毒蕈碱和NMDA受体拮抗剂对吗啡依赖大鼠脊髓和脑干前脑啡肽原和前强啡肽原mRNA表达的影响

目的　观察毒蕈碱 (M)受体拮抗剂对吗啡依赖大鼠脊髓和脑干前脑啡肽原 ( preproenkephalin ,PPE)和前强啡肽原 ( preprodynorphin ,PPD)mRNA表达的影响。 方法　本文利用逆转录聚合酶链反应 (RT PCR) ,以 β actinmRNA为内标检测了PPE和PPDmRNA。结果　吗啡依赖大鼠脊髓和脑干PPE基因表达和正常大鼠相比都略有增加 ,吗啡依赖大鼠注射纳洛酮激发戒断反应后 ,脊髓PPE基因表达增加 ,而脑干中变化不明显。吗啡依赖大鼠脊髓和脑干PPD基因表达都低于正常大鼠组 ,吗啡戒断反应时脊髓PPD基因表达在 1h变化不明显 ,2h时增加到峰值 ,4h时仍高于依赖组 ,而脑干强啡肽基因表达在 1h、2h和 4h时都明显减少。经M受体拮抗剂甲基东莨菪碱和M1拮抗剂 pirenzepine处理后大鼠脊髓和脑干PPE和PPD基因表达较戒断 1h组有不同程度的增加 ;经NMDA受体拮抗剂MK 80 1处理后 ,脊髓和脑干中PPE基因较戒断组 1h无明显差异 ,脊髓和脑干PPD基因表达较戒断组明显增加 ;而经NOS抑制剂L N 硝基精氨酸甲酯 (L NAME)处理后大鼠脊髓和脑干PPE基因表达较戒断 1h组有不同程度的增加 ,脊髓和脑干PPD基因表达变化不明显。脊髓和脑干中 β actin基因表达在各处理组之间没有差别。结论　M受体拮抗剂、NMDA受体拮抗剂和NOS抑制剂在吗啡戒断反应时增加     

吗啡依赖大鼠脊髓和脑干μ受体和κ受体mRNA表达的研究

目的 观察吗啡依赖戒断时大鼠脊髓和脑干μ受体和Κ受体mRNA表达以及毒蕈碱受体拮抗剂、NMDA受体拮抗剂和NOS抑制剂对些基因表达的影响。方法 用逆转录聚合酶链反应（RT－PCR）,以β-actin mRNA为内标检测μ受体和Κ受体mRNA的表达水平。结果 吗啡依赖大鼠脊髓和脑干μ受体mRNA表达明显升高,纳洛酮激发大鼠戒断反应1h后μ受体基因表达降低,4h后接近正常组,而脊髓和脑干Κ受体基因的变化与μ受体基因表达趋势相反。鞘内注射PKA抑制剂Rp-cAMPs和蛋白磷酸酶抑制剂calyculinA可以明显减少脊髓和脑干中μ受体和Κ受体基因表达,而PKA激活剂Sp-cAMPs则无明显影响;经NOS抑制剂l-N-硝基精氨酸甲酯（l-NAME)处理后,脊髓μ受体和Κ受体基因表达明显减少,经毒蕈碱（M）受体拮抗剂甲基东莨菪碱处理后,脊髓μ受体和脑干Κ受体基因表达也明显减少,而脊髓Κ受体和脑干μ受体基因表达变化不明显;经NMDA拮抗剂MK801和M1受体拮抗剂哌拉唑嗪处理后,脊髓和脑干μ受体和Κ受体基因表达较戒断1h组无明显差异。脊髓和脑干中β-actin基因表达各处理组之间没有差别。结论 吗啡依赖和戒断动物脊髓和脑干中μ受体和Κ受体基因表达发生改变,M受体拮抗剂和NOS抑制剂在吗啡戒断反应时减少μ受体和Κ受体基因表达可能是它们有效控制吗啡戒断症状的机制之一。     

吗啡依赖大鼠脊髓和脑干毒蕈碱受体亚型基因的表达

目的观察吗啡依赖大鼠脊髓和脑干毒蕈碱型乙酰胆碱受体m_1～5的表达。方法以β-actin为内标,用RT-PCR方法检测m_1～5的表达。结果吗啡依赖大鼠脊髓m_1～5受体和脑干中m₁和m₂表达较正常对照组明显升高,注射纳洛酮1 h后脊髓m_1～4和脑干m₁表达较依赖组减少。东莨菪碱(0.5 mg·kg^-1,ip)或呱伦西平(10 mg·kg^-1,ip)明显减少吗啡戒断症状,呱伦西平处理后脊髓m₁,m₂,m₃和m₅表达较戒断对照组增加,东莨菪碱处理后脊髓m₂,m₃和m₄表达增加。结论脊髓M受体适应性改变是吗啡戒断症状表达的生物学基础。     

毒蕈碱和NMDA受体拮抗剂对吗啡依赖大鼠脊髓和脑干前脑啡肽 …

目的 观察毒蕈碱（Ｍ）受体拮抗剂对吗啡依赖大鼠脊髓和脑干前脑啡肽原和前强啡肽原ｍＲＮＡ表达的影响。方法 本文利用逆转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ），以β－ａｃｔｉｎ ｍＲＮＡ为内标检测了ＰＰＥ ｍＲＮＡ。结果 吗啡依赖大鼠脊髓和脑干ＰＰＥ基因表达和正常大鼠相比都略有增加，吗啡依赖大鼠注射纳洛酮激发戒断反应后，脊髓ＰＰＥ基因表达增加，而脑干中变化不明显。吗啡依赖大鼠脊髓和脑干ＰＰＤ基因表达都低于正常     

吗啡依赖大鼠脊髓鸟苷酸环化酶对氧化氮和M受体激动剂反应性研究

吗啡处理组 (10mg·kg-1,sc)和吗啡依赖组大鼠脊髓鸟苷酸环化酶 (GC)基础活力和氧化氮 (硝普钠为供体 )刺激酶活力升高 ,cGMP含量却降低。纳络酮处理后 ,依赖大鼠脊髓GC活力降低 ,对NO敏感性提高 ,cGMP含量剧升。M受体激动剂氨甲酰胆碱可抑制对照组和吗啡处理组脊髓GC活力 ,对吗啡依赖以及纳洛酮处理组的GC抑制作用消失。结果表明脊髓GC对氧化氮和M受体激动剂的反应性改变在吗啡依赖及戒断反应中起重要作用。     

卡马西平对吗啡依赖大鼠戒断症状及ACTH的影响

目的 :观察卡马西平 (Carb)对吗啡依赖大鼠纳洛酮催促戒断症状的抑制作用及血清促肾上腺皮质激素(ACTH)水平的影响。方法 :剂量递增法皮下注射 (sc)盐酸吗啡 (Mor) ,建立大鼠吗啡依赖模型 ,腹腔注射 (ip)盐酸纳洛酮 1mg·kg- 1 催促 ,观察戒断反应并评分 ;免疫发光法测定血清ACTH水平。结果 :Carb 10 0mg·kg- 1 及 2 0 0mg·kg- 1 均可明显减轻大鼠戒断症状 (P <0 0 5 )。 10 0mg·kg- 1 剂量组的ACTH水平接近正常 ,低于Carb 2 0 0mg·kg- 1 组(P <0 0 5 )。结论 :适当剂量的卡马西平可有效控制吗啡依赖大鼠的戒断症状     

盐酸氢吗啡酮身体依赖性潜力

目的:评价盐酸氢吗啡酮产生身体依赖性的潜力。方法:采用小鼠催促戒断跳跃、大鼠催促戒断和大鼠自然戒断3种实验模型。结果:(1)在小鼠催促戒断实验中,氢吗啡酮3个剂量组(sc,累积剂量分别为7、70和480mg·kg-1)和吗啡组(sc,累积剂量为480mg·kg-1)小鼠出现跳跃的百分率和跳跃次数及体重下降百分率都明显高于对照组(P<0.01);(2)在大鼠ig给药的催促戒断实验中,氢吗啡酮3个剂量组(累积剂量分别为77.25、154.5和309.0mg·kg-1)及吗啡组(累积剂量为1030mg·kg-1)的大鼠和sc给药的催促戒断实验中氢吗啡酮3个剂量组(累积剂量分别为14.4、48和51.75mg·kg-1)及吗啡组(累积剂量为345mg·kg-1)大鼠的戒断症状分值和体重下降百分率均明显高于对照组(P<0.01);(3)在大鼠sc给药的自然戒断实验中,氢吗啡酮3个剂量组(累积剂量分别为207、310.5和621mg·kg-1)和吗啡组(累积剂量为2070mg·kg-1)大鼠在停用吗啡后体重均明显下降(P<0.05或P<0.01)。结论:盐酸氢吗啡酮与盐酸吗啡相似,对实验动物无论是ig给药还是sc给药,戒断后都可使动物出现戒断反应,都具有产生身体依赖性的潜力。     

氯胺酮对大鼠吗啡戒断症状的影响及其作用机理

目的　研究氯胺酮对大鼠吗啡戒断症状的影响及其可能的机理。方法　建立大鼠吗啡依赖模型 ,在用纳洛酮催瘾前 2min给予不同剂量的氯胺酮 ,观察其戒断症状的改变 ;用分光光度法测定戒断时大鼠一氧化氮 (NO)含量、一氧化氮合酶 (NOS)活性 ,用放射免疫法测定环鸟苷酸 (cGMP)含量。结果　 3个剂量的氯胺酮 (5、10和 2 0mg·kg- 1)均可缓解吗啡戒断时探究、扭体、湿狗样抖动、跳跃等运动反应 ,减少活动次数 ,抑制植物神经系统症状。10、2 0mg·kg- 1氯胺酮可显著减轻吗啡戒断所致的体重下降 ,小剂量氯胺酮 (5mg·kg- 1)可抑制吗啡依赖大鼠前额叶皮质、小脑的NOS活性和NO、cGMP含量的增高。结论　氯胺酮可缓解大鼠吗啡戒断症状 ,其作用机理可能与减弱大鼠吗啡戒断时NMDA NO cGMP通路效应有关。     

神经元型一氧化氮合酶反义寡脱氧核苷酸抑制大鼠吗啡戒断症状

目的　观察鞘内或侧脑室注射神经元型一氧化氮合酶 (nNOS)反义寡脱氧核苷酸对大鼠吗啡戒断症状的影响。方法　根据基因结构设计nNOS或eNOS反义寡脱氧核苷酸片段 ,用逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)测定nNOSmR NA表达。结果　吗啡依赖大鼠在纳洛酮激发前 2 4h鞘内注射nNOS反义寡脱氧核苷酸抑制所有大鼠吗啡戒断症状如湿狗摇动、扭体及激惹、腹泻、体重减少、咬牙和流涎。eNOS反义寡脱氧核苷酸对吗啡戒断症状总评分值没有影响 ,但减少腹泻、体重减轻值和咬牙等评分值。侧脑室注射nNOS反义寡脱氧核苷酸减少吗啡戒断症状 ,eNOS反义寡脱氧核苷酸对吗啡戒断症状没有影响。鞘内注射nNOS反义寡脱氧核苷酸后脊髓nNOSmRNA的相对表达几乎消失 ,iNOS的表达增加 ;而eNOS反义寡脱氧核苷酸处理后对nNOS和iNOS的表达没有影响。结论　nNOS基因表达介导了吗啡戒断反应过程 ,抑制nNOS基因表达可增加脊髓i NOS基因的表达。     

粉防己碱对大鼠吗啡戒断反应的影响

目的:研究钙拮抗剂粉防己碱 (Tet)对大鼠吗啡戒断反应的影响。方法··:以剂量递增法形成吗啡依赖模型 ,用纳洛酮催促戒断 ,戒断症状按柳田知司评分法给予评分。结果··:吗啡阳性组戒断症状分值为26.5±s7.1;Tet(30mg·kg-1) +吗啡组和Tet(60mg·kg-1) +吗啡组的戒断症状分值分别为 :11.7±s4.6、6.6±s4.3 ,与吗啡阳性组相比有极显著性差异 (P<0.001)。结论··:Tet能抑制吗啡大鼠依赖的戒断症状。     

三氟拉嗪抑制吗啡依赖大、小鼠纳洛酮催促的戒断症状

目的　研究三氟拉嗪对吗啡依赖大、小鼠纳洛酮催促戒断症状的影响 ,并探讨其机制。方法　吗啡依赖大、小鼠纳洛酮催促实验。结果　三氟拉嗪 (2～ 2 0mg·kg-1)呈剂量依赖性抑制吗啡依赖小鼠纳洛酮催促所致的跳跃、湿狗样抖动、前爪震颤和体重下降。三氟拉嗪 5～ 2 0mg·kg-1ip ,对吗啡依赖大鼠大部分纳洛酮催促的阳性戒断症状均具有明显的抑制作用 ,其中包括跳跃、湿狗样抖动、排泄物、体重下降、咬牙、流涎、腹泻、上睑下垂、激惹。作为DA1/DA2 受体激动剂 ,阿朴吗啡 (2～ 8mg·kg-1)对三氟拉嗪抑制吗啡依赖小鼠纳洛酮催促戒断症状无明显影响 ,而钙通道阻滞剂硝苯吡啶 (5～ 2 0mg·kg-1)则呈剂量依赖性加强三氟拉嗪对吗啡依赖小鼠纳洛酮催促戒断症状的抑制作用。结论　三氟拉嗪对吗啡依赖大、小鼠纳洛酮催促的戒断症状具有明显的抑制作用。对受体后钙调素生物活性的抑制作用可能是三氟拉嗪抗吗啡依赖大、小鼠躯体戒断症状主要机制 ,而中枢神经系统DA2 受体可能不参与三氟拉嗪对吗啡躯体戒断症状的抑制作用     

吗啡依赖大鼠脊髓和脑干一氧化氮含量和合酶活力分析

本文检测了吗啡依赖大鼠脊髓和脑干一氧化氮合酶（ＮＯｓ）活力,一氧化氮（ＮＯ）以及ｃＧＭＰ含量。结果显示吗啡依赖大鼠脊髓ＮＯｓ活力,ＮＯ和ｃＧＭＰ含量较正常对照组降低,脑干中ＮＯｓ活力轻度降低,而ＮＯ和ｃＧＭＰ含量降低。纳洛酮激发戒断症状后大鼠脊髓和脑干ＮＯｓ活力,ＮＯ以及ｃＧＭＰ含量急剧升高。ＮＯｓ抑制剂Ｌ－Ｎ－硝基精氨酸甲酯（Ｌ－ＮＡＭＥ）处理可以抑制大鼠吗啡戒断反应,同时减少脊髓和脑干ＮＯ含量。结果表明吗啡戒断反应与脊髓和脑干的ＮＯ－ｃＧＭＰ途径的兴奋有关。     

吗啡依赖大鼠脊髓和脑干一氧化氮含量和合酶活力分析

本文检测了吗啡依赖大鼠脊髓和脑干一氧化氮合酶（ＮＯｓ）活力,一氧化氮（ＮＯ）以及ｃＧＭＰ含量。结果显示吗啡依赖大鼠脊髓ＮＯｓ活力,ＮＯ和ｃＧＭＰ含量较正常对照组降低,脑干中ＮＯｓ活力轻度降低,而ＮＯ和ｃＧＭＰ含量降低。纳洛酮激发戒断症状后大鼠脊髓和脑干ＮＯｓ活力,ＮＯ以及ｃＧＭＰ含量急剧升高。ＮＯｓ抑制剂Ｌ－Ｎ－硝基精氨酸甲酯（Ｌ－ＮＡＭＥ）处理可以抑制大鼠吗啡戒断反应,同时减少脊髓和脑干ＮＯ含量。结果表明吗啡戒断反应与脊髓和脑干的ＮＯ－ｃＧＭＰ途径的兴奋有关。     

MK-801对吗啡依赖大鼠戒断症状及中枢cAMP含量的影响

目的观察MK-801对吗啡依赖大鼠戒断症状及脊髓和脑干cAMP含量的影响。方法选择♂性SD大鼠32只,随机分为盐水对照组、吗啡依赖组、吗啡戒断组和MK-801组,每组8只。各组在纳洛酮激发戒断后立即观察戒断症状30min,纳洛酮激发戒断后1h,处死大鼠,分离脊髓和脑干,用放射免疫法检测cAMP的含量。结果MK-801组戒断症状总分为26.06±1.98,低于吗啡戒断组61.15±3.28(P<0.01)。MK-801组脊髓cAMP含量为0.8±0.26μmol.g-1,低于吗啡戒断组(P<0.05),而与吗啡依赖组相近(P>0.05);MK-801组脑干cAMP含量为1.62±0.38μmol.g-1,低于吗啡戒断组(P<0.05),而与吗啡依赖组相近(P>0.05)。结论MK-801减轻吗啡戒断症状的机制可能与其降低大鼠中枢cAMP的水平有关。     

二丙诺啡对吗啡依赖动物的催促试验

目的观察二丙诺啡催促作用。方法连续递增剂量ｓｃ盐酸吗啡,建立吗啡依赖小鼠和大鼠模型,然后ｉｐ盐酸二丙诺啡（Ｍ５０５０）,观察各种戒断症状并评分。结果小鼠ｉｐＭ５０５０５ｍｇ·ｋｇ－１,大鼠ｉｐ２ｍｇ·ｋｇ－１可分别催促两种动物迅速出现戒断症状,体重显著减轻,大鼠戒断症状评分较高。结论Ｍ５０５０具有较好的催促作用,可作为催促剂用于动物实验研究。