绞股蓝总苷体外可逆性抑制大鼠心、脑微粒体Na ,K-ATP酶活性,并呈浓度依赖性,且对脑微粒体Na ,K-ATP酶的抑制作用较强,其IC50分别为(58.79±8.25)、(52.07±6.25)mg/L。降低Na ,K 浓度或增加ATP浓度则增强其抑制酶活性作用。酶动力学分析显示,绞股蓝总苷对微粒体Na ,K-ATP酶的作用近似Na 的竞争性拮抗剂、底物ATP的反竞争性抑制剂、K 的混合性抑制剂。结论绞股蓝总苷通过抑制心、脑Na ,K-ATP酶活性而发挥其强心作用和中枢抑制作用。     

益智汤对家兔脑Na+,K+-ATP酶活力影响的药效动力学研究

目的:探讨益智汤(YZS)的药效动力学过程。方法:本实验运用血清药理学的方法,以家兔脑Na ,K ATP酶活力为指标进行测定,建立相应的时间效应方程及剂量效应方程,以此进行益智汤药动学参数的估算。结果:益智汤不同时相含药血清及不同剂量含药血清对家兔脑Na ,K ATP酶活力均有一定的增强作用,其最低起效剂量为0.03g/kg,效应呈现半衰期为0.98h,效应消除半衰期为2.41h,药效作用期为5.03h,效应达峰时间为2.19h。结论:益智汤能增强家兔脑组织Na ,K ATP酶活力,且具有起效剂量低、起效迅速、药效持久等特征。     

急性一氧化碳中毒对小鼠脑酶的影响

目的:观察急性一氧化碳(CO)中毒对大鼠脑Na+-K+-ATP酶及琥珀酸脱氢酶(SDH)的活性影响.方法:一氧化碳腹腔注射造模后观察脑Na+-K+-ATP、SDH变化.结果:急性一氧化碳能导致小鼠脑Na+-K+-ATP酶、SDH酶活性降低.结论:急性一氧化碳中毒会导致大鼠脑损伤.     

温灸家兔穴位后循经皮肤温度及组织Ca~(2+)-、Mg~(2+)-ATP酶活性的变化

目的:研究循经温度形成的现象与Ca2+、Mg2+-ATP酶活性变化的关系,探讨循经高温线形成的能量代谢机制。方法:选用健康成年家兔7只,用红外热像仪观察温灸左后肢外侧"后三里"、右后肢内侧"阴陵泉"穴诱发胃经和脾经出现的温度变化。选取温灸后循经出现温度较高部位(高温区)的组织,用酶学方法测定Ca2+、Mg2+-ATP酶活性,并与非高温区(对照区)组织比较。结果:温灸家兔"后三里"阴陵泉"穴循经组织温度明显升高。右后肢内侧(足太阴脾经)高温区组织Mg2+-ATP酶活性明显高于对照区组织(P<0.05);左后肢外侧(足阳明胃经)高温区组织Mg2+-ATP酶活性亦有增高趋势,但与对照组比较差异无显著性意义(P>0.05)。温灸后,双后肢循经高温区组织Ca2+-ATP酶活性较对照区有升高趋势,但差异无显著性统计学意义(均P>0.05)。结论:1)家兔足太阴脾经循经出现温度较高组织的Mg2+-ATP酶活性较非高温区增强,可能导致外周ATP释放能量的功能活动加强,从而促使组织能量代谢旺盛。2)家兔循经温度较高组织的Ca2+-ATP酶活性未见明显改变,提示Ca2+-ATP酶活性在循经高温区的形成过程中可能不起主要作用。     

补心方对慢性心衰大鼠心肌Na+-K+ATP酶、Ca2+-Mg2+ATP酶及琥珀酸脱氢酶的作用研究

目的 研究补心方对心梗后早期大鼠Na+-K+ATP酶、Ca2-Mg2+ ATP酶和琥珀酸脱氢酶(Succinate Dehydrogenase,SDH)的影响.方法 清洁级大鼠60只,采取结扎冠状动脉左前降支中上1/3部,造成AMI模型,手术成功存活动物随机分为心阳高、中、低剂量组及曲美他嗪组、模型组、假手术组共6组,均予灌胃给药或蒸馏水8周.8周后采用分光光度计检测心梗后早期大鼠心肌Na+-K+ATP酶、Ca2+-Mg2+ ATP酶以及SDH水平.结果 对心肌细胞ATP酶的影响:模型组大鼠ATP酶含量及SDH活性较假手术组降低(P＜0.01).补心方干预后,心阳高剂量、中剂量、低剂量组Na+-K+ ATP酶、Ca2+-Mg2+ ATP酶和SDH活性较模型组均升高(P＜0.01),但低于假手术组及曲美他嗪组,且随剂量增加,Na+-K+ATP酶、Ca2-Mg2 ATP酶含量和SDH活性逐渐增强.结论 补心方可增强与Na+-K+ATP酶、Ca2-Mg2ATP酶含量,提高SDH活力,改善线粒体功能,从而保护心肌,改善慢性心衰大鼠症状,延缓慢性心衰的发生发展.     

针刺对D - gal致衰老大鼠模型脑组织NO、NOS及a2+-Mg2+- ATP酶活性的影响

目的:探讨针刺抗脑老化的作用机制.方法:将常用的抗衰老穴位分为督穴组和体穴组,观察不同组穴对衰老大鼠模型脑组织NO、NOS含量及Ca2+ - Mg2+ - ATP酶活性的影响.结果:D -gal致大鼠衰老后,脑组织中NO、NOS的含量明显升高,督穴组、体穴组均有延缓其含量升高的作用,且督穴组较体穴组作用强（P＜0.05）,具有显著性差异.而脑细胞膜Ca2+- Mg2+ - ATPase活性明显降低,各针刺组均有延缓其活性降低的作用,督穴组、体穴组之间比较,督穴组脑细胞膜Ca2+ - Mg2+ - ATPase活性明显高于体穴组,有显著性差异(P＜0.05).结论:针刺可以通过提高Ca2+ - Mg2+ - ATPase活性,稳定NOS浓度,从而平衡NO含量,充分发挥NO生理机能,而发挥抗脑衰老的作用,同时督穴组抗脑老化作用更为理想.     

敦煌韦慈方延缓衰老作用研究

目的 :研究敦煌韦慈方对D 半乳糖所致衰老模型小鼠的延缓衰老作用。方法 :用跳台法研究对D 半乳糖所致衰老模型小鼠学习记忆能力的影响 ,用NBT还原法和TBA荧光法测定小鼠血清SOD、MDA ;用DTNB直接比色法测定GSH Px的活性 ,UV法测定MAO B的活性 ,定磷法测定脑组织Na K ATP酶的活性。结果 :敦煌韦慈方可明显使D 半乳糖所致衰老模型小鼠血清SOD和脑组织GSH Px酶活性明显升高 ,血清MDA明显下降 ,可使Na K ATP酶活性明显升高 ,使脑组织MAO B活性明显下降。结论 :敦煌韦慈方具有显著的延缓衰老作用。     

温阳活血方对肾病大鼠Na+,K+-ATP酶、蛋白质代谢的影响

目的:探讨温阳活血方治疗肾病水肿的作用机制.方法:采用ADR注射制作大鼠肾病模型,观察温阳活血方对肾内髓Na ,K -ATP酶及肝脏蛋白质代谢的影响.结果:模型组大鼠肾内髓Na 、K -ATP酶活性明显高于正常组,温阳活血方可明显降低Na 、K -ATP酶活性,模型鼠肝组织蛋白质、RNA、DNA含量均低于正常组,温阳活血方可明显改善蛋白质的代谢异常,可使蛋白质、DM水平恢复正常.结论:促进肝组织蛋白合成,降低Na 、K -ATP酶活性可能是温阳活血方治疗实验大鼠水肿的机理之一.     

电针对脑缺血再灌注大鼠线粒体Ca2+值及Na+-K+-ATP酶活性的影响

目的:探讨电针对局灶性脑缺血再灌注大鼠大脑线粒体Ca2 值及Na -K -ATP酶活性的影响。方法:将动物随机分为正常组、模型组、电针组,采用改良的Longa的线栓法制作局灶性脑缺血再灌注模型。电针组于造模后针刺水沟、大椎、三阴交,捻转刺激30s后,接电针仪,持续20 min。结果:模型组Na -K -ATP酶活性较正常组显著下降,Ca2 值则较正常组明显升高;电针组Na -K -ATP酶活性与模型组比较有明显升高,Ca2 值较模型组显著降低。结论:电针可以提高缺血再灌注区域线粒体抗氧化损伤的能力,提高线粒体神经元细胞的能量代谢能力,从而发挥对缺血再灌注线粒体损伤的保护作用。     

地黄饮子对老年痴呆模型大鼠行为学、AchE及Na+K+- ATP、Ca2+-ATP酶活性的影响

目的 :观察古方地黄饮子对老年性痴呆大鼠行为学 ,以及对大脑海马、丘脑及皮层等组织中的乙酰胆碱酯酶 (AchE)、Na K -ATP、Ca2 -ATP酶的活性的影响。方法 :腹腔注射D -半乳糖建立亚衰老模型 ,大脑双侧Meynert基底核微注鹅膏蕈氨酸 (Ibotenicacid ,IBO) ,建立拟AD模型 ,采用避暗法观察该模型大鼠学习记忆能力 ,并采用酶学测定大鼠大脑海马、丘脑及皮层中AchE、Na K -ATP、Ca2 -ATP酶的活性。结果 :地黄饮子能缩短模型大鼠避暗学习、记忆潜伏期 ,减少错误次数 ;降低大鼠脑组织中AchE的含量 ,提高ATP酶的含量。结论 :地黄饮子能改善AD大鼠学习记忆能力 ,改善脑组织的能量代谢 ,防止AT Pase活性降低 ,并可维持乙酰胆碱 (Ach)的正常水平。     

益气活血解毒方对Lewis肺癌小鼠癌细胞Mg2+-ATP 酶、葡萄糖-6-磷酸酶活性的影响

目的观察益气活血解毒方药对小鼠Lewis肺癌癌细胞Mg2 -ATP酶、葡萄糖-6-磷酸酶(G-6-P酶)活性的影响。方法应用酶细胞化学染色法观察Lewis肺癌细胞酶活性的改变。结果质膜标志酶Mg2 -ATPase、内质网标志酶G-6-Pase反应颗粒变小,数量减少,密度减低,提示酶活性明显下降。结论益气活血解毒方药降低肺癌细胞质膜标志酶Mg2 -ATPase及内质网标志酶G-6-Pase活性。