全反式维甲酸对荷瘤Wistar大鼠生存期的影响及其机制

 目的研究全反式维甲酸对荷瘤鼠生存期的影响及其机制。方法建立wistar大鼠脑内C6胶质瘤模型，待肿瘤生长至第7天，随机将荷瘤鼠分为维甲酸治疗组和对照组。于接种后的第22天，免疫组化检测各组P27Kip1蛋白的表达并观察动物生存期。结果与对照组相比，治疗组动物p27kip1蛋白的表达增高（P〈0．05），生存期延长（P〈0．05），两者呈正相关。结论全反式维甲酸延长动物生存期的机制同上调p27kip1蛋白的表达有关。p27kip1蛋白的表达高低可作为判断胶质瘤预后的指标。     

冷冻治疗对荷瘤Wistar大鼠生存期的影响和机制

[目的]研究冷冻治疗对荷瘤Wistar大鼠生存期的影响和机制。[方法]建立大鼠C6脑胶质瘤模型,冷冻治疗后免疫组化检测p27kip1和CyclinD1蛋白的表达,观察动物生存期。[结果]与未实施冷冻治疗对照组比较,冷冻治疗可延长动物生存期,上调p27kip1蛋白的表达,下调CyclinD1蛋白的表达。p27kip1蛋白阳性表达率与荷瘤鼠生存期呈正相关,CyclinD1蛋白的阳性表达率与荷瘤鼠生存期呈负相关。p27kip1蛋白阳性表达率和CyclinD1蛋白的阳性表达率呈负相关。[结论]冷冻治疗可延长动物生存期,其机制同上调p27kip1蛋白和下调CyclinD1蛋白的表达有关。     

全反式维甲酸对大鼠C6脑胶质瘤细胞分化的影响

目的：探讨全反式维甲酸对大鼠C6脑胶质瘤细胞分化的影响。方法：建立大鼠C6脑胶质瘤模型,腹腔注射全反式维甲酸后,流式细胞仪检测细胞增殖时相变化及免疫组化检测p27Kipl蛋白和GFAP蛋白的变化。结果：流式细胞仪检测显示治疗组较对照组G1期细胞比例增加（P〈0．05）,S期细胞比例减少（P〈0．05）,免疫组化检测显示p27Kipl蛋白和GFAP蛋白的表达增加（P〈0．05）。结论：反式维甲酸可诱导大鼠C6脑胶质瘤分化,降低肿瘤恶性程度。     

全反式维甲酸对大鼠C6脑胶质瘤细胞分化的影响

目的:探讨全反式维甲酸对大鼠C6脑胶质瘤细胞分化的影响.方法:建立大鼠C6脑胶质瘤模型,腹腔注射全反式维甲酸后,流式细胞仪检测细胞增殖时相变化及免疫组化检测p27Kip1蛋白和GFAP蛋白的变化.结果:流式细胞仪检测显示治疗组较对照组G1期细胞比例增加(P<0.05),S期细胞比例减少(P<0.05),免疫组化检测显示p27Kip1蛋白和GFAP蛋白的表达增加(P<0.05).结论:反式维甲酸可诱导大鼠C6脑胶质瘤分化,降低肿瘤恶性程度.     

全反式维甲酸诱导大鼠C6脑胶质瘤细胞凋亡的实验研究

目的: 探讨全反式维甲酸对大鼠C6脑胶质瘤细胞的增殖抑制及其分子机制。 方法: MTT法检测全反式维甲酸作用于大鼠C6脑胶质瘤细胞后,观察其对细胞增殖抑制率的影响。流式细胞仪观察肿瘤细胞周期及凋亡率的变化。电镜观察C6细胞超微结构变化。Western blot法在不同时间点对凋亡相关基因caspase-3活性蛋白产物的表达进行了检测。 结果: MTT结果表明ATRA对C6细胞的抑制作用具有时间和浓度依赖性。流式细胞仪检测证明与对照组相比,处理组C6细胞发生G₁期阻滞;S、G₂期细胞比例下降;细胞出现亚二倍峰,凋亡比例明显增加。电镜下全反式维甲酸作用72h后处理组C6细胞呈凋亡改变:如核固缩、染色质趋边凝聚。Western blot检测发现,处理组出现了caspase-3蛋白活性裂解片段。 结论: 全反式维甲酸抑制C6脑胶质瘤细胞生长,全反式维甲酸抑制脑胶质瘤的作用机理可能至少通过改变细胞周期分布、诱导凋亡来实现。     

全反式维甲酸对胶质瘤SHG-44细胞基因表达谱的影响

背景与目的:胶质瘤有恶性进展的趋势,而诱导分化治疗可诱导高级别肿瘤的分化,使肿瘤恶性程度降低甚或转为正常。本研究旨在检测全反式维甲酸(all-transretinoicacid,ATRA)处理后胶质瘤SHG-44细胞的基因表达谱改变,为进一步研究胶质瘤的基因治疗奠定基础。方法:以10μmol/LATRA处理SHG-44细胞后,提取总RNA进行反转录聚合酶链反应,并以荧光染料Cy3和Cy5标记cDNA产物,然后进行芯片杂交,检测ATRA诱导前后SHG-44细胞的基因表达谱,获得差异表达基因;随机选择数个差异基因进行Northern杂交实验,以验证cDNA微阵列的结果。结果:应用cDNA微阵列检测发现ATRA处理前后的SHG-44细胞之间存在42个差异表达基因,其中表达上调28个、表达下调14个。这42个差异表达基因按功能分为:凋亡类3个、细胞迁移和转移类3个、细胞周期与生长调节类2个、细胞骨架类2个、分化类1个、细胞代谢类5个、癌基因1个、氧化磷酸化类1个、受体与信号传导类2个、核蛋白体类3个、泛素-蛋白酶系统类2个、生长因子与细胞因子类1个及其他类相关基因16个。结论:ATRA可引起胶质瘤SHG-44细胞基因表达谱的改变,上述差异表达基因可能不仅介导药物诱导胶质瘤分化的机制,而且调节胶质瘤的演进。     

全反式维甲酸对人胃腺癌细胞中Akt及其磷酸化蛋白表达的影响

目的研究全反式维甲酸（alltrans-retinoic acid,ATRA）对人胃腺癌细胞（SGC-7901）中Akt及其磷酸化蛋白p—Akt（Ser473）和p—Akt（Thr308）表达的影响及其对细胞凋亡的诱导作用。方法采用四甲基偶氮唑盐（MTT）方法检测ATRA对SGC-7901增殖的抑制作用;荧光混微镜观察细胞凋亡形态;Western blot方法检测不同浓度ATRA处理后的SGC-7901细胞中Akt、p-Akt（Ser473）和p-Akt（Thr308）的表达情况。结果ATRA对SGC-7901细胞增殖的抑制作用呈时间和剂量依赖性;ATRA处理48h时,荧光显微镜观察细胞呈现明显的凋亡形态学改变;Western blot检测显示ATRA对细胞中Akt蛋白的表达没有明显影响,但显著下调两种p-Akt蛋白的表达。结论ATRA诱导SGC～7901细胞凋亡可能与其抑制磷酸化Akt蛋白表达有关。     

全反式维甲酸对大鼠肝癌前状态NK细胞活性的影响

本文采用乳酸脱氢酶释放法测定了全反式维甲酸对二乙基亚硝胺诱导的鼠肝癌前状态自然杀伤细胞活性。结果表明二乙基亚硝胺诱癌１２周可明显导致大鼠ＮＫ细胞活性下降，而全反式维甲酸可预防二乙基亚硝胺的这种作用。因此，我们认为全反式维甲酸提高机体自然杀伤细胞活性可能为它预防肿瘤发生的机制之一。     

全反式维甲酸对结肠癌Lovo细胞VEGF及其受体表达的影响

目的 探讨全反式维甲酸(ATRA)对结肠癌Lovo细胞血管内皮细胞生长因子(VEGF)及其受体的影响,为其临床应用提供理论依据.方法 MTT法观察不同浓度ATRA对结肠癌Lovo细胞株生长的抑制作用以及对外源性VEGF刺激Lovo细胞生长的抑制作用.流式细胞仪分析ATRA作用后Lovo细胞周期变化以及细胞凋亡情况.ELISA法检测ATRA作用前后细胞培养上清液中VEGF含量变化.流式细胞仪测定Lovo细胞VEGF受体表达.结果 ATRA对Lovo细胞的生长具有抑制作用,呈时间与剂量依赖性.外源性VEGF165能刺激Lovo细胞生长,ATRA能够抑制VEGF165对细胞生长的刺激作用.随ATRA作用浓度增加,细胞周期G0/G1期细胞比例从(60.10±1.27)%增加至(84.80±1.40)%;细胞凋亡率增加至(39.79±3.96)%.ATRA能抑制Lovo细胞表达VEGF及VEGF受体,呈时间与剂量依赖性.结论 ATRA具有抑制结肠癌Lovo细胞株VEGF及其受体表达的作用,抑制肿瘤细胞的生长,可能机制为阻断VEGF自分泌及旁分泌,与促进肿瘤细胞凋亡及阻滞细胞周期有关.     

全反式维甲酸和亚硒酸钠对HL-60细胞Rb基因的RNA表达及其产物磷酸化的影响

目的：观察全反式维甲酸（ＲＡ）和亚硒酸钠对ＨＬ６０的Ｒｂ基因的ＲＮＡ及其产物磷酸化的联合效应。方法：以ＨＬ６０细胞为实验对象，利用狭线杂交、Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔｉｎｇ和流式细胞仪进行研究。结果：狭线杂交实验表明ＲＡ和硒单独或联合都对Ｒｂ基因的ＲＮＡ无明显影响。Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔｉｎｇ结果显示：ＲＡ和硒可影响该细胞ＲＢ蛋白磷酸化与去磷酸化状态。在第４天０．１μｍｏｌ／ＬＲＡ可使去磷酸化ＲＢ蛋白增加４７％；５．８μｍｏｌ／ＬＮａ２ＳｅＯ３可使磷酸化ＲＢ蛋白减少４９％，对去磷酸化ＲＢ蛋白仅轻度增加。联合后去磷酸化ＲＢ蛋白明显增加，较对照组增加了１２７％，明显高于两单独组。实验中ＲＢ蛋白磷酸化状态与细胞分化和细胞周期关系与文献报道一致。结论：ＲＡ和硒联用对ＨＬ６０细胞的ＲＢ蛋白产物去磷酸化作用比单独作用更强。加用硒有可能减少对ＲＡ的抗药性     

全反式维甲酸对阿糖胞苷诱导HL-60细胞凋亡的影响

目的 :探讨 HL- 6 0细胞经全反式维甲酸 (ATRA)作用后对化疗药物阿糖胞苷 (Ara- C)诱导凋亡敏感性的变化。方法 :应用光镜检查凋亡细胞形态 ,DNA电泳检查梯状条带及流式细胞仪检测细胞周期分布、凋亡细胞率和 bcl- 2蛋白表达的阳性细胞率和相对荧光强度 (MFI)。结果 :ATRA0 .3mg/ L 作用 HL- 6 0细胞 72 h后 ,S期细胞显著减少至 32 .9% (P<0 .0 5 ) ,G0 / G1 期细胞明显增加达 5 8.5 % (P<0 .0 5 ) ,bcl- 2阳性细胞率和 MFI分别下降至 18%和 0 .6 3(P<0 .0 5 ) ;Ara- C1.5 m g/ L 作用 HL- 6 0细胞 4h,凋亡细胞率为 5 5 .1% ,DNA电泳见明显的梯状条带。当 HL- 6 0细胞经 ATRA0 .3m g/ L 作用 72 h后再加 Ara- C1.5 m g/ L 继续培养 4h,细胞凋亡率明显减少至 34 .4% (P<0 .0 5 ) ,DNA电泳见梯状条带亮度减弱。结论 :ATRA降低 HL- 6 0细胞对 Ara- C诱导凋亡敏感性 ,其机制可能与 ATRA阻滞 G0 / G1 期细胞进入 S期有关     

减量HA方案和ATRA治疗高危骨髓增生异常综合征20例

目的：观察减量的三尖杉酯碱（H），阿糖胞苷（A）和全反式维甲酸（ATRA）诱导治疗高危骨髓增生异常综合征的疗效。方法：对20例高危骨髓增生异常综合征患者，应用三尖杉酯碱2－3mg／天，静脉滴注，连用5天，阿糖胞苷100mg/天，静脉滴注，连用5天，ATRA30－60mg/天，分次口服，结果：完全缓解（CR）6例（30％），部分缓解3例（15％），无效11例（55％），7例（35％）在治疗中转化为急性白血病，化疗相关性死亡3例（15％），结论：减量HA方案和全反式维甲酸治疗高危MDS有明显疗效，但老年患者治疗相关性死亡率较高，需注意个体化治疗。     

α-双炔失碳酯对 Swarm大鼠软骨肉瘤的分化诱导作用

目的：研究α -双炔失碳酯（ alpha-anordrin,α -anordrin）对 Swarm大鼠软骨肉瘤（ swarm rat chondrosarcoma,SRCS）生长的影响及其作用机制。方法：观察α -anordrin和全反式维甲酸（ all-trans retinoic acid, ATRA）对 SRCS在大鼠体内生长的影响;用 MTT法研究药物对细胞增殖的影响;用 von Kossa 法显示钙盐在组织中的沉积;用免疫组织化学法研究 S-100蛋白的表达水平;用硝基苯酚磷酸酯显色法检测碱性磷酸酯酶活性;用 Fura-2/AM荧光法测定细胞内自由钙离子浓度。结果：α -anordrin对 SRCS在大鼠体内生长有剂量依赖性的抑制作用,在 16 mg· kg-1时的抑制率为 41.2％ (P<0.05), ATRA在 10 mg· kg－ 1剂量下抑制率为 70.6％ (P< 0.01)。同时,经α-anordrin和 ATRA治疗后, SRCS中出现明显钙盐沉积; S-100蛋白表达水平升高。α-anordrin对 SRCS细胞体外生长的抑制作用明显弱于 ATRA,作用 48 h后对 SRCS细胞生长的 IC50分别为 161.7 μ mol/L和 1.47 μ mol/L。α-anordrin和 ATRA在体外可使 SRCS细胞中碱性磷酸酯酶活性和自由钙离子浓度显著性升高。结论：α-anordrin对 SRCS的生长有明显的抑制作用,这种抑制作用可能与其能够诱导 SRCS向成骨化方向分化有关。     

谷氨酸离子型受体拮抗剂对光动力治疗大鼠颅内C6胶质瘤的影响

背景与目的：胶质瘤是神经外科领域研究的难点。本研究观察NMDA型谷氨酸受体拮抗剂MK801和AMPA型谷氨酸受体拮抗剂CNQX对光动力治疗（photodynamic therapy,PDT）大鼠颅内C6胶质瘤的影响。方法：32只颅内种植C6胶质瘤的荷瘤鼠随机分为单纯光照射组（n=8）、PDT治疗组（n=8）、PDT＋MK801组（n=8）和PDT＋CNQX组（n=8）,行PDT治疗．并使用微透析仪局部给予MK801和CNQX,观察了动物生存期、肿瘤体积、尸检病理情况。结果：PDT＋MK801组荷瘤鼠平均生存期最长[（44．5±2．5）d],PDT组次之[（40．3±2．3）d],PDT＋CNQX组为（34．9±2．6）d,单纯光照射组最短[（28．9±2．4）d],荷瘤鼠PDT治疗或光照射后10d肿瘤体积单纯光照射组最大,为（29．54±6．43）mm^3,PDT＋CNQX组次之,为（24．60±0．53）mm^3;PDT组荷瘤鼠C6胶质瘤体积为（21．49±0．41）mm^3：PDT＋MK801组肿瘤体积最小,为（18．50±0．47mm^3。结论：PDT治疗能延长荷瘤动物的生存期;MK801可以增强光动力治疗胶质瘤的效果．而CNQX却降低了光动力治疗胶质瘤的效果。     

缓激肽对C6胶质瘤细胞分泌白细胞介素-6的影响

目的:白细胞介素-6(IL-6)与脑胶质瘤的恶性增殖密切相关,本文探讨缓激肽作用大鼠C6胶质瘤细胞后对IL-6表达的影响。方法:应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和放射免疫法分别检测1μmol·L^-1 缓激肽作用下,C6胶质瘤细胞内及细胞培养液中IL-6的表达水平。结果:RT-PCR结果显示缓激肽作用于C6胶质瘤细胞,在不同时相点(0,5,10,15,30,60min)均有IL-6mRNA的表达,各组间比较无显著性差异(P>0.05);放射免疫法结果显示,细胞培养液中未检测到IL-6的表达。结论:缓激肽作用C6胶质瘤细胞60min以内不引起IL-6的表达增强,这为缓激肽临床应用的安全性提供了有利的实验依据。     

全反式维甲酸对神经母细胞瘤细胞系体外生长的影响

目的　体外观察全反式维甲酸 (alltransretinoicacid ,ATRA)对神经母细胞瘤细胞系 (SK N SH)细胞生长的影响。方法　SK N SH细胞持续培养在含ATRA的 96孔板中 ,采用MTT法检测ATRA的体外抗增殖效果 ,用相差倒置显微镜及透射电镜观察细胞形态变化。结果　 0 .1～ 1μmol/L浓度的ATRA对SK N SH细胞可产生明显的抗增殖作用 ;其抗增殖作用呈时间和剂量依赖关系。 1μmol/LATRA作用 12天 ,细胞生长抑制率达 77.0 3%。ATRA能诱导SK N SH细胞分化成熟 ,先是细胞出现神经树 (轴 )突样胞突 ,培养 10天后多个细胞形成类似神经节样形态结构 ,“神经节”之间形成类神经纤维 ;电镜观察细胞核浆比例下降 ,无特征性细胞凋亡形态变化。结论　ATRA通过诱导分化作用 ,而明显抑制神经母细胞瘤细胞增殖。     

血管生成抑制素对C6脑胶质瘤的抑瘤效应

目的探讨不同剂量的血管生成抑制素（Angiostatin）在胶质瘤治疗中的抑制血管生成作用。方法应用不同剂量（100ng、1000ng）的血管生成抑制素分别作用于体外培养的大鼠C6脑胶质瘤细胞系和C6/SD大鼠脑胶质瘤模型,分别计算细胞存活率和抑瘤生成率,SABC免疫组织化学技术检测体内胶质瘤中的微血管密度。结果不同剂量的血管生成抑制素均对体外培养的胶质瘤细胞的生长不产生明显抑制作用;对体内生长的胶质瘤则有显著抑制作用,而且较高剂量的Angiostatin的抑制作用更为明显,抑瘤率最高达65.3％（P<0.01）。经不同剂量的血管生成抑制素处理的脑胶质瘤中微血管密度较对照组降低（P<0.01）。结论血管生成抑制素能抑制C6脑胶质瘤的血管生成,且较高剂量实验组的作用更为明显,此研究对血管生成抑制素抑制C6胶质瘤的生长机制研究奠定了一定基础。