木蹄层孔菌多糖对小鼠免疫功能的影响

目的 初步探讨木蹄层孔菌多糖(FFP)的免疫调节作用.方法 MTT法检测免疫细胞的代谢活力, ELISA法检测肿瘤坏死因子α(TNF-α)、干扰素γ(IFN-γ)、白细胞介素2(IL-2)的含量,鸡红细胞吞噬法检测巨噬细胞的吞噬功能,绵羊红细胞免疫法检测小鼠体液免疫功能.结果 发现FFP(100,50,25 ?滋g/ml)可以明显促进小鼠脾细胞代谢活力,促进脾细胞分泌细胞因子TNF-α、IFN-γ、IL-2;显著增强腹腔渗出细胞代谢活力,促进腹腔渗出细胞分泌TNF-α.FFP(100、50、25 mg/kg)显著增强绵羊红细胞(SRBC)所致小鼠特异性抗体生成.FFP(100、50 mg/kg)可以增强小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞(CRBC)的吞噬率和吞噬指数.结论 木蹄多糖可促进小鼠免疫细胞分泌细胞因子TNF-α、IFN-γ、IL-2和增强小鼠的体液免疫功能及巨噬细胞的吞噬功能.     

沙棘油抗肿瘤作用及对小鼠NK和单核-巨噬细胞活性的影响

目的研究沙棘油的抗肿瘤作用及对小鼠NK细胞活性、单核-巨噬细胞吞噬功能的影响。方法第一组昆明种雌性健康小鼠136只,进行动物移植性肿瘤抑制实验。第二组选用108只BalB/c雌性健康小鼠进行免疫指标测定,其中48只进行NK细胞活性测定;另外60只小鼠作腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验。两组均经口给予小鼠(1g/kg体重/d;0.33g/kg体重/d;0.033g/kg体重/日;0g/kg)沙棘油。结果给予小鼠1g/kg体重/日的沙棘油30d(接种肿瘤细胞前后均给予受试物),可对荷瘤小鼠S-180肿瘤的生长有抑制作用(P0.05),在0.33g/kg体重/日、1g/kg体重/日剂量组可明显增强小鼠NK细胞活性(P0.01),1g/kg体重/日剂量组能显著提高小鼠的单核-巨噬细胞吞噬功能(P0.01)。结论沙棘油具有抑制小鼠S-180肿瘤的作用、明显增强小鼠NK细胞活性、能显著提高小鼠的单核-巨噬细胞吞噬功能。     

盐酸13-己基小檗碱对T淋巴细胞活化和角质形成细胞细胞因子产生的影响

目的研究盐酸13-己基小檗碱对T淋巴细胞活化、角质形成细胞增殖、以及白介素-8(IL-8)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白介素-1(IL-1)产生的影响,探索该化合物针对炎症性皮肤病的作用靶点。方法体外培养小鼠脾脏T淋巴细胞、永生化角质形成细胞株HaCaT细胞以及小鼠腹腔巨噬细胞,分别用伴刀豆球蛋白A(ConA)、重组人肿瘤坏死因子-α(rhTNF-α)、312nm窄波UVB和脂多糖(LPS)诱导,采用MTT法检测盐酸13-己基小檗碱对小鼠T淋巴细胞活化和HaCaT细胞增殖的影响,用ELISA法检测其对HaCaT细胞IL-8和TNF-α,以及小鼠腹腔巨噬细胞IL-1β产生的影响。结果盐酸13-己基小檗碱明显抑制小鼠T淋巴细胞活化(IC50≈0.123μg/ml);在0.05～0.78μg/ml范围对HaCaT细胞增殖无明显的直接影响(抑制率<15%),能剂量依赖性抑制25ng/ml rhTNF-α诱导的HaCaT细胞IL-8产生(IC50=0.13μg/ml)和124.2 mJ/cm2窄波UVB照射引起的HaCaT细胞TNF-α产生(IC50=0.21μg/ml);在0.01μg/ml浓度时抑制10μg/ml LPS诱导的小鼠腹腔巨噬细胞IL-1β产生(抑制率达50%)。结论盐酸13-己基小檗碱能抑制T淋巴细胞活化及炎症性细胞因子IL-8、TNF-α和IL-1β产生,提示以上作用可能是该化合物针对炎症性皮肤病的作用靶点。     

多糖的抗肿瘤作用及对免疫功能的影响

目的:研究多糖成分的抗肿瘤作用及对小鼠免疫功能的影响。方法:观察多糖对小鼠移植性S180实体瘤生长对免疫低下小鼠溶血素生成及小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响。结果:多糖对小鼠移植性S180实体瘤具有明显的抑制作用,多糖具有拮抗环磷酰胺对小鼠血清溶血素生成的抑制作用,明显增强免疫低下小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬功能。结论:多糖对小鼠移植性S180实体瘤具有明显的抑制作用,多糖具有拮抗环磷酰胺对小鼠血清溶血素生成的抑制作用,明显增强免疫低下小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬功能。     

腹腔注射IL-2对小鼠单核吞噬细胞吞噬功能的影响

目的观察不同浓度IL-2对小鼠单核吞噬细胞吞噬功能的影响。方法取20只健康昆明小鼠随机分为五组:正常对照组和4个不同浓度的实验组。将浓度分别为20,40,80和160 U/ml的IL-2(实验组)经腹腔注入小鼠体内,观察小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的吞噬能力,计算出不同浓度IL-2作用后吞噬细胞的吞噬百分率和吞噬指数,并与正常对照组作比较。结果正常对照组小鼠巨噬细胞吞噬百分率为(16.98±1.22)%,20 U/ml组为(39.66±0.98)%,40 U/ml组为(57.61±1.04)%,80 U/ml组为(60.22±1.32)%,160 U/ml组为(61.11±0.99)%;吞噬指数依次为0.21±0.048,0.52±0.032,0.79±0.041,0.82±0.057和0.83±0.028。实验组与正常对照组之间具有显著性差异(P<0.05)。结论腹腔注射IL-2可以显著增强小鼠单核吞噬细胞的吞噬功能。     

低恒磁场对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响

本文用不同强度低恒定磁场处理小鼠离体腹腔巨噬细胞,对吞噬功能的作用,证明了在31Gs以上的低恒定磁场,与对照组比较,均能直接提高小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的能力(P<0.01),而提高小鼠腹腔巨噬细胞吞噬能力的最低场强是在31-50Gs之间。     

中药多糖对小鼠巨噬细胞功能影响的比较

目的：探讨枸杞多糖、猪苓多糖、茯苓多糖、灵芝多糖、黄芪多糖、当归多糖分别对小鼠巨噬细胞功能的影响及比较其作用的强弱。方法：分别给小鼠腹腔注射六味中药多糖后做巨噬细胞的吞噬试验,并分别计算吞噬指数。结果：六味中药多糖均能促进小鼠腹腔巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬作用,尤其枸杞多糖显著提高正常小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬指数（P＜0．001）。结论：六味中药多糖均能显著加强巨噬细胞的功能,提高细胞免疫力,枸杞多糖增强巨噬细胞功能的作用明显优于其他中药多糖。     

小鼠腹腔巨噬细胞体内吞噬功能测定

目的建立小鼠腹腔巨噬细胞体内吞噬功能测定方法,并测定其吞噬率.方法 用6%淀粉肉汤诱导小鼠腹腔产生巨噬细胞,体内吞噬5%鸡红细胞,并测定其吞噬率.结果 小鼠腹腔巨噬细胞成活率>98%,平均吞噬百分率和平均吞噬指数分别是38.04%和0.39.结论本实验方法可以用于小鼠腹腔巨噬细胞的相关研究.     

氟化钠体外对免疫细胞和抗体应答的影响

目的以小鼠脾细胞和腹腔巨噬细胞为材料,通过体外加入不同浓度的氟化钠(NaF),观察体外NaF对免疫细胞及抗体应答的影响.方法无菌取小鼠腹腔液5ml,将其分别注入24孔板内,同时加无菌鸡红细胞(CRBC)及含不同浓度NaF的无血清培养基,在37℃、5%CO2饱和水蒸气条件下培养,用倒置显微镜观察细胞生成与吞噬,并用玻片凝集法检测抗体产生.结果10LD50、LD50 NaF使绝大多数体外培养腹腔细胞(主要为巨噬细胞)死亡;1/100LD50、1/1000LD50 NaF促进巨噬细胞生长,1/10LD50,1/100LD50,1/1000LD50NaF促进巨噬细胞吞噬并在培养上清液中检出抗CRBC抗体.LD50为180mg/kg体重.结论1800g/L,180mg/kg NaF可使绝大多数腹腔细胞死亡,其中主要为巨噬细胞;低浓度的NaF可促进吞噬,与促进抗体应答是一致的;18～0.09mg/L NaF能够促进免疫应答.     

小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能实验的改进

[目的] 将大吞噬实验中的吞噬颗粒鸡红细胞换成酵母菌,硫代乙醇酸钠作为巨噬细胞刺激剂,观察小鼠腹腔巨噬细胞体内吞噬作用的现象和功能,探索和改进实验方法。[方法] 小鼠经腹腔注射3%硫代乙醇酸钠溶液刺激活化腹腔巨噬细胞,96 h后经腹腔注射分别注射鸡红细胞悬液和酵母菌菌液,10、30、60 min后观察巨噬细胞体内吞噬鸡红细胞和酵母菌的现象,并分别测定其吞噬百分率和吞噬指数。[结果] 30 min就可观察到小鼠腹腔巨噬细胞体内吞噬鸡红细胞和酵母菌的现象,吞噬鸡红细胞和酵母菌的平均吞噬百分率分别为15.3%和18.9%,吞噬指数分别为19.3和45.9,结果显示酵母菌作为吞噬颗粒,吞噬细胞对其吞噬百分数和吞噬指数均升高。[结论] 小鼠腹腔巨噬细胞体内吞噬酵母菌现象更明显,吞噬能力较大,而且省去制备鸡红细胞的时间,操作更方便,可作为一种稳定而简单体内巨噬细胞吞噬实验的方法。     

安坎速对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响

目的 观察安坎速对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬能力的影响.方法 取体重18～22g昆明小鼠50只,随机分为生理盐水组、环磷酰胺组和安坎速低、中、高剂量组.治疗2周后腹腔注射5%鸡红细胞悬液,8-12h后处死动物,抽出腹腔洗液,油镜下计数玻片巨噬细胞,计算吞噬指数和吞噬百分率.结果 安坎速低、中、高剂量组与生理盐水组及环磷酰胺组比较,吞噬指数、吞噬百分率均显著性升高(P＜0.01),而环磷酰胺组与生理盐水比较,吞噬指数、吞噬百分率两项指标略有降低,但无统计学意义(P＞0.05).结论 安坎速能显著性提升小鼠腹腔巨噬细胞吞噬指数和吞噬百分率,提示其可促进机体免疫状态.     

鸡卵黄免疫球蛋白(IgY)对小鼠单核吞噬细胞吞噬功能的影响

目的 观察鸡蛋卵黄免疫球蛋白IgY对小鼠单核吞噬细胞吞噬功能的影响.方法 用鸡卵黄免疫球蛋白IgY经口灌胃,观察小鼠单核吞噬细胞碳粒廓清率和小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的吞噬能力.结果 鸡卵黄免疫球蛋白IgY具有提高小鼠单核吞噬细胞碳粒廓清率及增强小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的吞噬能力.结论 鸡卵黄免疫球蛋白IgY能提高小鼠单核吞噬细胞吞噬功能,具有增强小鼠免疫功能的作用.     

壳聚糖胶囊对小鼠免疫功能的影响

目的：研究壳聚糖胶囊对小鼠免疫功能的影响.方法：设低（0.167g/kg·bw）、中（0.333g/kg· bw）、高（1.000g/kg·bw）剂量组与对照组,进行迟发型变态反应、ConA诱导的小鼠淋巴细胞转化、抗体生成细胞检测、半数溶血值测定（HC50）、碳廓清、腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞及NK细胞活性实验.结果：高剂量显著增加迟发型变态反应能力、淋巴细胞转化能力、抗体生成细胞数和HC50;中、高剂量显著增加NK细胞活性;各剂量对小鼠体重增长、脏/体比值及单核-巨噬细胞功能无明显影响.结论：壳聚糖胶囊具有增强免疫力的功能.     

荧光定量PCR方法探讨黄芪注射液对巨噬细胞吞噬结核杆菌的影响

目的: 探讨黄芪注射液对巨噬细胞吞噬结核杆菌的作用.方法: 以浓度为0(对照组),0.05,0.2,0.6,1.5,4 g/L的黄芪注射液100 μL与RPMI1640灌洗小鼠腹腔获得的巨噬细胞及结核杆菌共同孵育,采用荧光定量PCR法检测巨噬细胞对结核杆菌的吞噬能力.结果: 在黄芪注射液浓度为0.2,0.6,1.5,4 g/L时,黄芪对巨噬细胞吞噬结核杆菌有明显的促进作用.并且以1.5 g/L浓度为最佳.结论: 黄芪可以提高巨噬细胞对结核杆菌的吞噬作用,并具有双相性,当其浓度过高时具有抑制巨噬细胞吞噬结核杆菌的作用.本研究为临床治疗结核病提供了理论依据和新的思路.     

牡蛎多糖的制备和生物学活性研究

目的：改进制备工艺，分离、纯化东海近江牡蛎（Ostrea rivularis Gould）得到牡蛎多糖（Oyster polysaccharides，OPs），并探索其生物学活性。方法：采用热碱法提取，以三个剂量组（2．5、5、10mg／ml）进行正常小鼠脾淋巴细胞转化实验，迟发型超敏反应（DTH）、自然杀伤细胞（NK）活性测定，抗体形成细胞活性溶血空斑形成细胞实验（PFC）、碳廓清实验、腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验、荷瘤小鼠脾淋巴细胞活性测定（MTT法）、红细胞超氧化物歧化酶（SOD）活性测定。结果：制备得到牡蛎多糖粗品；免疫学实验表明OPs2．5mg／ml组能有效增加正常小鼠的脾淋巴细胞转化率、对小鼠DHT、NK细胞活性、PFC、小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞能力、荷瘤小鼠脾细胞活性起正向调节。三种浓度实验组均增强小鼠红细胞SOD活性。结论：牡蛎多糖能增强小鼠细胞免疫、体液免疫功能，并有一定的抗肿瘤和抗氧化作用。     

纳米颗粒对细胞免疫促进作用的体外实验研究

目的:探讨纳米颗粒对细胞免疫的调节作用。方法:利用壳寡糖纳米颗粒在体外对小鼠脾细胞进行刺激,并采用MTT法检测纳米颗粒对小鼠脾细胞是否存在促增殖作用。以壳寡糖纳米颗粒刺激小鼠腹腔巨噬细胞,采用细胞病变抑制法检测上清液中的干扰素-α(IFN-α)含量,及巨噬细胞吞噬功能,了解其对巨噬细胞刺激后的反应。结果:50纳米左右的壳寡糖颗粒,浓度在40～640μg/ml时刺激小鼠脾细胞增殖,其中浓度在160μg/ml时作用最明显。浓疗在10～640μg/ml时刺激小鼠腹腔巨噬细胞均可分泌IFN-α,其中浓度在160μg/ml时作用最明显。结论:壳寡糖纳米颗粒对小鼠脾细胞有促增殖作用,并可刺激小鼠腹腔巨噬细胞分泌细胞因子IFN-α。壳寡糖纳米级颗粒可以刺激免疫细胞,引起Th1细胞免疫。     

X盒结合蛋白1在低浓度皮质酮对巨噬细胞免疫功能调控中的作用

目的 探讨X盒结合蛋白1(X-box binding protein 1,XBP1)在低浓度皮质酮对小鼠腹腔巨噬细胞免疫功能调控中的作用.方法 分离培养成年健康雄性C57BL/6小鼠腹腔巨噬细胞,应用XBP1-RNAi慢病毒或阴性对照慢病毒感染小鼠腹腔巨噬细胞,采用荧光显微镜观察感染效率,感染3、5 d后收集巨噬细胞提取总RNA,应用RT-PCR检测小鼠腹腔巨噬细胞XBP1 mRNA表达水平和干扰效率.XBP1-RNAi慢病毒或阴性对照慢病毒感染离体培养的小鼠腹腔巨噬细胞3 d后,再应用低浓度皮质酮(50 ng/ml)处理小鼠腹腔巨噬细胞1 h,分别应用ELISA法及激光共聚焦显微镜检测小鼠腹腔巨噬细胞培养上清中TNF-α生成及其吞噬功能变化.结果 当复感染指数(multiplicity of infection,MOI)值≥6时,XBP1-RNAi慢病毒能有效地感染小鼠腹腔巨噬细胞,感染效率＞75%.应用RT-PCR检测发现XBP1-RNAi能有效地抑制小鼠腹腔巨噬细胞XBP1基因表达.通过选择性地沉默XBP1基因表达,低浓度皮质酮(50 ng/ml)对巨噬细胞吞噬功能增强的作用受到抑制,巨噬细胞的吞噬率和吞噬指数均显著下降(P＜0.01),而且对TNF-α分泌增强的作用也受到抑制,显著低于阴性对照慢病毒组(P＜0.01).结论 采用RNA干扰选择性地沉默XBP1,能有效地抑制低浓度皮质酮对巨噬细胞吞噬和TNF-α生成增强的作用.     

注射紫杉醇的小鼠骨髓细胞体外分化巨噬细胞增强

目的 研究小鼠腹腔注射紫杉醇对体外骨髓细胞诱导分化巨噬细胞的影响.方法 小鼠连续5 d腹腔注射紫杉醇,无菌制备骨髓细胞,用含巨噬细胞集落刺激因子 (M-CSF) 的RPMI1640培养液培养骨髓细胞,通过流式细胞仪对其诱导分化的巨噬细胞表面分子、吞噬功能进行分析.结果 紫杉醇明显降低小鼠骨髓细胞数量,但骨髓细胞体外诱导分化成巨噬细胞的数量明显增加;F4/80+巨噬细胞中CD80、CD14表面分子表达升高,而I-Ad表达降低;紫杉醇处理组诱导分化的巨噬细胞吞噬鸡红细胞的能力提高.结论 结果提示紫杉醇可能具有调节巨噬细胞表面分子的表达和吞噬功能.     

发酵轮叶党参乙醇提取物对荷瘤小鼠瘤体生长及机体免疫功能的影响

[目的]探讨发酵轮叶党参乙醇提取物(FCLEE)对荷瘤小鼠瘤体生长及机体免疫功能的影响.[方法]将H22荷瘤小鼠随机分为小、中、大剂量FCLEE组、模型对照组和环磷酰胺组.建立移植型H22荷瘤小鼠模型,观察FCLEE对肿瘤生长的抑制情况,并观察对脾脏、胸腺脏器指数的影响.采用荷瘤H22小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验检测FCLEE对吞噬百分率、吞噬指数的影响.采用MTT比色法测定FCLEE对NK细胞活性的影响.[结果]FCLEE小、中、大剂量组肿瘤质量明显小于模型对照组(P<0.05),肿瘤抑制率分别为31.6%,32.0%,34.3%;脾脏和胸腺指数均显著高于模型对照组和环磷酰胺组(P<0.05);腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的吞噬百分率、吞噬指数及NK细胞活性均明显高于模型对照组和环磷酰胺组(P<0.05).[结论]FCLEE可抑制在体肿瘤的生长,且可增强荷瘤小鼠的免疫功能.     

木犀草素对小鼠巨噬细胞免疫功能的影响

目的研究木犀草素对小鼠巨噬细胞免疫功能的影响.方法木犀草素按0.04、0.02和0.01g/(mL·d)给小鼠连续灌胃7d后,进行碳粒廓清试验、腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验并测定和计算血清溶菌酶活力及胸腺指数、脾脏指数.结果木犀草素对小鼠的胸腺指数及脾脏指数无明显影响.与对照组相比,木犀草素高剂量组小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的吞噬率和吞噬指数、碳粒廓清速率和廓清指数及体内溶菌酶活力明显降低,而低剂量和中剂量木犀草素组则无显著差别.结论木犀草素可降低小鼠巨噬细胞的吞噬功能及体内溶菌酶活力,具有一定的免疫调节作用.