联合接种流感疫苗和霍乱毒素B亚单位对流感病毒感染的防御作用

霍乱毒素B亚单位(CTB)是一种无毒性的霍乱毒素成分.CTB不仅是有效的肠道免疫原,也是一种肠粘膜佐剂.鼻内联合接种单剂流感病毒与CTB可诱导鼻分泌物中高水平IgA和血清中血凝抑制(HI)抗体.本文作者先给Balb/c小鼠鼻内联合接种甲型流感病毒HA疫苗和CTB,4周后再单独接种甲型流感病毒HA疫苗,观察接种后的免疫应答.小鼠接种两剂较高剂量(1.5μg)的A/PR/8/34(PR-8,H1N1)HA疫苗(第1剂与CTB联合接种)后,鼻洗液中的抗病毒IgA抗体和血清中的HI抗体应答都比第1次接种     

鼻内接种流感疫苗和霍乱毒素B亚单位预防流感病毒感染

霍乱毒素(CT)与某种无关的抗原同时接种时,不但是有效的肠道免疫原,而且还是刺激对无关抗原的IgA和IgG抗体应答的免疫调节剂。本文作者将CT或霍乱毒素B亚单位(CTB)与流感疫苗同时接种小鼠,观察小鼠的免疫应答及流感病毒感染情况。流感HA疫苗由流感病毒A/山形/120/86(H1N1)株和A/PR/8/34(H1N1)株制成。对6～8周龄的雌性BALB/c小鼠鼻腔、腹腔或皮下接种HA疫苗和CTB或CT。4周后测定血清中血凝抑制(HI)抗体和鼻腔内流感特异性和CTB特异性IgA抗体。     

流感HA和霍乱毒素B亚单位联合疫苗经鼻内、口腔或非肠胃途径免疫的比较

本文用不同剂量流感病毒A/PR/8/34HA疫苗和霍乱毒素B亚单位(CTB)联合免疫小鼠,比较了鼻内、非肠胃、腹腔或皮下接种小鼠4周后的抗体应答和用A/PR/8/34小鼠适应株鼻腔攻击3天后的保护作用的观察。作者首先检测呼吸道洗液和血清中抗PR8病毒IgA抗体,发现鼻内接种比其它途径产生较高水平的抗病毒IgA抗体。同时,分析呼吸道洗液和血清中抗PR8病毒IgG抗体,发现当CTB的剂量为0.1μg时,鼻内与非肠胃接种产生的IgG抗体水平相似;当     

鼻内接种C3d融合的血凝素产生的抗流感病毒感染的保护作用

曾有报道用补体成分 C3d与分泌型流感病毒血凝素 ( HA)融合的重组蛋白 ( s HA- C3d)作疫苗能增加 HA抗体的亲和力以及 HA抑制活性。因此 ,为了建立一种更安全有效的疫苗 ,作者在流感 -BALB/c小鼠模型中检测了融合 C3d的血凝素重组蛋白 ( s HA- m C3d3 )经鼻内免疫后诱导的粘膜免疫应答。　　日本国立传染病研究所 Watanabe等构建了表达重组蛋白的真核表达质粒 ,经纯化鉴定获得了相应的可用于免疫的 s HA- m C3d3 、分泌型血凝素( s HA)和从流感病毒直接纯化的跨膜型血凝素( tm HA)三种抗原 ,分别鼻内接种 6～ 8周雌性BALB/c小鼠…     

鼻内接种C3d融合的血凝素产生的抗流感病毒感染的保护作用[英]／Watanabe I，Ross TM，Tamura S，etal／／Vaccine.

曾有报道用补体成分C3d与分泌型流感病毒血凝素(HA)融合的重组蛋白(sHA—C3d)作疫苗能增加HA抗体的亲和力以及HA抑制活性。因此，为了建立一种更安全有效的疫苗，作者在流感-BALB／c小鼠模型中检测了融合C3d的血凝素重组蛋白(sHA—mC3d3)经鼻内免疫后诱导的粘膜免疫应答。     

甲型流感减毒活疫苗感染儿童的分泌性和全身性免疫应答

作者用 ELISA 检测 A/Alaska/77(H3N2)或 A/Hong Kong/77(H1N1)冷适应重组株病毒感染的儿童血清和鼻洗液中的抗甲型流感病毒纯化血凝素(HA)的同型特异性抗体,结果表明,接种疫苗前儿童的血清和鼻洗液中均未测到 HA 抗体。17名儿童接种后全部有血清 IgG HA 抗体应答,16人有 IgM抗体应答。血清 IgG 抗体在4～6周达高峰。而 IgM 抗体在2周时达高峰,4～7周下降。     

微粒树脂对鼻内免疫流感HA疫苗免疫应答的增强作用

流感病毒通过上呼吸道感染,局部分泌型抗体与血清抗体的产生对诱导交叉保护很重要,因为粘膜IgA主要提供抗上呼吸道感染的保护作用,而血清IgG抗体主要保护下呼吸道,所以建立一种能刺激粘膜IgA抗体产生的免疫方法可能会提高目前灭活疫苗的保护效果。然而,单独鼻内接种灭活疫苗不能诱导足够的粘膜IgA应答,需要有效的佐剂来增强其效力。多聚微粒可能是首选的免疫佐剂,因为抗原可能会掺入这些微粒,或与这些微粒结合。作者比较了不同离子交换树脂微粒对流感病毒血凝素（HA）疫苗鼻内接种小鼠的效果的增强作用。     

天然和重组霍乱毒素B亚单位作为鼻内接种刺激因子的比较

霍乱毒素(CT)与抗原同时口服或鼻内接种时可增强抗原特异性粘膜免疫应答。因此,CT及其B亚单位(CTB)作为粘膜疫苗的潜在佐剂具有重要意义。CT全毒素的毒性限制了它的使用。因此,CTB作为粘膜疫苗的成分显得更有前景。作者比较了鼻内接种卵白蛋白(OVA)与天然CTB或重组CTB(rCTB)的混合物或共价结合物的效果。     

合成的重组流感疫苗诱导的长期免疫力和株间交叉保护作用

作者将激发B细胞、辅助性T(Th)细胞和细胞毒性T淋巴细胞(CTL)应答的三个表位的寡核苷酸(HA91-108、NP55-69和NP147-158),分别插入沙门菌鞭毛蛋白基因中,得到杂交鞭毛蛋白Fla-55、Fla-147和Fla-91.将其免疫BALB/c小鼠,检测特异性体液免疫和细胞免疫应答.为评估疫苗诱导长期记忆和保护作用的能力,作者分别用Fla-对照、Fla-91+Fla-147和Fla-55+Fla-91+Fla-147鼻内免疫小鼠3次,间隔3周.末次免疫后1、4和7个月,用流感病毒A/得克萨斯/77攻击.结果表明,合成疫苗诱导的保护性免疫力至少可持续7个月.含有三种表位的疫苗免疫效果最好.Th表位与另两种表位协同时,可明显增强保护作用.所有A/H3株都有HA91-108,所有甲型病毒都具有核蛋白.因此有必要确定这些表位疫苗能否诱导交叉保护.结果表明,小鼠免疫后1个月,用甲型流感病毒株(两株为H3N2亚型,1株为H2N2型)攻击,接种Fla-91疫苗的小鼠仅能抵抗H3亚型病毒,增加Fla-147能增强Fla-91的保护力,对H2株也     

流感血凝素DNA疫苗诱导体液免疫应答的检定

作者向小鼠股四头肌注射流感病毒A/PR/8/34株的血凝素(HA)DNA10ng～100μg,共1～3次,每次间隔3周.用血凝抑制(HI)试验和ELISA检测免疫后小鼠体内抗HA抗体水平.两项试验结果都显示HA DNA注射剂量和注射次数与产生的抗体水平直接相关.注射lμg HA DNA三次或一次注射10～100μg HA DNA的小鼠体内均可测到抗体,而100μg HA DNA诱导的抗体水平至少与感染活流感病毒(A/PR/8/34)后产生的抗体水平相仿.免疫后抗体水平至少可维持18个月.注射次数对抗体水平影响不大.     

用重组病毒表达细胞因子——开发疫苗的新策略

免疫系统可被各种细胞因子活化和调节.白细胞介素2(IL-2)和γ干扰素(IFN-γ)能增强细胞介导免疫力,抑制淋巴细胞TH_2亚群的免疫应答:而IL-4、IL-5、IL-6和IL-10能诱导体液免疫应答,但抑制淋巴细胞TH1亚群应答.带有IL-2和IFN-γ编码基因的重组痘苗病毒感染裸鼠实验证明,可以改变痘苗病毒的致病力,增加其安全性。编码IL-2和流感病毒血凝素(HA)的重组痘苗病毒可诱导抗流感的保护性免疫力.鼻内接种编码IL-5和HA的痘菌病毒,可选择性增加分泌IgA的细胞数和IgA滴度.而给小鼠注射编码IL-6和HA的疲苗病毒时,选择性提高抗HA的IgG1水平.用共表达细胞因子和人类免疫缺陷症病毒(HIV)基因的痘苗病毒作疫苗不仅安全,而且可以克服HIN感染所造成的免疫缺陷,使免疫应答更有利于疾病的控制.     

冷重组流感活疫苗(CR35)和A/USSR/77(H1N1)流感灭活疫苗接种后血清和呼吸道分泌液中的免疫应答

本文比较了鼻腔接种流感病毒减毒活疫苗H1N1与局部和肠道外接种灭活单价 H1N1疫苗对有或无基础免疫者的免疫原性,并测定了鼻洗液和肺灌洗液中的血凝素(HA)抗体应答。对100名18～27岁成年志愿者分别接种两种类型A/USSR/77(H1N1)流感疫苗。灭活疫苗H1N1 HA含量为20μg/0.5ml,冷重组活疫苗(CR35)含2μgA/USSR HA。对     

儿童每年鼻内接种三价冷适应流感活疫苗对抗体应答的影响

三价冷适应流感活疫苗 ( CAIV- T)可能列为每年接种的疫苗。有关对重复接种CAIV- T免疫应答的报道较少 ,为了确定反复接种 CAIV- T疫苗的免疫应答 ,并与接种第 1针疫苗后的抗体应答进行比较。作者采用多中心、前瞻性随机、双盲对照方法 ,对2 0 3名健康儿童中 1 36名儿童 ,连续 4年鼻内接种 CAIV- T,然后在第 1、2、4年采血。第4年对以前未免疫过的 1 56名同龄儿童 ,免疫 1针 CAIV- T。用血凝抑制法检测 3种流感病毒株抗体。　　结果显示 :接种后 1年 99%的人产生甲型流感 ( H3N2 )病毒抗体 ,98%产生乙型流感病毒抗体 ,75%产生甲…     

药物赋形剂和吸收促进剂作为增强粘膜佐剂活性的免疫刺激物

霍乱毒素B亚单位(CTB)具有免疫佐剂作用,多种药物赋形剂和吸收促进剂[如牛磺胆酸(TC)、甘氨胆酸(GC)、双氢牛磺梭链孢酸(DHTF)、QuilA、甲基纤维素(MC)等]能进一步增强CTB的佐剂活性.将流感血凝素(HA)疫苗加CTB(0.2μg或2μg)、0.2μg CTB及赋形剂、2μg CTB及赋形剂或赋形剂悬于1.0μl的磷酸盐缓冲盐水中,分别接种于6周龄BALB/c雌性小鼠鼻腔内.免疫后4周,采集鼻腔洗液和血清,用ELISA测定抗HA和抗CTB抗体.     

rCTB结合脂质体作为口服抗原释放系统的效力[英]

脂质体是用于抗传染病疫苗研制的一种极有希望的口服抗原释放系统,但肠道集合淋巴结对脂质体的吸收率与嗣后诱导粘膜IgA应答仍是主要问题.针对脂质体免疫原的导向释放,作者曾报告通过霍乱毒素G_(M1)神经节苷脂结合亚单位(CTB)上的硫醚键连接到脂质体外表面.在此项研究中,作者研究了含变异链球菌AgⅠ/Ⅱ粘附素的唾液结合区(SBR)的重组CTB(rCTB)结合脂质体在诱导针对亲本分子AgⅠ/Ⅱ的粘膜(唾液、阴道和肠道)IgA和血清IgG应答中的效力.     

大肠杆菌不耐热肠毒素突变体可作为鼻腔免疫流感疫苗的佐剂

作者使用定点突变的大肠杆菌不耐热肠毒素(LT)作为佐剂,与流感病毒血凝素(HA)疫苗一起经鼻腔接种小鼠,对其免疫效果及安全性进行了探讨.取6～8周龄雌性BALB/c小鼠为免疫对象,HA疫苗由流感病毒PR8(H1N1)制备.用定点诱变方法替换Al亚单位上某一氨基酸,得到LT7K、LT61F、LT112K、     

大肠杆菌LTB加痕量LT用作鼻腔接种流感疫苗的佐剂

本文讨论了大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位(LTB)加痕量全毒素(LT)是否可作为鼻腔接种流感疫苗的有效佐剂.Balb/c小鼠鼻腔接种1.5μg流感血凝素(HA)灭活疫苗(以流感病毒明PR8株制备),分不加佐剂组、加2μg LTB组、加痕量LT组和同时加2μg LTB及痕量LT组(2～20ng),免疫后用ELISA方法检测小鼠的IgA和IgG抗体.结果发现,前三组诱导了临界水平的抗-HA IgG抗体应答,而最后一组诱导了较高水平的抗-HA IgG抗体应答.     

免疫活性肽FR48217对流感灭活疫苗免疫接种应答的增强作用

细菌细胞壁中的大分子肽聚糖是最有效的免疫刺激剂.FK156是从肽聚糖中分离出来的,它的衍生FR48217(FR)也显示出免疫刺激作用.作者用流感灭活疫苗与/不与FR合用接种小鼠,并在小鼠接种疫苗后28天用流感病毒A/PR/8/34进行攻击,通过检测血清和肺泡灌洗液中的流感病毒特异性IgA和IgG抗体滴度及肺泡灌洗液中的干扰素(IFN)活性,来研究FR增强免疫应答的机理.     

鼻内接种的病毒体流感亚单位疫苗在雪貂动物模型中诱导强的局部和全身性保护性免疫[英]

最近的研究表明,病毒体颗粒作为疫苗传送系统能够在动物和人类诱生强的免疫应答。雪貂对流感病毒感染的敏感性和临床反应与人类十分相似,是研究流感疫苗的很好模型。英国伦敦大学Lambkin等对雪貂鼻内和肌肉接种病毒体疫苗,比较两种疫苗防止流感、减轻症状的效果以及免疫雪貂鼻内分泌物中流感病毒的排泄情况。试验疫苗含有三株流感病毒〔类A/北京/262/95(H1N1)、A/悉尼/5/97(H3N2)和B/哈尔滨/7/94〕血凝素各15μg,鼻内接种疫苗另含4μg大肠杆菌不耐热毒素作为黏膜佐剂。将雪貂分为3组,第1组分别于第0和第7天用专用喷雾器鼻内接种200μl试…     

免疫佐剂MF59可增强流感疫苗在幼龄和老龄小鼠中的免疫原性

由于种种原因使得老年人对流感疫苗的免疫应答低于年轻人.一种可能提高老年人对流感疫苗免疫应答的方法是添加强的免疫佐剂,如可与流感疫苗合用的MF59就是有希望的新型佐剂.MF59是含有5%V/V鲨烯、0.5%V/V吐温80和0.5%Span85的水包油乳剂.免疫对象为8周龄和18月龄的雌性BALB/c小鼠.作者比较了加或不加MF59的流感疫苗在这两个年龄组小鼠中的免疫情况.以前未感染过流感病毒的小鼠经流感疫苗免疫后,18月龄小鼠的疫苗特异性抗体水平及T淋巴细胞增殖应答明显低于8周龄小鼠.免疫后两组的细胞因子水平和抗体同型分布亦不同.合用MF59的结果表明,未感染过流感病毒的老龄和幼龄小鼠对疫苗的免疫应答均显著提高,其中老龄小鼠的免疫应答水平与仅用疫苗免疫的幼龄小鼠相似.同样,以前感染过流感病毒的老龄小鼠对疫苗