基于氧化应激探讨“秩边透水道”针法对早发性卵巢功能不全大鼠凋亡相关因子表达的影响

目的：从氧化应激角度探讨“秩边透水道”针法改善早发性卵巢功能不全（POI）的可能机制。方法：将60只SD雌性大鼠随机分为空白组、模型组、假针刺组、药物组、秩边透水道组，每组12只。除空白组外，其余大鼠采用腹腔注射环磷酰胺的方式制备POI大鼠模型。造模成功后，秩边透水道组针刺大鼠双侧“秩边”，并刺向同侧“水道”方向，深约12 mm，留针30 min，每日1次，共4周；假针刺组用钝针头在“秩边”穴皮肤表面进行点按，不刺入皮下，每日1次，共4周；药物组给予戊酸雌二醇灌胃，共4周。干预结束后，采用荧光探针检测大鼠卵巢组织中活性氧自由基（ROS）水平；实时荧光定量PCR法和Western blot法检测大鼠卵巢组织中c-Jun氨基末端激酶（JNK）、叉头状转录因子1(FoxO1)、肿瘤抑制基因p53(p53)和p53上调凋亡调控因子（Puma）mRNA及蛋白表达情况。结果：与空白组比较，模型组大鼠卵巢组织ROS水平，JNK mRNA、p-JNK蛋白和FoxO1、p53、Puma mRNA及蛋白表达升高（P<0.01）；与模型组比较，假针刺组大鼠卵巢组织ROS水平，p-JNK蛋白和JNK、F...     

“秩边透水道”针法对早发性卵巢功能不全大鼠肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体及其受体表达的影响

目的:通过观察“秩边透水道”针法对早发性卵巢功能不全(POI)大鼠肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)及其受体死亡受体4(DR4)、死亡受体5(DR5)、诱骗受体1(DcR1)、诱骗受体2(DcR2)、死亡受体结构域(FADD)表达的影响，探讨“秩边透水道”针法治疗POI的可能机制。方法:雌性SD大鼠随机分为空白组、模型组、戊酸雌二醇组、秩边透水道组，每组10只。除空白组外，其余大鼠均以腹腔注射环磷酰胺的方式复制POI大鼠模型。造模成功后，秩边透水道组针刺大鼠双侧“秩边”并向同侧“水道”方向透刺，深约12 mm,留针30 min,每日1次，共4周；戊酸雌二醇组给予戊酸雌二醇(0.09 mg/kg)灌胃，每日1次，共4周。干预结束后，用ELISA法检测大鼠血清中卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、雌二醇(E2)、血管内皮生长因子(VEGF)含量；计算大鼠卵巢系数并用HE染色法观察卵巢组织病理形态及各级卵泡数量变化；实时荧光定量PCR法检测卵巢组织TRAIL、DR4、DR5、DcR1、DcR2、FADD的mRNA表达；免疫组织化学法检测卵巢组织TRAIL、DR4、DR5的阳性表...     

“秩边透水道”针法治疗肾虚型早发性卵巢功能不全临床研究

目的:观察“秩边透水道”针法治疗肾虚型早发性卵巢功能不全(POI)的临床疗效。方法:将62例POI患者随机分成观察组和对照组,每组31例。观察组用“秩边透水道”针法,配伍太溪、命门,隔日针刺1次,每次留针30 min,对照组采用雌孕激素序贯疗法(HRT),两组均以4周为1个疗程,治疗3个疗程,记录并比较治疗前后两组患者的中医症候积分、血清中促卵泡生成素(FSH)、雌二醇(E2)水平的变化,并对两种疗法的安全性进行评价。结果:与治疗前比较,治疗后两组患者的中医症候积分均降低(P<0.05),且观察组对中医症候的改善优于对照组(P<0.05);FSH水平均下降(P<0.05),E2水平均升高(P<0.05),组间比较差异均无统计学意义(P>0.05);观察组总有效率为90.32%,高于对照组的65.52%(P<0.05),观察组不良事件发生率为3.23%,低于对照组的24.14%(P<0.05)。结论:“秩边透水道”针法能够有效治疗POI,而且在改善肾虚型临床症状和安全性方面较对照组更具有优势。     

“秩边透水道”针法对早发性卵巢功能不全大鼠HPO轴和Bcl-2、Bax蛋白的影响研究

摘要：目的 探讨“秩边透水道”针法对早发性卵巢功能不全大鼠模型的作用机制研究。方法 筛选60只雌性SD大鼠,随机分为空白组、模型组、秩边组（“秩边透水道”）、普针组（“关元”、“三阴交”、“肾俞”）和西药组（戊酸雌二醇片）,每组12只。除空白组, 其余组连续15日腹腔注射环磷酰胺建立早发性卵巢功能不全大鼠模型。普针组和秩边组分别行隔日针刺,西药组采用戊酸雌二醇灌胃,每天1次,均治疗1个月。治疗结束,采用苏木素-伊红（HE）染色观察卵巢组织病理变化;酶联免疫吸附法（ELISA）检测大鼠血清中卵泡刺激素（FSH）、黄体生成素（LH）、雌二醇（E2）水平;免疫印迹法（Western blotting）检测卵巢组织中Bcl-2和Bax蛋白水平。结果 ① 空白组卵巢组织结构清晰,含有数量丰富的生长卵泡;模型组生长卵泡几不可见,闭锁卵泡数量明显增多;干预组闭锁卵泡数量减少,生长卵泡的数量均有所增加。 ②与空白组相比,模型组FSH、LH水平明显升高（P<0.01）,E2水平显著降低（P<0.01）;与模型组相比,干预组FSH、LH水平明显降低（P<0.01）,E2水平显著升高（P<0.01）;与秩边组相比,普针组FSH水平明显升高（P<0.01）,E2水平明显降低（P<0.01）,LH水平无显著性差异（P>0.05）,西药组FSH、LH、E2水平无显著性差异（均P>0.05）。③较空白组,模型组大鼠卵巢Bcl-2蛋白水平显著降低（P<0.01）,Bax蛋白水平明显增加（P<0.01）,Bcl-2/Bax值明显下降（P<0.01）;较模型组,秩边和西药组Bcl-2水平明显增加（P<0.01）,普针组Bcl-2水平无显著性差异（P>0.05）,秩边、普针、西药组Bax水平均降低（P<0.05）,以及Bcl-2/Bax值均显著升高（P<0.01）;较秩边组,普针组Bcl-2水平明显降低（P<0.01）,Bax水平明显升高（P<0.01）,Bcl-2/Bax值显著降低（P<0.01）,西药组Bcl-2、Bax水平,Bcl-2/Bax值均无显著性差异（P>0.05）。 结论 “秩边透水道” 针法通过降低大鼠血清中FSH、LH水平,增加E2水平,纠正紊乱的下丘脑-垂体-卵巢轴（HPO）,上调Bcl-2蛋白以及下调Bax蛋白水平,延缓细胞凋亡速度,减少闭锁卵泡数量,改善POI大鼠的卵巢功能,效果优于普针组,和西药组相当。     

益肾调经方调控PI3K/Akt通路对早发性卵巢功能不全大鼠卵巢功能及凋亡蛋白表达的影响

目的：探讨益肾调经方对早发性卵巢功能不全(POI)大鼠的影响及相关机制。方法：在60只动情周期正常的SD大鼠中随机选取10只大鼠作为空白组,其余50只大鼠腹腔注射环磷酰胺(CTX)诱导POI大鼠模型,建模成功后,随机分为模型组、对照组和中药低、中、高剂量组,连续给予相应药物灌胃14 d。灌胃结束后处死各组大鼠,观察大鼠的一般情况、动情周期、卵巢指数、性激素水平,HE染色观察卵巢组织结构,RT-qPCR和免疫组化检测卵巢组织中PI3K、Akt、Bcl-2和Bax mRNA及蛋白表达。结果：与空白组比较,模型组大鼠体质量明显下降(P <0.000 1),动情周期延长(P <0.000 1),卵巢指数明显下降(P <0.000 1),E2、AMH水平下降(P <0.000 1,P <0.001)、FSH、LH水平升高(P <0.000 1),模型组PI3K、Akt及Bcl-2 mRNA及蛋白表达明显降低(P <0.000 1,P <0.001),Bax mRNA及蛋白表达明显升高(P <0.000 1);与模型组比较,给药组大鼠一般状况明显改善,体质量出现不同程度增长(P <0.05,P <0.001,P <0.000 1),动情周期缩短(P <0.000 1),卵巢指数升高(P <0.000 1),E2、AMH水平升高(P <0.000 1,P <0.01),FSH、LH水平降低(P <0.01,P <0.001,P <0.000 1,),PI3K、Akt及Bcl-2 mRNA及蛋白表达明显升高(P <0.01,P <0.001,P <0.000 1),Bax mRNA及蛋白表达明显降低(P <0.01,P <0.000 1),且呈现明显的剂量依赖性,其中中药高剂量组改善效果最佳。结论：益肾调经方可能通过调控PI3K/Akt通路及凋亡相关蛋白从而达到改善POI模型大鼠卵巢功能的目的。     

针药并用治疗早发性卵巢功能不全临床观察

目的:观察针药并用治疗早发性卵巢功能不全的疗效.方法:92例随机分为常规组和试验组各46例.两组均用中药治疗,试验组联合针刺治疗.结果:治疗后试验组卵巢体积、子宫内膜厚度大于常规组(P＜0.05),性激素水平高于常规组(P＜0.05),试验组总有效率高于常规组(P＜0.05),试验组中医症状各项积分均低于常规组(P＜0...     

中药联合针刺治疗早发性卵巢功能不全肾阴虚证疗效及对性激素水平的影响

目的:探讨中药联合针刺治疗早发性卵巢功能不全肾阴虚证疗效及对性激素水平的影响.方法:选取我院2019年1月～2021年1月收治的早发性卵巢功能不全肾阴虚证患者共114例,随机分为两组,其中对照组57例采用戊酸雌二醇+黄体酮治疗,观察组57例则在对照组基础上辅以中药联合针刺治疗,比较两组治疗总有效率、治疗前后主要证候积分...     

艾灸预处理对早发性卵巢功能不全大鼠的卵巢保护作用

目的:观察艾灸预处理对早发性卵巢功能不全(POI)大鼠卵巢功能、生育力及卵巢颗粒细胞凋亡的影响，探讨艾灸预处理对POI大鼠卵巢功能的保护作用及其抗凋亡效应机制。方法:SD大鼠随机分为空白组、模型组和预灸组，每组14只。预灸组造模前予14 d温和灸干预，“肾俞”和“关元”“中脘”两组穴位隔日交替进行，每日1次，每次10 min。采用雷公藤多苷混悬液75 mg·kg^-1·d^-1灌胃14 d制备POI大鼠模型。观察大鼠动情周期、妊娠率和胚胎数量，称量卵巢湿重并计算卵巢指数；HE染色观察卵巢组织形态学变化及卵泡计数；ELISA法检测大鼠血清雌二醇(E₂)、卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、抗苗勒管激素(AMH)含量；TUNEL染色观察卵巢颗粒细胞凋亡率；免疫组织化学法和实时荧光定量PCR法分别检测卵巢组织中半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Caspase)-3和Caspase-9蛋白和mRNA表达水平。结果:与空白组相比，模型组动情周期紊乱，妊娠率和胚胎数量降低(P<0.01);卵巢湿重及卵巢指数降低(P<0.01),...     

穴位埋线联合调任通督针刺法对脾肾阳虚型早发性卵巢功能不全患者卵巢功能的影响分析

目的：研究穴位埋线联合调任通督针刺法对脾肾阳虚型早发性卵巢功能不全(POI)卵巢功能的影响。方法：将145例脾肾阳虚型POI患者随机分为对照组72例与观察组73例,对照组采用调任通督针刺法治疗,隔日1次,1个月为1疗程;观察组在对照组的治疗基础上加用穴位埋线治疗,每两周1次,4次为1疗程。2组均治疗12周后观察疗效,比较两组治疗前后的临床效果、中医临床症状、基础血清性激素变化情况以及卵巢功能情况。结果：治疗后,两组临床有效率分别为97.26%和88.89%,差异提示有统计学意义(P<0.05);两组中医临床症状积分均明显降低(P<0.05),且观察组相较对照组而言降低更明显(P<0.05);治疗后,观察组的促卵泡成熟激素(FSH)、促黄体生成素(LH)水平比对照组的水平低(P<0.05),雌二醇(E2)水平比对照组水平高(P<0.05);治疗后,两组Kupperman自评量表积分均低于治疗前(P<0.05),且观察组低于对照组(P<0.05);治疗后两组卵巢功能明显改善,抗缪勒管激素(AMH)水平均高于治疗前(P<0.05),且观察组高于...     

从“五脏理论”治疗早发性卵巢功能不全经验总结

总结治疗早发性卵巢功能不全门诊跟师经验总结,根据女性生理特点,以虚为本,从肝、心、脾、肺、肾五脏理论出发,益肾为主,阴阳双补,兼顾疏通之法,同时强调以"心"治"心"治疗女性情志障碍。治疗上补养脏腑为主,疏通经络为要,同时注意未病先防,既病防变,阻断病势,中西贯通,分期用药,身心同治。     

基于“经不调有三”理论论治早发性卵巢功能不全

清代沈金鳌在《妇科玉尺·月经》中提出“经不调有三,一脾虚,二冲任损伤,三痰脂凝塞”,认为早发性卵巢功能不全的发病根本为脾脏受损,与冲任脉、肝、肾、肺密切相关。天癸匮乏,冲任不畅,影响卵巢功能;或凝聚痰脂,作为病理产物而致病。治疗上遵循“治病求本,标本兼治”的思路,注重补肾健脾,肝气、肺气同调,扶衰抑邪,缓解症状的同时改善卵巢功能。     

“治其中”思想在早发性卵巢功能不全治疗中的应用

早发性卵巢功能不全是指妇女在40岁之前，卵巢功能明显衰退或丧失的临床综合征，因其造成月经紊乱和不孕而受到重视，严重影响患者生育和生活质量。中医学认为，此病发生与五脏相关，运用叶天士“上下交损，当治其中”思想来指导治疗，可以删繁就简，取得很好效果。     

调经促孕针法对早发性卵巢功能不全患者负性情绪的影响

目的:观察调经促孕针法对早发性卵巢功能不全(POI)患者负性情绪的影响.方法:60例POI患者采用随机数字表法分为针刺组和西药组,各30例.针刺组采用调经促孕针法治疗,穴取百会、神庭、关元、三阴交、肾俞、次髎等,每日1次,每周治疗5次,连续治疗3个月.西药组口服克龄蒙治疗,每天1片,连续21 d,停药1周为一疗程,连续...     

补肾调肝方对早发性卵巢功能不全合并失眠大鼠卵巢功能及睡眠的影响

目的 观察补肾调肝方对雷公藤多苷联合对氯苯丙氨酸(4-chloro-DL-phenylalanine, PCPA)诱导的早发性卵巢功能不全(premature ovarian insufficiency, POI)合并失眠大鼠模型的影响,探讨其作用机制。方法 选取具有规律动情周期的雌性SD大鼠,随机分为模型组(40只)、经典模型组(8只)和空白组(8只),经典模型组通过雷公藤多苷片造模,模型组通过雷公藤多苷片联合PCPA构建POI合并失眠大鼠模型,造模成功后将模型大鼠随机分为模型组、西药组、褪黑素组、中药高剂量组、中药低剂量组,每组8只,分别予药物干预20天。采用阴道涂片观察动情周期;苏木精—伊红(hematoxylin-eosin, HE)染色观察卵巢组织;戊巴比妥钠睡眠实验观察睡眠变化;酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)检测血清促卵泡激素(follicle-stimulating hormone, FSH)、雌激素(luteinizing hormone, E2)、5-羟色胺(5-hydroxyryptamine, 5...     

“秩边透水道”针法对子宫内膜异位症大鼠 PI3K/AKT/mTOR信号通路及血清指标的影响

目的 ：观察“秩边透水道”针法对子宫内膜异位症（endometriosis,EMs）大鼠PI3K/AKT/mTOR信号通路及血清EMAb、CA125及VEGF的影响,探讨“秩边透水道”针法治疗子宫内膜异位症的作用机制。方法 ：将36只采用自体移植术造模成功的健康清洁级雌性SD大鼠随机分为四组,加假手术组,各9只。分别予以秩边透水道针法、秩边透水道针法加自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤、自噬激动剂雷帕霉素进行干预。ELISA法测定各组血清EMAb、CA125及VEGF的含量,Western blot法检测 PI3K/AKT/mTOR 通路蛋白含量。结果 ：与假手术组比较,模型组血清中EMAb、CA125、VEGF水平以及内膜组织中PI3K、AKT、mTOR 的蛋白水平表达量显著升高(P<0.01);与模型组比较,针刺组、激动剂组、针刺加抑制剂组血清中EMAb、CA125、VEGF水平以及内膜组织中PI3K、AKT、mTOR蛋白水平表达量显著降低(P＜0.01);与针刺组比较,激动剂组血清中VEGF含量、内膜组织中PI3K、AKT、mTOR 的蛋白水平升高(P＜0.05),EMAb、CA125含量显著升高(P＜0.01),针刺加抑制剂组血清中EMAb、CA125、VEGF含量以及PI3K、AKT、mTOR水平显著增加(P＜0.01)。且针刺组效果较好。结论 ：针刺组可能通过抑制 PI3K/Akt/mTOR 信号通路进而诱导自噬改善EMs症状。     

针刺治疗早发性卵巢功能不全的系统评价和Meta分析

目的:分析与激素替代疗法(HRT)相比,针刺治疗早发性卵巢功能不全(POI)的临床疗效.方法:计算机检索中国知网(CNKI)、万方学术期刊全文数据库(Wanfang)、重庆维普数据库(CQVIP)、中国生物医学文献数据库(CBM)、科学网、Cochrane图书馆、PubMed及荷兰医学文摘(EMBASE)数据库,收集发表于2019年1月31日前的针刺治疗POI的随机对照试验(RCTs).主要疗效指标为血清基础促卵泡生成素(FSH)水平;次要指标包括血清黄体生成素(LH)、雌二醇(E2)和抗缪勒管激素(AMH)水平.两名作者独立提取数据,使用Cochrane评测工具评估偏倚和文献质量.采用RevMan 5.3对纳入文献进行Meta分析.结果:共纳入8篇RCTs,包含496例POI患者.Meta分析显示,与对照组相比,针刺可显著降低血清基础FSH水平[MD=-5.82,95%CI(-9.76,-1.87),I2=82%,P=0.004],升高E2水平[SMD=0.93,95%CI(0.34,1.52),I2=88%,P=0.002].亚组分析显示,与对照组相比,单纯针刺[MD=-4.53,95%CI(-8.96,-0.10),I2=73%,P=0.04]和针刺联合HRT[MD=-9.60,95%CI(-17.60,-1.61),I2=50%,P=0.02]均能显著降低FSH水平,但只有针刺联合HRT可显著升高E2水平[SMD=1.43,95%CI(1.03,1.82),I2=0%,P<0.00001].针刺与HRT之间LH水平无明显变化[MD=-3.16,95%CI(-9.41,3.10),I2=0%,P=0.32],纳入文献中只有1篇报告了AMH,结果显示针刺和HRT对AMH的改善无显著差异.结论:针刺可显著降低POI患者血清FSH水平,升高E2水平.然而,由于纳入文献存在样本量小、研究方法存在缺陷及显著的异质性等问题,支持研究结论的证据有限.因此,本研究结论仍需高质量的RCT加以验证.     

基于氧化应激探讨中医药治疗早发性卵巢功能不全的作用机制

近年来由于女性工作压力及生活压力与日俱增,早发性卵巢功能不全（POI）发病率在不断增加,且有年轻化趋势。氧化应激是导致POI的重要机制之一,机体内活性氧的失调将诱导卵巢颗粒细胞凋亡,严重影响卵母细胞的生长发育。对近年来相关文献进行梳理,发现中医药可以有效提高POI的抗氧化能力,抵抗卵巢氧化应激损伤,其机制可能与线粒体活性、铁死亡以及PI3K、Nrf2、SIRT1、MAPK多条信号通路相关,治疗方式以中药单体、单味中药、中药复方、中成药、针灸及针药结合为主。     

孕康口服液对早发性卵巢功能不全小鼠的影响

目的观察孕康口服液对早发性卵巢功能不全小鼠的影响。方法采用正常动情周期ICR小鼠灌胃给予雷公藤多苷溶液40 mg/kg构建早发性卵巢功能不全模型,大鼠随机分为正常组、模型组及孕康口服液高、中、低剂量组(36、18、9 mL/kg),灌胃给药10周。给药期间定期观察小鼠动情周期;ELISA法检测血清中雌二醇(E₂)、孕激素(P)、促卵泡生成素(FSH)、促黄体生成素(LH)、催乳素(PRL)、抗苗勒管激素(AMH)、抑制素B(INHB)水平;HE染色观察卵巢组织形态;TUNEL染色检测卵巢颗粒细胞凋亡;免疫组化检测Bax、Bcl-2蛋白表达。结果与模型组比较,孕康口服液高剂量组能缩短小鼠动情周期(P<0.05),改善卵巢组织形态学并增加窦状卵泡数量(P<0.05);升高血清E₂水平(P<0.05);减少卵巢颗粒细胞凋亡数量,并能降低Bax表达以及升高Bcl-2表达。结论孕康口服液能改善雷公藤多苷致小鼠早发性卵巢功能不全,其机制可能是通过调节凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax的表达,减少卵巢颗粒细胞凋亡。     

基于静息态功能核磁共振成像研究针刺对早发性卵巢功能不全患者下丘脑功能连接的影响

目的:基于静息态功能核磁共振成像(rs-fMRI)比较早发性卵巢功能不全(POI)患者与健康志愿者下丘脑与全脑脑区的功能连接差异,探讨针刺治疗POI的中枢机制。方法:以12例POI患者为针刺组,12例健康志愿者为健康对照组。穴组1取百会、中脘、神庭等穴,穴组2取双侧肾俞、次髎,针刺组予两穴组交替针刺治疗,30 min/次,3次/周(2次穴组1,1次穴组2),共治疗12周;健康对照组不进行任何干预。于治疗前后通过改良Kupperman指数量表(KI)、焦虑自评量表(SAS)评价患者状态;微粒子化学发光法检测两组受试者血清卵泡刺激素(FSH)、促黄体生成素(LH)、雌二醇(E₂)、抗苗勒管激素(AMH)含量;B超检测窦卵泡计数(AFC);针刺组患者与健康志愿者分别在针刺治疗前后和入组后行rs-fMRI检查,以双侧下丘脑为感兴趣区,观察POI患者与健康志愿者的下丘脑与全脑脑区的功能连接差异以及针刺前后POI患者的下丘脑与全脑脑区的功能连接变化。结果:针刺组治疗前KI、SAS评分高于健康对照组(P<0.01),与治疗前比较,治疗后FSH、LH含量降低,KI、SAS评...     

育胞颗粒对雷公藤多苷片致早发性卵巢功能不全大鼠卵巢功能的影响

目的观察育胞颗粒对早发性卵巢功能不全的改善作用并初步探究其作用机制。方法雷公藤造模成功的早发性卵巢功能不全(premature ovarian insufficiency,POI) SD雌性大鼠30只,随机分为空白对照组、育胞颗粒组、枸橼酸氯米芬(克罗米芬)组各10只。各组大鼠相应灌胃给予同体积的生理盐水、育胞颗粒、克罗米芬。ELISA检测大鼠血清抗苗勒管激素(anti-Müllerian hormone,AMH)水平,免疫组化检测大鼠卵巢雌激素受体(estrogen receptor,ER)、孕激素受体(progesterone receptor,PR)表达,Western blot检测大鼠卵巢c AMP依赖蛋白激酶(protein kinase A,PKA)的表达。结果与空白对照组比较,育胞颗粒组AMH水平和ER、PR及PKA的表达均显著升高(P均0.05),提示育胞颗粒可升高POI大鼠的AMH水平,增加POI大鼠卵巢ER、PR及PKA的表达,克罗米芬组PKA的表达显著高于育胞颗粒组(P0.01)。结论育胞颗粒具有促进POI大鼠卵巢功能恢复的作用,其作用机制可能与调节卵巢性激素水平,增加卵巢性激素受体表达相关;育胞颗粒促进卵巢功能恢复的作用可能与促进组织PKA的表达有关。