大肠癌中Pokemon的表达及与前哨淋巴结微转移的关系

目的 探索大肠癌中Pokemon的表达与大肠癌前哨淋巴结微转移的关系。方法 采用RT-PCR方法检测58例Dukes A-B期大肠癌组织中癌巢、癌以远组织中Pokemon mRNA的表达水平。采用免疫组织化学法检测其中56例大肠癌癌巢中Pokemon蛋白和前哨淋巴结CK20蛋白的表达。 结果 大肠癌癌巢中Pokemon mRNA水平显著高于癌以远组织（P=0.000）。Pokemon蛋白阳性与阴性患者前哨淋巴结发生微转移的比例间差异未达统计学意义（P=0.562）。Pokemon蛋白阳性的患者中CK20阴性的患者生存率高于CK20阳性的患者（P=0.039）。结论 Pokemon在大肠癌癌巢中高表达,联合检测Pokemon与前哨淋巴结CK20在大肠癌预后判断中有重要价值,但尚不能认为Pokemon蛋白可以影响大肠癌前哨淋巴结微转移。     

RT-PCR与免疫组化法检测宫颈癌前哨淋巴结微转移的探讨

目的:应用RT-PCR与免疫组织化学技术检测宫颈癌前哨淋巴结微转移,比较2种方法的差异.方法:选取经病理确诊的53例宫颈癌患者的110枚前哨淋巴结,进行病理切片,免疫组织化学染色与RT-PCR检测CK19的表达.结果:53例患者瘤体病灶PCR及免疫组织化学检测显示均有CK19阳性表达,阳性率100.0%.13例(24.52%)患者前哨淋巴结阳性表达,对13例患者的23枚前哨淋巴结进行PCR与免疫组织化学检测,结果有21枚(91.3%)前哨淋巴结PCR阳性;19枚(82.6%)免疫组织化学阳性.40例患者87枚前哨淋巴结阴性表达.有12例患者28枚前哨淋巴结PCR阳性,淋巴结阳性检出率为32.18%;有7例患者11枚前哨淋巴结阳性,阳性检出率为12.64%.PCR与免疫组织化学阳性表达分别为25例(47.16%)和20例(37.73%).结论:应用RT-PCR和免疫组织化学技术检测宫颈癌前哨淋巴结微转移的敏感性均高于临床病理;RT-PCR技术检测CK19基因判断宫颈癌前哨淋巴结微转移值得临床推广应用.     

Dukes B 期大肠癌前哨淋巴结微转移的定位检测及临床意义*

目的:探讨大肠癌前哨淋巴结（sentinel lymph node ,SLN ）微转移（micrometastasis,MM）的检测方法及其临床意义。方法:前瞻性研究64例行根治性手术的Dukes B期大肠癌患者,对其中61例定位成功的122 枚SLN 应用常规HE染色联合免疫组化SP法,检测其前哨淋巴结中细胞角蛋白20（CK20）及端粒酶的表达,随访3 年,记录患者的临床病理参数和生存资料,分析其相关性。结果:1）61例中有6 例患者9 枚SLN 经常规HE检测阳性。2）免疫组化法检测SLN :CK20阳性表达27.3%（15/55）;端粒酶阳性表达21.8%（12/55）。 3）两者联合检测前哨淋巴结微转移（SLNMM）检出率为38.2%（21/55）。 4）Dukes B期患者SLNMM（+）组癌复发转移率明显高于同期SLNMM（-）组（P<0.05）,生存率较低（P<0.05）,而与Dukes C期对比,差异无统计学意义;SLNMM（-）组患者的复发转移率、生存率与同期Dukes C期患者对比,有显著性差异（P<0.05）。 结论:CK20、端粒酶免疫组化法均可检测出大肠癌SLN 中存在的微转移（MM）,两者联合可提高检出率;大肠癌SLNMM的检出使大肠癌的Dukes分期更加精细,从而有助于指导术后的辅助治疗和预后判断。      

术中冰冻切片联合快速免疫组织化学染色检测乳腺癌前哨淋巴结微转移的临床研究

目的探讨术中冰冻切片联合快速免疫组织化学检测对乳腺癌前哨淋巴结（SLN）微转移的诊断价值,分析SLN微转移与临床各因素的关系。方法对43例乳腺癌患者行前哨淋巴结活检（SLNB）,切除SLN送快速病理学检查。以100μm为间隔,进行连续切片（SS）,并做冰冻切片HE染色及快速免疫组织化学染色检测SLN微转移[检测广谱细胞角蛋白（pan—CK）及上皮膜抗原（EMA）的表达];采用）（2检验或连续性校正x。检验对定性资料进行统计学分析。结果43例乳腺癌患者成功行SLNB,共检出SLN100枚。4例冰冻切片HE染色查见癌转移,39例HE染色阴性者继续行快速免疫组织化学染色检出微转移者6例。冰冻切片检测SLN癌转移率为9．3％（4／43）,冰冻切片联合术中快速免疫组织化学染色检测SLN癌转移率为23．3％（10／43）。两者的灵敏度、特异度、总符合率和假阴性率分别为36．4％／90．9％、100％／100％、83．7％／97．7％、63．6％／9．1％。SLN微转移与月经状态、肿瘤分期、组织学类型、肿瘤位置、激素受体状态及人表皮生长因子受体2（HER-2）状态无明显关系（P〉0．05）。结论术中冰冻切片联合快速免疫组织化学染色法提高了SLN微转移的检出率,减少了假阴性率,且安全、快速、花费少,值得在临床推广使用。     

巢式PCR检测CK19 mRNA和LUNX mRNA诊断肺癌淋巴结微转移

目的：探讨非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer，NSCLC）淋巴结微转移的基因诊断方法，并分析CK19 mRNA、LUNX mRNA作为肺癌微转移检测分子标记物的可行性。方法：采用巢式RT—PCR技术检测39例NSCLC患者的149枚淋巴结和20例肺良性病变患者的47枚淋巴结中的细胞角蛋白19（CK19 mRNA）、肺特异性X蛋白（LUNX mRNA）的表达。结果：39例NSCLN患者的149枚淋巴结中，46枚（30．9％）淋巴结存在CK19 mRNA阳性表达，56枚（37．6％）存在LUNX mRNA阳性表达，常规病理组织学检出20枚（13．4％）有癌转移，巢式RT—PCR方法和常规病理方法比较差异有统计学意义（P〈0．01）；20例肺良性病变患者的47枚淋巴结中CK19 mRNA和LUNX mRNA表达均为阴性，与肺癌组比较均有统计学意义（P〈0．01）。淋巴结微转移与病理类型、细胞分化程度和临床分期有密切关系（P〈0．05）。结论：CK19 mRNA、LUNX mRNA可作为检测NSCLC患者淋巴结微转移的分子标记物，联合检测可能有助于早期诊断肺癌转移，从而指导临床个体化治疗。     

结直肠癌淋巴结中黏蛋白1的表达和临床意义

目的研究结直肠癌区域淋巴结中黏蛋白1（MUC1）的表达，以寻找1种检测结直肠癌淋巴结微转移的可靠指标。方法采用免疫组织化学Elivision法，对69例结直肠癌457枚区域淋巴结中MUC1的表达进行检测和分析。结果常规病理学检查无转移的结直肠癌淋巴结，其MUC1的阳性表达率（淋巴结微转移率）为18．6％（61／328），DukesA、B和C期淋巴结微转移率分别是4．7％（3／64）、16．8％（28／167）和30．9％（30／97）。DukesA、B和C期转移淋巴结的检出率分别是4．7％（3／64）、16．8％（28／167）和70．4％（159／226）。免疫组织化学方法对结直肠癌转移淋巴结的检出率显著高于常规病理检查（P〈0．05），淋巴结微转移率和转移淋巴结的检出率随Dukes期别上升呈显著递增（P〈0．05）。1例DukesA期患者，9例B期患者因免疫组织化学检测到微转移，分期从DukesA或B期上调至C期。结论MUC1在结直肠癌区域淋巴结中有表达，是检测淋巴结微转移可靠指标。检测淋巴结中MUC1的表达可更准确的对结直肠癌进行临床分期。     

nm23 VE6F-C及VEGFR-3在大肠癌中的表达及意义

目的：探讨nm23、VEGF—C及其受体VEGFR-3在大肠癌中的表达和三者间的相互关系，及其在大肠癌淋巴结转移和肿瘤进展中的意义。方法：采用免疫组化SP法检测97例大肠癌组织和97例正常大肠组织中nm23、VEGF—C及VEGFR-3的表达。结果：1）A、B期大肠癌及无淋巴结转移的大肠癌组织中nm23的阳性表达率分别为68．9％、68．2％，C、D期及有淋巴结转移的大肠癌组织中nm23阳性表达率分别为30．6％、25.8％，A、B期高于C、D期，无淋巴结转移高于有淋巴结转移，差别有统计学意义（P〈0．05）；VEGF—C阳性表达率在C、D期及有淋巴结转移的大肠癌组织中分别为75．0％、77．4％，在A、B期及无淋巴结转移的大肠癌组织中分别为49．2％、50．0％，两者比较，差别有统计学意义（P〈0．05）；VEGFR-3在C、D期及有淋巴结转移的大肠癌中的阳性表达率分别为63．9％、67．7％，在A、B期及无淋巴结转移的大肠癌组织中分别为41．0％、40．9％，差别有统计学意义（P〈0．05。2）nm23与分化程度、肠壁侵犯深度、有无淋巴结转移及Duckes分期有关（P〈0．05），VEGF—C及VEGFR-3与分化程度、淋巴结转移及Duckes分期有关（P〈0．05）：3）nm23在正常大肠组织和大肠癌组织中的阳性表达率分别为83．5％、54．6％，差别有统计学意义（P〈0．05），VEGF—C在正常大肠组织和大肠癌组织中的阳性表达率分别为29．9％、58．8％；差别有统计学意义（P〈0．05），VEGFR-3在正常大肠组织和大肠癌组织中的阳性表达率分别为21．6％、49．5％，两者比较，差别有统计学意义（P〈0．05）。结论：nm23与VEGF—C和VEGFR-3在大肠癌中的表达呈负相关关系，nm23基因对大肠癌有抑制作用，VEGF—C和VEGFR-3与大肠癌的侵袭和转移密切相关，三者的联合检测可作为评价大肠癌病情、推测预后及指导治疗的重要参考指标。     

乳腺癌前哨淋巴结及骨髓中微转移的联合检测

目的：探讨乳腺癌患者联合进行前哨淋巴结（SLN）及骨髓微转移检测的可行性及临床价值。方法：^99mTc-SC作为示踪剂，进行前哨淋巴结活检，使用流式细胞仪检测前哨淋巴结中的微转移，并使用EMA和CK19的免疫组化染色，对腋窝淋巴结常规检查阴性的乳腺癌患者进行骨髓微转移的检测。结果：13例腋窝淋巴结常规HE检查阴性的患者中，流式细胞仪发现6例患者前哨林巴结中存在微转移（46．2％），SLN微转移的发生率与肿块大小相关（P＝0．027）。在腋窝淋巴结常规HE检查阴性的20例乳腺癌患者中，9例患者的骨髓中存在EMA或CK阳性的细胞（45％），骨髓微小转移与肿瘤ER（P＝0．045），OR（0＝0．010）的状态相关。10例同时进行骨髓及SLN微转移检测的患者，4例pN0(i )，4例pM0(i )，2例pN0(i )Mo(i )。结论：骨髓及淋巴结中的微转移可能与患者预后差相关。     

宫颈癌患者淋巴结CK19 mRNA的检测及其临床意义

背景与目的：采用RT—PCR技术检测CK19（cytokeratin 19）mRNA的转录，可在部分恶性肿瘤患者中检测到常规病理学方法不能检测到的隐性微转移。本研究旨在检测宫颈癌患者盆腔淋巴结组织特异性标志物（CK19mRNA）的表达，并探讨其临床意义。方法：采用RT—PCR技术检测Ⅰ～Ⅱ期宫颈癌患者盆腔淋巴结CK19 mRNA的转录。生存曲线用Kaplan—Meier转录。生存率比较采用Log—rank检验。结果：32例宫颈癌患者共检测淋巴结标本206枚，经常规病理组织学方法检测到24枚淋巴结有癌转移，阳性率为12％（24／206）；经RT—PCR法检测到44枚淋巴结表达CK19 mRNA，检出率为21％（44／206）。RT—PCR法与常规病理组织学方法比较，差异有显著性（P〈0．01）。常规HE染色阴性的182枚淋巴结中，29枚检测到CK19mRNA的特异性条带，微转移的检出率为15．9％（29／182）。低分化患者的淋巴结CK19检出率为87．5％（7／8）显著高于中～高分化患者的检出率33．3％（8／24）（P〈0．05）。而淋巴结CK19的检出率与年龄、临床分期、组织学类型、宫颈肿瘤大小、肌层浸润深度、宫旁浸润、脉管癌栓均无明显关系（P〉0．05）。淋巴结CK19 mRNA阳性患者的4年无瘤生存率为58％；而淋巴结CK19 mRNA阴性患者的4年无瘤生存率为76．5％，差异无显著性（P〉0．05）。结论：与传统的病理组织学比较，采用RT—PCR技术检测CK19 mRNA转录能显著提高淋巴结微转移的检出率，预后判断有待增大病例数进一步研究。     

N0期31例胃癌患者区域淋巴结组织中CK19的表达

目的：探讨常规染色显示无淋巴结转移的胃癌患者淋巴结微转移发生情况以及预后意义。方法：回顾性分析31例常规染色提示无淋巴结转移的胃癌患者(T1-3N0M0)，将常规检查阴性的淋巴结用CK19单克隆抗体进行免疫组织化学染色。结果：31例常规病理检查无淋巴结转移的患者中位随访期为50个月，所切除淋巴结的中位数为8个．总的5年生存率为53．7％，其中通过免疫组化发现的微转移检出率为32．3％(10／31)。淋巴结微转移患者5年生存率为30％，低于无微转移患者的66．5％，P=0．036。结论：CK19的免疫组化染色是检测胃癌淋巴结微转移的敏感易行的方法，且微转移的检测有助于明确分期、判断预后及指导治疗。     

早期非小细胞肺癌前哨淋巴结微转移检测的应用研究

目的 目前,尚无检测技术可准确判断肺癌前哨淋巴结(sentinel lymph node,SLN)微转移.本研究探讨CK19和MAGE A3表达与非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC) SLN微转移的相关性及临床价值.方法 选择山东大学附属山东省肿瘤医院胸外科32例接受手术治疗的临床Ⅰ～ⅡA期NSCLC患者,术中联合应用染色法(异舒泛蓝溶液)和放射同位素法(99 Tc硫胶体检测)找寻SLN,并采用免疫组化技术检测SLN及非前哨淋巴结(non-sentinel lymph node,nowSLN)中CK19和MAGE-A3抗体的表达.结果 32例患者均检测出SLN,共清除淋巴结598枚,其中SLN 103枚,non-SLN 495枚.平均每例患者清除淋巴结(18.69±8.13)枚,清除SLN(3.22±1.74)枚.免疫组化法检测到20例患者44枚SLN中CK19表达阳性,19例患者31枚SLN中MAGE-A3抗体表达阳性.SLN免疫组化检查阳性率为42.72％,明显高于常规HE染色的阳性率(25.24％),P=0.01.SLN的阳性表达率与临床病理分期有关,P＜0.05;而与性别、年龄、肿瘤部位、分化程度、肿瘤大小和肿瘤类型无关,P＞0.05.结论 CK19和MAGMA3是判断淋巴结微转移较好的分子标志物,通过免疫组化技术检测SLN中CK19和MAGE-A3表达有助于评估区域淋巴结微转移状况.     

逆转录聚合酶链反应检测结直肠癌淋巴结微转移的临床意义

背景与目的:结直肠癌淋巴结微转移灶是否有预测预后价值目前尚有争议,本文对结直肠癌患者淋巴结微转移情况进行逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测,研究微转移对临床分期和预后的影响。方法:用RT-PCR技术检测56例结直肠癌患者肠旁及系膜淋巴结中细胞角质蛋白CK20mRNA,揭示微转移灶的存在,并与常规病理苏木精伊红(HE)染色和免疫组化染色结果进行比较;分析HE染色和RT-PCR检测结果对判定临床病理分期和统计生存率的影响。结果:共检测432个淋巴结,HE染色、免疫组化染色和RT-PCR法淋巴结转移检出率分别为57.2%、62.3%和73.1%。HE染色和免疫组化的检出率无显著性差异(P>0.05),而HE染色和RT-PCR法检测结果有显著性差异(P<0.05)。56例患者中,按HE染色结果确定的PN0、PN1和PN2期,其5年无复发转移生存率分别为80%、60%和50%;通过RT-PCR技术检测,升级后的PN0、PN1和PN2期5年无复发转移生存率分别为100%、61.9%和55.6%,两种方法分析的结果有显著性差异(P<0.05)。结论:HE染色未确切指出淋巴结微转移癌;RT-PCR法检测CK20mRNA可以推断淋巴结微转移癌的存在,从而有助于确定结直肠癌临床分期和预测预后。     

结直肠癌前哨淋巴结体外定位检测的临床研究

目的:探讨用体外亚甲蓝作为染色剂寻找前哨淋巴结(sentinellymph node,SLN)的方法在结直肠癌SLN定位中的可行性及临床价值。方法:将行标准根治性切除的结直肠癌标本离体后,在肿块四周黏膜下注射亚甲蓝后追踪辨认。蓝染的淋巴结视为SLN,未蓝染的淋巴结被视为NSLN。SLN中无癌细胞转移者常规行细胞角蛋白(CK、AE1/AE3)免疫组化检查,CK阳性者视为有微转移病例。结果:82例患者成功标记SLN(96.47%),准确度为90.24%。通过CK检测,16例SLN阴性患者发现微转移,总转移率提升了18.30%,TNM分期得以提升的患者达18.82%。HE染色下SLN的假阴性率为23.17%,结直肠癌的假阴性率分别为6.38%和45.71%,有统计学意义（P=0.001）。结论:前哨淋巴结活检（SLNB）对结肠癌区域淋巴结转移情况的判断更有临床价值,但在直肠癌方面的应用值得进一步探讨。     

胃癌淋巴结微转移的多种抗体联合检测及其临床价值

免疫组化法检测胃癌淋巴结中的微转移灶方法简便,但敏感性差。同时应用多种抗体联合检测淋巴结的微转移情况,是否能提高其敏感性,克服免疫组化法的弱点尚有一些争议。本研究应用细胞角蛋白20(CK20)、上皮膜抗原(EMA)及肿瘤相关糖蛋白72-4(CA72-4)抗体对胃癌阴性淋巴结的微转移情况进行联合检测,旨在评价多种抗体联合检测微转移的应用价值。     

早期胃癌组织中上皮钙粘蛋白表达与淋巴结微转移及临床病理的关系

背景与目的:早期胃癌淋巴结微转移问题日益受到关注,胞浆角蛋白(cytokeratin,CK)染色是识别上皮源性恶性肿瘤细胞的重要方法,本研究拟探讨早期胃癌原发灶上皮钙粘蛋白(epithelial cadherin,E-cad)的表达情况与淋巴结内出现微转移之间的关系及临床意义.方法:用免疫组织化学染色的方法对162例早期胃癌患者的4 522枚淋巴结进行苏木精-伊红(HE)和胞浆角蛋白(cytokeratin,CK)染色,并对其中135例患者的原发灶切片进行E-cad染色,结合临床病理资料和随访结果进行分析.结果:HE染色发现的淋巴结转移率为6.8%(11/162),而CK染色发现的淋巴结转移率为26.5%(43/162),二者差异有统计学意义(P＜0.001).在151例HE染色未见淋巴结转移的患者中通过CK染色发现了32例(21.2%)有淋巴结微转移,且淋巴结微转移多见于原发灶直径大于1.0 cm,组织分化不良,肿瘤浸润较深的(如浸及粘膜下层),淋巴管和血管受累,以及E-cad低表达标本(P＜0.05).原发灶E-cad的低表达率为57.0%(77/135),与淋巴结出现微转移有密切关系,有淋巴结微转移患者的5年生存率比没有微转移者明显低(P＜0.01).结论:肿瘤直径大于1.0 cm,组织分化不良,较深的浸润,淋巴管或血管受累,以及E-cad低表达是早期胃癌患者出现淋巴结转移的高危因素.     

p53过度表达与结直肠癌淋巴结转移、微转移关系的研究

 目的　探讨结直肠癌病例中p5 3过度表达与淋巴结转移、微转移间关系。方法　收集 1989～2 0 0 1年根治性手术切除 ,有完整检查资料的结直肠癌标本 74例经溶脂法检查淋巴结共 35 0 3枚 ,均经4 μm间断连续切片 ,HE染色及免疫组织化法 (CK18+EMA)检查淋巴结转移和微转移。肿块经免疫组化法 (DO - 0 7)检查 p5 3过度表达。 结果　检出转移淋巴结 2 2 3枚 ,微转移淋巴结 38枚。全组中 31例有 p5 3过度表达。结肠癌中 p5 3过度表达与淋巴结转移、微转移无关 (r =0 .19,P =0 .2 0 ;r =- 0 .2 3,P=0 .13)。直肠癌中p5 3过度表达与淋巴结转移、微转移无关 (r =0 .0 2 ,P =0 .90 ;r =0 .13,P =0 .32 )。结论　p5 3过度表达与结直肠癌淋巴结转移、微转移程度无明显相关性。     

肺特异性X蛋白角蛋白19及癌胚抗原基因在非小细胞肺癌淋巴结微转移中的比较

目的 探讨非小细胞肺癌(NSCLC)中肺特异性X蛋白(LUNX)mRNA、角蛋白19(CK19)mRNA和癌胚抗原(CEA)mRNA的表达及与NSCLC淋巴结转移和分期的关系.方法 采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法,检测56例NSCLC患者的肺癌组织和103枚区域性淋巴结的LUNX mRNA、CK19 mRNA和CEA mRNA的表达情况.对所有淋巴结做常规病理切片并行HE染色,观察转移情况.结果 (1)LUNX mRNA、CK19 mRNA和CEA mRNA在肺癌患者淋巴结中的表达明显高于肺良性病变者(P＜0.05).(2)与常规病理学方法检查淋巴结相比,RT-PCR技术的敏感性显著增高(P＜0.05).(3)LUNX mRNA、CK19 mRNA在淋巴结中的阳性表达率与肺癌病理类型之间无明显相关性(P＞0.05),但CEA mRNA在肺腺癌组织中的表达明显增高(P＜0.05).(4)区域淋巴结中,LUNX mRNA表达的阳性率随TNM分期的升高而增加(P＜0.05).结论 LUNX mRNA与CK19mRNA均可作为RT-PCR检测肺癌患者区域性淋巴结微转移的分子标志物;在特异性和敏感性上,LUNX mRNA优于CK19 mRNA.采用RT-PCR方法,有利于早期诊断肺癌转移.     

cN0舌鳞癌颈淋巴结微转移检测及其临床意义

背景与目的:常规病理检查颈淋巴结阴性舌鳞状细胞癌(简称舌癌)术后出现颈部复发可能与微转移有关。本研究探讨临床颈部阴性(cN0)舌癌患者淋巴结微转移情况及其临床意义。方法:49例患者523枚颈淋巴结同时行常规HE染色和CK19免疫组化(IHC)染色,所有病例随访9～83(平均56)月。结果:HE染色检出5例患者7枚(1.3%)淋巴结转移;IHC染色检出19例34枚(6.5%)淋巴结转移,两种检测方法差异有统计学意义(P<0.05)。14例患者27枚(5.2%)淋巴结存在微转移。HE染色将3例cN0舌癌分期上升至pN1期,2例cN0上升至pN2b期;IHC染色将3例cN0舌癌分期上升至pN1期,16例cN0上升至pN2b期。淋巴结微转移与性别、年龄、T分期、分化程度和浸润深度无相关性(P>0.05)。有、无微转移患者5年生存率分别为78.5%和86.7%,两者之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论:免疫组化染色可提高舌癌颈淋巴结转移的检出率和病理分期的准确性。本实验未能证明微转移与预后的关系,该问题仍有待进一步研究。