由阴沟肠杆菌引起的感染分布及其耐药性变迁

目的：探讨由阴沟肠杆菌引起感染的临床分布、阴沟肠杆菌中超广谱β-内酰胺酶ESBLs和AmpC酶的携带率以及其耐药性变迁的趋势，为临床合理使用抗生素、有效控制感染提供流行病学依据。方法：采用全自动微生物分析仪Vitek—60进行细菌的鉴定，用K—B琼脂扩散法进行菌株的耐药性检测，并分别用纸片扩散法和表型筛选法检测其超广谱β-内酰胺酶ESBLs和AmpC酶。结果：本地区由阴沟肠杆菌引起的感染呈逐年递增趋势，感染的人群以中老年为主，感染部位主要见于呼吸道、伤口及泌尿道等。阴沟肠杆菌ESBLs的携带率由2000年的6．9％上升至2002年的10．8％，AmpC酶的携带率由2000年的25％上升至35％。药敏试验提示亚胺培南有较强的敏感性94％，依次为头孢吡肟65％、舒普深70．5％、丁胺卡那、喹诺酮类存在着交叉耐药。其他抗生素的耐药性均有不同程度的上升，其中头孢噻肟较为明显。结论：本地区存在高产AmpC酶的阴沟肠杆菌的流行；亚胺培南是治疗由阴沟肠杆菌引起的临床感染的首选药物，加强阴沟肠杆菌超广谱β-内酰胺酶ESBLs和AmpC酶的耐药性检测，对临床合理选择抗生素及控制耐药菌株的播散和流行，具有重要的指导意义。     

临床分离阴沟肠杆菌的耐药性分析

目的 分析阴沟肠杆菌耐药机理和现状，指导临床合理应用抗菌药物。方法 用K－B纸片扩散法对132株阴沟肠杆菌做20种抗菌药物的敏感试验，并对80株阴沟肠杆菌进行超广谱β－内酰胺酶（ESBLs）测定。结果 对20种抗菌药物的敏感试验显示，阴沟肠杆菌对β－内酰胺酶抗生素显示较高耐药；对氨基糖苷，喹诺酮类等也有不同程度的耐药，对碳青霉烯类有很高的抗菌活性。结论 阴沟肠杆菌对临床常用的抗菌药物呈高耐和多重耐药，其耐药机制为β－内酰胺酶产生的ESBLs的AmpC酶；环丙沙星，左氟沙星，头孢吡肟等可作为治疗其感染的首选用药，亚胺培南可作为二线用药，治疗其混合感染及其高耐菌株。     

阴沟肠杆菌高产AmpC酶和ESBLs的检测及其耐药性研究

目的:了解本地区阴沟肠杆菌高产AmpC酶和超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的流行状况及其耐药性。方法:收集154株临床分离无重复阴沟肠杆菌,通过改良三维实验检测阴沟肠杆菌高产AmpC酶和超广谱β-内酰胺酶(ESBLs),运用K-B琼脂扩散法进行药物敏感性试验。结果:在154株菌中,18.83%的菌株单产ESBLs,22.73%的菌株单产AmpC酶,5.19%的菌株同时产AmpC酶和ESBLs,53.25%的菌株AmpC酶和ESBLs均不产生。产不同类型β-内酰胺酶其耐药性有所不同。结论:本地区阴沟肠杆菌产AmpC酶和ESBLs的流行处于一个相对较高的水平。高产AmpC酶菌株对一、二、三代头孢菌素、头孢西丁、酶抑制剂复合制剂等高度耐药,对头孢吡肟敏感,而产ESBLs菌株对三代头孢菌素、头孢吡肟均不同程度耐药,而对各种酶抑制剂复合制剂保持较高的敏感性,因此,产Ampc酶及ES-BLs酶的细菌的耐药性不完全相同,产酶类型不同需选用不同类型的抗生素。     

革兰阴性杆菌TEM型β-内酰胺酶耐药基因研究

目的 了解中南大学3所附属医院产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)革兰阴性杆菌TEM型耐药基因的检出及流行情况.方法 收集254株多重耐药革兰阴性杆菌,采用双纸片协同法(DDS)进行ESBLs表型确证,多重PCR.法扩增blaTEM、blaSHV、blaOXA-1基因,TEM特异性引物对其整个开放阅读框进行扩增并对PCIL产物测序,通过BLAST分析确定基因型;并对携带有TEM基因的革兰阴性菌株用随机扩增多态DNA(RAPD)方法进行菌株的同源性分析.结果 经多重PCR扩增,105株肠杆菌获得阳性结果,其中85株菌携带TEM基因,26株菌携带SHV基因,10株菌携带OXA-1基因;6株非发酵菌获得阳性结果,均携带TEM基因,且全部为TEM-1型广谱β-内酰胺酶.携带blaTEM耐药基因的菌株所含RAPD类型:大肠埃希菌12种,肺炎克雷伯菌6种,阴沟肠杆菌7种.结论 TEM-1型β-内酰胺酶是湖南地区主要流行的TEM型酶;大肠埃希菌产TEM酶情况尤为突出;在同一医院以及同一病区存在TEM-1型β-内酰胺酶的克隆传播.     

多重耐药铜绿假单胞菌β-内酰胺酶耐药基因分析

目的 了解临床下呼吸道标本分离多重耐药铜绿假单胞菌(MDRPA)β-内酰胺酶及OprD2耐药基因存在状况,指导临床合理用药.方法 收集39株下呼吸道分离MDRPA,采用聚合酶链反应(PCR)技术检测β-内酰胺酶、OprD2基因并进行测序分析.结果 39株MDRPA中OXA-10阳性7株(18%),VIM-2阳性2株(5%),34株OprD2基因缺失(87%).结论 携带0XA-10、VIM-2及OprD2基因缺失是导致MDRPA对β-内酰胺类抗生素耐药的重要机制.     

产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌耐药性及基因型分析

目的:了解某医院分离产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）大肠埃希菌的耐药性和基因型,为临床合理用药提供依据。方法:收集大肠埃希菌544株,其中161株为产ESBLs菌株。采用VITEK 2 Compact分析仪进行药敏检测,双纸片协同试验确证产ESBLs菌株,PCR法扩增耐药基因。结果:产ESBLs菌株对多数抗菌药物的耐药率高于不产ESBLs菌株（P<0.05~P<0.01）。161株产EBSLs菌株携带CTX-M-9型基因98株、TEM型84株、CTX-M-1型62株、OXA-2型15株、OXA-10型7株、SHV型5株。CTX-M-1型和TEM+CTX-M-1型菌株对头孢他啶的耐药率分别为43.5%、59.1%明显高于CTX-M-9型和TEM+CTX-M-9型菌株15%、11.8%的耐药率（P<0.05和P<0.01）。结论:该院产ESBLs大肠埃希菌的基因型主要为CTX-M与TEM型,产ESBLs菌株对多数抗菌药物的耐药性高于不产ESBLs菌株。     

阴沟肠杆菌呼吸道感染的耐药研究

①目的调查阴沟肠杆菌呼吸道感染的耐药特点。②方法分析58例阴沟肠杆菌所致肺部感染的临床资料,测定超光谱β-内酰胺酶,用三维法测定AmpC酶。③结果产AmpC酶和超光谱β-内酰胺酶（ESBLs）分别为20.7%（12/58）,36%（21/58）、同时阳性10%（6/58）。培氟沙星、妥布霉素敏感率较高,分别为82%、91%。④结论诊断依靠病原学并结合临床及胸部X线检查,治疗应根据药敏并联合应用抗生素。     

产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌耐药表型和基因型分析

目的:分析临床分离大肠埃希菌耐药性、产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)阳性率及耐药基因之间的关系。方法:用K-B法检测117株大肠埃希菌耐药性,用酶抑制剂增强实验纸片法检测产ESBLs菌株,用PCR法检测相关耐药基因,用DNA序列分析确认基因亚型。结果:117株大肠埃希菌产ESBLs 49株,阳性率41.9%。产ESBLs菌株对青霉素类和第一、第二代头孢菌素耐药率100%,对第三代头孢菌素中头孢哌酮、头孢噻肟和头孢曲松耐药率>95%,对酶抑制剂哌拉西林/三唑巴坦和头孢哌酮/舒巴坦耐药率<20%,未检测到亚胺培南耐药株。非产ESBLs菌株耐药率明显低于产ESBLs菌株。49株产ESBLs菌株PCR均扩增到CTX-M型耐药基因,44株扩增到TEM型基因,未扩增到其他基因型。DNA序列分析证实为CTX-M-14亚型、CTX-M-3亚型和广谱酶TEM-1亚型基因。结论:大肠埃希菌产ESBLs较高,耐药显著;耐药基因以CTX-M-14亚型为主,其次为CTX-M-3亚型,尚未检出其他ESBLs基因。TEM-1亚型广谱内酰胺酶基因在大肠埃希菌中普遍存在。     

浙江省2003年医药卫生科研进展

一、基础医学研究1.革兰阴性菌超广谱β-内酰胺酶及 AmpC 酶研究:浙江大学医学院附属第一医院完成了浙江省产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠杆菌和肺炎克雷伯菌流行情况及耐药性研究;完成了浙江省阴沟肠杆菌 ampC 基因表达状况及耐药性研究;完成了 ESBLs 检测方法的评价,为基层医院检测 ESBLs 提供了方法学基础;创建了 AmpC 酶检测方法,解决了临床实验室无简便、易行、可靠的 AmpC 酶检测手段的问题,完成了 ESBLs 基因型分布及 ESBEs 流行相关因素分析;首次发现了6个β-内酰胺酶新基因型;发现浙江省 ESBLs 以 CTX-M 型为主;将基因表达引入β-内酰胺酶研究,率先建立了β-内酰胺酶新基因表达体系,为β-内酰胺酶基因功能研究建立了新的方法,并已用于 SHV-28及 CTX-M-22新基因型的功能研究。2.细胞外基质与 PTCA 术后再狭窄及药物干预:浙江大学医学院附属第一医院用血管紧张素转换酶抑制剂和血管紧张     

呼吸道肺炎克雷伯菌耐药性与 CTX-M 型 ESBLs 的研究

目的：探讨来源于呼吸道肺炎克雷伯菌(KP)耐药性与CTX-M型超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的关系。方法采用PCR 扩增和测序分析检测 KP 质粒和染色体上的 CTX-M 型 ESBLs 基因;采用纸片扩散法检测抗菌药物敏感性;使用χ2检验分析相关数据。结果有 CTX-M-1群酶和 CTX-M-25群酶检出,CTX-M 型 ESBLs 的总检出率为39.02%(48株),其中质粒和染色体上同时携带 CTX-M-1群酶的检出率为26.02%(32株)。β-内酰胺类抗菌药物头孢唑林、氟喹诺酮类抗菌药物左旋氧氟沙星、磺胺类抗菌药物复方磺胺甲恶唑等在 CTX-M 型 ESBLs 阳性组的耐药率明显高于阴性组(P <0.05)。结论在来源于呼吸道的 KP 中,在质粒和染色体上同时携带 CTX-M-1群酶基因最常见,CTX-M 型 ESBLs 与 KP 对某些抗菌药物产生耐药性关系密切。     

阴沟肠杆菌产AmpC酶和ESBLs的检测及药物敏感性分析

目的 了解阴沟肠杆菌的耐药特性及其产AmpCβ-内酰胺酶(AmpC酶)和产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的情况。方法 药敏实验和AmpC酶检测采用WalkAway-40全自动微生物分析仪,FSBLs俭测采用NCCLS纸片确证试验。结果 阴沟肠杆菌的标本来源主要为痰液、尿液、创口分泌物等,以烧伤科为多。ESBLs检出率为51．8％,AmpC酶检出率为53．2％。业胺培南敏感率为92．8％,其余抗生素敏感率均低于50％。结论 阴沟肠杆菌Ampc酶和ESBLs检出率较高,耐药性严苇,治疗应首选亚胺培南。     

肺炎克雷伯菌β-内酰胺酶基因型分布

目的阐明广州地区肺炎克雷伯菌β-内酰胺酶基因型分布。方法用药敏纸片法对67株耐三代头孢菌素类抗生素的肺炎克雷伯菌进行超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)表型筛选,采用PCR检测β-内酰胺酶耐药基因,对部分ESBLs菌株进行脉冲场凝胶电泳(PFGE)。结果 67株菌中有58株菌ESBLs表型阳性,β-内酰胺酶基因检测显示,44株产CTX-M、43株产SHV(其中10株产超广谱的SHV)、14株产OXA-1群、38株产TEM,7株菌产AmpC。产CTX-M的菌株有20株产CTX-M-1群(包括15株产CTX-M-15)和24株产CTX-M-9群(包括14株产CTXM-14)。PFGE结果显示产ESBLs菌株同源性低。结论广州地区耐三代头孢肺炎克雷伯菌以产CTX-M-1群和CTX-M-9群ESBLs为主。     

痰标本中肺炎克雷伯菌超广谱β-内酰胺酶基因的检测及耐药分析

目的分析痰标本中肺炎克雷伯菌的耐药特点及超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的发生率、基因分型。方法收集安徽省内34家医院痰标本中分离到的114株肺炎克雷伯菌,用琼脂稀释法检测其耐药性,标准纸片扩散法及PCR法检测ESBLs基因并初步分型。结果114株肺炎克雷菌中产ESBLs58株(50.9%),其中CTX-M-1型12株,CTX-M-9型15株,TEM型42株,SHV型49株,OXA-1型2株;产ES-BLs肺炎克雷伯菌的耐药率明显高于非产ESBLs菌株。结论痰标本中产ESBLs肺炎克雷伯菌检出率高,且呈多重耐药。     

泌尿系感染肠杆菌科细菌的产酶率及耐药状况分析

泌尿系感染(UTI)是临床常见的感染性疾病,尤以肠杆菌科细菌感染为主,由于临床广泛的不合理应用抗菌药物,使肠杆菌科细菌产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)日趋严重,给临床用药治疗带来了困难。为了解UTI的肠杆菌细菌的产酶率及耐药状况,我们对引起UTI的106株肠杆菌科细菌进行了菌群分析和超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)检测及药敏试验,为临床合理应用抗菌药物提供帮助。材料1.菌株来源106株菌自2005年10月-2006年11月从临床送检UTI的中段尿标本中分离。质控菌株为大肠杆菌ATCC25922、金黄色葡萄球菌ATCC25923、铜绿假单胞菌ATCC27853,均购…     

骨伤病人中阴沟肠杆菌的感染及药敏分析

目的:了解骨伤病人中感染阴沟肠杆菌的状况及耐药性,为临床提供抗感染依据。方法:对2006年1～12月分离出的阴沟肠杆菌采用回顾性的方法,分析其感染率及耐药状况。结果:共分离出阴沟肠杆菌135株,占分离总数的8.9%。药敏结果显示,阴沟肠杆菌对β-内酰胺类、氨基糖苷类、喹诺酮类、磺胺类抗菌药物有较高的耐药性,而对特殊β-内酰胺类(泰能等)和含酶抑制剂复合药耐药率较低,最低者是头孢哌酮/舒巴坦(10.4%),其次是哌拉西林/他唑巴坦(12.59%)。结论:阴沟肠杆菌已经成为骨伤病人感染的主要致病菌之一,且有17.6%的菌株产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs),对多种抗菌药物的耐药性较高,且有多重耐药性,临床应加强对阴沟肠杆菌的监控并防治耐药菌株的传播流行。     

13种抗生素对阴沟肠杆菌体外抗菌活性的研究

阴沟肠杆菌是引起院内感染的常见菌 ,它对β-内酰胺类、氨基糖甙类抗生素呈现出高耐药性 ,尤其是对第三代头孢菌素的耐药率呈上升趋势 [1]。根据1 995年 Bush- Jacoby- Mederios分类学 ,阴沟肠杆菌产生的 β-内酰胺酶属于染色体介导的 amp C基因编码的头孢菌素酶 ,分子生物学分类为 C类酶 ,它不但产生特异性β-内酰胺酶 ,还可产生质粒介导的超广谱β-内酰胺酶 ( ESBLs) [2 ,3 ] ,因此其耐药性越来越引起临床的广泛关注。我们用琼脂稀释法检测了阴沟肠杆菌对临床常见 1 3种抗生素的最低抑菌浓度( MIC) ,并用双纸片协同试验对其进行了 E…     

肠杆菌科细菌超广谱β-内酰胺酶携带率及其耐药性变迁

目的 了解西安地区肠杆菌科细菌超广谱β－内酰胺酶的携带率及其耐药性变迁，为产超广谱β－内酰胺酶菌株感染的治疗提供流行病学依据。方法 采用常规生化方法及Vitek全自动微生物分析仪进行肠杆菌科细菌的鉴定，超广谱β－内酰胺酶的检测采用浓度梯度法和纸片法，用K－B琼脂扩散法进行菌株的耐药性检测。结果 西安地区2001年肠杆菌科细菌超广谱β－内酰胺酶的携带率由1999年同期的16．41％增加为22．50％。超广谱β－内酰胺酶的主要携带菌仍以大肠埃希菌为主，产气肠杆菌和阴沟肠杆菌超广谱β－内酰胺酶携带率分别由0％和42．86％增长到17．86％和53．85％，其感染率也明显增加。亚胺培南的耐药率由6．1％降为0．63％，丁胺卡那、头孢哌酮／舒巴坦的耐药率则较1999年增加了1－2倍，其他抗生素的耐药率均有不同程度的增长。结论 本地区超广谱β－内酰胺酶阳性菌由相对单一性向多样性转化。亚胺培南是治疗超广谱β－内酰胺酶阳性菌株感染的首选药。加强产超广谱β－内酰胺酶肠杆菌科细菌的耐药性监测，对临床合理选择药物及控制阳性菌株的流行具有重要的实用价值。     

肠杆菌科细菌产AmpC酶和ESBLs的状况及对β-内酰胺类药物药敏检测分析

目的:了解肠杆菌科细菌产头孢菌素酶(AmpC)酶和超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的状况及对β-内酰胺酶类药物药敏情况。方法:应用头孢西丁三维试验检测AmpC酶,用纸片法检测ESBLs。对β-内酰胺酶类药物药敏试验采用K-B琼脂扩散法。结果:AmpC酶阳性为13.3%(149/1157),其中以阴沟肠杆菌、大肠埃希菌、肺炎克雷伯阳性率较高,而ESBLs阳性为43.0%(498/1157),其中以大肠埃希菌、肺炎克雷伯、阴沟肠杆菌阳性率较高,ESBLs和AmpC同时阳性为4.7%(54/1157)。除对亚胺培南未形成耐药外,AmpC阳性菌株对β-内酰胺酶类药物耐药率超过50%,ESBLs则超过70%,这些均显著高于非产酶株。结论:须要计划地使用各种抗生素类药物,防止更多的AmpC和ESBLs阳性菌株的形成。     

肠杆菌科产超广谱β-内酰胺酶菌株的调查分析

目的:监测肠杆菌科产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)菌株的耐药情况.指导临床医生合理应用抗生素,控制院内感染。方法:采用纸片协同法检测ESBLs菌株,并对82株产ESBLs菌株进行分析。结果:产ESBLs菌株主要为大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和阴沟肠杆菌。产ESBLs菌株与长期住院、应用广谱抗生素、健康等级差以及住ICU病房等有明显关系,并且具有多重耐药性。结论:产ESBLs的肠杆菌科细菌引起的感染日益增多,实验室及临床医生应注重产ESBLs菌株的监测和报告,合理应用抗生素,控制产ESBLs菌株的流行。     

儿童产ESBLs肺炎克雷伯菌耐药性及基因型研究

目的 了解笔者医院儿童产β内酰胺酶(ESBLs)肺炎克雷伯菌的耐药性及基因分型,为临床合理使用抗生素提供依据。方法 收集2017年7月~2018年7月从笔者医院常规分离的临床痰液、尿液、血液等各标本进行培养,对肺炎克雷伯菌进行ESBLs筛选及确证。对确证110株产超广谱β-内酰胺酶临床菌株进行19种抗生素的药敏试验,观察产ESBLs肺炎克雷伯菌耐药性。分析了产生肺炎克雷伯菌的ESBL质粒谱,并对产生肺炎克雷伯菌的ESBL携带的ESBL抗性基因进行了扩增和PCR分型。结果 产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯杆菌表现为多重耐药性,对头孢唑啉、头孢唑啉、头孢噻嗪、头孢噻嗪等头孢菌素具有较高的耐药性,耐药率为77.2%～86.0%。酶抑制复合制剂的耐药率为31.8%～80.0%,对亚胺培南耐药率为0。耐药基因型检出率中,SHV型占4.5%,CTX-M-9型占32.7%,TEM型占41.8%,CTX-M-1型占42.7%。另有41株(37.3%)检测到两种或两种以上耐药基因型,其中以CTX-M-1型与TEM型或CTX-M9型为主。结论 超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌的产生引起对多种抗生素具有多重耐药性,临床应重视其检测和药敏试验。亚胺培南等碳青霉烯类抗生素目前仍是治疗产广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌感染最有效的药物。